专利名称：延衰颗粒的制作方法
技术领域：
本发明由纯天然中药材制成，属于绿色食品药品范畴，具体是指一种延防衰老的延衰颗粒。
随着全球人口日趋老龄化，特别是中国正进入老年化社会，中外医学界已把抗衰老尤其是抗衰老医药保健品作为人类生命科学的重大科研课题之一。据有关统计，仅中国大陆自然衰老人群就高达1亿人以上，还有大约两亿病理性早衰人群。由此可见，仅就国内市场而言，抗衰老医药保健品的科研意义重大，市场应用前景广阔。现代医学认为，人类随着年龄的增长，必然会出现一个老化的生物过程，老化包括生理性的“衰老”和病理性的“早衰”与“衰老”。老化主要表现为活动效能降低，思维和体力减弱，协调功能丧失等。祖国医学认为，人的生长壮老等自然规律与肾中精气之盛衰密切相关，博大精深的中医药宝库有许多治疗早衰和抗衰老的经典方剂，为中华民族的繁衍生息发挥了久远巨大的效益。西医多以口服和注射素的方式延防衰老，激化体内活力。但是过量长期补充激素，会破坏人体平衡，产生药物依赖性甚至会导致一些不可知病变发生，应当慎用。现有的一些保健制品，如太阳神口服液、SOD口服液等等，所起的作用比较专一，或是补充SOD含量，或是调理人体某个脏器，缺少综合平衡协调功效。
本发明的目的是提供一种补肾养肾，综合协调平衡人体机能，提高人体超氧化物药化酶SOD含量，清除体内自由基，减少氧化脂质LPO的产生的延缓衰老的延衰颗粒。
祖国医学认为，早衰或衰老的各种人群由于肾气逐渐衰退，精血日趋不足，导致肾之阴阳失调，而肾阴肾阳乃各脏腑阴阳之根本，进而导致各脏腑功能的紊乱或退化，这就形成未老先衰以及男女更年期综合症等病理变化的基础条件。由于各种衰老人群的体质、劳逸、生活、环境、精神、疾病等因素影响，不能自身调节适应以肾虚为主的一系列脏腑功能紊乱的症候群，因而形成早衰、男女更年期综合症等病理性变化。机体早衰的青年人、中年人，特别是中年向老年过渡期会出现一系列的生理变化。主要是肾气渐衰，天癸日枯、精血不足、冲任衰退、阴阳平衡失调。肾阴亏损，经脉失于濡养温煦，导致心肝功能紊乱。特别在肾阴虚的影响下，髓海不足，元神易失常、神明易失守则出现心肾不交之证。肾阴不足导致水不涵木，致肝肾阴虚。因此，肝肾阴虚本症之主因。本发明所述延衰片为肝肾阴虚而设，方中以熟地滋阴养血、补精益髓为君药，枸杞子、女贞子、桑椹子补肝肾之阴，鳖甲滋阴潜阳，共为臣药。脾胃为后天之本，生化之源，故以西洋参、山药益气养阴补脾胃之气，菟丝子补阳益阴，北沙参、麦冬滋补肺胃之阴，当归补血；柏子仁养心安神为佐药；另桑椹子归肝肾之经，有滋阴补血之效，亦为使药。诸药合用，共奏滋补肝肾、调节阴阳养血安神的保健功能。
本发明由12味中约组成，在每单位延衰颗粒中白糖占7.1％，滑石粉占2.0％并含有微量食用石蜡和色素，其特征是，在每单位所述延衰颗粒中其配方配比如下熟 地15.3％枸杞子8.1％北沙参8.1％ 柏子仁6.1％当 归8.1％ 麦 冬6.1％桑椹子8.0％ 女贞子6.1％鳖 甲7.6％ 西洋参2.2％菟丝子7.6％ 山 药7.6％延衰颗粒是根据传统保健理论，以北沙参、熟地、鳖甲、山药、枸杞子、桑椹子、女贞子、菟丝子、当归、西洋参、柏子仁、麦冬等原料制成。所述延衰片可升高体内超氧化物歧化酶SOD的含量，清除体内自由基，减少过氧化脂质LPO的产生，保护细胞膜，减缓机体衰老过程。经功能试验证明，本发明具有延缓衰老的保健作用；临床观察治疗240例，花红片对照组90例，总有效率分别为84.5％、82.2％，经Riddit统计分析，两组疗效无显著差异。其中对阴虚型更年期综合症效果最佳，对热盗汗，失眠健忘、面色潮红、烘热汗出、精神萎靡、烦燥易怒、性欲减退、寐多恶梦、咽干舌燥等症状缓解显著，服药后无不良反应。本品用于治疗早衰、男女更年期综合症具有方便可靠、确实满意的效果。
