含有稻壳多酚的抗肺癌保健品的制作方法

文档序号:11240079阅读:641来源:国知局
含有稻壳多酚的抗肺癌保健品的制造方法与工艺

本发明属于保健品领域,具体涉及一种含有稻壳多酚的抗肺癌保健品。



背景技术:

肺癌是发病率和死亡率近年来增长最快的一种恶行肿瘤,每年死于肺癌的人数已经超过了一百万,约占恶行肿瘤死亡人数的四分之一,近50年来许多国家都报道肺癌的发病率和死亡率均明显增高,男性肺癌发病率和死亡率均占所有恶行肿瘤的第一位,女性发病率占第二位,死亡率占第二位。近年来中药组分配伍抗肿瘤研究是治疗恶性肿瘤的新方向,寻找有效的抗癌药物和方法,是世界医学面临的重要课题,中药作为祖国医学用来防治疾病的有力武器,与化学合成药物相比,除了具有取材方便、价格低廉和毒副作用小等优点外,更重要的是,中药的优势在于改变肿瘤细胞的生物学行为从而抑制其生长发展,并保护机体的正常功能,使患者延长寿命,减轻痛苦,保持良好生活质量。同时,随着社会的进步,生产力的发展,现代人越来越把注意力从化合成药转向天然药,希望从天然药物中开发出更为安全有效的新药以替代前者,从而减少药源疾病的发生,发展中草药不仅传承了中华民族千百年的精华,也具有广大的市场前景及经济效益。



技术实现要素:

本发明目的是提供一种具有抗肺癌功能的含有稻壳多酚的天然保健品,该保健品是以我国广泛种植的禾本科粮食作物水稻的加工副产物稻壳出发,制备稻壳多酚和其他中药提取物混合。

本发明采用的技术方案为:

含有稻壳多酚的抗肺癌保健品,由以下原料按重量百分比组成:

稻壳多酚50-70%,地黄提取物5-10%,紫花地丁提取物5-10%,

水牛角提取物5-10%,女贞子提取物5-10%,中边莲提取物5-10%。

所述含有稻壳多酚的抗肺癌保健品,所述稻壳多酚的制备方法如下:

1)纤维素酶酶解提取:料液比按质量比1:10-1:30,将稻壳粉末溶于水,纤维素酶加入量为120-180u/g,进行热水浸提,控制温度为50-60℃,ph范围值5.0-6.0,酶解时间为1-2h,离心,过滤,得纤维素酶酶解提取液备用,沉淀物a继续进行乙醇辅助提取;

2)乙醇辅助提取:料液比按质量比1:10-1:30,将沉淀物a溶于乙醇,乙醇体积分数为50-70%,提取时间为2-3h,离心,过滤,得乙醇辅助提取液备用,沉淀物b继续进行超声浸提;

3)超声浸提:超声波功率为160-200w,超声时间为20-30min,抽滤,得超声浸提提取液备用;

4)合并纤维素酶酶解提取液、乙醇辅助提取液和超声浸提提取液,将总提取液旋转蒸发浓缩,滤纸初过滤后,用滤膜进行超滤,超滤液无菌冷冻干燥,得到粗稻壳多酚干粉。

所述含有稻壳多酚的抗肺癌保健品,所述地黄提取物的制备方法为:在室温条件下,称量粉碎成200目的地黄固体粉末;分别按质量比1:10比例称取地黄固体粉末和去离子水,超声破碎30min,室温浸提3h,滤纸初过滤、超滤膜超滤,超滤液无菌冷冻干燥,得地黄提取物。

所述含有稻壳多酚的抗肺癌保健品,所述紫花地丁提取物的制备方法为:在室温条件下,称量粉碎成200目的紫花地丁固体粉末;分别按质量比1:10比例称取紫花地丁固体粉末和去离子水,超声破碎30min,室温浸提3h,滤纸初过滤、超滤膜超滤,超滤液无菌冷冻干燥,得紫花地丁提取物。

所述含有稻壳多酚的抗肺癌保健品,水牛角提取物的制备方法为:在室温条件下,称量粉碎成200目的水牛角固体粉末;分别按质量比1:10比例称取水牛角固体粉末和去离子水,超声破碎30min,室温浸提3h,滤纸初过滤、超滤膜超滤,超滤液无菌冷冻干燥,得水牛角提取物。

