专利名称:带有次苯基的斯伯格埃林有关化合物及其制备方法
本发明涉及新型的有关斯伯格埃林化合物及其制备方法。本发明特别涉及具有式(Ⅰ)的关于斯伯格埃林化合物及其盐类和含次苯基的式(Ⅰ)的有关斯伯格埃林化合物及其盐类的制备方法。结构式(Ⅰ)如下
式中R1是可以被羟甲基取代的低级烷撑;X为氢原子或卤原子;m与n各为0或1～5的整数。该方法的特点是从受保护的斯伯格埃林(Spergualin)有关化合物(Ⅱ)中去除保护基团。
式中R′1是可以被羟甲基取代的低级烷撑，其中的羟基可以被保护;R2是氨基保护基;R3是被保护的氨基;X、m和n与上述定义相同。
斯伯格埃林(Spergualin)是本发明的发明者之一Umezawa及其同事从能产生斯伯格埃林(Spergualin)的芽胞杆菌属细菌培养滤液中分离出来的一个化合物。斯伯格埃林(Spergualin)具有下列结构式
斯伯格埃林(Spergualin)能抑制革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌的生长。对小白鼠白血病L1210、白血病EL-4和Ehrlich癌、肉瘤180的治疗试验证明，它具有明显的抗肿瘤作用。因此斯伯格埃林(Spergualin)解认为是一种有希望的抗肿瘤药物(见Japanese Patent Kokai No.48957/1982)。
Umezawa等还发现斯伯格埃林(Spergualin)衍生物，如在15位上酰化的化合物，也具有类似的作用(Japanese pateut Kokai No.185254/1982和62152/1983)。
但是，斯伯格埃林(Spergualin)及其已知的衍生物在水中是不稳定的。
为寻找在水溶液中稳定并且保持高效的斯伯格埃林(Spergualin)有关化合物，发明人进行了各种研究。结果发现了通式(Ⅰ)化合物，它们具有较好的稳定性和生物活性，从而取得本发明的成就。
在毒性试验中，大白鼠体重下降的速率和服用本发明化合物天数之间的相互关系。
发明的化合物具有很好的抗肿瘤作用，毒性较低，并且在水溶液中很稳定。在水溶液中稳定对于制成水剂，如注射液，是十分重要的。因此，该类化合物被认为是有希望的抗肿瘤药物。
本发明的斯伯格埃林(Spergualin)有关化合物(Ⅰ)详述如下R1是可以被羟甲基取代的低级烷撑，如甲撑、乙撑、甲代乙撑、羟甲基甲撑、1-羟甲基乙撑、2-羟甲基乙撑、1，2-二(羟甲基)乙撑、1-羟甲基甲代乙撑、2-羟甲基甲代乙撑，3-羟甲基甲代乙撑、1，2-二(羟甲基)甲代乙撑。1，3-二(羟甲基)甲代乙撑、2，3-二(羟甲基)甲代乙撑和1，2，3-三(羟甲基)甲代乙撑;X为氢原子或卤原子(如氯、溴、氟或碘);m或n各为0或1～5的整数;通式(Ⅰ)中二个甲撑基可以处在苯环的邻、间或对位。
斯伯格埃林(Spergualin)有关化合物(Ⅰ)列举如下，此处GP、GMP、GPro和TAD分别为“guanidinophenyl”(胍基苯基)、“guanidinomethylphenyl”(胍基甲基苯基)、“guanidinopropyl”(三氮癸烷)的缩写。
10-｛N-〔4-(3-胍基苯基)丁酰基〕甘氨基〕｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(3-胍基苯基)丁酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氧癸烷10-｛N-〔4-(4-胍基苯基)丁酰基〕甘氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(4-胍基苯基)丁酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(4-胍基苯基)丁酰基〕-β-丙氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(4-胍基苯基)丁酰基〕-γ-氨基丁酰｝-1，5，10-三氮癸烷
10-｛N-〔4-(2-氯-4-胍基苯基)丁酰基〕甘氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(2-氯-4-胍基苯基)丁酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(2-氯-4-胍基苯基)丁酰基〕-β-丙氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(2-氯-4-胍基苯基)丁酰基〕-γ-氨基丁酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(3-氯-4-胍基苯基)丁酰基〕甘氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(3-氯-4-胍基苯基)丁酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(3-氯-4-胍基苯基)丁酰基〕-β-丙氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(3-氯-4-胍基苯基)丁酰基〕-γ-氨基丁酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔3-(2-氟-4-胍基苯基)丁酰基〕甘氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(2-氟-4-胍基苯基)丁酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(3-氟-4-胍基苯基)丁酰基〕甘氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(3-氟-4-胍基苯基)丁酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔5-(3-胍基苯基)戊酰基〕甘氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷
10-｛N-〔5-(3-胍基苯基)戊酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔5-(4-胍基苯基)戊酰基〕甘氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔5-(4-胍基苯基)戊酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔5-(2-氯-4-胍基苯基)戊酰基〕甘氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔5-(2-氯-4-胍基苯基)戊酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔5-(3-氯-4-胍基苯基)戊酰基〕甘氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔5-(3-氯-4-胍基苯基)戊酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔6-(4-胍基苯基)己酰基〕甘氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔6-(4-胍基苯基)己酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔6-(2-氯-4-胍基苯基)己酰基〕甘氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔6-(2-氯-4-胍基苯基)己酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔6-(3-氯-4-胍基苯基)己酰基〕甘氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔6-(3-氯-4-胍基苯基)己酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷
10-｛N-〔3-(3-胍基甲基苯基)丙酰基〕甘氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔3-(3-胍基甲基苯基)丙酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔3-(4-胍基甲基苯基)丙酰基〕甘氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔3-(4-胍基甲基苯基)丙酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔3-(2-氯-4-胍基甲基苯基)丙酰基〕甘氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔3-(2-氯-4-胍基甲基苯基)丙酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔3-(3-氯-4-胍基甲基苯基)丙酰基〕甘氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔3-(3-氯-4-胍基甲基苯基)丙酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(4-胍基甲基苯基)丁酰基〕甘氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(4-胍基甲基苯基)丁酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(2-氯-4-胍基甲基苯基)丁酰基〕甘氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(2-氯-4-胍基甲基苯基)丁酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(3-氯-4-胍基甲基苯基)丁酰基〕甘氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷
