本发明属于中药制剂领域，涉及喷雾制剂，尤其是一种消淤止痛喷雾剂及其制备方法。
背景技术：
部队军事训练伤中有高达80％为肌肉、筋骨损伤，具体临床表现为局部疼痛、肿胀、有触痛、皮肤青紫，严重时引起日常活动受限。“红花洗药”一直以来是部队军事训练中急慢性软组织损伤的常用药。但“红花洗药”是中药散剂型，每次使用需沸水冲开泡洗。使用携带均不便，给人们用药带来困难，尤其给野外训练的广大官兵用药时上述问题尤为突出。为了便于基层部队使用，同时提高生物利用率，减少浪费。有必要将“红花洗药”制成生物利用度高的现代剂型，从而提高临床用药的高效性、安全性和便捷性。
技术实现要素：
本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种利用率高、化瘀止痛效果好、且有别于气雾剂的一种消淤止痛喷雾剂及其制备方法。
本发明解决其技术问题是采取以下技术方案实现的：
一种消淤止痛喷雾剂，其组成成分及重量份数为：红花1900-2100份、海桐皮1400-1500份、白芷1400-1500份、木鳖子1400-1500份、威灵仙820-840份、当归820-840份、伸筋草450-550份、没药450-550份、乳香450-550份、川椒240-260份、木瓜450-550份、川芎240-260份。
而且，红花2000份、海桐皮1488份、白芷1488份、木鳖子1488份、威灵仙836份、当归836份、伸筋草500份、没药500份、乳香500份、川椒252份、木瓜500份、川芎252份。
一种消淤止痛喷雾剂的制备方法，具体步骤如下：
⑴粉粹：将原料药材粉碎成粗粉，粉碎筛选用二号筛，筛孔内径为850μm±29μm，目号为24目，混合均匀，得到混合粗粉；
⑵渗漉:把步骤⑴中的混合粗粉加入10000ml、60％乙醇中浸润，避光密闭放置2小时，待药材完全湿润后，装入渗漉筒，其中，60％乙醇溶剂需高出混合粗粉5cm，再在渗漉筒中密闭放置48小时；
⑶收集：48小时后开始收集渗漉液，以80滴/分钟的滴速同时加入60％乙醇，使溶剂的液面始终保持在高出混合粗粉5cm，收集渗漉液达55000ml后，停止收集，静置48小时，取上清液分装；
⑷制喷雾剂：将分装好的上清液利用喷雾设备制成喷雾剂，即得到消淤止痛喷雾剂，使用时借助手动泵的压力，将药剂以雾状形式释放，喷于患处皮肤。
而且，所述的混合粗粉包括a组分、b组分及c组分，其制备步骤如下：
⑴先将海桐皮、白芷、威灵仙、当归、伸筋草、木瓜、川芎7味药材粉碎过滤制得a组分；
⑵再将木鳖子、川椒2味药材粉碎过滤制得b组分；
⑶将乳香和没药2味药材粉粹过滤制得c组分；
⑷最后将红花粉碎过滤逐步依次添加到c组分、b组分及a组分中，混合均匀，即得混合粗粉。
本发明的优点效果：
1、本喷雾剂有别于气雾剂，气雾剂喷出药物的动力为抛射剂，如氟氯烷烃(现多不用)、氢氟烷烃、二甲醚等。喷雾剂则是一种独特的剂型，既有雾化给药的特点和优势，又避免使用抛射剂，既安全又可靠，可用于呼吸道、皮肤黏膜或腔道起局部作用，也可起全身作用，有的可作特殊用途。
2、本喷雾剂适用于皮肤、黏膜、关节肢体表面、腔道等部位给药，药物呈细小雾滴能直达作用部位，局部浓度高，起效迅速；给药剂量准确，给药剂量比注射或口服小，因此毒副作用小，且药物呈雾状直达病灶，形成局部浓度，可减少疼痛，且使用方便。
3、本发明的消淤止痛喷雾剂通过质量控制标准，选择tcl法定性检测消淤止痛喷雾剂中红花、白芷、当归、川芎，采用hplc法控制君药红花中羟基黄色素a的含量，经过10000ml、60％的乙醇进行渗漉后，每毫升消淤止痛喷雾剂中羟基红花黄色素a的含量不少于0.35mg，优于市面上其他中药制剂，同时，依据2005药典附录中加速实验方法和结合经典的初均速法，对本发明的消淤止痛喷雾剂的稳定性进行考察，在室温(25℃)条件下放置稳定性良好，有效期在1年以上。
