专利名称：花椒的提取物,含有它们的药物和化妆品制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种新的提取物，其可以通过使用二氧化碳对花椒的果皮进行提取而获得。本发明还涉及含有上述提取物的药物和化妆品制剂。该提取物具有抗炎和止痛活性，可用于治疗瘙痒。
在中国，花椒的果皮作为调料被广泛地用作调味品。进一步地，在中国和印度的草药中，植物的这个部分被用作局部麻醉剂，并可用来治疗痢疾。有报道称，含有一系列单萜类化合物(例如1，8-伞花醇(cimol)，里哪醇，4-萜品油，石竹烯，苎烯等)的油是一种强驱昆虫剂。
最近，EP 568001公开了这种果实皮的抗病毒活性。
在US 5,137,912中公开了从花椒(其中simulans是bungeanum的异名)根部的树皮中提取得到的白屈菜赤碱具有预防血栓的活性。根据JP01294657，用有机溶剂对果皮进行提取得到了含有异丁酰胺的提取物，该提取物在应用于舌部30秒种后具有局部麻醉作用，并可持续20-80分钟。
现人们已惊奇地发现，用处于临界状态的二氧化碳对花椒果皮进行提取得到的提取物具有显著的止痛活性，而不象用溶剂得到的提取物那样具有局部麻醉活性。在35-55℃，优选的是35-40℃的温度下，在150-300bar，优选的是180-230bar压力下的二氧化碳对细研磨或转形成小丸的花椒的果皮进行提取，可以得到本发明产品。
生成的提取物即可在除去提取水后使用其本身，也可通过使之在不混溶的溶剂(例如脂肪醇和脂肪烃，优选的是正己烷或石油醚)之间分配进行进一步的纯化。
当经皮应用于人类时，生成的提取物被证明具有显著的止痛活性；因此它们在药物和化妆品领域中具有应用价值。
在药物领域中，它们在缓解糖尿病性微血管病的疼痛、痔疼痛、烧伤疼痛以及任何形式的局部疼痛方面具有作用。本发明提取物的进一步应用是治疗瘙痒。
在化妆品领域中，根据本发明，提取物可用于脱毛霜、光浴后制剂、剃须液和霜以及所有需要局部止痛和抗瘙痒作用的皮肤治疗。
采用大鼠坐骨神经-肌肉长趾伸肌(EDL)的实验模型，通过电生理测量，可在体外评价本发明提取物的抗瘙痒活性。
通过心内过量使用潘索托(Penthotal)杀死成年Sprague-Dawley大鼠。解剖带有长束坐骨神经的EDL肌肉并将其置于含有Ringer溶液用于电生理学研究的容器中，上述Ringer溶液每10分钟替换一次。以不同浓度分散受试提取物(最好是加入了表面活性剂)，使之与神经纤维、神经肌肉结合部位以及肌肉进行接触。为了进行电生理实验，将填充有3M KCl的细胞内微电极置于肌肉细胞内，记录电现象(小型终板电位、终板电位、肌肉细胞的膜电位)，其中包括自发的和由神经刺激器诱导的。为了此目的，使神经与刺激器相连接，任意地每秒刺激一次。通过与信号放大器连接的微电极检测肌肉细胞的电现象，并通过数字示波器显示出来。
在0.0005-0.002％这个浓度范围内进行测试时，本发明提取物对神经肌肉突触的传导具有强的、暂短的活性作用，这可由小型终板电位的频率增加以及自发终板电位的出现来证明。相反地，通过溶剂得到的提取物具有局部麻醉活性，并可以降低和抑制神经搏动的传导。
在10名健康志愿者身上，通过评价研究或皮肤热敏感度实验来评价受试提取物的止痛活性。
在用受试产品或相应的安慰剂处理30分钟后，将一个进行性加热的热探针置于受试者的肩胛区。记录受试者认为疼痛的温度值。给予按照实施例VII方法制备得到的0.5ml乳剂，其中含有0.5％按照实施例I方法制备得到的花椒提取物。受试提取物的止痛活性结果列于下表中。
治疗 T0 T30min安慰剂 45.7±1.0 45.3±0.4提取物 46.0±0.8 47.2±0.4本发明提取物可以配制成霜剂、洗液、泡沫剂、凝胶剂，用于皮肤和粘膜给药，也可以配制成软明胶胶囊、硬明胶胶囊、片剂或栓剂；优选将本发明提取物配制成用于皮肤给药的霜剂或泡沫剂。或者是用于系统给药软明胶胶囊、可口嚼的片剂或栓剂。
对于系统给药而言，制剂中提取物的剂量范围为5-100mg/剂，对于局部制剂来说，制剂中提取物的剂量范围为0.05-1％。
下列给出的实施例将进一步说明本发明，但并不限制它。
实施例I-花椒亲脂性提取物的制备根据下述方法，在一个25L用于超临界气体的设备中，对10Kg花椒的果皮进行提取，上述设备配备有两个分离器，作为分馏提取物的冷凝器。
在收获后，将10Kg果皮在不高于60℃的温度下进行机械干燥，然后压制成立方体，并在下列实验条件下，用超临界状态的CO2对其进行提取。