10-｛N-〔4-(3-氯-4-胍基甲基苯基)丁酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔5-(2-胍基甲基苯基)戊酰基〕甘氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔5-(2-胍基甲基苯基)戊酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔5-(5-胍基甲基苯基)戊酰基〕甘氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔5-(4-胍基甲基苯基)戊酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔5-(2-氯-4-胍基甲基苯基)戊酰基〕甘氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔5-(2-氯-4-胍基甲基苯基)戊酰基-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔5-(3-氯-4-胍基甲基苯基)戊酰基〕甘氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔5-(3-氯-4-胍基甲基苯基)戊酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔3-胍基丙基〕苯甲酰基〕甘氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔3-(3-胍基丙基)苯甲酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(3-胍基丙基)苯甲酰基〕甘氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(3-胍基丙基)苯甲酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷
10-｛N-〔2-氯-4-(3-胍基丙基)苯甲酰基〕甘氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔2-氯-4-(3-胍基丙基)苯甲酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔3-氯-4-(3-胍基丙基)苯甲酰基〕甘氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔3-氯-4-(3-胍基丙基)苯甲基酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔3-(4-(3-胍基丙基)苯基)丙酰基〕甘氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔3-(4-(3-胍基丙基)苯基)丙酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔3-(2-氯-4-(3-胍基丙基)苯基)丙酰基〕甘氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔3-(2-氯-4-(3-胍基丙基)苯基)丙酰基〕-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔3-(3-氯-4-(3-胍基丙基)苯基)丙酰基〕甘氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔3-(3-氯-4-(3-胍基丙基)苯基)丙酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷斯伯格埃林(Spergualin)有关化合物(Ⅰ)和酸形成盐。成盐的酸可以是无机或有机酸，但应无毒。任何无毒的无机酸均可，但通常用盐酸、硫酸、硝酸和磷酸。对成盐的有机酸也没有任何特殊的限制，通常用醋酸、丙酸、丁二酸、延胡索酸、马来酸、苹果酸、酒石酸、戊二酸、柠檬酸、苯磺酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙磺酸、丙磺酸，天冬氨酸和谷氨酸。
斯伯格埃林(Spergualin)有关化合物(Ⅰ)可以用已知方法从受保护的斯伯格埃林(Spergualin)有关化合物(Ⅱ)去除保护基因而制得。
原料化合物结构式(Ⅱ)中的符号X、m和n的定义同结构式(Ⅰ)。符号R′1是可以被羟甲基取代的基因，如需要的话，该羟基可以用一般保护基保护。应用已知保护基的实例见“Protein Chemistry IAmino acids.Peptides，”ed.by Shiro Akabori，Takeo Kancko and Kozo Narita，Kyoritsu Shuppan，1969;“Peptide Synthe-sis”，ed.by Nobuo Izumiya，Maruzen，1975，E.Schroder and K.Lubke;“The Peptides”，Academicpress，New York 1965;E.Wusch;“Methoden der Organischem chemie(Houben.Weyl)，Syntheses von Peptiden”，Georg Thime Verlag Stuttgart，1974，M.Bodanszky and M.A.Ondetti;“Peptide Synthe-sis”，Interscience Publishers，New York，1976。
R2和R3上的氨基保护基可以采用任何已知的氨基保护基(见上述参考文献)。R2和R3上的氨基保护基不一定要相同，可以用不同的基团适当配合。但是，为了便于制备，这两个基团最好相同。氨基或羟基的保护基有(1)任意取代的C1～C5的酰基，(2)苯基单或双羰基，如苯甲酰基或邻苯二甲酰基，(3)任意取代的C1～C5的烷氧羰基，(4)任意取代的C1～C5的烷基，(5)任意取代的苯硫基或C1～C3的烷硫基，和(6)任意取代的苯磺酰基。烷基或烷基上的取代基有卤原子、硝基、取代或未经取代的苯基。在苯基上的取代基有卤原子、硝基、C1～C3的烷氧基、C1～C3烷基、任意取代的苯偶氮基。羟基保护基是(1)苄基，(2)苄氧羰基，(3)乙酰基，(4)特丁基，(5)三苯甲基，(6)2-吡喃基，或(7)对-甲苯磺酰基。R2和R3的氨基保护基是(1)甲酰基或三氟乙酰基，(2)苯甲酰基或邻苯二甲酰基，(3)(a)特丁氧羰基，1-甲基乙氧羰基或1-乙基丙氧羰基，(b)未经取代的苄氧羰基或被下列基团取代的苄氧羰基甲氧基、卤原子、硝基、苯偶氮基或被甲基取代的苯偶氮基，(4)苄基或三苯甲基，(5)邻-硝基苯硫基，(6)三苯甲硫基，或(7)对-甲苯磺酰基。
从被保护的斯伯格埃林(Spergualin)有关化合物(Ⅱ)中去除保护基的方法，随所有保护基的类型而不同。但可以使用任何一个已知的去除保护基的方法(见上述参考文献)。
保护基可以在不超过所用溶剂的沸点的温度下去除，其温度随保护基或溶剂的类型而不同。温度范围通常是-50～150℃，最好在-40～120℃。可以用无机或有机溶剂，无机溶剂有水、液态氨和液态氟化氢;有机溶剂有极性溶剂(如C1～C4醇类、醋酸、二甲基甲酰胺和二氧六环)和醋酸低级烷基酯类。如需要，上述溶剂还可混合使用。
根据被去除的保护基类型，可以从还原(如催化还原或用碱金属和氨还原)、水解、酸分解和肼分解反应中，选择合适的去除保护基的方法。常用的保护基及其去除方法见表1。
表1中，符号“+”表示保护基可以用标有符号“+”的方法去除，符号“-”表示某保护基不能用标有符号“-”的方法去除，“±”表示某保护基可部分去除或分解，标有符号“±”的方法，不适用于去除该保护基。
可用于本发明的保护基不限于表1所示，上述所引关于肽化学的参考文献中，所载的任一保护基团都可采用。
从已经不含保护基的反应混合物中分离斯伯格埃林(Spergualin)有关化合物(Ⅰ)的方法，随去除保护基方法的不同而异。如果用钯黑催化还原去除保护基，则产品可用下述方法分离。滤去催化剂，滤液在减压下浓缩，用CM-Cephadex
(Na+)和Sephadex
LH-20纯化残留物(见T.Takeuchi et al.，J.Antibiotics，34，1619(1981))。如果用三氟醋酸去除保护基，则分离方法为反应混合物在减压下浓缩，并用上述已知方法纯化残留物。
应用上述纯化方法，可以得到斯伯格埃林(Spergualin)有关化合物(Ⅰ)的盐酸盐。如希望得到其他盐类，可以应用下述方法将该盐酸盐溶于水中，使其通过强碱性离子交换树脂，合并含有产品的部分。同时将相应的酸溶于水或亲水性有机溶剂(如甲醇、乙醇、丙酮、四氢呋喃或二氧六环)，进行中和。中和液在减压下蒸发至干。残留的有机溶剂在减压下蒸出，残留物冷冻干燥。也可用氢氧化银或氧化银水溶液中和化合物(Ⅰ)盐酸盐中的盐中的盐酸，滤去不溶的氯化银，加入相应的酸，制成新的盐类，然后冷冻干燥。
受保护的斯伯格埃林(Spergualin)有关化合物(Ⅰ)的典型例子如下，此处biz和diaoc分别是“dibenzyloxycarbonyl”(二苄氧羰基)和“di-tertbutyloxycarbonyl”(二-特丁氧羰基)的缩写。
