一种防治畜禽腹泻的中药复方及其制备工艺的制作方法

本发明涉及中兽药
技术领域：
，尤其涉及蒲公英、土茯苓、紫花地丁、野菊花、败酱草等中药组方和提取制备工艺。
背景技术：
畜禽腹泻类疾病不仅是困扰我国各养殖户的严重问题之一，也是引起世界各国畜牧业损失的主要原因之一。抗生素是防治畜禽腹泻最为常见的方式，但长期不规范及滥用抗生素，使病原产生了严重的耐药性，并且药物残留问题也不断威胁人类和动物的生命安全，破坏生态环境。因此迫切需要研究新型药物或技术来替代抗生素，减少其带来的不良后果及危害。中药及其制剂以纯天然、无毒、无残留、无耐药性等优势成为人民日益关注的对象，许多中药对畜禽腹泻有良好疗效，并能提高动物机体免疫，改善生产质量。现代研究者也在不断研制开发新型中兽药制剂，用来防治畜禽腹泻疾病，代替抗生素，减少畜牧业损失。我们通过根据中兽医理论分析仔猪细菌性腹泻和鸡大肠杆菌病为湿热证，选取清热解毒效果好的多味药物筛选组合，筛选出具有抗革兰氏阴性菌活性很强的蒲公英、土茯苓、紫花地丁、野菊花、败酱草几味中药进行合理组合配伍，显著提高了其抗菌效果，可以完全代替抗生素抑制大肠杆菌，中和大肠杆菌肠毒素，控制大肠杆菌引起的仔猪黄白痢和鸡肠炎等疾病。和抗生素相比不仅具有抗生素抗菌作用，而且还具有抗生素没有的中和细菌内毒素和抗炎作用，因此在临床治疗仔猪黄白痢和鸡细菌性肠炎更有效。目前常规中药提取工艺一般将药材或饮片采用煎煮法、回流法、浸渍法进行提取，具有提取时间长，提取温度较高的特点。因此中药中有效成分破坏较多，提取得率较低。提取后的药渣含水量大，一般当固体废弃物处理，给环保带来一定的压力。本工艺采用超微粉碎结合浸渍法进行提取，采用先进的离心固液分离技术进行药液收集具有一定的先进性。技术实现要素：针对目前畜牧行业使用中药仅采用传统中药组方简单粉碎或简单的煎煮，申请人进行了研究改进，采用了适合该组方的先进提取工艺，提供一种防治畜禽腹泻的中药复方及其制备工艺。本发明所采用的技术方案如下：(1)筛选抗菌、抗炎作用好，对革兰氏阴性菌(如大肠杆菌)敏感且成本较低的中药蒲公英、土茯苓、紫花地丁、野菊花、败酱草；(2)研究药物的配伍对抗菌作用提升和临床药效的作用，确定蒲公英、土茯苓、紫花地丁、野菊花、败酱草的配伍比例；(3)对提取工艺进行研究，确立合适的提取方法，保障药物有效成分最大程度的提取，制定出产品提取工艺。最终确定的提取工艺如下：①按上述重量份数分别称取各原料，筛选；②将上述各原超微冻粉碎，粉碎至800-1000目；③加入氢氧化钠和水80℃浸泡60分钟，提取溶媒为饮用水，所用溶媒与原料比为6∶1，氢氧化钠添加量为溶媒1％；④分别使用卧螺离心机和蝶式离心机进行固液分离；⑤用稀盐酸将提取液调节ph值至3.5-4.0范围；⑥将上述提取液浓缩至密度为1.05-1.10。核心工艺参数：所述超微粉碎目数为800-1000目；所述浸渍提取浸泡温度为80℃，溶媒比6∶1，氢氧化钠添加量为溶媒1％；所述离心固液分离卧螺旋离心机转速参数为3000r/min，蝶式离心机转速参数为6000r/mim；所述浓缩方法采用三效浓缩器，各效真空度和蒸发温度为：一效-0.04～-0.07mpa，85℃；二效-0.06～-0.08mpa，75℃，三效-0.07～-0.10mpa，65℃。药液浓缩至相对密度1.05～1.10。(4)对产品成型工艺进行研究，制成方便临床使用的合适两种剂型。一种为水溶型粉剂，一种是颗粒型散剂。水溶性粉剂采用喷雾干燥工艺，将浓缩液抽至喷雾干燥机进行喷干，得到粉末状可溶性粉。该剂型的优势适合临床饮水中添加，而且口服吸收利用率高。喷雾干燥工艺参数：喷雾干燥机进风温度为140-160℃，出风温度为70-90℃。颗粒型散剂采用颗粒二氧化硅吸附，桨叶螺旋干燥机干燥。