4、本发明提供一种利用率高、化瘀止痛效果好、且有别于气雾剂的一种消淤止痛喷雾剂及其制备方法，相比市面上现有的制剂，本制剂的优势在于创新利用10000ml、60％的乙醇进行渗漉，仅需使用12味中药就能达到化瘀止痛的功效，且本制剂是喷雾剂型，剂型新颖，市面上现有的剂型仅有酊剂及贴膏剂，而本喷雾剂方便携带，使用便捷，疗效显著，毒副作用小，尤其适用于一些特殊的户外环境使用，在部队军事训练中得到了较好的临床应用效果，从1999年1月至2000年1月，使用“红花洗药”治疗跌打损伤、关节肿痛等154例，平均止痛时间为20min，消肿5天，散瘀5天。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明作进一步详述，以下实施例只是描述性的，不是限定性的，不能以此限定本发明的保护范围。
实施例1
一种消淤止痛喷雾剂，其组成成分及重量份数为：红花2000份、海桐皮1488份、白芷1488份、木鳖子1488份、威灵仙836份、当归836份、伸筋草500份、没药500份、乳香500份、川椒252份、木瓜500份、川芎252份。
实施例2
一种消淤止痛喷雾剂，其组成成分及重量份数为：红花1900份、海桐皮1400份、白芷1400份、木鳖子1400份、威灵仙820份、当归820份、伸筋草450份、没药450份、乳香450份、川椒240份、木瓜450份、川芎240份。
实施例3
一种消淤止痛喷雾剂，其组成成分及重量份数为：红花2100份、海桐皮1500份、白芷1500份、木鳖子1500份、威灵仙840份、当归840份、伸筋草550份、没药550份、乳香550份、川椒260份、木瓜550份、川芎260份。
上述消淤止痛喷雾剂制备方法具体步骤如下：
⑴粉粹：将原料药材粉碎成粗粉，混匀均匀；
⑵渗漉:把步骤⑴粉粹混合后的粗粉加入10000ml、60％乙醇中浸润，避光密闭放置2小时，待药材完全湿润后，装入渗漉筒，其中，60％乙醇溶剂需高出混合粗粉5cm，再在渗漉筒中密闭放置48小时。
⑶收集：48小时后开始收集渗漉液，以80滴/分钟的滴速同时加入60％乙醇，使溶剂的液面始终保持在高出混合粗粉5cm，收集渗漉液达55000ml后，停止收集，静置48小时，取上清液分装。
⑷制喷雾剂：将分装好的上清液利用喷雾设备制成喷雾剂，使用时借助手动泵的压力，将药剂以雾状形式释放，喷于患处皮肤。
上述的混合粗粉包括a组分、b组分及c组分，其中，
⑴先将海桐皮、白芷、威灵仙、当归、伸筋草、木瓜、川芎7味药材粉碎过滤制得a组分；
⑵再将木鳖子、川椒2味药材粉碎过滤制得b组分；
⑶将乳香和没药2味药材粉粹过滤制得c组分；
⑷最后将红花粉碎过滤逐步依次添加到c组分、b组分及a组分中，混合均匀。
本发明提供的一种消淤止痛喷雾剂，作为解放军第254医院一种自主研发的中药制剂，用于临床二十余年，批准制剂文号：北制字(2006f12010)。具有活血化淤、消肿止痛的功效，适用于跌打损伤、风湿疼痛，筋骨酸痛，关节肿痛等。自使用之今，疗效确切。未见不良反应发生。目前保存的临床观察记录，统计资料从1999年1月至2000年1月，使用消淤止痛喷雾剂治疗跌打损伤、关节肿痛等154例，平均止痛时间为20min，消肿5天，散瘀5天，全部病例治愈。
祖国医学认为“气伤痛、行伤肿”，治宜活血化淤，消肿止痛，舒筋活络，使其气通畅，肿痛消除。“红花洗药”由红花、白芷、威灵仙、伸筋草、乳香、没药等十余味中药组成，红花活血祛瘀，为君药。白芷祛风除湿；木鳖子消肿散结攻毒；威灵仙辛散而通，性急善走，能祛风除湿，通经活络止痛。此三味为臣药，助红花活血祛瘀之功，且可祛风湿之痹。当归活血化瘀止痛；伸筋草辛温善行，可祛风除湿，舒经活络；乳香、没药活血止痛，消肿祛瘀。此四味为佐药。木瓜舒经活络；川芎通达气血，活血定痛；川椒辛热，温中止痛，治风塞湿痹。此三味为使药。