10-｛N-〔4-(3-胍基苯基)丁酰基〕甘氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(3-胍基苯基)丁酰基〕甘氨酰｝-1，5-二-特丁氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(3-胍基苯基)丁酰基〕-氧苄基-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(3-胍基苯基)丁酰基〕-氧-特丁基-L-丝氨酰｝-1，5-二-特丁氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(4-胍基苯基)丁酰基〕甘氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(4-胍基苯基)丁酰基〕甘氨酰｝-1，5-二-特丁氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(4-胍基苯基)丁酰基〕-氧苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(4-胍基苄基)丁酰基〕-氧特丁基-L-丝氨酰｝-1，5-二-特丁氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(4-胍基苯基)丁酰基〕-β-丙氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(4-胍基苯基)丁酰基〕-γ-氨基丁酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(2-氯-4-胍基苯基)丁酰基〕甘氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(2-氯-4-胍基苯基)丁酰基)〕-氧苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(2-氯-4-胍基苯基)丁酰基〕-γ-氨基丁酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(3-氯-4-胍基苯基)丁酰基〕甘氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(3-氯-4-胍基苯基)丁酰基〕-氧苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(3-氯-4-胍基苯基)丁酰基〕-β-丙氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(2-氟-4-胍基苯基)丁酰基〕甘氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(2-氟-胍基苯基)丁酰基〕氧苄基-L-丝氨酰｝-1，5，-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(3-氟-4-胍基苯基)丁酰基〕甘氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(3-氟-4-胍基苯基)丁酰基〕-氧苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔5-(4-胍基苯基)戊酰基〕-氧苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔5-(2-氯-4-胍基苯基)戊酰基〕甘氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔5-(3-氯-4-胍基苯基)戊酰基〕甘氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔5-(3-氯-4-胍基苯基)戊酰基〕-氧苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔6-(4-胍基苯基)己酰基〕甘氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔6-(4-胍基苯基)己酰基〕-氧苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔6-(3-氯-4-胍基苯基)己酰基〕-氧苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔3-(3-胍基甲基苯基)丙酰基〕-氧苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔3-(4-胍基甲基苯基)丙酰基〕-氧苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔3-(2-氯-4-胍基甲基苯基)丙酰基〕甘氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔3-(2-氯-4-胍基甲基苯基)丙酰基〕-氧苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔3-(3-氯-4-胍基甲基苯基)丙酰基〕甘氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔3-(3-氯-4-胍基甲基苯基)丙酰基〕-氧苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(4-胍基甲基苯基)丁酰基〕甘氨酰｝-1，5.-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(4-胍基甲基苯基)丁酰基〕-氧苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(3-氯-4-胍基甲基苯基)丁酰基〕-氧苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔5-(2-胍基甲基苯基)戊酰基〕-氧苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔5-(4-胍基甲基苯基)戊酰基〕甘氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔5-(2-氯-4-胍基甲基苯基)戊酰基〕甘氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔5-(2-氯-4-胍基甲基苯基)戊酰基〕-氧苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔3-(3-胍基丙基)苯甲酰基〕甘氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔3-(3-胍基丙基〕苯甲酰基〕甘氨酰｝-氧苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(3-胍基丙基)苯甲酰基〕甘氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔4-(3-胍基丙基)苯甲酰基〕-氧苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔2-氯-4-(3-胍基丙基)苯甲酰基〕甘氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔2-氯-4-(3-胍基丙基)苯甲酰基〕-氧苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔3-(4-(3-胍基丙基)苯基)丙酰基〕甘氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔3-(4-(3-胍基丙基)苯基)丙酰基〕-氧苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔3-(2-氯-4-(3-胍基丙基)苯基)丙酰基〕甘氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔3-(2-氯-4-(3-胍基丙基)苯基)丙酰基〕-氧苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔3-(3-氯-4-(3-胍基丙基)苯基)丙酰基〕甘氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-｛N-〔3-(3-氯-4-(3-胍基丙基)苯基)丙酰基〕-氧苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷制备本发明最终产品的原料-新的受保护的斯伯格埃林(Sper-gualin)有关化合物(Ⅱ)可用下法制得。1，5-双保护的-1，5，10-三氮癸烷(Ⅳ)结构式如下
式中R2和R3与上述定义相同。(Ⅳ)与N-受保护的α，β或γ氨基酸衍生物(Ⅴ)进行反应式中R5代表氨基保护基，它不同于R2和R3上的氨基保护基;R6是可以被羟甲基取代的α、β或γ氨烷基，而羟基可以任意地受保护，结果得到10-(N-受保护的氨酰基)-1，5-双保护的-1，5，10-三氮癸烷(Ⅵ)。
式中R2、R3、R5和R6与上述定义相同。从(Ⅵ)中去除保护基R5，即得10-氨酰基-1，5-双保护的-1，5，10-三氮癸烷(Ⅶ)。
式中R′1、R2和R3与上述定义相同。(Ⅶ)进一步和带次苯基的ω-胍基羧酸衍生物(A)进行缩合反应，得到受保护的斯伯格埃林(Sper-gualin)有关化合物(Ⅱ)。
式中m、n和X与上述定义相同。
化合物(Ⅶ)和(A)可以用形成肽键通用的方法进行缩合。例如酰氯法、碳化二亚胺法(用二环己基碳化二亚胺或1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳化二亚胺)、迭氮化物法(用酰肼)、混合酸酐法(用氯代甲酸乙酯或氯代甲酸异丁醋)、活性酯法(用氰甲基酯、乙烯基酯、取代或未取代的苯基酯、苯硫基酯、或N-羟基琥珀酰亚胺酯)、氧酰基羟胺衍生物法(用丙酮肟或环己酮肟)和N-酰基化合物法(用羰基二咪唑)。缩合反应所用的溶剂可以从形成肽键常用的溶剂中选择，例如醚类(乙醚、四氢呋喃和二氧六环)、酮类(丙酮和甲基乙基酮)卤代烃类(二氯甲烷和氯仿)、酰胺类(二甲基甲酰胺和二甲基乙酰胺)和腈类(乙腈)。ω-胍基羧酸(A)举例如下4-(3或4-胍基苯基)丁酸，4-(2或3-氯-4-胍基苯基)丁酸，4-(2或3-氟-4-胍基苯基)丁酸，5-(3或4-胍基苯基)戊酸，5-(2-或3-氯-4-胍基苯基)戊酸，5-(2或3-氯-4-胍基苯基)戊酸，6-(2或3-氯或氟-4-胍基苯基)己酸，3-(3或4-胍基甲基苯基)丙酸，3-(2或3-氯或氟-4-胍基甲基苯基)-丙酸，4-(3或4-胍基甲基苯基)丁酸，4-(2或3-氯或氟-4-胍基甲基苯基)丁酸，5-(2，3或4-胍基甲基苯基)戊酸，5-(2或3-氯或氟-4-胍基甲基苯基)戊酸，3或4-(3-胍基丙基)苯甲酸，2或3-氯或氟-(3-胍基丙基)苯甲酸，3-〔3或4-(3-胍基丙基)苯基〕丙酸和3-〔2或3-氯或氟-4-(3-胍基丙基)苯基〕丙酸。通过ω-氨基酸(B)和常用的形成胍基的试剂反应，使氨基转为胍基，从而得到ω-胍基羧酸(A)。
