一种青稞发酵原浆及制备方法和应用与流程

本发明涉及生物技术和化妆品领域，具体涉及一种青稞发酵原浆及制备方法和作为化妆品的应用。

背景技术：

β-葡聚糖是化妆品优良的保湿剂。青稞是生长在青藏高原地区的一种特色粮食作物，营养丰富，多种微量矿质元素，是β-葡聚糖含量最高的谷物。

技术实现要素：

本发明的目的之一是提供一种青稞发酵原浆，该青稞发酵原浆富含青稞β-葡聚糖、肽、氨基酸、超氧化物歧化酶及少量乙醇，可直接作为化妆品使用，能提供营养、保湿、抗衰老、清除自由基、肤感清透。

本发明的目的之二是提供上述的一种青稞发酵原浆的制备方法，该制备方法利用酵母菌发酵青稞粉浆，降解青稞淀粉和蛋白质，促进青稞β-葡聚糖溶出和酵母代谢产物的合成，所得到发酵液经离心、过滤得青稞发酵原液。该制备方法具有工艺简单，发酵条件温和，操作方便，设备要求低等优点。

本发明的技术方案

一种青稞发酵原浆，通过包括如下步骤的方法制备而成：

（1）、将粒径为75-100μm的青稞麸皮粉加入到水中，搅拌均匀后得到质量百分比浓度为10-20%的青稞麸皮粉浆，然后控制温度为55-65℃进行糊化15-30min，冷却降温至25-35℃，得到糊化液；

（2）、在步骤（1）得到的糊化液中接种商品化酿酒活性干酵母，然后控制温度25℃-35℃，搅拌转速100-180rpm进行发酵24-72小时，得到发酵液；

上述接种所用的商品化酿酒活性干酵母的量为步骤（1）所用青稞麸皮粉质量的0.05-0.2%；

（3）、将步骤（2）得到的发酵液控制转速为8000rpm离心10-20min，去沉淀，得到上清液；

（4）、在步骤（3）所得的上清液中加入硅藻土混合搅拌15-30min，然后经150-200目筛网过滤，所收集的滤液，即为青稞发酵原浆；

上述硅藻土的加入量，按硅藻土：上清液为1g:0.1-0.5l的比例计算，优选为1g:0.5l的比例，所述的硅藻土为食品级硅藻土。

上述所得的一种青稞发酵原浆，经检测，按每克青稞发酵原浆计算，其含有42.35-46.25mg的β-葡聚糖、130.3-250.48u的超氧化物歧化酶（其中的u定义为每毫升反应液中sod抑制率达50%时所对应的sod量），按每毫升青稞发酵原浆计算，其还含有0.205-0.335mg小分子肽，所得的青稞发酵原浆按体积百分比计算，还含有1.3-1.7%的乙醇。

上述所得的青稞发酵原浆由于含有β-葡聚糖、超氧化物歧化酶、肽和少量乙醇，因此可起到保湿、抗衰老、清除自由基的作用。可直接作为化妆品精华液或爽肤水的应用，或作为化妆品面膜中保湿剂的应用。

本发明的有益效果

本发明的一种青稞发酵原浆，由于含有β-葡聚糖、超氧化物歧化酶、多肽和少量乙醇，因此可起到保湿、抗衰老、清除自由基的作用。依据《化妆品卫生规范》进行人体斑贴试验，结果表明青稞发酵原浆化妆品无刺激、无过敏。可直接作为化妆品精华液或爽肤水的应用，或作为化妆品面膜中保湿剂的应用

进一步，本发明的一种青稞发酵原浆，其制备工艺简单，以糊化青稞麸皮为培养基，利用酿酒酵母菌自身丰富的酶系统，通过发酵直接获得。

附图说明

图1、实施例2所得的青稞发酵原浆直接作为化妆品爽肤水时皮肤mmv增长率保湿能力随时间的变化情况。

图2、不同浓度青稞发酵原浆还原力的情况图；

图3、不同浓度维生素c还原力的情况图；

图4、不同浓度青稞发酵原浆对dpph自由基清除能力的情况图。

具体实施案例

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明，说明但不限制本发明。

按照张娟等的《刚果红法测定燕麦中β-葡聚糖含量的研究》中所述的方法，采用7200型可见分光光度计（unic）仪器对本发明各实施例中所得的青稞发酵原浆中的β-葡聚糖含量进行测定；

按照隋英忠等的《复方树莓提取液中sod活性测定及其体内影响的实验研究》中所述的方法，采用7200型分光光度计（unic）仪器对本发明各实施例所得的青稞发酵原浆中的超氧化物歧化酶活力进行测定，其中每毫升反应液中sod抑制率达50%时所对应的sod量为一个sod活力单位（u）。

