本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种茶氨酸改性鱼鳞蛋白面膜的制备方法。
背景技术：
胶原蛋白是皮肤组织里主要的蛋白质成分，占皮肤干重的70％～80％，由真皮里的纤维细胞(fibroblasts)制造，胶原蛋白是一种白色、透明、无分支的原纤维，本身是一种非常坚固的蛋白质，在年轻，健康，少受阳光伤害的皮肤中，它组成一束束略弯的纤维，互相跟上一层及下一层的形成直角排列，这使皮肤得到结实的效果。但当岁月增长，胶原蛋白不但数量减小，而且排列也变得不规则，真皮因而变薄；环境因素更容易使胶原蛋白溶解消失。导致皮肤的衰老。正是因为胶原蛋白的流失导致支撑皮肤的胶原肽键和弹力网断裂，其螺旋网状结构随即被破坏，皮肤组织被氧化、萎缩、塌陷，肌肤就会出现干燥、皱纹、松弛无弹性等衰老现象。补充足够的胶原蛋白能够刺激真皮层中的纤维母细胞自行进行胶原蛋白的分泌，使得胶原蛋白自行生成机制和代谢功能恢复正常，进而有效延缓肌肤的松弛与老化。用含有胶原蛋白的膏体涂抹皮肤后，皮肤表皮和真皮结构可有效地改善，并促进了皮肤内胶原的合成。现实医学常用胶原蛋白进行美容，胶原蛋白能直接作用于真皮层的受损的胶原纤维，使其迅速恢复横向纤维结构。胶原蛋白独特的三螺旋结构及胶原蛋白分子中的亲水基，强化了肌肤原发性水动力，保证水分在肌肤表面和深层的循环，改善淋巴循环，使肌肤水润饱满有活力。但胶原蛋白分子量大，直接加入化妆品中不能被肌肤直接吸收。
目前，胶原蛋白生产提取的主要来源于三类物质：骨胶原、深海鱼鱼皮、鱼鳞。其中骨胶原主要来自猪、牛、羊等动物，原料易获取，原料源稳定，但是动物骨提取的骨胶原含有较多脂肪，骨胶原纯度稍低，美容性能稍差，并且由于宗教和动物疾病的原因，动物骨胶原的市场份额已经越来越小。相对于骨胶原，鱼皮胶原，鱼鳞胶原兼具二者的优势；并且通过检测，鱼鳞胶原蛋白的羟脯氨酸含量高于其他原料，由于鱼鳞中胶原蛋白肽与人皮肤胶原的结构相似，兼容性好，由鱼鳞制备的胶原蛋白产品，更容易被皮肤吸收。
然而由鱼鳞制备的胶原蛋白产品抗菌防霉性能差，抗紫外性能差，耐热稳定性也较差，无法直接作为化妆品使用。针对以上问题，传统上主要通过添加稳定剂、防腐剂、抗菌剂等方式。外加这些添加剂虽然能提高胶原蛋白肽的抗菌、防霉、抗紫外等性能，但他们往往具有生理毒性，一方面，不可避免地会对人体造成伤害；另外一方面，降低化妆品的档次。
技术实现要素：
针对现有技术的不足，本发明的主要目的是提供茶氨酸改性鱼鳞蛋白面膜的制备方法，通过茶氨酸改性制得的鱼鳞蛋白面膜具有良好的抗菌防霉性能、抗紫外性能、耐热稳定性。
为解决上述问题，本发明提供了一种茶氨酸改性鱼鳞蛋白面膜的制备方法，包括以下步骤：
(1)将鱼鳞胶原蛋白肽溶解于酸性溶液中，获得蛋白肽溶液；
(2)将茶氨酸与抑制剂分散于溶剂中，然后加入步骤(1)中的蛋白肽溶液，混合均匀后，调节溶液ph为5～7，置于紫外灯下用紫外线照射1～5h；