附
图1是本发明工艺流程图。
制成片剂的实施例按如下配方进行熟 地15.3％白 糖7.1％枸杞子8.1％ 柏子仁6.1％北沙参8.1％ 麦 冬6.1％当 归8.1％ 女贞子6.1％桑椹子8.0％ 西洋参2.2％鳖 甲7.6％ 滑石粉2.0％山 药7.6％ 食用石蜡 0.01‰菟丝子7.6％ 食用色素 0.04‰以下是支持本发明的各种实验报告，其中包括保健功能评价报告、毒理学安全性评价报告、产品稳定性试验报告以及卫生学检测报告等。
一、毒理学安全性评价报告样品来源受试物由武汉宏生保健品公司提供。绿色片剂。
样品处理受试物经研磨粉碎后按1％、5％、10％不同比例加到基料中，制成块状供试验用。
1、急性毒性实验动物昆明种小鼠18-20g，雌雄各半。
给予途径受试物按10％比例加入到饲料中给予方法按体重的20％称取受试物+基料混合饲料供动物食用，记一天24小时内动物摄入总量，试验前禁食12h，不断水。观察一周，并记录动物中毒症状及死亡情况。结果见表1表1对小鼠急性毒性试验结果动物数 死亡动物数 体重24小时内摄入量 受试物摄入量(只) (只) (g) 饲料量(g) 受试物量(g) (每千克体重)10 018.5±1.0 2.4±0.2 0.24±0.0212.8±1.110 019.5±1.0 2.8±0.2 0.28±0.0214.2±1.524小时内动物摄入受试物总量为12.8-14.2g/kg，一周内动物未见明显中毒症状及死亡发生。按急性毒性分级，该受试物属实际无毒级。
2、微核实验动物昆明种小鼠，23-25g，雌雄兼有。
剂量分组设置受试物1％、5％、10％三个剂量组，及空白对照组和阳性对照组。
实验方法按体重20％定量称取受试物饲料，让其自由摄入30小时后，处死动物，取胸骨骨髓涂片，每只动物油镜下观察1000个嗜染红细胞，结果如下表2对小鼠微核试验结果受试物剂量动物数 观察细胞数 出现微核细胞数 微核形成率(％) (只) (个) (个) (‰)阴性对照组 0 10 10×1000 22 2.2实验组1.0 10 10×1000 28 2.85.0 10 10×1000 25 2.510 10 10×1000 24 2.4CP组(mg/kg)60 10 10×1000386 38.6结论各实验组与阴性对照组结果比较，差异无显翥生；表明该受试物骨髓微核试验结果为阴性。
3、小鼠精子畸形试验动物昆明种雄性小鼠，23-25g。
实验方法剂量分组同微核试验。连续给予受度物饲料五天后，再继续喂养30天基础饲料，处死动物，取两侧副睾涂片镜检。结果见表3表3 对小鼠精子畸形试验结果受试物 剂量 动物数观察精子数畸形精子数精子畸形率(％) (只)(个) (个) (‰)阴性对照组0 10 10×1000 1511.51实验组 1.0 10 10×1000 1781.785.0 10 10×1000 1831.8310 10 10×1000 1751.75CP组(mg/kg) 60 10 10×1000 4244.24
结论各实验组与阴性对照组结果比较，差异无显著性，表明该受试物精子畸形试验结果为阴性。
4、Ames试验采用经鉴定符合生物学要求的鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型TA97、TA98、TA100、TA102四株菌株进行试验；采用多氯联苯(PCB)诱导的大鼠肝匀浆作为体外活化系统(+S9)。受试物分为三个剂量组，固体样品经溶解后稀释成不同浓度，灭菌后每皿加入0.5ml，浓度分别为0.2、200、5000μg/皿。采用平板掺入法记录三次重复的平行样品结果。