药红花含有多种有效成分，如羟基红花黄色素a(hydroxysaffloryellowa,hsya)，对红花的药理研究也主要是hsya药理活性研究，hsya具有抑制，缓解了血栓形成炎症反应，能明显的清除oh-自由基。促进血管吻合口修复愈合的等作用。臣药白芷主要含香豆素类成分，如欧前胡素、异欧前胡素等，具有解热、镇痛、抗炎、抗病原微生物和促细胞生长等作用。臣药威灵仙研究主要集中在原白头翁素和白头翁素上，具有抗菌、镇痛、杭炎和对骨关节的保护作用。木鳖子含有大量脂肪酸，联合用在骨伤科治疗中起到了很好的散结消肿定痛作用。伸筋草具有抗炎、镇痛作用和免疫功能调节。当归具有抗炎、镇痛、抗血小板聚集、促物质代谢、消除氧自由基和抗脂质过氧化作用。没药具有抗炎、镇痛、抗菌、消肿和刺激潜能作用。乳香具有镇痛、抗氧化作用。川芎、花椒有镇痛和抑制血小板形成的作用。组方中药味大多具有抗炎、镇痛，抗菌、消肿、抑制血栓形成、免疫功能调节等作用，基本和目前文献报到治疗软组织损伤药物作用机理相符。但现有技术中的“红花洗药”的剂型老化、使用携带不便，生物利用率低，起效慢。而中药喷雾剂的制备工艺趋于成熟，已成为中药制剂领域中的一个重要分支。尤其中药喷雾剂用于局部治疗时能使药物均匀分散，呈细小雾滴能直达作用部位，局部浓度高，起效迅速，可减少疼痛，且使用方便。用于局部治疗时优于其它剂型。
本发明的消淤止痛喷雾剂通过质量控制标准，选择tcl法定性检测“消淤止痛喷雾剂”中红花、白芷、当归、川芎，采用hplc法控制君药红花中羟基黄色素a的含量，经过10000ml、60％的乙醇进行渗漉后，每毫升“消淤止痛喷雾剂”中羟基红花黄色素a的含量不少于0.35mg。同时，依据2005药典附录中加速实验方法和结合经典的初均速法，对本发明的消淤止痛喷雾剂的稳定性进行考察，在室温(25℃)条件下放置稳定性良好，有效期在1年以上。
因疼痛和肿胀是急性软组织损伤后主要的症状表现，消淤止痛喷雾剂消淤止痛喷雾剂治疗急性软组织损伤，其药效也主要表现在抗炎、镇痛上。发明人以药理学实验研究方法(药效学)评价消淤止痛喷雾剂有无镇痛和对抗急性炎症的生物活性。
一、消淤止痛喷雾剂镇痛作用
考察其镇痛作用选用经典的镇痛实验小鼠热板法、甩尾法、扭体法。结果由热板法实验数据可见对照组动物两个时间点痛反应潜伏期分别为17.50±6.54和13.90±5.43秒，给药后无论是喷雾剂还是阳性对照药均表现为强度不同的镇痛作用，给药后1小时的作用效果明显优于给药后0.5小时的作用效果，在给药后1小时，喷雾剂高、中、低浓度组动物痛反应潜伏期分别为21.40±14.12秒，27.30±13.93秒和29.50±18.06秒，其中中、低浓度组实验数据与对照组相比p值小于0.01，喷雾剂高浓度虽有镇痛作用，但未能通过统计学检验。阳性对照药品云南白药亦有明确的镇痛作用，痛反应潜伏期为21.20±3.97秒，p值小于0.05。由甩尾法实验数据可知，给药后0.5小时，各给药组动物仅表现出一定的镇痛作用的趋势，给药后1小时，其镇痛作用明显显现。喷雾剂各个浓度组均表现出程度不等镇痛活性，高、中、低浓度用药动物的痛觉反应潜伏期分别为21.40±14.12秒、27.30±13.93秒、29.50±18.06秒，其值与对照组(痛觉反应潜伏期为4.86±0.90秒)相比p值分别小于0.001、0.01和0.05，阳性对照品云南白药亦有较强的镇痛作用。由扭体(预)实验数据可知，消淤镇痛喷雾剂对冰醋酸所致的动物扭体痛反应没有镇痛作用。结论：消淤止痛喷雾剂对热刺激所致疼痛感觉具有明确对抗作用，但不具有明确的量效关系，对化学刺激(冰醋酸)所致疼痛感觉无对抗作用。
二、消淤止痛喷雾剂抗炎作用
考察其抗急性炎症作用。选用了耳壳二甲苯炎症肿胀法、毛细血管通透性实验，由耳壳二甲苯炎症肿胀法实验数据可见对照组动物肿胀程度为8.3±2.9mg，给药后对其肿胀程度具有强度不同的抑制作用，其中以喷雾剂低浓度作用效果最好，肿胀度为3.6±2.1，与对照组相比p值小于0.001，喷雾剂高、中浓度虽有抑制作用，但由于标准差较大而未能通过统计学检验。阳性对照药品云南白药亦有明确的抑制作用，肿胀度为5.3±1.8mg，p值小于0.05。由毛细血管通透性实验数据可知，喷雾剂各个浓度均有程度不等抑制磷酸组织胺诱导的毛细血管通透性增加的活性，期中以中浓度的作用效果最佳，其od值为0.099±0.026，与对照组(od值为0.122±0.023)相比p值小于0.05，高、低浓度组虽有一定的抑制活性，但未见统计学意义；阳性对照品氟轻松亦有较强的抑制磷酸组织胺诱导的毛细血管通透性增加的活性。结论：消淤止痛喷雾剂具有明确的对抗实验性急性炎症的活性。