式中R7是氢原子或低级烷基，m、n和X与上述定义相同。如果(B)式中R7为低级烷基，则缩合产品再经水解。(B)式中某些ω-氨基酸也是新的化合物，它们由不同的原料用已知的方法合成。
原料化合物(Ⅶ)列举如下10-甘氨酰-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-甘氨酰-1，5-二-特丁氧基-1，5，10-三氮癸烷10-氧苄基-L-丝氨酰-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-特丁基-L-丝氨酰-1，5-二-特丁氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-β-丙氨酰-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-β-丙氨酰-1，5-二-特丁氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-γ-氨基丁酰基-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷10-γ-氨基丁酰基-1，5-二-特丁氧羰基-1，5，10-三氮癸烷化合物(Ⅷ)及其无毒盐为通式(Ⅰ)的首选化合物。
式中R8是氢原子或羟甲基。
从受保护的斯伯格埃林(Spergualin)有关化合物(Ⅸ)中去除保护基团，得到化合物(Ⅷ)。
式中R′8是氢原子或受保护的羟甲基，R2是氨基保护基，R3是受保护的氨基。
下面通过实例详细介绍本发明，实例中薄层层析(TLC)Rf值的测定方法如下硅胶60F254板(厚度为0.25毫米，由Merck & Co.生产)用列举的溶剂系统展开约8厘米，原点到化合物斑点中心的距离，除以原点到溶剂前沿的距离，得Rf值b用紫外光(2537 )或三酮或Sakaguchi试剂显色测定斑点的位置。
实例110-｛N-〔4-〔4-胍基苯基)丁酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷三盐酸盐(化合物1)406克(4.89mmol)10-｛N-〔4-(4-胍基苯基)丁酰基〕-氧苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷盐酸盐淡黄色油状物溶于50毫升甲醇和30毫升醋酸的混合溶剂。加入0.4克钯黑，将溶液于55℃加热，在常压下催化还原6小时。反应后滤出催化剂，滤液减压浓缩，得280克油状物。将油状物溶于25毫升混合溶剂(60份甲醇和40份0.3摩尔浓度的氯化钠水溶液)，并通过装有350毫升CM-Sephadex
C-25(Na+)的柱子(预先用相同溶剂平衡)。
用2000毫升由60份甲醇和40份0.3摩尔浓度氯化钠水溶液组成的混合液及2000毫升由60份甲醇和40份1.0摩尔浓度氯化钠水溶液组成的混合液进行梯度洗提，合并含有产品的洗提液，减压浓缩至干。加入甲醇，将不溶的氯化钠滤去，用下述方法从油状物中纯化产品。为除去混杂在产品中的少量氯化钠，将油状产品溶于5毫升甲醇，并通过装有100毫升Sephadex
LH-20的柱子。用甲醇洗提，合并含有产品的洗提液，减压浓缩。油状物再溶于5毫升蒸馏水，并通过装有80毫升HP-20
(Mitsubishi Chemical Indu-stries，Ltd.)的柱子，以进一步除去少量杂质。柱子用蒸馏水洗提，合并含有产品的洗提液，减压浓缩，得到的油状产品溶于5毫升蒸馏水，滤去不溶部分。滤液冷冻干燥，得产品1.17克(产率44.0%)。
核磁共振(NMR)(DMSO-d6)化学位移δ＝1.1～2.5(b，12H)，2.5～3.4(b，8H)，3.4～3.8(bd，3H)，4.0～4.5(b，1H)，
6.8～7.7(m，8H)，7.7～8.8(b，5H)，8.8～9.7(b，2H)，10.13(bs，1H)。
红外(IR)(KBr)频率ν(厘米-1)＝3290，2940，2320，1635，1510，1450。
薄层层析(TLC)(正-丙醇∶吡啶∶水∶醋酸＝6∶4∶3∶2v/v)。
比移值Rf＝0.34〔a〕19.5D-13.8°(C＝1.17，H2O)在本例中，可用10-｛N-〔4-(4-胍基苯基)丁酰基〕-氧-特丁基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷盐酸盐代替10-｛N-〔4-(4-胍基苯基)丁酰基〕-氧-苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷。
10-｛N-〔4-(4-胍基苯基)丁酰基〕-氧-特丁基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷盐酸盐用三氟乙酸处理，然后还原、纯化(同实例1的方法)，可得化合物1。
在本例中，可用10-｛N-〔4-(4-胍基苯基)丁酰基〕-氧-乙酰基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷盐酸盐代替10-｛N-〔4-(4-胍基苯基)丁酰基〕-氧-苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷盐酸盐。
10-｛N-〔4-(4-胍基苯基)丁酰基〕-氧-乙酰基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷盐酸盐用1～2当量浓度氢氧化钠水溶液处理，然后还原、纯化(同实例1的方法，可得化合物1。
实例210-｛N-〔4-(4-胍基苯基)丁酰基〕甘氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷三盐酸盐(化合物2)3.30克(4.90mmol)10-｛N-〔4-(4-胍基苯基)丁酰基〕-甘氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷淡黄色油状物溶于40毫升醋酸。加入0.3克钯黑，于50℃加热，在常压下催化还原10小时。反应后滤出催化剂，滤液减压浓缩，得2.10克油状物。将油状物溶于10毫升蒸馏水，并通过装有220毫升CM-Sephadex
C-25(Na+)的柱子。用1100毫升蒸馏水和1100毫升1.0摩尔浓度氯化钠水溶液进行梯度洗提，合并含有产品的洗提液，减压浓缩至干。向干燥的固体产品中加入甲醇，将不溶的氯化钠滤去。
产品按实例1类似的方法纯化，得产品0.89克(产率35.3%)。
核磁共振(NMR)(DMSO-d6)化学位移δ＝1.1～2.5(b，12H)，2.5～3.3(b，8H)，3.5～3.9(bd，2H)，6.9～7.7(m，8H)，7.7～8.3(b，3H)，8.3～10.0(b，5H)。
红外(IR)(KBr)频率ν(厘米-1)＝3290 2940 2320 16401540 1455薄层层析(TLC)(正丙醇∶吡啶∶水∶醋酸＝6∶4∶3∶2v/v)。
比移值Rf＝0.26实例310-｛N-3-(4-胍基甲基苯基)丙酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷三盐酸盐(化合物3)2.60克(3.27mmol)10-｛N-〔3-(4-胍基甲基苯基)丙酰基〕-氧-苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷淡黄色油状物溶于40毫升甲醇和30毫升醋酸的混合液。加入0.20克钯黑，于55℃加热，在常压下催化还原5小时。反应后滤去催化剂，滤液减压浓缩，得1.8克油状物。将油状物溶于10毫升蒸馏水，并通过装有220毫升CM-Sephadex
C-25(Na+)的柱子。用1100毫升蒸馏水和1100毫升摩尔浓度的氯化钠水溶液进行梯度洗提，合并含有产品的洗提液，减压浓缩至干。向干燥固体产品中加入甲醇，将不溶的氯化钠滚去。
按实例1的方法进行纯化，得产品0.84克(产率47.2%)。
核磁共振(NMR)(DMSO-d6)化学位移δ＝1.1～2.4(b，6H)，2.4～3.4(b，12H)，3.4～3.9(bd，3H)，4.0～4.6(bd，3H)，6.8～7.7(b，4H)，7.2(S，4H)7.7～8.7(b，6H)，8.7～9.7(b，2H)。
红外(IR)(KBr)频率ν(厘米-1)＝3310 2940 2320 16401535 1450薄层层析(TLC)(正-丙醇∶吡啶∶水∶醋酸＝6∶4∶3∶2V/V)比移值Rf＝0.25〔a〕19.5D-24.8°(C＝1.0，H2O)。
实例410-｛N-〔4-(3-胍基丙基)苯甲酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷三盐酸盐(化合物4)2.00克(2.52mmol)10-｛N-〔4-(3-胍基丙基)苯甲酰基〕-氧苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷油状物溶于4毫升甲醇和20毫升醋酸的混合液。加入0.3克钯黑，于50℃加热，在常压下催化还原61时。反应后滤去催化剂，滤液减压浓缩，得2.60克油状物。将油状物溶于10毫升蒸馏水，并通过装有300毫升CM-Sephadex
C-25(Na+)的柱子。用1100毫升蒸馏水和1100毫升1.3摩尔浓度氯化钠水溶液进行梯度洗提，合并含有产品的洗提液，减压浓缩至干。加入甲醇，将不溶的氯化钠滤去。所得产品按实例1类似的方法纯化，得产品0.642克(产率49.9%)。
核磁共振(NMR)(DMSO-d6)化学位移δ＝1.2～2.4(b，8H)，2.6～3.4(b，12H)，3.4～4.2(bd，3H)，4.2～4.7(b，1H)，7.1～7.5(b，4H)，7.33(d，2H，偶合常数J＝8Hz)，7.7～8.8(b，6H)，7.90(d，2H，偶合常数J＝8Hz)，8.8～9.7(b，2H)。