表4 Ames试验结果回变菌落数(个)受试物 剂量(μg/皿) -S9+S9TA97 TA98 TA100 TA102 TA97TA98 TA100 TA102自发回变 0 108 25 162240 119 28 156 246受试物0.2 121 36 183205 135 36 173 235200 189 29 195258 163 35 198 2835000 163 32 198256 145 43 183 256阳性对照 ＞5000＞5000 35826 1660＞5000＞3000 256注-S9阳性对照组为2、4、7-TNF972，加入量为0.3μg/皿+S9阳性对照为2-AF，加入量为10μg/皿5 30天喂养试验5.1动物采用3个月龄Wistar大鼠，共80只，雌雄各半，体重160-180克。动物由湖北省医学实验动物中心提供。
5.2齐量与分组设三个齐量组和一个对照组，每组20只动物，雌雄各10只。按人群推荐日摄入量的1111倍即10％作为高剂量组，下设5％、1％为中、低剂量组。喂养一个月，按试验要求测定有关指标。
5.3观察指标5.3.1临床检查包括一般表现、行为、中毒及死亡情况。每周进食量及食物利用率。
5.3.2血液检查试验结束时测定血红素(Hb)、红细胞计数、白细胞计数及分类。
5.3.3血液生化检查包括谷丙转氨酶(ALT)、血清尿素氨(BUN)。
5.3.4脏器称重及脏器系数5.3.5病理组织学检查对所有动物进行大体解剖检查，及对心、肝、脾、肾、肺等主要脏器进行病理学检查。
5.4试验结果5.4.1临床检查试验中，动物未发现任何中毒症状，食欲、毛色均正常。体重及食物利用率结果见表5从表中可见，各种大鼠体重及食物利用率结果差异无显著性。表5 对大鼠体重及食物利用率结果剂 量动重量(g，M±SD) 食物利用率(％) 物(只) (％)数初重第四周 增重♀对照组 10162.4±12.6 245.8±26.6 83.413.7±0.61 10157.9±21.1 239.3±23.6 81.413.4±0.85 10160.1±13.9 233.0±27.8 72.913.2±0.110 10165.6±10.1 241.0±23.6 75.413.6±0.3♂对照组 10168.6±14.7 271.8±34.8 113.218.4±0.31 10164.5±13.7 284.5±26.4 120.018.4±0.25 10162.4±12.6 278.7±35.1 116.317.8±0.310 10168.6±14.7 271.8±31.3 103.217.4±0.2
与对照组比较差异无显著性5.4.2血液学检查Hb测定、RBC计数、WBC计数结果见表6经检验，Hb含量、RBC计数、WBC计数结果各组间差异无显著性。表6 对大鼠Hb含量、RBC计数、WBC计数的影响剂量 动物数Hb含量 RBC计数 WBC计数(％) (只) (g/L) (×1012个/L) (×109个/L)对照组 10130.2±3.87.16±0.3414.8±1.601 10136.5±4.57.65±0.4616.4±1.535 10127.8±5.66.90±0.5718.3±1.4810 10135.9±3.87.59±0.6316.9±1.085.4.3血液生化检查血清BUN、GPT含量测定见表7，经检验各组间差异无显著性。表7 对大鼠BUN、ALT、AST的影响剂量(％) 动物数(只) BUN(g/L)ALT(U/L)AST(U/L)对照组10 19.6±1.35 61.8±5.3 226.8±35.01％ 10 18.3±0.98 54.6±11.8 234.6±18.35％ 10 21.9±1.08 62.3±9.5 215.6±43.210％ 10 20.8±1.56 58.3±4.8 223.6±41.85.4.4脏器重量及系数肝、肾、脾等脏器重量及系数，结果见表8；与对照组比较，各剂量组大鼠肝、肾、脾等脏器重量及系数差异无显著性。