一种从九龙藤提取总黄酮的方法与流程

文档序号:13677070

本发明属于中药有效成分提取,具体是一种从九龙藤提取总黄酮的方法。



背景技术:

九龙藤系豆科羊蹄甲属植物龙须藤(Bauhiniachampionii(Benth.)Benth.的干燥藤茎,是一种广西民族特色中草药,在我国东南沿海亦有广泛分布,植物资源丰富。其性平、味苦辛、无毒。九龙藤的化学成分主要为黄酮类、甾体类、萜类、多环酚类、木脂素类、生物碱类、芳香酸类等,具有祛风除湿、活血止痛、健脾理气功效,用于风湿关节炎、腰腿痛、跌打损伤、胃及十二指肠溃疡等。其中九龙藤中的总黄酮具有抗氧化、镇痛消炎及抗血小板等作用。因此,有效分离、纯化黄酮活性成分对九龙藤的开发利用具有重要意义。



技术实现要素:

本发明目的在于提供一种从九龙藤提取总黄酮的方法,本发明方法具有工艺简单、总黄酮产量高、纯度高、成本低、容易实现工业化生产等优点,对九龙藤有效成分的开发利用具有重要意义。

为了实现以上目的,本发明采用的技术方案如下:

一种从九龙藤提取总黄酮的方法,包括以下步骤:

(1)将九龙藤根茎粉碎至40-60目,过筛,每次加入为九龙藤药材重量6-10倍的乙醇进行回流提取2-3次,合并滤液;

(2)将步骤(1)的滤液减压浓缩后,得九龙藤粗提物,在九龙藤粗提物加入丙酮,配成质量浓度为10-20%的进样溶液,再用稀酸调节溶液的pH值至4-5;

(3)将进样溶液输送至模拟移动床进行分离纯化,所述移动床的色谱柱填充聚丙烯酰胺和活性炭,洗脱剂为丙酮和乙酸乙酯混合溶剂,得洗脱液;

(4)将上述洗脱液再经过减压浓缩,真空干燥,即得到九龙藤总黄酮。

进一步地,所述回流提取温度为50-60℃,每次回流提取1-2h。

进一步地,所述减压浓缩的真空度为-0.06 ~ -0.08Mpa、温度为60-70℃。

进一步地,所述稀酸为稀盐酸、稀硫酸或醋酸中的一种或多种组合物。

进一步地,所述丙酮和乙酸乙酯的体积比为2-4:1。

进一步地,所述聚丙烯酰胺和活性炭的质量比为1:3-5。

进一步地,所述真空干燥是真空度为-0.06 ~ -0.08Mpa、温度为50-60℃下干燥。

进一步地,所述利用模拟移动床分离纯化时控制洗脱泵流速50-100mL/min,压力6-8MPa ,进样泵流速15-25mL/min,压力6-8MPa ,工作温度40-50℃。

与现有技术相比,本发明的优点及有益效果为:

1、本发明方法得到的九龙藤粗提物经过模拟移动床进行分离提纯,大大提高了九龙藤总黄酮的纯度和回收率,总黄酮中以芦丁计纯度可达到75%以上。

2、本发明采用模拟移动床是连续式生产,克服了柱层析间歇性生产存在的缺陷,模拟移动床具有生产自动化程度高、工作效率高、成本较低、生产环境安全环保,容易实现工业化生产。

3、本发明以丙酮和乙酸乙酯作为流动相,以聚丙烯酰胺和活性炭作为固定相,可以更好的实现总黄酮与其他杂质的分离,提高提取物中总黄酮的含量。

4、本发明提取的九龙藤中总黄酮具有抗氧化、镇痛消炎及抗血小板等作用,市场应用前景广阔。

5、本发明方法具有工艺简单、耗能低、安全环保、成本低廉等优点,容易实现工业化生产,为九龙藤药物的开发利用提供了有效的途径。

具体实施方式

下面将结合具体实施例对本发明方案进一步详细说明,但不限于本发明的保护范围。

实施例1

一种从九龙藤提取总黄酮的方法,包括以下步骤:

(1)将九龙藤根茎10kg粉碎至40目,过筛,每次加入为九龙藤药材重量6倍的乙醇进行回流提取3次,回流提取温度为60℃,第一次回流提取2.0h,第二次回流提取1.5h,第三次回流提取1h,合并滤液;

(2)将步骤(1)的滤液在真空度为-0.08Mpa、温度为60℃下减压浓缩成稠膏状,得九龙藤粗提物,在九龙藤粗提物加入丙酮,配成质量浓度为15%的进样溶液,再用稀盐酸调节溶液的pH值至4;

(3)将进样溶液输送至模拟移动床进行分离纯化,所述移动床的色谱柱填充质量比为1:4的聚丙烯酰胺和活性炭,洗脱剂为体积比3:1的丙酮和乙酸乙酯混合溶剂,得洗脱液;所述利用模拟移动床分离纯化时控制洗脱泵流速50mL/min,压力8MPa ,进样泵流速20mL/min,压力8MPa ,工作温度40℃;

(4)将上述洗脱液在真空度为-0.08Mpa、温度为60℃下减压浓缩成稠膏状,真空度为-0.08Mpa、温度为60℃下干燥,即得到九龙藤总黄酮。

本实施例所得的金不换总生物碱经过HPLC检测,以芦丁计含量为79.16%。

实施例2

一种从九龙藤提取总黄酮的方法,包括以下步骤:

(1)将九龙藤根茎10kg粉碎至60目,过筛,每次加入为九龙藤药材重量8倍的乙醇进行回流提取3次,回流提取温度为50℃,第一次回流提取1.5h,第二次回流提取1.0h,第三次回流提取1.0h,合并滤液;

(2)将步骤(1)的滤液在真空度为-0.06Mpa、温度为70℃下减压浓缩成稠膏状,得九龙藤粗提物,在九龙藤粗提物加入丙酮,配成质量浓度为10%的进样溶液,再用稀硫酸调节溶液的pH值至5;

(3)将进样溶液输送至模拟移动床进行分离纯化,所述移动床的色谱柱填充质量比为1:5的聚丙烯酰胺和活性炭,洗脱剂为体积比4:1的丙酮和乙酸乙酯混合溶剂,得洗脱液;所述利用模拟移动床分离纯化时控制洗脱泵流速80mL/min,压力6MPa ,进样泵流速15mL/min,压力6MPa ,工作温度45℃。

(4)将上述洗脱液在真空度为-0.06Mpa、温度为70℃下减压浓缩成稠膏状,真空度为-0.06Mpa、温度为55℃下干燥,即得到九龙藤总黄酮。

本实施例所得的金不换总生物碱经过HPLC检测,以芦丁计含量为83.64%。

实施例3

一种从九龙藤提取总黄酮的方法,包括以下步骤:

(1)将九龙藤根茎10kg粉碎至60目,过筛,每次加入为九龙藤药材重量10倍的乙醇进行回流提取2次,回流提取温度为55℃,第一次回流提取2h,第二次回流提取1.5h,合并滤液;

(2)将步骤(1)的滤液在真空度为-0.08Mpa、温度为65℃下减压浓缩成稠膏状,得九龙藤粗提物,在九龙藤粗提物加入丙酮,配成质量浓度为20%的进样溶液,再用醋酸调节溶液的pH值至4;

(3)将进样溶液输送至模拟移动床进行分离纯化,所述移动床的色谱柱填充质量比为1:3的聚丙烯酰胺和活性炭,洗脱剂为体积比2:1的丙酮和乙酸乙酯混合溶剂,得洗脱液;所述利用模拟移动床分离纯化时控制洗脱泵流速100mL/min,压力6MPa ,进样泵流速25mL/min,压力6MPa ,工作温度50℃。

(4)将上述洗脱液在真空度为-0.08Mpa、温度为65℃下减压浓缩成稠膏状,真空度为-0.08Mpa、温度为50℃下干燥,即得到九龙藤总黄酮。

本实施例所得的金不换总生物碱经过HPLC检测,以芦丁计含量为76.25%。

实施例4

一种从九龙藤提取总黄酮的方法,包括以下步骤:

(1)将九龙藤根茎5kg粉碎至60目,过筛,每次加入为九龙藤药材重量7倍的乙醇进行回流提取2次,回流提取温度为60℃,第一次回流提取1.5h,第二次回流提取1.5h,合并滤液;

(2)将步骤(1)的滤液在真空度为-0.06Mpa、温度为70℃下减压浓缩成稠膏状,得九龙藤粗提物,在九龙藤粗提物加入丙酮,配成质量浓度为15%的进样溶液,再用稀盐酸调节溶液的pH值至5;

(3)将进样溶液输送至模拟移动床进行分离纯化,所述移动床的色谱柱填充质量比为1:4的聚丙烯酰胺和活性炭,洗脱剂为体积比4:1的丙酮和乙酸乙酯混合溶剂,得洗脱液;所述利用模拟移动床分离纯化时控制洗脱泵流速50mL/min,压力8MPa ,进样泵流速20mL/min,压力8MPa ,工作温度40℃。

(4)将上述洗脱液在真空度为-0.06Mpa、温度为70℃下减压浓缩成稠膏状,真空度为-0.06Mpa、温度为60℃下干燥,即得到九龙藤总黄酮。

本实施例所得的金不换总生物碱经过HPLC检测,以芦丁计含量为78.42%。

实施例5

一种从九龙藤提取总黄酮的方法,包括以下步骤:

(1)将九龙藤根茎5kg粉碎至40目,过筛,每次加入为九龙藤药材重量8倍的乙醇进行回流提取3次,回流提取温度为55℃,第一次回流提取1.5h,第二次回流提取1h,第三次回流提取1h,合并滤液;

(2)将步骤(1)的滤液在真空度为-0.08Mpa、温度为60℃下减压浓缩成稠膏状,得九龙藤粗提物,在九龙藤粗提物加入丙酮,配成质量浓度为10%的进样溶液,再用稀盐酸调节溶液的pH值至4;

(3)将进样溶液输送至模拟移动床进行分离纯化,所述移动床的色谱柱填充质量比为1:5的聚丙烯酰胺和活性炭,洗脱剂为体积比3:1的丙酮和乙酸乙酯混合溶剂,得洗脱液;所述利用模拟移动床分离纯化时控制洗脱泵流速80mL/min,压力6MPa ,进样泵流速25mL/min,压力6MPa ,工作温度50℃;

(4)将上述洗脱液在真空度为-0.08Mpa、温度为60℃下减压浓缩成稠膏状,真空度为-0.08Mpa、温度为50℃下干燥,即得到九龙藤总黄酮。

本实施例所得的金不换总生物碱经过HPLC检测,以芦丁计含量为84.19%。

再多了解一些
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