按照鲁伟等的《蛋白水解液中多肽含量的测定方法》中所述的方法，采用7200型分光光度计（unic）仪器对本发明各实施例所得的青稞发酵原浆中的多肽含量进行测定；

按照gb5009.225-2016《酒中乙醇浓度的测定》对本发明各实施例所得的青稞发酵原浆中的酒精度进行测定。

本发明的各实施例中所用的商品化酿酒活性干酵母，购于某超市，500g，生产厂家为安琪酵母股份有限公司。

实施例1

一种青稞发酵原浆，通过包括如下步骤的方法制备而成：

（1）、将粒径为75-100μm的青稞麸皮粉加入到水中，搅拌均匀后得到质量百分比浓度为10%的青稞麸皮粉浆，然后控制温度为55℃进行糊化15min，冷却降温至25℃，得到糊化液；

（2）、在步骤（1）得到的糊化液中接种商品化酿酒活性干酵母，然后控制温度25℃，搅拌转速100rpm，进行发酵24小时，得到发酵液；

上述接种所用的商品化酿酒活性干酵母的量为步骤（1）所用青稞麸皮粉质量的0.05%；

（3）、将步骤（2）得到的发酵液控制转速为8000rpm离心10min，去沉淀，得到上清液；

（4）、在步骤（3）所得的上清液中加入硅藻土进行混合搅拌15min，然后经150目筛网过滤，所收集的滤液，即为青稞发酵原浆；

上述硅藻土的加入量，按硅藻土：上清液为1g:0.5l的比例计算，所述的硅藻土为食品级。

对上述所得的青稞发酵原浆中进行测定，结果上述所得的青稞发酵原浆中的β-葡聚糖含量为42.35mg/g、超氧化物歧化酶活力为130.30u/g、多肽含量为0.205mg/ml、乙醇的体积百分比为1.3%。

实施例2

一种青稞发酵原浆，通过包括如下步骤的方法制备而成：

（1）、将粒径为75-100μm的青稞麸皮粉加入到水中，搅拌均匀后得到质量百分比浓度为15%的青稞麸皮粉浆，然后控制温度为55℃进行糊化15min，冷却降温至25℃，得到糊化液；

（2）、在步骤（1）得到的糊化液中接种商品化酿酒活性干酵母，然后控制温度30℃，搅拌转速140rpm，进行发酵36小时，得到发酵液；

上述接种所用的商品化酿酒活性干酵母的量为步骤（1）所用青稞麸皮粉质量的0.1%；

（3）、将步骤（2）得到的发酵液控制转速为8000rpm离心15min，去沉淀，得到上清液；

（4）、在步骤（3）所得的上清液中加入硅藻土进行混合搅拌15min，然后经150目筛网过滤，所收集的滤液，即为青稞发酵原浆；

上述硅藻土的加入量，按硅藻土：上清液为1g:0.5l的比例计算，所述的硅藻土为食品级。

对上述所得的青稞发酵原浆进行测定，结果上述所得的青稞发酵原浆中的β-葡聚糖含量为46.25mg/g、超氧化物歧化酶活力为250.48u/g、多肽含量为0.335mg/ml、乙醇的体积百分比为1.4%。

实施例3

一种青稞发酵原浆，通过包括如下步骤的方法制备而成：

（1）、将粒径为75-100μm的青稞麸皮粉加入到水中，搅拌均匀后得到质量百分比浓度为15%的青稞麸皮粉浆，然后控制温度为60℃进行糊化20min，冷却降温至25℃，得到糊化液；

（2）、在步骤（1）得到的糊化液中接种商品化酿酒活性干酵母，然后控制温度30℃，搅拌转速140rpm，进行发酵48小时，得到发酵液；

上树接种所用的商品化酿酒活性干酵母的量为步骤（1）所用青稞麸皮粉质量的0.1%；

（3）、将步骤（2）得到的发酵液控制转速为8000rpm离心15min，去沉淀，得到上清液；

（4）、在步骤（3）所得的上清液中加入硅藻土进行混合搅拌30min，然后经200目筛网过滤，所收集的滤液，即为青稞发酵原浆；

上述硅藻土的加入量，按硅藻土：上清液为1g:0.5l的比例计算，所述的硅藻土为食品级。

对上述所得的青稞发酵原浆进行测定，结果上述所得的青稞发酵原浆中的β-葡聚糖含量为43.90mg/g、超氧化物歧化酶活力为237.26u/g、多肽含量为0.287mg/ml、乙醇的体积百分比为1.5%。

实施例4

一种青稞发酵原浆，通过包括如下步骤的方法制备而成：

（1）、将粒径为75-100μm的青稞麸皮粉加入到水中，搅拌均匀后得到质量百分比浓度为20%的青稞麸皮粉浆，然后控制温度为65℃进行糊化30min，冷却降温至25℃，得到糊化液；

（2）、在步骤（1）得到的糊化液中接种商品化酿酒活性干酵母，然后控制温度35℃，搅拌转速180rpm，进行发酵72小时，得到发酵液；

上述接种所用的商品化酿酒活性干酵母的量为步骤（1）所用青稞麸皮粉质量的0.2%；

（3）、将步骤（2）得到的发酵液控制转速为8000rpm离心15min，去沉淀，得到上清液；

（4）、在步骤（3）所得的上清液中加入硅藻土进行混合搅拌30min，然后经200目筛网过滤，所收集的滤液，即为青稞发酵原浆；

上述硅藻土的加入量，按硅藻土：上清液为1g:0.5l的比例计算，所述的硅藻土为食品级。

对上述所得的青稞发酵原浆进行测定，结果上述所得的青稞发酵原浆中的β-葡聚糖含量为43.25mg/g、超氧化物歧化酶活力为160.45u/g、多肽含量为0.334mg/ml、乙醇的体积百分比为1.7%。