所述含有稻壳多酚的抗肺癌保健品,女贞子提取物的制备方法为:在室温条件下,称量粉碎成200目的女贞子固体粉末;分别按质量比1:10比例称取女贞子固体粉末和去离子水,超声破碎30min,室温浸提3h,滤纸初过滤、超滤膜超滤,超滤液无菌冷冻干燥,得女贞子提取物。

所述含有稻壳多酚的抗肺癌保健品,中边莲提取物的制备方法为:在室温条件下,称量粉碎成200目的中边莲固体粉末;分别按质量比1:10比例称取中边莲固体粉末和去离子水,超声破碎30min,室温浸提3h,滤纸初过滤、超滤膜超滤,超滤液无菌冷冻干燥,得中边莲提取物。

本发明的有益效果是:

本发明开创性的技术是将稻壳多酚作为抗肺癌的核心功能性原料,提出用于治疗肺癌的中药组合物,配伍合理,形成具有抗肺癌的多酚、中草药混合保健品。本发明通过对人体外肺癌细胞的实验研究,发现稻壳多酚的组合物对体外肿瘤细胞具有较好的抑制作用,对于肺癌的防治有着非常显著的效果,可以避免过多的化学合成药物造成的毒副作用,而且价格低廉,来源广泛,也使得稻壳多酚组合物受到广泛关注。

本发明采用水稻加工副产物稻壳粉末提取的多酚作为活性物质,制备抗肺癌保健品或药品,提取方法简单,不存在合成药剂的毒副作用,对设备的要求低,中间产物及终产物均无毒,安全性高,生产成本低,而且服用和携带十分的方便,吸收快速且效果好,因此拥有十分广阔市场前景,适合工业生产。

附图说明

图1是稻壳多酚组合物对人肺癌细胞株973细胞生长影响。

图2是稻壳多酚组合物抑制973细胞集落形成的集落试验结果。

图3是稻壳多酚组合物抑制973细胞迁移试验结果。

具体实施方式

实施例1含有稻壳多酚的抗肺癌保健品

(一)稻壳多酚的制备

采用纤维素酶酶解—乙醇浸提—超声波分步法的工艺组合提取稻壳多酚步骤如下:

1)纤维素酶酶解提取:将稻壳去除杂质,干燥,经粉碎机粉碎,过60目筛,制成稻壳粉末。料液比按质量比1:30,将稻壳粉末溶于水,纤维素酶加入量为150u/g,进行热水浸提,控制温度为50℃,ph5.0,酶解时间为2h,4000r/min进行离心15min,过滤,得纤维素酶酶解提取液备用,沉淀物a继续进行乙醇浸提;

2)乙醇辅助提取:料液比按按质量比1:20,将沉淀物a溶于乙醇,乙醇体积分数为60%,提取时间为3h,离心,过滤,得乙醇辅助提取液备用,沉淀物b继续进行超声提取;

3)超声浸提:料液比按按质量比1:20,将沉淀物b溶于乙醇,乙醇体积分数为60%,超声波功率为180w,超声时间为30min,抽滤,得超声浸提提取液备用;

4)合并纤维素酶酶解提取液、乙醇辅助提取液和超声浸提提取液,将总提取液旋转蒸发浓缩,滤纸初过滤后,用滤膜进行超滤,超滤液无菌冷冻干燥,得到粗稻壳多酚干粉。

(二)地黄提取物的制备

在室温条件下,称量粉碎成200目的地黄固体粉末;按质量比1:10比例称取地黄固体粉末和去离子水,超声破碎30min,室温浸提3h,滤纸初过滤、超滤膜超滤,超滤液无菌冷冻干燥,得地黄提取物。

(三)紫花地丁提取物的制备

在室温条件下,称量粉碎成200目的紫花地丁固体粉末;按质量比1:10比例称取紫花地丁固体粉末和去离子水,超声破碎30min,室温浸提3h,滤纸初过滤、超滤膜超滤,超滤液无菌冷冻干燥,得紫花地丁提取物。

(四)水牛角提取物的制备

在室温条件下,称量粉碎成200目的水牛角固体粉末;按质量比1:10比例称取水牛角固体粉末和去离子水,超声破碎30min,室温浸提3h,滤纸初过滤、超滤膜超滤,超滤液无菌冷冻干燥,得水牛角提取物。