表8 对大鼠肝、肾、脾等脏器重量及系数结果剂量动 肝脏 肾脏 脾脏(％)物(只)数 重量(g) 系数(％) 重量(g) 系数(％) 重量(g) 系数(％)♀对照组108.35±1.08 3.4±0.19 1.54±0.29 0.62±0.01 1.18±0.11 0.48±0.021 108.11±1.35 3.4±0.20 1.50±0.03 0.63±0.03 1.03±0.02 0.43±0.035 108.08±0.95 3.5±0.18 1.51±0.08 0.65±0.01 1.05±0.05 0.45±0.0110 108.28±1.18 3.4±0.23 1.52±1.03 0.63±0.04 1.08±0.03 0.45±0.02♀对照组1011.8±1.45 4.2±0.08 1.89±0.08 0.67±0.03 1.31±0.04 0.46±0.011 1012.1±1.13 4.3±0.18 1.96±0.09 0.69±0.05 1.35±0.02 0.47±0.015 1011.3±1.15 4.1±0.13 1.83±0.05 0.64±0.03 1.29±0.03 0.46±0.0210 1010.9±1.63 3.9±0.12 1.80±0.03 0.66±0.02 1.28±0.02 0.47±0.01与对照组比较*P＜0.055.4.5病理组织学检查结果对各受试物组和对照组部份动物的心、肝、肺、脾、肾等脏器进行了病理组织切片观察，未见异常病理病变。
6、致畸试验6.1动物采用Wistar大鼠，雌鼠250-270克，雄鼠300克，各48只。动物由湖北省医学实验动物中心提供。
6.2剂量分组设置空白对照组及受试物低、中、高三个剂量组；受试物低、中、高剂量组分别以1％、5％、10％的受试物加入到基料中喂养动物，空白对照组喂养普通饲料。
2.3方法动物以雌雄1∶1同笼交配，以查出阴栓或阴道涂片查到精子作为受孕零天。获得孕鼠38只，对照组9只；低、中、高剂量组分别为9、10、11只。在受孕的第1天开始给予受试物，第20天检查到孕鼠阴道有血性分泌物时，立即断头处死动物，检查孕鼠及胎鼠情况，记录子宫重量、黄体数、吸收胎、死胎数、活胎数；胎鼠体重、身体、尾长；并逐一检查胎鼠有无畸形，如有无脑膨出、露脑、小头、小耳、小眼、唇裂、短肢、并肢、多肢、无肢；最后将每窝1/2胎鼠制作骨标本以检查骨胳异常，另1/2置Bouins液中固定作内脏病理检查。
6.4结果见表9、10、11与对照组比较，受试物各组受孕率、平均胎鼠数无差别；胎鼠外观未见畸形；受试物各组胎鼠体重、身长、尾长与对照组比较，差异无显著性；与对照组比较，各实验组的矢状缝及前囟的宽度均属正常，颅骨、胸骨、肋骨、脊柱及内脏检查均无异常发现。据上所述各实验组对大鼠的胎鼠生长发育未产生影响，无致畸作用。表9 对大鼠繁殖的影响剂量 交配数 孕鼠数受孕率 胎鼠数 平均胎数数 死胎数 吸收胎(％)(只) (只) (％) (只) (/只) (只)(只)对照组 12 975 515.63 0 3112 975 535.89 0 05121083 68 6.8 0 110121083 64 6.4 0 4注交配数系指发现有阴栓的雌鼠数 孕鼠数系指怀胎的雌鼠数表10 对大鼠胎鼠的影响(M±SD)剂量(％) 胎鼠数(只)体重(g) 身长(cm) 尾长(cm)对照组 51 2.948±0.236 