本发明属于滴眼液技术领域，具体涉及一种含有螯合剂的地夸磷索四钠滴眼液。
背景技术：
地夸磷索四钠滴眼液是全球获准上市的首个p2y2受体激动剂滴眼液，其作用于结膜上皮及杯状细胞膜上的p2y2受体，通过上调细胞内的钙离子浓度，促进水分及黏蛋白的分泌，从而改善干眼病症状，使泪膜更接近正常状态。另外，地夸磷索四钠滴眼液作为具有诱导排痰作用的去痰剂或肺炎治疗药而期待开发的化合物。地夸磷索四钠(diquafosoltetrasodium)化学名为p1,p4-二(尿苷5’-四磷酸)钠，由参天制药公司和inspire制药公司联合开发，2010年在日本上市，商品名为diquas，地夸磷索四钠滴眼液2017年的销售额约为1亿美元。中国专利申请cn1265114a公开了地夸磷索四钠化合物的制备方法。
中国专利申请cn103282039a公开了在含有优选的乙二胺四乙酸及其盐作为螯合剂的地夸磷索滴眼液抑制不溶性析出物的产生；中国专利申请cn104203254a进一步公开了含有优选的乙二胺四乙酸及其盐作为螯合剂的地夸磷索滴眼液抑制不溶性析出物的产生，同时增加了具有减轻眼部刺激性和增强保存效力。
上述专利申请cn103282039a和cn104203254a提供了含有优选的乙二胺四乙酸及其盐作为螯合剂的地夸磷索滴眼液和不含螯合剂的滴眼液在25℃、3个月的稳定性比较，检测结果采用目视观察，结果显示不加螯合剂的滴眼液产生了白色不溶性析出物。
技术实现要素：
本发明经过实验发现，不加螯合剂的地夸磷索四钠滴眼液产生的不溶性析出物包括极其细小的不溶性微粒，采用目视的方法观察是不够准确的。虽然对于滴眼液制剂中国药典要求采用可见异物检查法(通则0904灯检目视法)，并不强制要求进行不溶性微粒检查，但是由于地夸磷索四钠滴眼液的地夸磷索四钠含量高达3％，这在现有滴眼液中是非常少见的。因此，与其他活性成分含量不是很高的滴眼液相比，地夸磷索四钠滴眼液在制造、流通和保存过程中因浓度过高而析出的概率明显提高，对患者的使用造成潜在的风险，为此本发明按照中国药典注射液的标准检查不溶性微粒，按照中国药典通则(0903)不溶性微粒检查法(光阻法)重新考察了乙二胺四乙酸二钠作为螯合剂的3％地夸磷索四钠滴眼液于25℃保存3个月的结果，结果如下：
按照中国药典通则(0903)不溶性微粒结果判定(2)每个供试品容器(份)中含10μm及以上的微粒数不得过6000个，含25μm及以上的微粒数不得过600个，由上述表格结果可知，采用含有0.01％(w/v)乙二胺四乙酸二钠和地夸磷索四钠滴眼液的保存稳定性不能达到相关要求。此外，对中国专利申请cn104203254a中的公开的众多螯合剂进行了考察分析，发现均存在不溶性微粒结果不符合相关要求的问题。
在上述发现的基础上，为了能够获得安全性能更佳的地夸磷索四钠滴眼液，抑制因制备、流通以及保存过程中产生的析出物，发明人进行了大量的探索和分析，通过在地夸磷索四钠滴眼液中添加特定螯合剂，预料不到地发现可以更有效的抑制析出物的产生，不溶性微粒检测结果符合相关要求，提高了地夸磷索四钠滴眼液的用药安全性。
本发明提供一种含有螯合剂的地夸磷索四钠滴眼液，包含地夸磷索四钠、药学上可添加的添加剂、第一螯合剂、ph调节剂和水，所述地夸磷索四钠的浓度为3％(w/v)，所述第一螯合剂选自二乙烯三胺五乙酸、乙二胺四亚甲基膦酸及其盐中的一种或多种。盐可以为本领域常规的药用盐，包括钠盐、钾盐等。