红外(IR)(KBr)频率ν(厘米-1)＝3300，3150，2950，1640，1535，1500，1460，1290，1060。
薄层层析(TLC)(正-丙醇∶吡啶∶水∶醋酸＝6∶4∶3∶2V/V)比移值Rf＝0.31〔a〕19.5D+24.4°(C＝0.97，H2O)。
实例510-｛N-〔3-(3-胍基甲基苯基)丙酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷三盐酸盐(化合物5)1.61克(2.03mmol)10-｛N-〔3-(3-胍基甲基苯基)丙酰基〕-氧-苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷淡黄色油状物按实例3处理，得产品0.54克产率4.82%。
核磁共振(NMR)(DMSO-d6)
化学位移δ＝1.1～2.3(b，6H)，2.3～3.4(b，12H)，3.4～3.8(bd，3H)，4.0～4.6(bd，3H)，6.8～7.8(m，8H)，7.8～8.8(b，6H)，8.8～9.7(b，2H)。
红外(IR)(KBr)频率ν(厘米-1)＝3240，2320，1630，1530，1450。
薄层层析(TLC)(正-丙醇∶吡啶∶水∶醋酸＝6∶4∶3∶2V/V)。
比移值Rf＝0.30〔a〕19.5D-22.0°(C＝1.0，H2O)。
实例610-｛N-〔5-(4-胍基苯基)戊酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷三盐酸盐(化合物6)2.42克(3.00mmol)10-｛N-〔5-(4-胍基苯基)戊酰基〕-氧-苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷淡黄色油状物按实例3处理，得产品0.69克(产率41.1%)。
核磁共振(NMR)(DMSO-d6)化学位移δ＝1.1～2.5(b，14H)，2.5～3.3(b，8H)，3.4～3.7(bd，3H)，4.0～4.4(b，1H)，6.8～7.7(m，8H)，7.7～8.7(b，5H)，8.7～9.7(b，2H)，10.05(bs，1H)。
红外(IR)(KBr)频率ν(厘米-1)＝3300，2940，2330，1640，1510，1450。
薄层层析(TLC)(正-丙醇∶吡啶∶水∶醋酸＝6∶4∶3∶2V/V)。
比移值Rf＝0.31〔a〕19.5D-13.9°(C＝1.07，H2O)。
实例710-｛N-〔4-(3-胍基丙基)苯甲酰基〕甘氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷三盐酸盐(化合物7)1.34克(1.99mmol)10-｛N-〔4-(3-胍基丙基)苯甲酰基〕甘氨酰｝-1，5-二苄氨羰基-1，5，10-三氮癸烷油状物溶于5毫升醋酸，并在冷却下加入10毫升25%溴化氢醋酸溶液，在室温下搅拌30分钟。加入无水乙醚，析出的油状物用倾析法洗涤二次以上，油层进行真空干燥，得油状产品1.64克。然后按实例2处理，得产品0.477克(产率39%)。
核磁共振(NMR)(DMSO-d6)化学位移δ＝1.1～2.4(b，8H)，2.5～3.4(b，12H)，3.7～4.0(bd，2H)，7.1～7.5(b，4H)，7.33(d，2H，偶合常数J＝8Hz)，7.7～8.5(b，8H)，7.90(d，2H，偶合常数J＝8Hz)，8.5～8.9(b，1H)，8.9～9.6(b，2H)。
红外(IR)(KBr)频率ν(厘米-1)＝3270，2950，2930，1640，1540，1500，1460，1300。
薄层层析(TLC)(正-丙醇∶吡啶∶水∶醋酸＝6∶4∶3∶2V/V)。
比移值Rf＝0.33实例810-｛N-〔5-(2-胍基甲基苯基)戊酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷三盐酸盐(化合物8)2.78克(3.38mmol)10-｛N-〔5-(2-胍基甲基苯基)戊酰基〕-氧-苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷淡黄色油状物按实例3处理，得产品0.81克(产率41.8%)。
核磁共振(NMR)(DMSO-d6)化学位移δ＝1.1～2.5(b，14H)，2.5～3.4(b，8H)，3.4～3.8(bd，3H)，4.0～4.6(bd，3H)，6.8～7.7(m，8H)，7.7～8.8(b，6H)，8.8～9.6(b，2H)。
红外(IR)(KBr)频率ν(厘米-1)＝3280，2930，2320，1640，1540，1450。
薄层层析(TLC)(正-丙醇∶吡啶∶水∶醋酸＝6∶4∶3∶2V/V)。
比移值Rf＝0.50〔a〕19.5D-13.9°(C＝1.02，H2O)。
实例910-｛N-〔3-(2-氯-4-胍基甲基苯基)丙酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷三盐酸盐(化合物9)1.60克(1.86mmol)10-｛N-〔3-(2-氯-4-胍基甲基苯基)丙酰基〕-氧-苄基-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷， 1/3 磷酸盐油状物在冰冷却下与20毫升含有3.00克三氟甲磺酸和2.48克茴香硫醚的三氟醋酸溶液混合，在室温下搅拌2小时。
反应后加入100毫升无水乙醚，析出的油状物用倾析法洗涤二次以上，油层在减压下浓缩。加入100毫升蒸馏水，将不溶部分滤去，滤液直接通过装有300毫升CM-Sephadex C-25(Na+)的柱子。该柱按实例3处理，得产品0.528克(产率49.0%)。
核磁共振(NMR)(DMSO-d6)化学位移δ＝1.2～2.3(b，6H)，2.5～3.3(b，12H)，3.3～3.7(bd，3H)，4.1～4.6(bd，3H)，7.1～7.7(m，7H)，7.7～8.6(b，6H)，8.6～9.5(b，2H)。
红外(IR)(KBr)频率ν(厘米-1)＝3300，3150，3050，2950，1645，1540，1450，1050。
薄层层析(TLC)(正-丙醇∶吡啶∶水∶醋酸＝6∶4∶3∶2V/V)比移值Rf＝0.35〔a〕19.0D-26.1°(C＝11，H2O)。
实例1010-｛N-〔6-(4-胍基苯基)己酰基〕-L-丝氨酰｝-1，5，10-三氮癸烷三盐酸盐(化合物10)1.13克(1.31mmol)10-｛N-〔6-(4-胍基苯基)己酰基〕-氧-苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷淡黄色油状物按实例3处理，得产品0.15克(产率63.9%)。
熔点m.p.159.5°～161.5℃
核磁共振(NMR)(DMSO-d6)化学位移δ＝1.00～1.90(b，12H)，1.90～2.38(b，4H)，2.57～3.22(b，8H)，3.22～3.85(b，3H)，3.85～4.55(b，1H)，4.55～5.38(b，1H)，6.95～7.40(m，4H)，7.40～7.72(b，4H)，7.72～8.15(b，2H)，8.15～9.32(b，4H)，9.32～10.53(b，1H)。
红外(IR)(KBr)频率ν(厘米-1)＝3280，2930，2775，1640，1555，1510，1450，1295，1245，1060。
薄层分析(TLC)(正-丙醇∶吡啶∶水∶醋酸＝6∶4∶3∶2V/V)。
比移值Rf＝0.43〔a〕20.5D-13.7°(C＝1.28，H2O)。
参考例110-｛N-〔4-(4-胍基苯基)丁酰基〕-氧-苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷盐酸盐的合成。
(1)10-(N-特丁氧羰基-氧-苄基-L-丝氨酰)-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷。
4.76克(11.5mmol)1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷溶于50毫升乙酸乙酯。在冰冷却下，加入1.04克(10.3mmol)三乙胺，然后加入5.87克(约15mmol)N-特丁氧羰基-氧-苄基-L-丝氨酸-N-羟基琥珀酰亚胺酯，在室温下反应过夜。再加入50毫升乙酸乙酯，乙酸乙酯溶液依次用5%碳酸氢钠水溶液、0.1N盐酸和饱和氯化钠水溶液洗涤。乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥，滤去干燥剂。滤液在减压下浓缩，得产品8.34克(产率理论量)。
薄层层析(TLC)(氯仿∶甲醇＝9∶1V/V)。
比移值Rf＝0.80(2)10-(氧-苄基-L-丝氨酰)-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷8.00克(11.5mmol)10-(N-特丁氧羰基-氧-苄基-L-丝氨酰)-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷溶于8.0毫升三氟醋酸，并在室温下反应3小时。反应混合物在减压下浓缩，得到的油状物溶于200毫升乙酸乙酯，依次用5%碳酸氢钠水溶液和蒸馏水洗涤。乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥，滤去干燥剂。滤液在减压下浓缩得油状产品6.82克(产率理论量)。
薄层层析(TLC)(氯仿∶甲醇＝9∶1V/V)。
比移值Rf＝0.50(3)10-｛N-〔4-〔4-胍基苯基)丁酰基〕-氧-苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷盐酸盐1.26克(4.89mmol)4-(4-胍基苯基)丁酸盐酸盐棕色结晶溶于20毫升二甲基甲酰胺。在冷却下加入0.68克(5.87mmol)N-羟基琥珀酰亚胺和1.20克(5.87mmol)N，N′-二环己基碳化二亚胺，混合物在室温下反应过夜。滤去N，N′-二环己基脲，滤液直接用于下步反应。3.54克(6.00mmol)，10-(氧-苄基-L-丝氨酰)-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷淡黄色油状物溶于30毫升二甲基甲酰胺，在冰冷却下，加入0.61克(6.00mmol)三乙胺，然后再加入预先制备的4-(4-胍基苯基)丁酸盐酸盐N-羟基琥珀酰亚胺酯的二甲基甲酰胺溶液，混合物在室温下反应过夜，并减压浓缩。油状物溶于150毫升乙酸乙酯和150毫升氯仿的混合液，该溶液依次用5%碳酸钠水溶液、0.5N盐酸和饱和氯化钠水溶液洗涤。分出有机层，并用无水硫酸钠干燥，滤去干燥剂，在减压下浓缩，得淡黄色油状产品4.10克(产率理论量)。