(3)将步骤(2)的产物超声处理0.5～3h后，用微孔膜过滤，得到滤液，将滤液依次通过阴阳离子柱去离子；
(4)将步骤(3)的产物真空冷冻干燥，即得到茶氨酸改性鱼鳞蛋白肽；
(5)将茶氨酸改性鱼鳞蛋白肽与成膜剂、植物提取物、增稠剂、渗透剂在溶剂中混合均匀，即得到茶氨酸改性鱼鳞蛋白面膜。
为了加入鱼鳞胶原蛋白的溶解速率，首先将鱼鳞胶原蛋白肽溶解于酸性溶液中，优选的，在步骤(1)中，所述酸性溶液为酸的水溶液，所述酸为盐酸、柠檬酸、醋酸、乳酸中的至少一种。
根据本发明，光引发剂能够使茶氨酸与鱼鳞蛋白肽在光照情况下，发生反应，优选的，所述光引发剂为安息香及其衍生物、2,2-二甲氧基-2-苯基苯乙酮、硫杂蒽酮类、苯甲酮类等中的至少一种。
蛋白肽与茶氨酸在光引发剂的存在下能够在紫外线下发生反应，优选的，在步骤(2)中，所述紫外灯的功率密度为50～100μw/cm2，紫外线的波长为253.7nm。
优选的，所述抑制剂为二乙醇胺、三乙醇胺和乙酰丙酮中的至少一种。
通过超声，能够使溶液中的溶质均匀的分散，优选的，所述超声的频率为30～40khz。
由于大分子很难被肌肤吸收，本发明通过微孔滤膜过滤能够除去溶液中的大分子，优选的，所述微孔膜为为孔径为10-30μm的混合纤维素微孔滤膜。
优选的，在步骤(5)中，所述成膜剂为聚丙烯酸、聚丙烯酸脂钠、聚乙烯吡咯烷酮、羟甲基纤维素、聚维酮和聚乙二醇中的至少一种。
为了提高面膜的适用性，增加面膜的功能，优选的，在步骤(5)中，所述植物提取物为红景天提取物、海藻提取物、绿茶提取物、芦荟提取物、薄荷提取物、金盏花提取物、金银花提取物、薰衣草提取物、玫瑰提取物、洋甘菊提取物、柠檬提取物、迷迭香提取物、罗勒提取物、葡萄籽提取物、茯苓提取物中的至少一种。
所述鱼鳞胶原蛋白肽的制备工艺，包括以下步骤：
a、取鱼鳞，洗净后，将鱼鳞在含有碳酸盐的溶液中浸泡3～5h，然后将鱼鳞置于酸性溶液中，用微波处理，然后再用碱性溶液浸泡3～12h，然后洗涤至中性，过滤，得到滤液1和滤渣1；
b、将步骤a中的滤渣用酶制剂处理，洗涤过滤，得到滤液2和滤渣2；
c、将滤液1和滤液2合并，用微孔滤膜过滤，得到滤液3，对滤液3进行喷雾干燥，得到鱼鳞胶原蛋白。
根据本发明，本发明首先将鱼鳞用碳酸盐的溶液处理，碳酸盐溶液能够疏松鱼鳞中致密的胶原蛋白纤维，从而方便后续处理，提高后续处理的效率，优选的，所述含有碳酸盐的溶液为碳酸盐的水溶液，优选为碳酸钠和或碳酸钾的水溶液。
根据本发明，在步骤a中，所述酸性溶液为ph至小于7的任何溶剂，可以为酸的水溶液、强酸弱碱盐的水溶液、苯酚及其衍生物溶液，优选为酸的水溶液，由于本发明中提取的胶原蛋白最终是制作成面膜，敷在脸上，所述酸优选为对人体无害的酸，优选为浓度小于0.1m盐酸、柠檬酸、醋酸、乳酸中的至少一种。
根据本发明，微波处理能够使胶原蛋白的三螺旋结构被破坏，其中的氢键和疏水键断裂，能够增加酸溶解的效率，优选的，在步骤a中，所述微波处理的功率为400～900w；所述微波处理的时间为0.5～15min。