-温度提取器的温度为35℃，初级分离器的温度为30℃，次级分离器的温度为20℃。
-压力提取器的压力为180bar，初级分离器的压力为100bar，次级分离器的压力为50Bar。
CO2的流速为10L/分钟，持续45分钟。提取物在次级分离器中进行浓缩，而大部分存在于植物基质中的水分在初级分离器中被浓缩。在真空且不高于40℃的温度下，于次级分离器干燥提取物，得到了1.5kg面糊样的提取物，其微带黄色，有强烈的气味，并含有约25％的异丁酰胺。在Hibar RT LiChrospher 100RP-18柱上进行HPLC分析，以下表中给出的洗脱条件进行洗脱(1mL/min)。进样量为5μL，溶液浓度为2mg/mL。层析结果见图。表
实施例II-花椒亲脂性提取物的制备在收获后，将10Kg果皮在不高于60℃的温度下进行机械干燥，然后压制成立方体，并在下列实验条件下，用超临界状态的CO2对其进行提取。
-温度提取器的温度为40℃，初级分离器的温度为30℃，次级分离器的温度为20℃。
-压力提取器的压力为205bar，初级分离器的压力为100bar，次级分离器的压力为50Bar。
CO2的流速为10L/分钟，持续45分钟。提取物在次级分离器中进行浓缩，而大部分存在于植物基质中的水分在初级分离器中被浓缩。在真空且不高于40℃的温度下，于次级分离器干燥提取物，得到了1.5kg面糊样的提取物，其微带黄/绿色，并且与实施例1中的提取物具有相同的物理-化学性质，并含有约20％异丁酰胺。
实施例III-花椒亲脂性提取物的制备在收获后，将10Kg果皮在不高于60℃的温度下进行机械干燥，然后压制成立方体，并在下列实验条件下，用超临界状态的CO2对其进行提取提取器的温度为40℃且压力为230bar。提取所用CO2与被提取药物的比例为27-45Kg/Kg药物。提取物在50bar和20℃下于分离器中浓缩。在真空且不高于40℃的温度下干燥后，得到1.3kg面糊样的提取物，其微带黄/绿色，并且与实施例1中的提取物具有相同的物理-化学性质。实施例IV-纯化的花椒亲脂性提取物的制备将实施例1中得到的0.5kg花椒果皮亲脂性提取物溶于2.5L 95％的甲醇水溶液中，并用正己烷提取三次，每次0.5L。用甲醇对上述己烷相进行反洗涤，采用异丁酰胺作为指示剂，其应该保留在甲醇相中。除去非活性的己烷相，合并甲醇相，用0.6L水进行稀释，再用0.6L正己烷进行反提取两次。合并己烷相，用0.3％活性碳脱色，硫酸钠干燥，在真空且不高于40℃的温度下将其浓缩成油状物，得到0.22Kg油状提取物，其具有蜜样稠性，并含有约50％异丁酰胺。实施例V-花椒醇溶液100ml含有20％花椒的油醇溶液 0.50g环(二)甲基硅酮 20.00g醇 100.0ml实施例VI-花椒无醇溶液100ml含有20％花椒的油醇溶液 0.50gPPG-26 Buteth和PEG-40氢化蓖麻油5.00g甲基氯代异噻唑啉酮和甲基异噻唑啉酮 0.10g纯水适量至100.0ml
生育酚 0.10gEDTA二钠 0.10g水 适量至100.0g实施例VIII-花椒流质乳液100g含有20％花椒的油醇溶液 0.50gPEG-20硬脂酸甘油酯和硬脂酸甘油酯 10.00gC10-18甘油三酯10.00g甘油 5.00g玉米胚油 2.00g聚二甲基硅氧烷(Dimethicone)2.00gPEG-25 Laureth-25 2.00g鲸蜡醇 1.00g氢化羊毛脂 0.50g咪唑烷基尿素 0.30g锂蒙脱石(e)羟乙基苯氧乙醇以及对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸乙酯和对羟基苯甲酸丙酯和对羟基苯甲酸丁酯 0.50g生育酚 0.10g水 适量至100.0g
权利要求
1.使用超临界CO2对花椒果皮进行提取所获得的花椒提取物。
2.权利要求1中所述的提取物，其是在35-55℃及150-300bar下，用二氧化碳进行提取而获得。
3.权利要求1和2中所述的含有异丁酰胺20-50重量％的提取物。
4.含有作为活性成分的权利要求1-3中提取物及合适的赋形剂的药物组合物。
5.含有作为活性成分的权利要求1-3中提取物及合适的赋形剂的化妆品组合物。
全文摘要
通过使用超临界CO
文档编号A61K8/00GK1308541SQ99808222
公开日2001年8月15日 申请日期1999年4月7日 优先权日1998年7月7日
发明者E·邦巴德里, B·盖贝塔 申请人:因迪纳有限公司