核磁共振(NMR)(DMSO-d6)化学位移δ＝1.1～2.8(b，12H)，2.8～3.8(b，10H)，4.2～4.8(bS，3H)，5.02(S，2H)，5.06(S，2H)，7.3(S，15H)，7.7～10.1(b，12H)。
薄层层析(TLC)(氯仿∶甲醇∶17%氨水＝6∶1.5∶0.25V/V)。
比移值Rf＝0.164-(4-胍基苯基)丁酸盐酸盐用下法制备。
1.60克(8.93mmol)4-(4-氨基苯基)丁酸棕色结晶溶于40毫升四氢呋喃，加入2.70克(13.4mmol)1-脒基-3，5-二甲基吡唑硝酸盐和2.19克(17.0mmol)N，N-二异丙基-乙胺，混合物回流过夜。过滤，收集结晶，并依次用丙酮、甲醇和四氢呋喃洗涤，然后干燥。干燥的棕色结晶悬浮在10毫升蒸馏水中，加入1N盐酸直至结晶完全溶解，并在减压下浓缩至干。残留物用乙醚和丙酮各洗二次，得棕色结晶1.54克(产率67.0%)，熔点m.p.157～160℃。
核磁共振(NMR)(D2O+Dcl，外标TMS)化学位移δ＝2.1～2.6(m，2H)，2.6～3.3(m，4H)，7.5～7.9(m，4H)。
红外(IR)(KBr)频率ν(厘米-1)＝3370，3170，2330，1730，1680，1660，
1620，1600，1575，1510，1240，1220。
参考例210-｛N-〔4-(4-胍基苯基)丁酰基〕甘氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷的合成。
(1)10-(N，N，-邻苯二甲酰甘氨酰)-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷12.4克(30.0mmol)1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷溶于200毫升四氢呋喃，在冰冷却下，加入4.90毫升(35.0mmol)三乙胺，然后加入10.6克(35.0mmol)邻苯二甲酰甘氨酸N-羧基琥珀酰亚胺酯，混合物在室温下反应过夜。
反应混合物在减压下蒸发至干。残留物溶于1200毫升乙酸乙酯，并依次用5%碳酸氢钠水溶液、0.5N盐酸和饱和氯化钠水溶液洗涤。分出乙酸乙酯层，并用无水硫酸钠干燥，滤去干燥剂。滤液在减压下浓缩，加入乙酸乙酯和乙醚，析出结晶。过滤，收集结晶，干燥，得产品14.6克(产率81.0%)。
熔点m.p.102°～104℃薄层层析(TLC)(氯仿∶甲醇∶醋酸＝95∶5∶3V/V)。
比移值Rf＝0.4(2)10-甘氨酰-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷将370毫升乙醇和6.00克(120mmol)水和肼加到14.4克(24.0mmol)10-(N，N-邻苯二甲酰甘氨酰)-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷中。加热回流2小时。反应后滤去不溶部分，滤液在减压下浓缩。得到的油状物溶于300毫升乙酸乙酯，依次用5%碳酸氢钠水溶液和蒸馏水洗涤。分出乙酸乙酯层。用无水硫酸钠干燥。滤去干燥剂，滤液在减压下浓缩，得油状产品12.5克(产率理论)。
薄层层析(TLC)(氯仿∶甲醇∶醋酸＝95∶5∶3V/V)。
比移值Rf＝0.10(3)10-｛N-〔4-(4-胍基苯基)丁酰基〕甘氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷1.56克(6.05mmol)4-(4-胍基苯基)丁酸盐酸盐棕色结晶溶于20毫升二甲基甲酰胺。在冷却下加入0.84克(7.26mmol)N-羟基琥珀酰亚胺和1.50克(7.26mmol)N，N′-二环己基碳化二亚胺，混合物在室温下反应过夜。滤去N，N′-二环己基脲滤液直接用于下步反应。
2.59克(5.5mmol)10-甘氨酰-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷淡黄色油状物于30毫升二甲基甲酰胺。在冰冷却下加入0.61克(6.05mmol)三乙胺，然后再加入预先制备的4-(4-胍基苯基)丁酸盐酸盐N-羟基琥珀酰亚胺酯的二甲基甲酰胺溶液。混合物在室温下反应过夜，并在减压下浓缩。油状残留物溶于300毫升乙酸乙酯和60毫升乙醇的混合溶剂，依次用5%磷酸、5%碳酸钠水溶液和饱和氯化钠水溶液洗涤。在洗涤中析出的油状物加少量乙醇溶解，有机层用无水硫酸钠干燥，滤去干燥剂，滤液在减压下浓缩，得到淡黄色油状产品3.30克(产率89.1%)核磁共振(NMR)(CDcl3)化学位移δ＝1.1～2.8(b，12H)，2.8～4.1(b，10H)，5.04(S，4H)，4.8～8.1(b，11H)，7.3(S，10H)。
薄层层析(TLC)(氯仿∶甲醇∶17%氨水＝6∶3.5∶1V/V)。
比移值Rf＝0.59
参考例310-｛N-〔3-(4-胍基甲基苯基)丙酰基〕-氧-苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷的合成。
将1.00克(4.52mmol)3-(4-胍基甲基苯基)丙酸淡黄色结晶在冰冷却下分次加到3毫升亚硫酰氯中，并在冰冷却下反应15分钟，反应混合物在减压下浓缩至干。
2.00克(3.38mmol)10-(氧-苄基-L-丝氨酰)-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷溶于10毫升二甲基甲酰胺，加入0.92克(9.04mmol)三乙胺，然后再加入预先制备的3-(4-胍基甲基苯基)丙酰氯盐酸盐在4毫升二甲基甲酰胺中的溶液。在冰冷却下，混合物反应30分钟，并在减压下浓缩。油状残留物溶于300毫升乙酸乙酯和50毫升乙醇的混合溶剂，依次用5%磷酸，5%碳酸钠水溶液的饱和氯化钠水溶液洗涤。洗涤中析出的油状物，加入少量乙醇溶解，有机层用无水硫酸钠干燥，滤去干燥剂。然后滤液在减压下浓缩，得淡黄色油状物2.67克(产率理论量)。
核磁共振(NMR)(CDcl3)化学位移δ＝1.0～2.0(b，6H)，2.0～3.9(b，14H)，4.0～4.8(bd，5H)，5.0(S，2H)，5.05(S，2H)，5.1～8.3(b，11H)，7.2(S，15H)。
薄层层析(TLC)(氯仿∶甲醇∶17%氨水＝6∶15∶0.25V/V)。
比移值Rf＝0.273-(4-胍基甲基苯基)丙酸的合成方法如下。
(1)3-(4-氨甲基苯基)丙酸甲酯4.30克(22.97mmol)3-(4-氰基苯基)丙烯酸甲酯溶于350毫升含饱和氨的甲醇，加入3克阮来(Raney)镍，在60大气压，室温下，氢化2小时。反应后滤去催化剂，滤液在减压下浓缩，得油状产品4.02克(产率90.54%)。
核磁共振(NMR)(CDcl3)化学位移δ＝2.4～3.2(m，6H)，3.63(S，3H)，3.8～4.7(b，2H)，7.16(S，4H)。
薄层层析(TLC)(氯仿∶甲醇＝10∶1V/V)。
比移值Rf＝0.16(2)3-(4-胍基甲基苯基)丙酸3.70克(19.14mmol)3-(4-氨甲基苯基)丙酸甲酯油状物溶于150毫升四氢呋喃。加入5.80克(28.71mmol)1-脒基-3，5-二甲基吡唑硝酸盐和4.70克(36.37mmol)N，N-二异丙基乙胺，混合物回流过夜。反应混合物在减压下浓缩，得油状物。然后加入70毫升5%盐酸，回流3小时。过滤，滤液用冰冷却，加入10%氢氧化钠水溶液，调节pH到6.4。在冰冷却下缓和搅拌30分钟，过滤，收集析出的结晶。结晶先用蒸馏水后用四氢呋喃洗涤，干燥，得淡黄色结晶产品2.85克(产率67.4%)。
熔点m.p.≥300℃核磁共振(NMR)(D2O+Ccl，外标TMS)化学位移δ＝3.0～3.6(m，4H)，4.84(S，2H)，7.7(S，4H)。
红外(IR)(KBr)频率ν(厘米-1)＝3350，3060，2330，1675，1610，1550，1460，1405，1150。
薄层层析(TLC)(氯仿∶甲醇∶17%氨水＝4∶4∶2V/V)。
比移值Rf＝0.60
参考例410-｛N-〔4-(3-胍基丙基)苯甲酰基〕-氧-苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷的合成。
0.85克(3.84mmol)4-(3-胍基丙基)苯甲酸溶于8.0毫升亚硫酰氯。加入催化量的干燥吡啶，在室温下搅拌6小时，反应混合物在减压下浓缩。将得到的4-(3-胍基丙基)苯甲酰氯盐酸盐溶于6毫升干燥的二甲基甲酰胺。上述溶液在冰冷却下滴加到15毫升含有1.90克(3.18mmol)10-(氧-苄基-L-丝氨酰)-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷和1.16克(11.5mmol)三乙胺的干燥四氢呋喃溶液中，在冰冷却下搅拌1小时，然后加入数滴蒸馏水，减压浓缩。油状残留物溶于300毫升乙酸乙酯，得到的溶液依次用10%碳酸钠水溶液，5%磷酸水溶液，10%碳酸钠水溶液和饱和氯化钠水溶液洗涤。洗涤中析出的油状物加入少量乙醇溶解。有机层用无水硫酸钠干燥，减压浓缩至干，得油状产品2.20克(产率87.1%)。
核磁共振(NMR)(CDCl3)化学位移δ＝1.3～2.1(b，8H)，2.5～4.1(b，12H)，4.5(S，2H)，5.02(S，2H)，5.05(S，2H)，6.9～8.9(b，11H)，7.3(S，15H)。
薄层层析(TLC)(氯仿∶甲醇∶17%氨水＝6∶15∶0.25V/V)。
比移值Rf＝0.324-(3-胍基丙基)苯甲酸的合成方法如下。
4.00克(20.7mmol)4-(3-氨基丙基)苯甲酸甲酯溶于150毫升四氢呋喃。加入6.25克(31.0mmol)1-脒基-3，5-二甲基吡唑硝酸盐和5.08克(39.3mmol)N，N-二异丙基乙胺，混合物回流过夜。