优选的，在步骤a中，所述碱性溶液为碱金属氢氧化物和/或碱土金属氢氧化物的水溶液。
优选的，在步骤b中，所述酶制剂处理的具体步骤为：在步骤a中的滤渣中加15～20倍量水，调节控制ph值在6.5～7.5、温度在45～55℃，加入酶制剂1，该酶制剂1与滤渣比例为(0.5～3.0)∶100，搅拌0.5～1.5h，保温1～4h，然后灭活酶制剂1；控制ph值在1.0～3.0、温度在55～70℃下加入酶制剂2，该酶制剂2与滤渣比例为(0.1～3.0)∶100，搅拌1～3h后，灭活酶制剂2。
在步骤b中，所述酶制剂1和酶制剂2各自为中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶中的至少一种。
本发明通过微孔滤膜过滤能够除去溶液中的大分子，优选的，在步骤c中，所述微孔滤膜为孔径为20-50μm的混合纤维素微孔滤膜。
与现有技术相比，本发明具有以下技术效果：
(1)本发明通过茶氨酸对鱼鳞蛋白肽进行改性，提高了鱼鳞蛋白肽的抗菌防霉性能、抗紫外性能、耐热稳定性，使其能够作为面膜中的活性成分，能够直接使用；
(2)本发明的茶氨酸改性鱼鳞蛋白面膜中不含刺激性物质，安全无刺激，且与人体相容性好，能有效被皮肤直接吸收，深层滋养皮肤；
(3)本发明将茶氨酸改性鱼鳞蛋白面膜与植物提取液配合使用，具有协同增效的作用，增强抗皮肤衰老功效，同时改善产品气味，无需添加香精，增加产品安全性以及适用性。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例1
本发明提供了一种茶氨酸改性鱼鳞蛋白面膜的制备方法，包括以下步骤：
(1)将鱼鳞胶原蛋白肽溶解于盐酸溶液中，获得蛋白肽溶液；
所述的鱼鳞胶原蛋白肽的制备方法为：将鱼鳞依次用碳酸钠溶液、盐酸溶液中、氢氧化钠溶液和酶制剂处理，过滤干燥后，即得到鱼鳞胶原蛋白肽，
其中，所述酶制剂处理的具体步骤为：将酸处理和碱处理后的加入16倍量水中，调节控制ph值在7、温度在50℃，加入中性蛋白酶，该中性蛋白酶与滤渣比例为2∶100，搅拌1h，保温2h，然后灭活中性蛋白酶；控制ph值在2.0、温度在60℃下加入木瓜蛋白酶，该木瓜蛋白酶与滤渣比例为2∶100，搅拌2h后，灭活木瓜蛋白酶；
(2)将茶氨酸、光引发剂安息香及其衍生物与抑制剂二乙醇胺分散于溶剂中，然后加入步骤(1)中的蛋白肽溶液，混合均匀后，调节溶液ph为6，置于紫外灯下用紫外线照射2h，所述紫外灯的功率密度为60μw/cm2，紫外线的波长为253.7nm；
(3)将步骤(2)的产物超声处理2h，所述超声的频率为35khz，用孔径为20μm的混合纤维素微孔滤膜过滤，得到滤液，将滤液依次通过阴阳离子柱去离子；
(4)将步骤(3)的产物真空冷冻干燥，即得到茶氨酸改性鱼鳞蛋白肽；