该剂型优势是产品流散性好，不容易结块，容重接近主要饲料原料玉米粉、豆粕粉容重，加工饲料时添加均匀度好。选用载体及成品参数：二氧化硅颗粒大小20-30目；成品容重0.51-0.58吨/立方米。(5)对提取药渣处理进行研究，本发明采用微生物发酵的方法制成动物用中药微生态制剂。本发明主要用于防治仔猪黄白痢和鸡细菌性肠炎，疗效确实，可以代替抗生素治疗大肠杆菌引起的畜禽疾病，可适用于无抗养殖和畜牧行业减少抗生素的使用。具有安全无副作用，显效快，症状消失快，效果迅速等特点。附图说明图1提取工艺图图2干燥工艺图图3用药后各组治愈率的动态变化具体实施方式下面结合附图，说明本发明的具体实施方式。一种防治畜禽腹泻的中药复方及其制备工艺的步骤为：按重量比例分别称取各蒲公英25-30份，土茯苓20-25份，紫花地丁25-30份，野菊花20-25份，败酱草25-30份，筛选；将上述各原料超微粉碎，粉碎至800-1000目；加入氢氧化钠和水80℃浸泡60分钟，提取溶媒为饮用水，所用溶媒与原料比为6∶1，氢氧化钠添加量为溶媒1％；分别使用卧螺离心机(3000r/min)和蝶式离心机(6000r/mim)进行固液分离；用稀盐酸将提取液调节ph值至3.5-4.0范围；将上述提取液浓缩至密度为1.05-1.10。浓缩方法采用三效浓缩器，各效真空度和蒸发温度为：各效真空度和蒸发温度为：一效-0.04～-0.07mpa，85℃；二效-0.06～-0.08mpa，75℃，三效-0.07～-0.10mpa，65℃；将浓缩液进行喷干或采用二氧化硅吸附干燥分别制成水溶性粉剂或颗粒型散剂。喷雾干燥机进风温度为140-160℃，出风温度为70-90℃。二氧化硅大小为20-30目，颗粒状散剂成品容重为0.51-0.58吨/立方米。为了更好的解释本发明，下面结合具体实施方式对本发明做进一步说明。实施例1按重量份数分别称取蒲公英26份，土茯苓20份，紫花地丁26份，野菊花20份，败酱草26份筛选清洗；将上述各原料超微粉碎，粉碎至800-1000目；加入氢氧化钠和水80℃浸泡60分钟，提取溶媒为饮用水，所用溶媒与原料比为6∶1，氢氧化钠添加量为溶媒1％；分别使用卧螺离心机(3000r/min)和蝶式离心机(6000r/mim)进行固液分离；用稀盐酸将提取液调节ph值至3.5-4.0范围；将上述提取液浓缩至密度为1.05-1.10。浓缩方法采用三效浓缩器，各效真空度和蒸发温度为：各效真空度和蒸发温度为：一效-0.04～-0.07mpa，85℃；二效-0.06～-0.08mpa，75℃，三效-0.07～-0.10mpa，65℃。药液浓缩至相对密度1.05～1.10(图1)，然后喷雾干燥，喷雾干燥机进风温度为140℃，出风温度为70℃(图2)。实施例2按重量份数分别称取蒲公英30份，土茯苓24份，紫花地丁30份，野菊花24份，败酱草30份筛选清洗；将上述各原料超微粉碎，粉碎至800-1000目；加入氢氧化钠和水80℃浸泡60分钟，提取溶媒为饮用水，所用溶媒与原料比为6∶1，氢氧化钠添加量为溶媒1％；分别使用卧螺离心机(3000r/min)和蝶式离心机(6000r/mim)进行固液分离；用稀盐酸将提取液调节ph值至3.5-4.0范围；将上述提取液浓缩至密度为1.05-1.10。浓缩方法采用三效浓缩器，各效真空度和蒸发温度为：各效真空度和蒸发温度为：一效-0.04～-0.07mpa，85℃；二效-0.06～-0.08mpa，75℃，三效-0.07～-0.10mpa，65℃。药液浓缩至相对密度1.05～1.10(图1)，每公斤药材所得提取液采用780g颗粒二氧化硅吸附烘干，二氧化硅颗粒大小20-30目，烘干方法采用桨叶螺旋干燥机，所得成品容重0.56吨/立方米(图2)。