反应混合物在减压下浓缩，得油状物。
向油状物中加入100毫升6N盐酸，加热回流4小时，用50毫升乙酸乙酯洗涤二次。水层用20%氢氧化钠水溶液调节pH到6.0。冷却后过滚，收集析出的结晶，得产品2.53克(产率55.1%)。
熔点m.p.285°～289℃核磁共振(NMR)(DMSO-d6+Dcl，外标TM)化学位移δ＝2.0～2.7(m，2H)，3.1～3.5(m，2H)，3.5～4.0(m，2H)，7.9(d，2H，偶合常数J＝8Hz)，8.4(d，2H，偶合常数J＝8Hz)。
参考例510-｛N-〔3-(3-胍基甲基苯基)丙酰基〕-氧-苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷的合成。
0.55克(2.49mmol)3-(3-胍基甲基苯基)丙酸淡黄色结晶和1.20克(2.03mmol)10-(氧-苄基-L-丝氨酰)-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷淡黄色油状物按参考例3处理，得淡黄色油状产品1.63克(产率理论量)。
核磁共振(NMR)(CDcl3)化学位移δ＝1.1～2.1(b，6H)，2.1～3.9(b，14H)，3.9～4.7(bd，5H)，5.0(S，2H)，5.05～(S，2H)，6.3～8.5(b，11H)，7.2(S，15H)。
薄层层析(TLC)(氯仿∶甲醇∶17%氨水＝6∶1.5∶0.25V/V)。
比移值Rf＝0.42
3-(3-胍基甲基苯基)丙酸的合成方法如下。
(1)3-(3-氨甲基苯基)丙酸甲酯4.3克(22.97mmol)3-(3-氰基苯基)-丙酸甲酯＊白色结晶按参考例3～(1)处理，得油状产品4.40克(产率理论量)。
核磁共振(NMR)(CDcl3)化学位移δ＝2.3～3.2(m，6H)，3.67(S，3H)，4.2～6.5(b，2H)，6.7～7.5(m，4H)。
薄层层析(TLC)(氯仿∶甲醇＝10∶1V/V)。
比移值Rf＝0.24(2)3-(3-胍基甲基苯基)丙酸4.40克(22.77mmol)3-(3-氨甲基苯基)丙酸甲酯油状物按参考例3～(2)处理，得淡黄色结晶2.1克(产率41.7%)。
熔点m.p.273°～276℃核磁共振(NMR)(D2O+Dcl，外标TMS)化学位移δ＝2.8～3.5(m，4H)，48(S，2H)，7.3～7.9(m，4H)。
红外(IR)(KBr)频率ν＝(厘米-1)＝3340，3100，2330，1645，1535，1400，1330。
薄层层析(TLC)(氯仿∶甲醇∶17%氨水＝4∶4∶2V/V)。
比移值Rf＝0.5〔注〕＊4.3克(22.97mmol)3-(3-氰基苯基-丙烯酸甲酯白色结晶按参考例3～(1)处理。
参考例610-｛N-〔5-(4-胍基苯基)戊酰基〕-氧-苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷的合成。
0.80克(3.40mmol)5-(4-胍基苯基)戊酸淡黄色结晶和1.80克(3.05mmol)10-(氧-苄基-L-丝氨酰)-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷淡黄色油状物按参考例3处理，得淡黄色油状产品2.42克(产率理论量)。
核磁共振(NMR)(CDcl3)化学位移δ＝0.9～2.8(b，14H)，2.8～3.9(b，10H)，4.47(bS，3H)，5.03(S，2H)，5.06(S，2H)，5.0～7.9(b，11H)，7.3(S，15H)。
薄层层析(TLC)(氯仿∶甲醇∶17%氨水＝6∶1.5∶0.25V/V)。
比移值Rf＝0.385-(4-胍基苯基)戊酸的合成方法如下。
7.42克(35.80mmol)5-(4-氨基苯基)戊酸甲酯油状物按参考例3处理，得黄色结晶3.72克(产率44.1%)。
熔点m.p.254°～256℃核磁共振(NMR)(D2O+Dcl，外标TMS)化学位移δ＝1.7～2.4(m，4H)，2.5～3.4(m，4H)，7.5～8.0(m，4H)。
红外(IR)(KBr)频率ν(厘米-1)＝3330，2940，2330，1680，1630，1570，1515，1400，1305，
1265。
薄层层析(TLC)(氯仿∶甲醇∶17%氨水＝4∶4∶2V/V)。
比移值Rf＝0.50参考例710-｛N-〔4-(3-胍基苯基)苯甲酰基〕甘氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷的合成。
0.66克(2.98mmol)4-(3-胍基丙基)苯甲酸溶于60毫升亚硫酰氯。加入催化量的干燥吡啶，在室温下将混合物搅拌4小时，并在减压下浓缩。
得到的酰氯盐酸盐溶于4毫升干燥的二甲基甲酰胺。在冰冷却下，将其滴加到10毫升含有1.27克(2.70mmol)10-甘氨酰-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷和0.46克(4.5mmol)三乙胺的干燥四氢呋喃溶液中。
混合物按参考例4处理，得油状产品1.46克(产率80.3%)。
核磁共振(NMR)(DMSO-d6)化学位移δ＝1.1～2.1(b，8H)，2.1～3.5(b，12H)，3.7～4.0(b，2H)，5.01(S，2H)，5.05(S，2H)。6.8～8.9(b，11H)，7.30(S，10H)。
薄层层析(TLC)(氯仿∶甲醇∶17%氨水＝6∶1.5∶0.25V/V)。
比移值Rf＝0.34
参考例810-｛N-〔5-(2-胍基甲基苯基)戊酰基〕-氧-苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷的合成。
1.20克(4.81mmol)5-(2-胍基甲基苯基)戊酸淡黄色结晶和2.00克(3.38mmol)10-(氧-苄基-L-丝氨酰)-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷淡黄色油状物按参考例3处理，得淡黄色油状产品2.90克(产率理论量)。
核磁共振(NMR)(CDcl3)化学位移δ＝1.1～2.8(b，14H)，2.8～4.0(b，10H)，4.2～4.7(b，5H)，5.0(S，2H)，5.04(S，2H)，5.0～8.8(b，11H)，7.2(S，15H)。
薄层层析(TLC)(氯仿∶甲醇∶17%氨水＝6∶1.5∶0.25V/V)。
比移值Rf＝0.305-(2-胍基甲基苯基)戊酸的合成方法如下(1)5-(2-氰基苯基)戊酸甲酯15.2克(71.4mmol)5-(2-氰基苯基)-2-4-戊二烯酸甲酯溶于600毫升甲醇。加入0.6克钯黑，在室温和常压下，催化还原6小时。反应后滤去催化剂，滤液在减压下浓缩，得到油状产品16.47克(产率理论量)。
核磁共振(NMR)(CDcl3)化学位移δ＝1.4～2.1(m，4H)，2.1～2.6(m，2H)，2.6～3.2(m，2H)，3.7(S，3H)，7.0～(m，4H)。
(2)5-(2-氨甲基苯基)戊酸甲酯
15.5克(71.4mmol)5-(2-氰基苯基)戊酸甲酯油状物按参考例3～(1)处理，得淡黄色油状产品14.7克(产率92.9%)。
核磁共振(NMR)(CDcl3)化学位移δ＝1.35(S，2H)，1.3～2.0(m，4H)，2.1～2.9(m，4H)，3.63(S，3H)，3.85(S，2H)，7.0～7.5(m，4H)。
薄层层析(TLC)(氯仿∶甲醇＝10∶1V/V)。
比移值Rf＝0.26(3)5-(2-胍基甲基苯基)戊酸8.00克(36.1mmol)5-(2-氨甲基苯基)戊酸甲酯按参考例3～(2)处理，得淡黄色结晶6.41克(产率71.2%)。
熔点m.p.275°～277℃核磁共振(NMR)(D2O+Dcl，外标TMS)。
化学位移δ＝1.7～2.4(m，4H)，2.6～3.3(m，4H)，4.8(S，2H)，7.5～7.9(m，4H)。
红外(IR)(KBr)频率ν(厘米-1)＝3350，3020，2950，2320，1675，1620，1540，1445，1395，1145。
薄层层析(TLC)(氯仿∶甲醇∶17%氨水＝6∶3∶0.5V/V)。
比移值Rf＝0.24参考例910-｛N-〔3-(2-氯-4-胍基甲基苯基)丙酰基〕-氧-苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷 1/3 磷酸盐的合成。
0.767克(3.00mmol)3-(2-氯-4-胍基甲基苯基)丙酸在冷却下溶于8.0毫升亚硫酰氯。搅拌反应30分钟后，减压浓缩。得到的3-(2-氯-4-胍基甲基苯基)丙酰氯盐酸盐溶于10毫升干燥的二甲基甲酰胺，在冰冷却下将其滴加到15毫升含有1.61克(2.73mmol)10-氧-苄基-L-丝氨酰)-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷和0.91克三乙胺的干燥二甲基甲酰胺溶液中。在冰冷却下搅拌1小时后，加数滴蒸馏水，然后将反应混合物溶于300毫升乙酸乙酯和少量乙醇的混合溶剂，依次用5%碳酸钠水溶液，5%磷酸水溶液和氯化钠水溶液洗涤。洗涤中析出的油状物加少量乙醇溶解。有机层用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得油状产品1.97克(产率83.8%)。
核磁共振(NMR)(DMSO-d6)化学位移δ＝1.0～2.0(b，6H)，2.2～3.5(b，12H)，3.5～3.8(bd，2H)，4.3～4.8(bm，5H)，5.02(S，2H)，5.05(S，2H)，6.8～8.8(b，11H)，7.10(S，5H)，7.30(S，10H)。
薄层层析(TLC)(氯仿∶甲醇∶17%氨水＝6∶1.5∶0.25V/V)。
比移值Rf＝0.213-(2-氯-4-胍基甲基苯基)丙酸的合成方法如下。
(1)3-(2-氯-4-乙酰基氨甲基苯基)-丙酸甲酯5.00克(21.25mmol)3-(4-乙酰基甲基苯基)丙酸甲酯在-25℃加到14.2克(106mmol)无水三氯化铝溶于85毫升硫酰氯的溶液中。混合物的温度逐渐上升到5℃，在该温度下将混合物搅拌24小时。