(5)将茶氨酸改性鱼鳞蛋白肽与聚丙烯酸、红景天提取物、羧甲基纤维素钠增稠剂、烷基苯磺酸钠渗透剂在溶剂中混合均匀，即得到茶氨酸改性鱼鳞蛋白面膜。
实施例2
本发明提供了一种茶氨酸改性鱼鳞蛋白面膜的制备方法，包括以下步骤：
(1)将鱼鳞胶原蛋白肽溶解于柠檬酸溶液中，获得蛋白肽溶液；
所述的鱼鳞胶原蛋白肽的制备方法为：将鱼鳞依次用碳酸钾溶液、柠檬酸溶液中、氢氧化钾溶液和酶制剂处理，过滤干燥后，即得到鱼鳞胶原蛋白肽，
其中，所述酶制剂处理的具体步骤为：将酸处理和碱处理后的加入18倍量水中，调节控制ph值在7.1、温度在52℃，加入木瓜蛋白酶，该木瓜蛋白酶与滤渣比例为
1∶100，搅拌1h，保温4h，然后灭活木瓜蛋白酶；控制ph值在2.0、温度在60℃下加入胰蛋白酶，该胰蛋白酶与滤渣比例为2∶100，搅拌2h后，灭活胰蛋白酶；
(2)将茶氨酸、光引发剂2,2-二甲氧基-2-苯基苯乙酮与抑制剂三乙醇胺分散于溶剂中，然后加入步骤(1)中的蛋白肽溶液，混合均匀后，调节溶液ph为6，置于紫外灯下用紫外线照射3h，所述紫外灯的功率密度为70μw/cm2，紫外线的波长为253.7nm；
(3)将步骤(2)的产物超声处理1h，所述超声的频率为35khz，用孔径为25μm的混合纤维素微孔滤膜过滤，得到滤液，将滤液依次通过阴阳离子柱去离子；
(4)将步骤(3)的产物真空冷冻干燥，即得到茶氨酸改性鱼鳞蛋白肽；
(5)将茶氨酸改性鱼鳞蛋白肽与聚丙烯酸脂钠、海藻提取物、羧甲基纤维素钠增稠剂、烷基苯磺酸钠渗透剂中混合均匀，即得到茶氨酸改性鱼鳞蛋白面膜。
实施例3
本发明提供了一种茶氨酸改性鱼鳞蛋白面膜的制备方法，包括以下步骤：
(1)将鱼鳞胶原蛋白肽溶解于柠檬酸溶液中，获得蛋白肽溶液；
所述的鱼鳞胶原蛋白肽的制备方法为：将鱼鳞依次用含有碳酸钠的溶液、柠檬酸溶液中、氢氧化钠溶液和酶制剂处理，过滤干燥后，即得到鱼鳞胶原蛋白肽，
其中，所述酶制剂处理的具体步骤为：将酸处理和碱处理后的加入15倍量水中，调节控制ph值在6.5、温度在45℃，加入木瓜蛋白酶，该木瓜蛋白酶与滤渣比例为1∶100，搅拌1.0h，保温2h，然后灭活木瓜蛋白酶；控制ph值在2.0、温度在60℃下加入中性蛋白酶，该中性蛋白酶与滤渣比例为2∶100，搅拌2h后，灭活中性蛋白酶；
(2)将茶氨酸、硫杂蒽酮类光引发剂与三乙醇胺抑制剂分散于溶剂中，然后加入步骤(1)中的蛋白肽溶液，混合均匀后，调节溶液ph为5，置于紫外灯下用紫外线照射1h，所述紫外灯的功率密度为50μw/cm2，紫外线的波长为253.7nm；
(3)将步骤(2)的产物超声处理3h，所述超声的频率为40khz，用孔径为10μm的混合纤维素微孔滤膜过滤，得到滤液，将滤液依次通过阴阳离子柱去离子；
(4)将步骤(3)的产物真空冷冻干燥，即得到茶氨酸改性鱼鳞蛋白肽；
(5)将茶氨酸改性鱼鳞蛋白肽与聚丙烯酸脂钠、绿茶提取物、黄原胶增稠剂、烷基硫酸酯钠渗透剂在溶剂中混合均匀，即得到茶氨酸改性鱼鳞蛋白面膜。
实施例4
