本发明属于兽药技术领域，具体涉及一种治疗母畜子宫内膜炎的中药组合物及其制备方法与应用。
背景技术：
在动物养殖过程中，尤其是种畜繁育场，母畜的子宫内膜炎是养殖过程中最为常见的生殖系统疾病。母畜中较为常见的奶牛和母猪，如果养殖和管理不善的情况下，患有子宫内膜炎的母畜可以接近总数的一半。目前治疗手段主要还是依靠抗生素进行子宫局部给药或是口服全身给药。抗生素比较中药制剂治疗子宫内膜炎的缺点在于容易产生耐药性，产生环境污染和作用方式较为单一。目前的中药子宫注入剂较多，但是配方和有效物质过于复杂，不利于控制产品质量和产品效果。
中国发明专利cn103223021a公开了一种由天然药材的活性成份构成的用于治疗奶牛和猪子宫内膜炎的子宫灌注药物。本发明的防治奶牛、母猪子宫内膜炎的子宫灌注药物为药材博落回的活性成份，或者在其中再加入蒲黄和紫花地丁的活性成份。本发明的药材中：紫花地丁具清热解毒，凉血消肿之功效，有助于消除患病母畜子宫炎症和肿胀。蒲黄能兴奋子宫，促进子宫收缩，有助于子宫内脓液的排出，促进患病母畜子宫机能恢复，利于母畜早日怀孕。对比文件中虽然是利用博落回提取物，但其并未对博落回提取物中血根碱的含量进行限制，其采用煎煮的方法，然后对煎煮液进行乙醇提取，回收乙醇后调节ph值制备得到灌注药液，但是采用上述方法很难提取到血根碱。
中国发明专利cn102000145a公开了一种防治母畜子宫内膜炎的中西药复方灌注液及其制备方法，其中各组分的含量为：红花提取物0.5～5g/l、淫羊藿提取物1～10g/l、益母草提取物1～10g/l、痢菌净5～50g/l、水杨酸10～100g/l、乳酸环丙沙星4～40g/l、甲硝唑3～30g/l、冰片1～10g/l、聚乙烯吡咯烷酮20～40g/l、乙醇100～200g/l、吐温-805～15g/l，余量为注射用水。本发明通过将中药和西药的有效结合弥补了纯中药治疗用药量大、给药强度高、见效缓慢、疗程长，及纯西药治疗副作用大、易产生抗性的不足。实现标本兼治及抗生素抗菌消炎与中药成分修复子宫机能的有机结合。对比文件中使用中西药组合灌注剂针对细菌性子宫内膜炎等疾病进行治疗，加入的抗生素容易产生耐药性，产生环境污染和作用方式较为单一。
研究过程中发现，血根碱在ph值为5.5～7.0的水溶液中不稳定，在放置1-3个月后基本上只剩下10％～20％，对比文件中提取了博落回提取物，最后的制剂形式直接制备成了子宫灌注液，不利于博落回中血根碱的稳定保存。
技术实现要素：
为了克服现有技术中的问题，本发明提供一种治疗母畜子宫内膜炎的中药组合物及其制备方法与应用，采用博落回和益母草进行配伍应用，以博落回为君药，益母草为臣药，发挥其清热解毒，活血化瘀的作用来治疗母畜的子宫内膜炎。
为了实现上述目的，本发明通过以下技术方案实现：
本发明第一方面提供一种治疗母畜子宫内膜炎的中药组合物，所述组合物包括如下原料重量组分：博落回60～90份，益母草10～40份，所述博落回和益母草经过提取分别制得博落回提取物和益母草提取物，所述博落回提取物中的血根碱的质量百分比含量不得低于40％。
在一个优选的实施方案中，所述益母草提取物中的盐酸水苏碱的质量百分比含量不得低于3％。
在一个优选的实施方案中，所述博落回提取物从博落回果荚中提取分离得到。
在一个优选的实施方案中，所述中药组合物中还包括ph调节剂和助溶剂，所述ph调节剂为1.08～1.65份，助溶剂为0.32～0.33份。
在一个优选的实施方案中，所述中药组合物的产品形态为固体。避免了在溶液状态下，博落回提取物中的血根碱不稳定造成的损失。
在一个优选的实施方案中，所述中药组合物在使用时用水或生理盐水制备成灌注剂，所述灌注剂的ph为5.5～7.0。
本发明第二方面提供一种治疗母畜子宫内膜炎的中药组合物的制备方法，包括以下步骤：
s1、取博落回果荚60～90份，用稀酸溶液渗漉提取，然后加入碱液后过滤得到沉淀a，将沉淀a进行干燥处理后，用醇溶液提取然后加入酸溶液得到沉淀b，将沉淀b干燥后即得博落回提取物；
s2、取益母草10～40份，用水提取后将水提液进行浓缩处理，加入醇溶液沉淀后，回收醇液后干燥即得益母草提取物；