优选地，所述第一螯合剂的浓度为0.0005％～0.5％(w/v)。
优选地，所述药学上可添加的添加剂包括缓冲剂、等渗剂和表面活性剂中的一种或多种；所述缓冲剂选自磷酸钠、磷酸氢钠、磷酸二氢钠、乙酸钠和ε-氨基己酸中的一种或多种；所述等渗剂选自氯化钠、氯化钾和甘油中的一种或多种；表面活性剂选自聚氧乙烯山梨糖醇酐单油酸酯、硬脂酸-40-聚烃氧基酯和聚氧乙烯氢化蓖麻油中的一种或多种。
优选地，所述ph调节剂选自碳酸氢钠、碳酸钠、碳酸氢钾或碳酸钾。ph调节剂使地夸磷索四钠滴眼液的ph保持在4～8，优选5～8。
优选地，所述的含有螯合剂的地夸磷索四钠滴眼液，还包含第二螯合剂，所述第二螯合剂选自乙二胺四乙酸、柠檬酸、苹果酸、酒石酸、富马酸、马来酸及其盐中的一种或多种。
更优选地，所述第一螯合剂和所述第二螯合剂的质量比为60～80:20～40。
最优选地，所述第一螯合剂和所述第二螯合剂的质量比为80:20。
优选地，所述防腐剂选自苯扎氯铵、苄索氯铵或葡萄糖酸氯己定，更优选苯扎氯铵。
本发明中涉及的原料，可以是非水合物，也可以是水合物。
与现有技术相比，本发明带来的有益效果包括：发现了现有3％地夸磷索四钠滴眼液可能存在的安全隐患，并进一步通过添加特定的螯合剂能够获得安全性能更佳的地夸磷索四钠滴眼液，抑制因制备、流通以及保存过程中产生的析出物。本发明提供的含有3％地夸磷索四钠滴眼液具有更佳的安全性和稳定性，可减少不良反应的发生，不溶性微粒的数量少，符合更高要求的相关标准。
具体实施方式
本发明中的地夸磷索四钠，如下述结构式所示：
本发明滴眼液可以按照常规的方法制造，可以利用常用的技术根据需要添加制药学上容许的添加剂：如磷酸钠、磷酸氢钠、磷酸二氢钠、乙酸钠、ε-氨基己酸等缓冲剂；氯化钠、氯化钾、甘油等等渗剂；聚氧乙烯山梨糖醇酐单油酸酯、硬脂酸-40-聚烃氧基酯、聚氧乙烯氢化蓖麻油等表面活性剂。本发明滴眼液的ph只要在眼科制剂容许的范围内即可，通常优选在4～8的范围内，更优选5～8。
本发明滴眼液可以含有防腐剂，作为本发明的防腐剂可以选自苯扎氯铵、苄索氯铵或葡萄糖酸氯己定等，该防腐剂浓度只要为发挥规定的保存效力的浓度即可，没有特别限定，该防腐剂为苯扎氯铵的情况下浓度优选为0.001～0.005％(w/v)。本发明滴眼液也可以不含有防腐剂，作为本发明不含有防腐剂的并且达到保存效力的方法是采用单剂量滴眼瓶或者多剂量的特殊滴眼瓶，比如
本法明中“不溶性析出物”是指在本发明滴眼液的制造、流通和保存过程中产生的不再溶解的杂质，可以是肉眼可见的杂质，也以及肉眼不可见的但是可以通过仪器检测出来的杂质。“不溶性微粒”则难以通过肉眼观察。本发明中的百分含量，如无特殊指出均指w/v，所用的试验材料，如无特殊说明，均为常规商购得到。
实施例1：含有0.001％二乙稀三胺五乙酸的地夸磷索四钠滴眼液
将地夸磷索四钠3g(折干)、磷酸氢钠水合物0.2g、氯化钠0.41g、氯化钾0.15g，二乙稀三胺五乙酸0.001g及苯扎氯铵0.0075g溶解于水，添加ph调节剂，使ph为7.5、渗透压比为1.0，定容至100ml。
实施例2：含有0.005％二乙稀三胺五乙酸的地夸磷索四钠滴眼液