本发明对提取工艺优化结果如下：在相同的提取条件下，对不同溶剂处理对产品得率进行对比分析。溶剂分别为纯水和1％naoh水溶液，经过相同的提取工艺提取后，计算浸膏得率，并通过hplc对本产品主要成分咖啡酸进行含量测定。方法：色谱条件：色谱柱：c18(4.6mm/250mm，5um)；甲醇∶磷酸盐缓冲液(0-15min，23∶77；16-25min，80∶20；26-30min，23∶77)为流动相；柱温：40℃；检测波长323nm，流速1ml/min，进样量：10ul。供试品制备：取本品1g，精密称定，置于50ml的锥形瓶中，精密加入10ml的5％甲酸甲醇溶液，摇匀，称定重量，超声处理，放冷后再称定重量，用5％甲酸甲醇溶液补足重量，低速离心，取上清液过滤，滤液备用。对照品制备：取咖啡酸标准品15g，精密称定，加甲醇10ml溶解，取1ml，定容到50ml容量瓶中，得30ug/ml的咖啡酸对照品溶液，备用。每种试验平行5次，结果如下(表1)：表1：不同溶媒浸提后浸膏得率及咖啡酸含量本发明对大肠杆菌的96孔板mic测定结果如下：对照产品有：1、白头翁散2、黄芩解毒散3、本发明产品喷雾干燥粉(以“蒲地散”商品名代替)方法：微量肉汤稀释法。每种药物每个浓度设3个重复，每种药10个稀释浓度。同时，每种药每个浓度设一个不加菌液孔，每个重复分别设阳性对照孔(加菌不加药)和阴性对照孔(不加药不加菌)。置37℃温箱16h后观察(眼观)结果，初步确定各药对各菌的mic，随后取未长菌各孔液体试管培养以进一步确认各药对各菌的mic。结果如下(表2)。表23种中药对两种细菌的mic测定结果(mg/ml)细菌黄芩解毒散白头翁散蒲地散猪大肠杆菌s45203112812864鸡大肠杆菌cmcc4443925625664本发明治疗鸡大肠杆菌病试验结果：对照产品有：1、白头翁散2、本发明产品吸附干燥品(以“蒲地散k”商品名代替)14日龄罗曼公鸡接种大肠杆菌o78造病，次日将发病鸡随机分为5组。高、中、低剂量的药物试验组分别在饲料中添加0.3％、0.2％和0.1％的蒲地散k，药物对照组添加1.0％的白头翁散，阳性对照组不添加任何药物，各组连续处理5天，第6天统计各组的有效率(表3)。表3蒲地散治疗实验性鸡大肠杆菌病效果注：同列数据肩标无相同字母者差异显著(p＜0.05)。蒲地散高剂量组的有效率最高，中剂量组与药物对照组相当，均显著高于阳性对照组。表明，蒲地散可用于治疗鸡大肠杆菌病，推荐剂量为饲料中添加0.2％。本发明治疗仔猪腹泻试验结果：对照产品有：1、白头翁散2、本发明产品吸附干燥粉(以“蒲地散k”商品名代替)挑选腹泻仔猪80头，随机均分为4组。高、中、低剂量的药物试验组分别在基础日粮中添加0.3％、0.2％和0.1％的蒲地散k，药物对照组添加1％的白头翁散，各组自由采食，连用5天，于停药后统计疗效。结果，蒲地散k高、中剂量组的总有效率为80％，显著高于低剂量组，与药物对照组的差异不显著；治愈率也与药物对照组相当。表明蒲地散k对猪细菌性腹泻有较好的疗效，推荐剂量为1％混饲(表4)(图3)。表4各组疗效统计组别头数治愈头数治愈率(％)显效头数显效率(％)总有效率(％)高剂量201260.0a525.085.0a中剂量201155.0a525.080.0a低剂量20630.0b630.060.0b药物对照201155.0a520.075.0a注：同列数据肩标无相同字母者差异显著(p＜0.05)。上文中所述的仅是本发明的一般性说明、具体优选实施方式和试验，本发明不限于以上实施例。本领域技术人员在不脱离本发明的精神和构思的前提下直接导出或联想到的其他修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。当前第1页12