本发明涉及一种含有egcg的凝胶剂及其制备方法，属于药物制剂领域。
背景技术：
绿茶作为一种绿色饮品在世界范围内广泛流行，目前发现，绿茶可以调节一系列信号通路的运行从而发挥健康促进作用，而这种健康促进作用，主要是由绿茶内所含的绿茶茶多酚(gtp)所介导的。表没食子儿茶素没食子酸酯(egcg)，是绿茶茶多酚中含量最丰富的儿茶素，约占儿茶素质量的50％。近年来，多项体内外实验证实egcg具有抗氧化、抗炎症、抗肿瘤、预防癌症和预防血管疾病等功效。作为毒副作用小的食源性天然活性物质，egcg药物制剂的开发和应用有着很好的前景。
然而，药物的生物学活性主要取决于其到达靶器官/组织的量的多少，很多水溶性或者脂溶性的药物在胃肠道中不能完全吸收，而且在身体中代谢速度很快，导致其生物学活性大大降低。绿茶成分在血浆中的量仅为其摄入量的0.2％～2.0％，生物利用率的低下是导致影响绿茶发挥其作用的主要原因之一。egcg因其酚羟基有很强的供氢能力，易被氧化生成邻醌类及联苯酚醌物质，且易受胃酸影响而降解，因而在人体肠胃中滞留时间短，吸收率和生物利用度低，到达发病部位的药物少，大大限制了egcg的广泛应用。因此，开发一种egcg的新剂型对于维持egcg生物活性和提高生物利用度有重要的意义。
技术实现要素：
本发明针对egcg在人体肠胃中滞留时间短、吸收率和生物利用度低、到达发病部位的药物少的问题，提供了一种含有egcg的凝胶剂及其制备方法，该制剂直接作用于病灶，避免了胃酸对egcg的影响，提高了egcg的吸收率和生物利用度。
为了解决上述技术问题，本发明提供了一种含有egcg的凝胶剂，包括以下重量份的组分：
egcg10～20份、vc10～20份、凝胶基质10～40份、丙二醇50～60份、丙三醇70～80份、乙二胺四乙酸二钠0.1～1份和无水乙醇70～80份；
所述egcg的纯度≥95％；
所述凝胶基质为卡波姆-940、羧甲基纤维素钠或羟乙基纤维素中的一种。
进一步地，所述egcg的纯度≥98％。
进一步地，所述egcg的纯度≥99％。
进一步地，所述egcg和vc的质量比为1:1。
进一步地，所述卡波姆-940重量份为10份。
进一步地，所述羧甲基纤维素钠重量份为40份。
进一步地，所述羟乙基纤维素重量份为20份。
上述含有egcg的凝胶剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)取上述重量份的丙二醇、丙三醇和乙二胺四乙酸二钠于水中，充分溶解混匀，得混合液；
(2)取上述重量份的凝胶基质粉末，均匀分散在步骤(1)的混合液面上，调节ph6.5～7.0，将容器口封闭，室温溶胀12～36h，得溶胀混合物；
(3)取上述重量份的vc和egcg于水中，溶解混匀，并将其加入步骤(2)的溶胀混合物中，边加入边搅拌，得egcg混合物；
(4)取上述重量份的无水乙醇加入步骤(3)egcg混合物中，搅拌均匀；
(5)补加水至总重量份为1000份，搅拌均匀，得含有egcg的凝胶剂。
进一步地，所述步骤(2)ph为6.8。
进一步地，所述步骤(2)溶胀时间为24h。
本发明取得的有益效果：egcg和vc产生协同效应，增强了egcg的抗肿瘤活性，提高了治疗效果；本发明方法包括溶解、混合、溶胀、搅拌等步骤，制备得到的含有egcg的凝胶剂可直接作用于病灶，具有使用方便、依从性好、黏附性好、不易流出等优点，避免了胃酸对egcg的破坏和肝脏首过效应，具有良好的安全性和有效性，提高了egcg的吸收率和生物利用度，提高了治疗效果，可作为治疗宫颈癌的局部给药制剂。
为了进一步证明本申请所述产品的效果，申请人还分别进行了以下安全性(家兔阴道刺激性试验)和有效性试验及分析：
试验例1家兔阴道刺激性试验
(1)方法与资料
取雌性大耳白兔20只，重量在2.5～3kg，适应性养殖3天。按体重随机分成4组，即给药组1、给药组2、给药组3和空白对照组，每组5只。将实施例1～3制备的含有egcg的凝胶剂作为供试品1、供试品2和供试品3分别轻轻纳入给药组1、给药组2和给药组3的大耳白兔阴道，然后用消毒过的细小玻捧将药品轻轻推入阴道5cm，固定观察6天，确认供试品无漏出，然后任其自由活动，观察动物情况。给药组1～3分别隔天给药一次，连续7次，共14天。末次给药后24小时，观察动物情况。随后处死动物，摘取生殖器官包括子宫和阴道，肉眼观察给药处阴道粘膜有无刺激反应症状，如充血，有分泌物等，对其进行刺激性评价。做成切片在光镜下进行病理学检查。
(2)试验结果