将地夸磷索四钠3g(折干)、磷酸氢钠水合物0.2g、氯化钠0.41g、氯化钾0.15g，二乙稀三胺五乙酸0.005g及苯扎氯铵0.0075g溶解于水，添加ph调节剂，使ph为7.5、渗透压比为1.0，定容至100ml。
实施例3：含有0.001％乙二胺四亚甲基膦酸的地夸磷索四钠滴眼液
将地夸磷索四钠3g(折干)、磷酸氢钠水合物0.2g、氯化钠0.41g、氯化钾0.15g，乙二胺四亚甲基膦酸0.001g及苯扎氯铵0.0075g溶解于水，添加ph调节剂，使ph为7.5、渗透压比为1.0，定容至100ml。
对比例1：含有0.001％乙二胺四乙酸二钠的地夸磷索四钠滴眼液
将地夸磷索四钠3g(折干)、磷酸氢钠水合物0.2g、氯化钠0.41g、氯化钾0.15g，乙二胺四乙酸二钠0.001g及苯扎氯铵0.0075g溶解于水，添加ph调节剂，使ph为7.5、渗透压比为1.0，定容至100ml。
对比例2：含有0.001％乙二胺四乙酸二钠的地夸磷索四钠滴眼液
将地夸磷索四钠3g(折干)、磷酸氢钠水合物0.2g、氯化钠0.41g、氯化钾0.15g，乙二胺四乙酸二钠0.00175g溶解于水，添加ph调节剂，使ph为7.5、渗透压比为1.0，定容至100ml。
试验例一：不溶性微粒的检测
将上述地夸磷索四钠滴眼液于25℃考察3个月，采用中国药典通则(0903)不溶性微粒光阻法检测记录每个供试品容器(份)中含10μm及以上的微粒数和25μm及以上的微粒数，结果见表1所示。
表1不同地夸磷索四钠滴眼液的不溶性微粒检测结果
按照中国药典通则(0903)不溶性微粒结果判定(2)每个供试品容器(份)中含10μm及以上的微粒数不得过6000个，含25μm及以上的微粒数不得过600个。由表1可知，对于含有0.001％乙二胺四乙酸二钠螯合剂的滴眼液的不溶性微粒数量明显高于本发明含有0.001％二乙稀三胺五乙酸或0.001％乙二胺四亚甲基膦酸螯合剂的滴眼液，显示出使用二乙稀三胺五乙酸或乙二胺四亚甲基膦酸螯合剂能够显著抑制不溶性微粒等析出物的产生，对比例2说明含有防腐剂和不含有防腐剂没有明显差别。
实施例4：含有0.0002％乙二胺四乙酸二钠和0.0008％二乙稀三胺五乙酸五钠的地夸磷索四钠滴眼液
将地夸磷索四钠3g(折干)、磷酸氢钠水合物0.2g、氯化钠0.41g、氯化钾0.15g，乙二胺四乙酸二钠0.0002g，二乙稀三胺五乙酸五钠0.0008g及苯扎氯铵0.0075g溶解于水，添加ph调节剂，使ph为7.5、渗透压比为1.0，定容至100ml。
实施例5：含有0.0004％乙二胺四乙酸二钠和0.0006％二乙稀三胺五乙酸五钠的地夸磷索四钠滴眼液
将地夸磷索四钠3g(折干)、磷酸氢钠水合物0.2g、氯化钠0.41g、氯化钾0.15g，乙二胺四乙酸二钠0.0005g，二乙稀三胺五乙酸五钠0.0005g及苯扎氯铵0.0075g溶解于水，添加ph调节剂，使ph为7.5、渗透压比为1.0，定容至100ml。
实施例6：含有0.0005％乙二胺四乙酸二钠和0.0005％二乙稀三胺五乙酸五钠的地夸磷索四钠滴眼液
将地夸磷索四钠3g(折干)、磷酸氢钠水合物0.2g、氯化钠0.41g、氯化钾0.15g，乙二胺四乙酸二钠0.0005g，二乙稀三胺五乙酸五钠0.0005g及苯扎氯铵0.0075g溶解于水，添加ph调节剂，使ph为7.5、渗透压比为1.0，定容至100ml。