(五)女贞子提取物的制备

在室温条件下,称量粉碎成200目的女贞子固体粉末;按质量比1:10比例称取女贞子固体粉末和去离子水,超声破碎30min,室温浸提3h,滤纸初过滤、超滤膜超滤,超滤液无菌冷冻干燥,得女贞子提取物。

(六)中边莲提取物的制备

在室温条件下,称量粉碎成200目的中边莲固体粉末;分别按质量比1:10比例称取中边莲固体粉末和去离子水,超声破碎30min,室温浸提3h,滤纸初过滤、超滤膜超滤,超滤液无菌冷冻干燥,得中边莲提取物。

(七)含有稻壳多酚的抗肺癌保健品组合物(简称稻壳多酚组合物)

由以下原料按重量百分比组成:

稻壳多酚60%,地黄提取物5%,紫花地丁提取物10%,

水牛角提取物5%,女贞子提取物10%,中边莲提取物10%

(八)mtt实验

本实施例使用人肺癌细胞株973细胞,采用mtt法检测稻壳多酚组合物体外抗癌活性,实验步骤如下:

1)取对数生长期的肺癌细胞系(973)细胞接种于96孔板,过夜培养使其贴壁;

2)稻壳多酚组合物的浓度(6.25、12.5和25mg/ml);

3)在24h后加入mtt(5mg/ml);

4)然后将96孔板放在37℃恒温培养箱中继续培养4h;

5)处理结束后,将mtt吸出,加入150μl的dmso,使甲瓒晶体完全溶解;

6)通过测量每个孔在490nm处的吸光度值来评估973细胞的增值;结果如图1所示。

如图1所示,不同浓度的稻壳多酚组合物(6.25、12.5和25mg/ml)分别孵育973细胞24h,然后利用mtt比色法检测。结果显示,处理肺癌细胞一段时间后,浓度为12.5和25mg/ml的稻壳多酚组合物均表现出显著的抑制作用,浓度为25mg/ml组抑制率在24h后达到了77.4%,结果表明,稻壳多酚组合物在体外可抑制人肺癌细胞生长。

(九)集落形成实验

不同的处理组的肺癌细胞以每孔1000个细胞的密度接种于孔板上,培养过夜使其贴壁。分别加入12.5和25mg/ml的稻壳多酚组合物培养10d,吸出培养基,每孔用pbs仔细洗两次。使用甲醇将集落固定20min,然后用0.5%结晶紫染色15min,用清水冲洗并拍照,结果如图2所示。

如图2所示,稻壳多酚组合物抑制肺癌细胞集落形成的集落试验结果。稻壳多酚组合物孵育973细胞一段时间后,集落数量与对照组相比明显降低。24小时后浓度为12.5mg/ml时能够显著减少肺癌细胞形成的集落,浓度为25mg/ml时集落的减少极显著。

(十)transwell实验

肿瘤细胞迁移实验采用直径为6.5mm的transwell小室,其中内孔大小为8.0μm。将973细胞血清饥饿24h,然后使用胰蛋白酶消化,计数,并用无血清1640培养基重悬。大约1×105细胞被接种到上层小室,下层小室加入含有10%胎牛血清的1640培养基。细胞放在37℃培养24h。培养后,上层小室内表面的细胞被迁移。将穿过小室的细胞固定和染色并在显微镜下统计。每个实验组做三个平行取其平均值,结果如图3所示。

由图3可见,肿瘤细胞的一个重要特点是他们具有入侵和迁移到远端器官的能力,这是几乎所有癌症死亡的主要原因,利用transwell实验分析米糠多酚组合物对973细胞的迁移影响。如图3所示,与对照组相比,稻壳多酚组合物处理组973细胞跨膜迁移的数量大幅下降,结果显示稻壳多酚组合物可以显著抑制973细胞迁移。

实施例2含有稻壳多酚的抗肺癌保健品

(一)-(六)同实施例1。

(七)含有稻壳多酚的抗肺癌保健品,由以下原料按重量百分比组成:

稻壳多酚70%,地黄提取物10%,紫花地丁提取物5%,

水牛角提取物5%,女贞子提取物5%,中边莲提取物5%。

实施例3含有稻壳多酚的抗肺癌保健品

(一)-(六)同实施例1。

(七)含有稻壳多酚的抗肺癌保健品,由以下原料按重量百分比组成:

稻壳多酚50%,地黄提取物10%,紫花地丁提取物10%,

水牛角提取物10%,女贞子提取物10%,中边莲提取物10%。

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