3.108±0.238 1.436±0.1081 53 2.983±0.315 3.068±0.235 1.445±0.1155 68 2.846±0.513 3.042±0.432 1.421±0.11010 64 3.056±0.315 3.084±0.364 1.400±0.103表11对大鼠胎鼠骨骼的影响剂 量胸骨缺失及骨化不全颅骨矢状缝宽度(％) (胎鼠数/受检胎鼠数) (毫米，平均值)对照组 5/200.241 7/250.235 7/300.2110 9/350.22注矢状缝宽度在1.0毫米以下均属正常结果与判定(Results and Evaluation)延衰颗粒 对两种性别的昆明种小鼠24小时经口摄入受试物总量为12.8-14.2g/kg，未发现中毒症状及死亡情况，按急性毒性分级，该受试物属实际无毒级类物质。三项致突变试验(小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验、小鼠精子畸形实验、Ames试验)结果均为阴性。30天喂养试验表明该受试物1％、5％、10％剂量，对大鼠血液、生化、脏器病理组织学无明显影响。致畸试验结果表明该受试物对大鼠无致畸胎作用。
二、保健功能评价报告1、样品处理延衰颗粒经研磨粉碎后，过80目筛，供果蝇生存实验用。动物实验时，受试物按不同的比例加入到基料中，制成块状喂养动物。
2、果蝇生存实验实验动物黑腹果蝇(drosophila melanogaster)。
饲养方法采用平底培养指管培养，每管25只，置25℃，相对湿度为65％的暗温箱中，四天换一次培养基。基础培养基配方如下组份玉米份 红 糖 琼 脂 苯甲酸 干酵母粉水 合计含量(％) 10 13.5 1.50.15 1 73.85 100
剂量设1个空白对照组和受试物0.2％，1％，5％3个剂量组。
实验方法收集10h内孵出的处女蝇，用乙醚麻醉后称重分组，雌雄分养，每组雌雄果蝇各100只，给予掺入受试物的基础培养基，每24h统计果蝇的存活数和死亡数，直至全部死亡。
结果见表1，从表1可见，0.2％，1.0％，5.0％剂量组可明显延长雌性果蝇的平均寿命，1.0％、5.0％、剂量组可明显延长雄性果蝇的平均寿命；0.2％剂量组可明显延长雄性果蝇的最高寿命，5.0％剂量组可明显延长雄性果蝇的最高寿命，与对照组比较差异有显著性(P＜0.05)。表1 对果绳生存实验的影响组 别样本数 平均体重(ug) T50(d) 平均寿命(d) 最高寿命(d)♀ 对照 100883 4547.6±13.674.5±3.10.2％ 100892 6162.9±11.4* 78.6±5.34*1.0％ 100846 6060.6±9.26* 74.5±2.885.0％ 100873 6553.4±9.53* 69.7±5.03♂ 对照 100736 4950.8±12.974.5±13.40.2％ 100724 5052.2±10.870.1±5.11.0％ 100732 6061.3±11.5* 80.2±3.65.0％ 100740 6565.2±12.7* 84.3±1.42**表示与对照组比较P＜0.05注T50表示半数死亡时间3、生化指标检测动物16个月龄昆明种小鼠，共40只，3月龄小鼠10只。
湖北省医学实验动物中心提供。
分组根据生产厂家提供的人体推荐日摄入量0.09/kg.d，分别扩大10、20、30倍，即0.9、1.8、2.7g/kg.d，作为受试物低、中、高剂量组剂量。受试物加入到饲料中供动物食用，动物进食量按体重的10％计算，另设老龄对照组及少龄对照组，以普通饲料代替；连续给予受试物一个月；然后采血、处死动物作血清、肝脏过氧化脂质(LPO)含量和肝脏超氧化物歧化酶(SOD)活力的测定。