应用实验

对上述实施例2所得的青稞发酵原浆直接作为爽肤水化妆品应用时，进行保湿性能的评价实验，具体步骤如下：

选取30名年龄20-45周岁的志愿者，志愿者清洁手臂后，在恒温恒湿环境下（温度20-24℃，湿度40-60%），平衡30min测试皮肤水分。每处测试区域为5cm×5cm，测量手臂测试区域的空白值，然后按2mg样品/cm²的用量将实施例2所得的青稞发酵原浆涂抹于手臂相应区域，分别于即时涂抹、1h、2h、3h、4h后测定皮肤水分，比较皮肤水分含量增长率。试用后，测试者均未出现刺激或者过敏现象，实验结果见附图1，从图1中可以看出样品的mmv在涂抹后达到最佳保湿效果，并持续降低，测试期间样品使皮肤mmv增长率均大于0，由此表明了保湿效果好，且具有较强的持久保湿能力。

皮肤水分含量（mmv）增长率=（涂抹后t时段皮肤的含水量-涂抹前皮肤的含水量）/涂抹前皮肤的含水量×100%。

对上述实施例2所得的青稞发酵原浆直接作为爽肤水化妆品应用时，进行安全性能的评价实验，具体步骤如下：

斑贴试验主要是用于检测化妆品终产品或原料的刺激性。本发明对青稞发酵原浆化妆品进行人体封闭式斑贴试验,对其潜在皮肤刺激性进行评估。

选择合适的志愿者30人,年龄范围在18-60岁随机选择。将0.2ml到0.025ml实施例2所得的青稞发酵原浆滴加在滤纸片上,再将滤纸片置于斑试器（北京百亿怡达科技开发有限公司）孔内，得到测试样品。

每个测试样品均设置空白对照样品,即将0.2ml到0.025ml蒸馏水或橄榄油滴加在滤纸片上,再将滤纸片置于对照用的斑试器（北京百亿怡达科技开发有限公司）孔内，得到对照样品。

试验部位选为人体背部,利用无刺激性的胶带将斑试器固定贴敷于受试者背部。测试周期持续24h。为了试验结果的准确、可信和科学,在测试期间志愿者按照要求,不能摘

掉斑试器和对照用的斑试器,亦不可使受试部位接触水。

24h后去除斑试器和对照用的斑试器,静置后,等待压痕消失,观察皮肤的反应。如果试验结果为阴性,则样品无刺激。

斑贴试验结果见表1

表1斑贴试验结果

“—”=阴性反应

“+”=可疑反应仅有微弱红斑

“++”=弱阳性反应红斑反应红斑、浸润、水肿、可有丘疹

“+++”=强阳性反应疤疹反应红斑、浸润、水肿、丘疹、疤疹反应可超出受试区

由表1可知,实施案例2制备的青稞发酵原浆化妆品在试验中未发现不良反应，说明本发明提供的青稞发酵原液直接作为化妆品爽肤水应用，其具有较高安全性。

对上述实施例2所得的青稞发酵原浆进行体外抗氧化性能的评价，实验如下：

按照姜忠杰的《青稞麸皮可溶性粗多糖的提取及其抗氧化性研究》所述的方法，测定不同浓度的青稞发酵原浆的还原力，结果如附图2所示，以不同浓度(0.02mg/ml、0.04mg/ml、0.06mg/ml、0.08mg/ml、0.1mg/ml)的维生素c为阳性对照，结果见附图3，在实验所测定的浓度范围内，青稞发酵原液的还原力随浓度的增加而升高。100%发酵原液的还原力为0.876，比0.1mg/ml维生素c的还原力0.846稍高，表明青稞发酵原液同样具有很好的还原力。

按照姜忠杰的《青稞麸皮可溶性粗多糖的提取及其抗氧化性研究》所述的方法，测定青稞发酵原浆的dpph自由基清除能力，以浓度0.1mg/ml的维生素c为阳性对照，结果如附图4所示。在实验所测定的浓度范围内，青稞发酵原液的dpph自由基清除能力随浓度的增加而升高。100%发酵原液的dpph自由基清除能力为79.25%，0.1mg/ml维生素c的dpph自由基清除能力为49.52%，表明本发明所得的青稞发酵原液具有很好的dpph自由基清除能力。

综上所述，本发明提供的一种青稞发酵原浆，由于含有β-葡聚糖、超氧化物歧化酶、小分子肽和少量乙醇，因此可起到保湿、抗衰老、清除自由基的作用，经测试，发酵原浆无过敏反应，可直接作为化妆品精华液或爽肤水的应用，或作为化妆品面膜中保湿剂的应用。

以上所述仅是本发明的实施方式的举例，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和变型，这些改进和变型也应视为本发明的保护范围。