本发明提供了一种茶氨酸改性鱼鳞蛋白面膜的制备方法，包括以下步骤：
(1)将鱼鳞胶原蛋白肽溶解于醋酸溶液中，获得蛋白肽溶液；
所述的鱼鳞胶原蛋白肽的制备方法为：将鱼鳞依次用碳酸钾溶液、醋酸溶液中、氢氧化钾溶液和酶制剂处理，过滤干燥后，即得到鱼鳞胶原蛋白肽，
其中，所述酶制剂处理的具体步骤为：将酸处理和碱处理后的加入20倍量水中，调节控制ph值在7.5、温度在55℃，加入胰蛋白酶，该胰蛋白酶与滤渣比例为3∶100，搅拌1.5h，保温4h，然后灭活胰蛋白酶；控制ph值在2.0、温度在70℃下加入木瓜蛋白酶，该木瓜蛋白酶与滤渣比例为2∶100，搅拌2h后，灭活木瓜蛋白酶；
(2)将茶氨酸、安息香及其衍生物光引发剂与乙酰丙酮抑制剂分散于溶剂中，然后加入步骤(1)中的蛋白肽溶液，混合均匀后，调节溶液ph为7，置于紫外灯下用紫外线照射5h，所述紫外灯的功率密度为100μw/cm2，紫外线的波长为253.7nm；
(3)将步骤(2)的产物超声处理3h，所述超声的频率为40khz，用孔径为30μm的混合纤维素微孔滤膜过滤，得到滤液，将滤液依次通过阴阳离子柱去离子；
(4)将步骤(3)的产物真空冷冻干燥，即得到茶氨酸改性鱼鳞蛋白肽；
(5)将茶氨酸改性鱼鳞蛋白肽与聚丙烯酸脂钠、金盏花提取物、卡拉胶增稠剂、仲烷基硫酸酯钠渗透剂在溶剂中混合均匀，即得到茶氨酸改性鱼鳞蛋白面膜。
实施例5
本发明提供了一种茶氨酸改性鱼鳞蛋白面膜的制备方法，包括以下步骤：
(1)将鱼鳞胶原蛋白肽溶解于盐酸溶液中，获得蛋白肽溶液；
所述的鱼鳞胶原蛋白肽的制备方法为：将鱼鳞依次用碳酸钾溶液、盐酸溶液中、氢氧化钾溶液和酶制剂处理，过滤干燥后，即得到鱼鳞胶原蛋白肽，
其中，所述酶制剂处理的具体步骤为：将酸处理和碱处理后的加入15倍量水中，调节控制ph值在7.5、温度在55℃，加入胃蛋白酶，该胃蛋白酶与滤渣比例为1.2∶100，搅拌1.3h，保温2h，然后灭活胃蛋白酶；控制ph值在2、温度在60℃下加入胰蛋白酶，该胰蛋白酶与滤渣比例为2.4∶100，搅拌2h后，灭活胰蛋白酶；
(2)将茶氨酸、光引发剂2,2-二甲氧基-2-苯基苯乙酮与抑制剂二乙醇胺分散于溶剂中，然后加入步骤(1)中的蛋白肽溶液，混合均匀后，调节溶液ph为6，置于紫外灯下用紫外线照射2h，所述紫外灯的功率密度为80μw/cm2，紫外线的波长为253.7nm；
(3)将步骤(2)的产物超声处理3h，所述超声的频率为40khz，用孔径为30μm的混合纤维素微孔滤膜过滤，得到滤液，将滤液依次通过阴阳离子柱去离子；
(4)将步骤(3)的产物真空冷冻干燥，即得到茶氨酸改性鱼鳞蛋白肽；
(5)将茶氨酸改性鱼鳞蛋白肽与羟甲基纤维素、金银花提取物、果胶增稠剂、硫酸化蓖麻油渗透剂在溶剂中混合均匀，即得到茶氨酸改性鱼鳞蛋白面膜。
上述描述仅是对本发明部分实施例的描述，并非对本发明范围的任何限定，本行业的普通技术人员可根据本发明对上述实施例做出改进或修改，但均属于本发明保护范围。