实验方式实验结束时，取尾血分离血清，测定血清SOD活性、LPO含量；然后处死动物，取肝脏，制备1％的肝匀浆作SOD活力测定。SOD测定采用亚硝酸盐法，LPO测定采用共轭双键法(试剂盒购自南京建成生物工程公司)。
结果见表2.与对照组比较 延衰颗粒低、中、高剂量组可明显减少血清及10％肝匀浆LPO含量(P＜0.01)；低、中、高剂量组可明显升高血清及1％肝匀浆SOD活性(P＜0.01)。表2.对老龄小鼠肝脏和血清SOD、LPO的影响动 LPO(nmol.MDA/mlSOD(NU/mL)剂 量 物(只)(g/kg) 数 血清 10％肝匀浆 血清 1％肝匀浆老龄对照 10 41.3±4.7 262.5±37.3 173.6±61.0259.4±58.80.910 27.8±4.6* 154.3±24.2* 338.8±49.8* 436.5±54.4*1.810 28.3±4.5* 183.4±31.3* 372.5±41.8* 399.3±35.7*2.710 29.6±4.0* 162.7±33.3* 260.1±53.9383.3±49.1*少龄对照 10 28.2±4.0 149.3±41.4 364.7±61.0461.6±50.0与老龄对照组比较*P＜0.01结果与判定(Results and Evaluation)延缓衰老试验结果表明延衰颗粒(1)中、高剂量组可延长果蝇的平均寿命，低剂量组可延长雌性果蝇的最高寿命，高剂量组可延长雄性果蝇的最高寿命；(2)以相当于生产厂家提供的人体推荐日摄入量(4.5g/50kg)的10、20、30倍，即0.9、1.8、2.7g/kg，分别作为受试物低、中、高剂量组。低、中、高剂量组可明显减少血清及10％肝匀浆LPO含量；低、中、高剂量组可明显升高血清、1％肝匀浆SOD活力。依据延缓衰老作用评价程序规定，该受试物有延缓衰老作用。
三、产品稳定性试验报告
四、卫生学检测报告检验结果970310970315970320水分(％) 3.04 3.02 3.02蛋白质(％)5.54 5.65 5.55砷(mg/Kg，以As计)＜0.3 ＜0.3＜0.3铅(mg/Kg，以Pb计)＜0.5 ＜0.5＜0.5汞(mg/Kg，以Hg计)＜0.3 ＜0.3＜0.3细菌总数(个/g) ＜10 ＜10 ＜10大肠菌群(个/100g)＜30 ＜30＜30致病菌 未检出未检出 未检出霉 菌(个/g) ＜10 ＜10＜10酵 母(个/g) ＜10 ＜10＜10
权利要求
一种延衰颗粒，由十二味中药组成，在每单位所述颗粒中白糖占7.1％，滑石粉占2.0％并含微量食用色素和石蜡，其特征是在每单位所述延衰颗粒中，其配方配比如下熟 地15.3％ 枸杞子8.1％北沙参8.1％柏子仁6.1％当 归8.1％麦 冬6.1％桑椹子8.0％女贞子6.1％鳖 甲7.6％西洋参2.2％菟丝子7.6％山 药7.6％
全文摘要
延衰颗粒由熟地、枸杞子、北沙参、当归、桑椹子、鳖甲、菟丝子、柏子仁、麦冬、女贞子、西洋参、山药十二味中药组方而成。可升高体内超氧化物歧化酶SOD的含量,清除体内自由基,减少过氧化脂质LPO的产生,保护细胞膜,本发明具有延缓衰老的保健作用,对阴虚型更年期综合症效果最佳,对热盗汗,失眠健忘、面色潮红、烘热汗出、精神萎靡、烦燥易怒、性欲减退、寐多恶梦、咽干舌燥等症状缓解显著,服药后无不良反应,可用于治疗早衰、男女更年期综合症,具有方便可靠、确实满意的效果。
文档编号A61P39/06GK1240141SQ9811360
公开日2000年1月5日 申请日期1998年6月24日 优先权日1998年6月24日
发明者徐宏生 申请人:徐宏生