因此通过药效动物实验小鼠热板法、甩尾法、扭体法表明“消淤止痛喷雾剂”对热刺激所致疼痛感觉具有明确对抗作用，与云南白药气雾剂镇痛作用相当，但对化学刺激(冰醋酸)所致疼痛感觉无对抗作用。药效动物实验耳壳二甲苯炎症肿胀法、毛细血管通透性实验表明“消淤止痛喷雾剂”具有明确的对抗实验性急性炎症的活性，与云南白药气雾剂和氟轻松抗炎作用相当。
三、消淤止痛喷雾剂皮肤用药安全性实验研究
为了评估其皮肤用药的安全性，我们按照新药审批办法中有关毒理的要求及相关文献，对消淤止痛喷雾剂进行了安全性实验研究，内容包括皮肤急性毒性实验(测定ld50(半数致死剂量)或mtd(最大耐受剂量))、皮肤刺激性实验和皮肤过敏实验。
(一)急性毒性实验结果：
消淤止痛喷雾剂高浓度(大剂量)破损皮肤给药可能对大鼠会产生一定的毒副作用，主要表现在影响大鼠体重的增长。由于该影响作用有限，所以仅在体总增长速率较快的雄性大鼠体内有所表现，而在体重增长速率较慢的雌性大鼠体内没有表现。结果显示：消淤止痛喷雾剂高浓度应该慎用于破损皮肤的患者。消淤止痛喷雾剂大鼠完整及破损皮肤给药剂量高达17.2(生药)g/kg(12小时，给药4次累积剂量)不致动物死亡，最大耐受剂量(mtd)为17.2(生药)g/kg,为临床用药剂量的344倍。
(二)刺激性实验结果：
消淤与止痛组和赋形剂对照组给药刺激后6～72h均未见红斑及水肿，表明消瘀止痛喷雾剂及赋形剂无皮肤刺激作用。依据表3和表4评价标准，消瘀止痛喷雾剂总积分均值为0。刺激强度为无刺激性。结论：消瘀止痛喷雾剂浓度为0.201g生药/ml时喷雾给药对家兔皮肤无刺激作用。
(三)皮肤过敏实验结果：
2，4-二硝基氯苯组动物受试区自激发给药6h后，有明显的红斑及水肿，致敏率为100％；赋形剂对照组和消淤止痛组自激发给药后6～72h均未见红斑及水肿，表明赋形剂及消淤止痛伤喷雾剂无致敏作用。
因此经过皮肤急性毒性、皮肤刺激性和皮肤过敏实验，表明“消止痛喷雾剂”对家兔无明显急性毒性反应，对家兔完整皮肤组无刺激性，对豚鼠无皮肤过敏反应。说明本制剂毒性甚小，是一种安全性较好的外用制剂。
四、羟基红花黄色素a抑制局灶性缺血再灌注损伤大鼠的炎症反应
药效实验表明消淤止痛喷雾剂具有明显对抗急性炎症的生物活性，因此发明人将对其药效物质基础进一步研究。消淤止痛喷雾剂组方中君药红花(carthamustinctoriusl.)，其具有活血通径、散瘀止痛等功效,常用于血脉闭塞、跌打损伤、疮疡肿痛等证。羟基红花黄色素(hsya)是其最重要的组成成分。以往的数据表明，hsya能对抗血小板活化因子与其受体的结合。在这项研究中，我们研究hsya对原代培养大鼠皮层神经细胞缺血再灌注损伤和对短暂性脑缺血再灌注损伤的作用，并且通过研究hsya治疗缺血性损伤后白细胞介素-1β和肿瘤坏死因子-α表达改变来阐明其部分作用机制。
结果发现hsya对体外缺氧诱导的神经细胞损伤和体内短暂局灶性脑缺血再灌注损伤具有神经保护作用，这种保护作用是由于hsya抑制了部分局灶性缺血再灌注损伤后的炎症反应。进一步发现hsya同时显著减少肿瘤坏死因子-α和白介素-1β在mrna和蛋白质水平的表达，表明hsya抑制了部分局灶性缺血再灌注损伤后的炎症反应与抑制促炎细胞因子的效应有关。
通过一系列实验研究研制出的消淤止痛喷雾剂，作为传统“红花洗药”替代药，更加高效、安全、使用方便，也为“消淤止痛喷雾剂”进行临床实验奠定基础。目前消淤止痛喷雾剂已获得军队医疗机构制剂临床研究批件，正在进行临床研究，推广使用。