s3、将步骤s1制备的博落回提取物和步骤s2制备的益母草提取物合并，加入ph调节剂和助溶剂后，灭菌处理即得；
所述博落回提取物中的血根碱的质量百分比含量不得低于40％，所述益母草提取物中的盐酸水苏碱的质量百分比含量不得低于3％。
在一个优选的实施方案中，所述稀酸溶液为稀硫酸，所述碱液为氢氧化钠溶液，所述醇溶液为乙醇溶液。
在一个优选的实施方案中，所述中药组合物在使用时用水或生理盐水制备成灌注剂，所述灌注剂的ph为5.5～7.0。
本发明第三方面提供一种治疗母畜子宫内膜炎的中药组合物在制备治疗母畜子宫内膜炎的药物中的应用。
博落回：味辛苦，性温，可以祛风解毒，散瘀消肿，杀虫。主要含有血根碱、白屈菜红碱、原阿片碱和别隐品碱等生物碱，现代药理研究表明有抗菌、杀虫、杀咀、改善肝功能、增强免疫力及抗肿瘤等作用。
益母草：味辛苦，性寒，可以活血祛瘀，调经消水。主要含有水苏碱、益母草碱等生物碱，现代药理研究表明有抗血小板聚集、降低血液黏度、肾脏保护、调经止血、抗炎镇痛以及免疫调节等方面药理作用；特别是对子宫作用活性较强，能增加子宫运动的频率，促进子宫收缩。
本发明的有益效果如下：
(1)本发明提供一种治疗母畜子宫内膜炎的中药组合物，采用博落回和益母草进行配伍应用，以博落回为君药，益母草为臣药，分别利用博落回提取物和益母草提取物作为活性成分，其中博落回提取物中的血根碱的质量百分比含量不得低于40％，二组合使用发挥组合物清热解毒，活血化瘀的作用来治疗母畜的子宫内膜炎。
(2)本发明中利用博落回果荚制备博落回提取物，利用稀酸溶液加热提取，然后加入碱液后过滤得到沉淀，将沉淀进行干燥后，用醇溶液提取然后加入酸溶液得到沉淀的方法得到博落回提取物中血根碱的含量在40％以上，提取率较高。所得产品制备成固态混合物，避免了血根碱在ph值为5.5～7.0的水溶液中不稳定，在放置1-3个月后基本上只剩下10％～20％的问题，保持了有效成份的稳定。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
此外，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。在本发明的描述中，“多个”的含义是两个或两个以上，除非另有明确具体的限定。
在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示意性实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本公开的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。
一、治疗母畜子宫内膜炎的中药组合物的制备
实施例1
(1)取博落回果荚6kg，用0.5％硫酸渗漉提取，然后用碱液调溶液为ph值约为10沉淀，过滤后得到沉淀，沉淀进行干燥处理后，用90％乙醇溶解后加硫酸溶液沉淀，滤过，沉淀干燥后即博落回提取物113.4g，液相测得血根碱百分含量为40.9％。
(2)取益母草药材4kg，10倍水提取2次，合并水提液浓缩至约1.10g/cm3，加入等量95％乙醇进行醇沉，回收醇液干燥即得益母草提取物365.8g，液相测得盐酸水苏碱为3.2％。
(3)合并博落回提取物和益母草提取物，加入柠檬酸钠110g，羧甲基纤维素钠33g，混合包装，灭菌即得。
实施例2
(1)取博落回果荚7.5kg，用0.5％硫酸渗漉提取，然后用碱液调溶液为ph值约为10沉淀，过滤后得到沉淀，沉淀进行干燥处理后，用90％乙醇溶解后加硫酸溶液沉淀，滤过，沉淀干燥后即博落回提取物141.2g，液相测得血根碱百分含量为41.2％。
(2)取益母草药材2.5kg，10倍水提取2次，合并水提液浓缩至约1.10g/cm3，加入等量95％乙醇进行醇沉，回收醇液干燥即得益母草提取物230.8g，液相测得盐酸水苏碱为3.4％。
(3)合并博落回提取物和益母草提取物，加入柠檬酸钠142g，羧甲基纤维素钠33g，混合包装，灭菌即得。
实施例3