实施例7：含有0.0002％乙二胺四乙酸二钠和0.0008％乙二胺四亚甲基膦酸五钠的地夸磷索四钠滴眼液
将地夸磷索四钠3g(折干)、磷酸氢钠水合物0.2g、氯化钠0.41g、氯化钾0.15g，乙二胺四乙酸二钠0.0002g，乙二胺四亚甲基膦酸五钠0.0008g及葡萄糖酸氯己定0.24ml(0.2％溶液)溶解于水，添加ph调节剂，使ph为7.5、渗透压比为1.0，定容至100ml。
实施例8：含有0.0002％柠檬酸氢二钠和0.0008％二乙稀三胺五乙酸的地夸磷索四钠滴眼液
将地夸磷索四钠3g(折干)、磷酸氢钠水合物0.2g、氯化钠0.41g、氯化钾0.15g，柠檬酸氢二钠0.0002g，二乙稀三胺五乙酸0.0008g及苯扎氯铵0.0075g溶解于水，添加ph调节剂，使ph为7.5、渗透压比为1.0，定容至100ml。
实施例9：含有0.0002％富马酸和0.0008％乙二胺四亚甲基膦酸五钠的地夸磷索四钠滴眼液
将地夸磷索四钠3g(折干)、磷酸氢钠水合物0.2g、氯化钠0.41g、氯化钾0.15g，富马酸0.0005g，乙二胺四亚甲基膦酸五钠0.0005g及苯扎氯铵0.0075g溶解于水，添加ph调节剂，使ph为7.5、渗透压比为1.0，定容至100ml。
实施例10：含有0.0002％酒石酸和0.0008％二乙稀三胺五乙酸五钠的地夸磷索四钠滴眼液
将地夸磷索四钠3g(折干)、磷酸氢钠水合物0.2g、氯化钠0.41g、氯化钾0.15g，酒石酸0.0005g，二乙稀三胺五乙酸五钠0.0005g及苯扎氯铵0.0075g溶解于水，添加ph调节剂，使ph为7.5、渗透压比为1.0，定容至100ml。
实施例11：含有0.0002％苹果酸和0.0008％乙二胺四亚甲基膦酸的地夸磷索四钠滴眼液
将地夸磷索四钠3g(折干)、磷酸氢钠水合物0.2g、氯化钠0.41g、氯化钾0.15g，苹果酸0.0005g，乙二胺四亚甲基膦酸0.0005g及苯扎氯铵0.0075g溶解于水，添加ph调节剂，使ph为7.5、渗透压比为1.0，定容至100ml。
实施例12：含有0.0002％马来酸和0.0008％乙二胺四亚甲基膦酸的地夸磷索四钠滴眼液
将地夸磷索四钠3g(折干)、磷酸氢钠水合物0.2g、氯化钠0.41g、氯化钾0.15g，马来酸0.0005g，乙二胺四亚甲基膦酸0.0005g及苯扎氯铵0.0075g溶解于水，添加ph调节剂，使ph为7.5、渗透压比为1.0，定容至100ml。
试验例二：不溶性微粒的检测
将上述地夸磷索四钠滴眼液于25℃考察分别考察0天和90天，采用中国药典通则(0903)不溶性微粒光阻法检测记录每个供试品容器(份)中含10μm及以上的微粒数和25μm及以上的微粒数，结果如表2所示。
表2单独及复配使用螯合剂的地夸磷索四钠滴眼液的不溶性微粒检测结果
由表2可知，仅使用第一螯合剂的滴眼液，以及同时使用第一螯合剂和第二螯合剂的滴眼液均能显著抑制不溶性微粒等析出物的产生。其中，使用第一螯合剂和第二螯合剂时的质量比为60～80:20～40时的效果较佳。
以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明的保护范围。