将反应混合物注入大量冰中，析出的不溶部分用约1000毫升氯仿提取。氯仿层依次用蒸馏水5%碳酸钠水溶液，5%磷酸钠水溶液和蒸馏水洗涤，再用无水硫酸镁干燥，减压浓缩，得棕色油状物6.0克，油状物6.0克油状物通过300克的硅胶(Wako Gei C-200)柱，并用甲苯-乙酸乙酯混合液(1∶1V/V)洗涤，合并含产品的洗提液，浓缩至干，得产品1.93克(产率33.7%)。
熔点m.p.91°～93℃核磁共振(NMR)(CDcl3，400MHz)化学位移δ＝2.03(S，3H)，2.63(t，2H，偶合常数J＝7.7Hz)，3.04(t，2H，偶合常数J＝7.7Hz)，3.67(S，3H)，4.37(d，2H，偶合常数J＝5.9Hz)，5.85(bS，1H)，7.10(d，1H，偶合常数J＝7.8Hz)，7.20(d，1H，偶合常数J＝7.8Hz)，7.26(S，1H)。
(2)3-(2-氯-4-氨甲基苯基)丙酸盐酸盐20毫升ZN盐酸和10毫升二氧六环的混合液加到1.10克(4.08mmol)3-(2-氯-4-乙酰基-氨甲基苯基)丙酸甲酯中，加热回流8小时。反应混合物在减压下浓缩至干，得固体产品1.05克(产率理论量)。
熔点m.p.191°～194℃核磁共振(NMR)(D2O，外标TMS)化学位移δ＝2.9～3.7(m，4H)，4.60(S，2H)，7.6～8.1(m，3H)。
薄层层析(TLC)(氯仿∶甲醇∶17%氨水＝6∶3∶0.5V/V)。
比移值Rf＝0.20(3)3-(2-氯-4-胍基甲基苯基)丙酸1.00克(4.00mmol)3-(2-氯-4-氨甲基苯基)丙酸盐酸盐溶于40毫升甲醇。加入1.03克(5.12mmol)1-基-3，5-二甲基吡唑硝酸盐和1.10克(8.51mmol)N，N-二异丙基乙胺，在80℃加热搅拌过夜。反应混合物在减压下浓缩，残留物溶于100毫升蒸馏水。用50毫升氯仿洗涤二次，水层用1N盐酸调节pH到6.1，在减压下浓缩。
残留物用丙酮、蒸馏水洗涤，析出的结晶真空干燥，得结晶0.75克(产率73.3%)。
熔点m.p.260°～264℃核磁共振(NMR)(D2O+Dcl，外标TMS)化学位移δ＝2.8～3.7(m，4H)，4.82(S，2H)，7.5～7.9(m，3H)。
薄层层析(TLC)(氯仿∶甲醇∶17%氨水＝6∶3∶0.5V/V)。
比移值Rf＝0.06参考例1010-｛N-〔6-(4-胍基苯基)己酰基〕-氧-苄基-L-丝氨酰｝-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷的合成。
0.65克(2.61mmol)6-(4-胍基苯基)己酸淡黄色结晶和1.29克(2.19mmol)10-氧-苄基-L-丝氨酰)-1，5-二苄氧羰基-1，5，10-三氮癸烷按参考例3处理，得油状产品1.92克(产率理论量)。
核磁共振(NMR)(CDcl3)化学位移δ＝0.80～1.95(b，14H)，1.95～2.30(b，2H)，2.30～2.85(b，2H)，2.85～3.45(b，8H)，3.45～4.00(bm，2H)，4.30～4.80(b，1H)，4.67～(S，2H)，5.50(S，4H)，5.60～7.50(b，8H)，7.50(bS，4H)，7.25～(S，5H)，7.28(S，10H)。
红外(IR)(Neat)频率ν(厘米-1)3320，2940，1670，1650，1540，1515，1475，1450，1425，1255，1210，740，700。
薄层层析(TLC)(氯仿∶甲醇∶17%氨水＝6∶1.5∶0.25V/V)。
比移值Rf＝0.256-(4-胍基苯基)己酸由6-(4-氨基苯基)己酸甲酯按参考例6合成5-(4-胍基苯基)戊酸的方法制得。
本发明所述化合物在水溶液中的稳定性，对大白鼠的毒性和抗小白鼠白血病L1210延长存活效果的数据叙述如下。
1 化合物在水溶液中的稳定性(1)实验方法实验化合物溶于水中，配成0.5%(W/W)的浓度，水溶液于40±1℃保存并按一定的时间间隔取样，进行高压液相色谱分析。通过测量峰面积比计算每个化合物的残留百分数。
(2)实验结果实验化合物在一定时间间隔的残留百分数见表2，实验开始的数值定为100%。
表2 化合物在水溶液中残留百分数化合物 时间(实例号) 0 12 24 48 72 120 1681 100 99.8 99.6 99.8 99.5 99.6 99.52 100 99.7 99.9 99.8 99.9 100 99.83 100 99.6 99.5 99.8 99.6 99.6 99.84 100 99.6 99.9 99.6 99.7 99.9 99.55 100 99.9 99.6 99.6 99.9 99.6 99.86 100 99.5 99.8 99.7 99.7 99.5 1007 100 99.6 99.6 100 100 99.9 99.78 100 99.7 99.9 99.5 99.8 99.7 99.89 100 99.8 99.8 99.7 100 99.5 99.6Spergualin 100 94.6 90.8 84.6 78.5 69.9 65.12 化合物在体外抑制小白鼠白血病L1210细胞生长的能力(1)实验方法将白血病L12101×105细胞/0.2毫升移植到DBA/2种雌性小白鼠的腹腔内。4天后取腹水，离心得到L1210细胞。将这些细胞悬浮在加有小牛血清和2-巯基乙醇的RPMI1640介质中，最终达到5×104细胞/0.9毫升的浓度。
本发明所述的每个化合物均溶于上述介质。
0.9毫升L1210细胞悬浮液与0.1毫升0.62～1000微克/毫升实验化合物溶液混合，混合物在37℃、5%CO2气压下孵化48小时。测定孵化前和孵化后的细胞数，并测定与对照组相比抑制50%L1210细胞生长的浓度(IC50)。
(2)实验结果化合物抑制小白鼠白血病L1210细胞生长能力的典型实例见表3，以IC50表示。
表3 在体外化合物对小白鼠白血病L1210细胞生长的抑制化合物 IC50(实例号) (微克/毫升)4 1.17 0.928 0.973 对大白鼠的毒性(1)实验方法将化合物1溶于生理盐水(化合物1的浓度6.25毫克/毫升)给大白鼠腹腔注射上述溶液，注射量为0.2毫升/100克(体重)。每天一次，连续10天。
大白鼠体重下降的速率按下式计算体重下降的速率%＝ (给药后大白鼠体重的平均值)/(给药前大白鼠体重的平均值) ×100(2)实验结果结果见附图。
大白鼠体重下降的速率很慢，因此，化合物1的毒性很小。
4 化合物抗小白鼠白血病L1210延长存活效果和毒性(1)实验方法给CDF1-SLC雌性小白鼠(每组6只)腹腔接种白血病细胞L1210(1×105细胞/0.2毫升)。将本发明中的二个化合物各自用生理盐水稀释成各种浓度，从接种的第二天开始每种稀释浓度按0.1毫升/10克(体重)给药，连续9天。
接种后30天，计算各治疗组动物平均存活时间(天)，除以对照组动物平均存活时间，再乘以100，即得延长存活百分率(T/C)。(T/C)值大于125认为是有效的。
(2)实验结果化合物抗小白鼠白血病L1210典型实例的T/C值见表4。
表4 化合物抗小白鼠白血病L1210延长存活效果化合物 剂量 T/C(实例号) (毫克/公斤/天) (%)对照 0.00 10050.00 -25.00 17812.50 42016.25 4353.13 4351.56 4350.78 4060.39 14950.00 1525.00 43512.50 4356.25 435
23.13 4351.56 4350.78 1450.39 109
权利要求
1.制备带有一个次苯基的斯柏格埃林(Spergualin)有关化合物及其盐的方法，该化合物用下式表示
式中R1是可以被羟甲基取代的低级烷撑；X是氢原子或卤原子；m与n各为0或1～5的整数，该方法的特点是从受保护的斯柏格埃林(Sper-gualin)有关化合物中去除保护基团，受保护的化合物用式(Ⅱ)表示
式中R′1是可以被羟甲基取代的低级烷撑，其中的羟基可以被保护；R2是氨基保护基；R3是被保护的氨基；X、m和n与上述定义相同。
2.按照权项1所述的方法，其特点是R1是甲撑或被羟甲基取代的甲撑，R′1是甲撑或被受保护的羟甲基取代的甲撑。
3.按照权项1所述的方法，其特点是m为0并且n为2～5的整数。
4.按照权项1所述的方法，其特点是R′1中羟基的保护基是(1)可以带有取代基的苄基，(2)可以带有取代基的苄氧羰基，(3)酰基，(4)特丁基，(5)三苯甲基，(6)吡喃基，或(7)对-甲苯磺酰基。
5.按照权项1所述的方法，其特点是R2及R3的氨基保护基是(1)任意取代的C1～C5的酰基，(2)苯基单或双羰基，(3)任意取代的C1～C5的烷氧羰基，(4)任意取代的C1～C5的烷基，(5)任意取代的苯硫基，(6)任意取代的C1～C3的烷硫基，或(7)任意取代的苯磺酰基。
6.按照权项1所述的方法，其特点是去除保护基的方法是还原，水解，酸分解，或者肼分解。
7.按照权项1所述的方法，其特征是反应在溶剂中于-50℃到150℃进行的。
8.按照权项1所述的方法，其特点是R1是(1)甲撑或(2)被羟甲基取代的甲撑，其中羟基可用下述基团来保护(1)苄基，(2)苄氧基羰基，(3)乙酰基，(4)特丁基，(5)三苯甲基，(6)2-吡喃基，或(7)对-甲苯磺酰基。而R2和R3的氨基保护基是(1)甲酰基或三氟乙酰基，(2)苯甲酰基或邻苯二甲酰基，(3)a)特丁氧羰基，1-甲基乙氧羰基或1-乙基-丙氧羰基，b)未经取代的苄氧羰基或被下列基团取代的苄氧羰基甲氧基、卤原子、硝基、苯偶氮基或被甲基取代的苯偶氮基，(4)苄基或三苯甲基，(5)邻-硝基苯硫基，(6)三苯甲硫基，或(7)对-甲苯磺酰基。
9.制备下式所示的斯柏格埃林(Spergualin)有关化合物及其无毒盐的方法
式中R8是氢原子或羟甲基，该方法的特点是从受保护的斯柏格埃林(Spergualin)有关化合物中去除保护基团，受保护的化合物用下式表示
式中R′8是氢原子或受保护的羟甲基，R2是氨基保护基，而R3是受保护的氨基。
专利摘要
本发明是关于斯伯格埃林(Spergualin)有关化合物及其盐类和它们的制备方法，所述化合物的结构式如下
文档编号A61K31/16GK85101425SQ85101425
公开日1987年1月17日 申请日期1985年4月1日
发明者梅尺浜夫, 竹内富雄, 西泽林藏, 高桥克俊, 中村辉也, 梅田芳久 申请人:微生物学研究会导出引文BiBTeX, EndNote, RefMan