(1)取博落回果荚9kg，用0.5％硫酸渗漉提取，然后用碱液调溶液为ph值约为10沉淀，过滤后得到沉淀，沉淀进行干燥处理后，用90％乙醇溶解后加硫酸溶液沉淀，滤过，沉淀干燥后即博落回提取物167.4g，液相测得血根碱百分含量为42.8％。
(2)取益母草药材1kg，10倍水提取2次，合并水提液浓缩至约1.10g/cm3，加入等量95％乙醇进行醇沉，回收醇液干燥即得益母草提取物92.5g，液相测得盐酸水苏碱为3.1％。
(3)合并博落回提取物和益母草提取物，加入柠檬酸钠168g，羧甲基纤维素钠33g，混合包装，灭菌即得。
三、治疗效果检测
(一)脂多糖诱导的小鼠子宫内膜炎的治疗实验
将40只昆明系雌性小鼠随机分为空白对照组(健康小鼠)、阳性组(造模不给药组)及治疗组(应用实施例1-3制备的组合物)共计5组，其中博落回益母草子宫注入剂配成0.3g(以总药材计)/1ml水的溶液。小鼠麻醉后子宫注射脂多糖溶液(5mg/ml)20ul，其中空白对照组(健康小鼠)注射20ul生理盐水。24小时后，各组小鼠子宫先用生理盐水冲洗，然后空白组和阳性组子宫内注射20ul生理盐水，治疗组注射20ul博落回益母草子宫注入剂。子宫注射治疗24小时后处死小鼠，解剖分离子宫组织，切取部分组织置于中性甲醛溶液固定，按常规方法脱水、透明、包埋，制备4um石蜡切片，苏木精-伊红(he)染色观察子宫组织的病理变化，并评分。评分标准：(1)水肿：正常为0分；轻微为1分；适中为2分；严重为3分。(2)炎性细胞浸润：0～1为0分；2～5为1分；6～10为2分；11～15为3分；16～20为4分；>20为5分。实验数据及结果如下表1所示：
表1
由表1可知，与阳性对照组相比，实施例1-3制备的组合物制备的子宫注入剂可有效降低子宫内膜炎母鼠子宫的水肿和炎症水平。
(二)母猪子宫内膜炎的治疗
(1)病例的挑选要求：阴门下方常常流出黄色或者白色有腥臭味的分泌物，或者发现阴门附近有污秽结有脓痂；进而用开膣器进行阴道检查，子宫口和阴道是否红肿充血及有炎性分泌物流出而入选。
(2)在母猪场挑选40头患有子宫内膜炎的随机分为4组，每组10头，取实施例2制备的中药组合物，分别稀释为0.1g(以总药材计)/1ml药液组，0.3g(以总药材计)/1ml溶液组和0.5g(以总药材计)/1ml溶液组，以及土霉素组(0.3g/1ml)阳性组。
(3)每头母猪每次用20ml药液子宫灌注，连用3天，第5天观察并记录结果，阴门还流出明显异味分泌物为无效；阴门不流出或基本不流出异味分泌物，但是子宫口和阴道还有明显红肿充血现象为好转；阴门外无异味分泌物且子宫口和阴道恢复正常为治愈，情况如下表2所示：
表2
由表2根据实验数据可知，配置成0.3g(以总药材计)/1ml和0.5g(以总药材计)/1ml的博落回益母草子宫注入剂，对母猪子宫内膜炎的治疗效果与土霉素效果相当，0.1g(以总药材计)/1ml的略差于土霉素效果。
(三)奶牛子宫内膜炎的治疗
(1)病例的挑选要求：阴门下方常常流出黄色或者白色有腥臭味的分泌物，或者发现阴门附近有污秽结有脓痂；进而用开膣器进行阴道检查，子宫口和阴道是否红肿充血及有炎性分泌物流出而入选。
(2)在奶牛场挑选40头患有子宫内膜炎的随机分为2组，每组20头，取实施例2制备的中药组合物，稀释为0.3g(以总药材计)/1ml溶液组和土霉素组(0.3g/1ml)阳性组。
(3)每头奶猪每次用30ml药液子宫灌注，连用3天，第5天观察并记录结果，阴门还流出明显异味分泌物为无效；阴门不流出或基本不流出异味分泌物，但是子宫口和阴道还有明显红肿充血现象为好转；阴门外无异味分泌物且子宫口和阴道恢复正常为治愈，情况如表3所示：
表3
由表3实验数据可知配置成0.3g(以总药材计)/1ml的博落回益母草子宫注入剂对奶牛子宫内膜炎的治疗效果略好于土霉素。
以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只限于这些说明。对于本发明所属领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明的保护范围。