给药组1、给药组2、给药组3和对照组家兔生长情况良好，正常饮食。四组家兔子宫及阴道没有发现红肿充血状况。组织学检查表明，对照组没有血管扩张现象，阴道黏膜上皮细胞形态也没有发现异常；给药组阴道黏膜上皮细胞形态未见异常，固有层可见淋巴细胞和散在淋巴小结，无血管扩张现象，外膜层与肌肉层没有明显血管扩张现象，多次给药对阴道黏膜、子宫无刺激性。
(3)试验结论
在阴道刺激性试验中，本发明方法制备的含有egcg的凝胶剂没有对阴道和子宫生殖器产生刺激作用，具有良好的安全性。
试验例2有效性试验
(1)方法与资料
本试验为随机、对照临床试验研究，入选患者为40～65岁确诊为宫颈癌的患者，共60例，均为不适合手术或放疗的患者，以阴道出血为主要临床症状。本试验将60例患者随机分为2组，其中，试验组30例，对照组30例。试验组采用本发明方法制备的含有egcg的凝胶剂进行阴道给药治疗，每天给药1剂，每剂含纯度≥95％的egcg100mg；对照组采用egcg粉末口服给药，每天3次，每次给纯度≥95％的egcg200mg。
(2)试验结果
主要评价指标：完全缓解指肿瘤完全消退，临床症状消失；部分缓解指肿瘤病灶缩小≥50％，临床症状明显改善；改善指肿瘤病灶缩小＜50％，临床症状有所缓解；无效指肿块无变化甚至出现新病灶，临床症状没有缓解甚至加重。治疗三个月后，试验组患者完全缓解2例，部分缓解10例，改善16例，无效2例，总有效率为93.3％；对照组完全缓解0例，部分缓解5例，改善17例，无效8例，总反应率为73.3％。经统计学分析，p＜0.05，具有显著性差异。
次要评价指标：试验组无进展生存期为4.6个月，对照组无进展生存期为2.8个月，经统计学分析，p＜0.05，具有显著性差异。
安全性评价：所有患者进行了临床试验后的安全性检查，未见异常现象发生，均无严重不良事件。
(3)试验结论
本发明制备的含有egcg的凝胶剂直接作用于肿瘤部位，避免了胃酸对egcg的破坏和肝脏首过效应，提高了吸收率和生物利用度，疗效优于egcg口服剂。
具体实施方式
下面结合实施例进一步详细说明本发明技术方案。采用的egcg粉末购自湖南三为生物科技有限公司。
实施例1一种含有egcg的凝胶剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)称丙二醇50g、丙三醇80g和乙二胺四乙酸二钠0.1g于300ml水中，充分溶解混匀，得混合液；
(2)称卡波姆-940粉末10g，均匀分散在步骤(1)的混合液面上，调节ph6.5，将容器口封闭，室温溶胀12h，得溶胀混合物；
(3)称vc10g、纯度为95％的egcg粉末20g于200ml水中，溶解混匀，并将其加入步骤(2)的溶胀混合物中，边加入边搅拌，得egcg混合物；
(4)称80g无水乙醇加入步骤(3)egcg混合物中，混合，搅拌均匀；
(5)补加水至总重量1000g，搅拌均匀，得含有egcg的凝胶剂。
实施例2一种含有egcg的凝胶剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)称丙二醇60g、丙三醇80g和乙二胺四乙酸二钠0.5g于300ml水中，充分溶解混匀，得混合液；
(2)称羧甲基纤维素钠40g，均匀分散在步骤(1)的混合液面上，调节ph7.0，将容器口封闭，室温溶胀36h，得溶胀混合物；
(3)称vc20g、纯度为98％的egcg粉末10g于200ml水中，溶解混匀，并将其加入步骤(2)的溶胀混合物中，边加入边搅拌，得egcg混合物；
(4)称70g无水乙醇加入步骤(3)egcg混合物中，混合，搅拌均匀；
(5)补加水至总重量1000g，搅拌均匀，得含有egcg的凝胶剂。
实施例3一种含有egcg的凝胶剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)称丙二醇50g、丙三醇70g和乙二胺四乙酸二钠1g于300ml水中，充分溶解混匀，得混合液；
(2)称羟乙基纤维素20g，均匀分散在步骤(1)的混合液面上，调节ph6.8，将容器口封闭，室温溶胀24h，得溶胀混合物；
(3)称vc10g、纯度为99％的egcg粉末10g于200ml水中，溶解混匀，并将其加入步骤(2)的溶胀混合物中，边加入边搅拌，得egcg混合物；
(4)称80g无水乙醇加入步骤(3)egcg混合物中，混合，搅拌均匀；
(5)补加水至总重量1000g，搅拌均匀，得含有egcg的凝胶剂。