含有稠合吡咯并咔唑的可形成粒子的组合物的制作方法

专利名称：含有稠合吡咯并咔唑的可形成粒子的组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及非水的可形成粒子的药物组合物，它含有稠合吡咯并咔唑或其衍生物。本发明也涉及将本发明的可形成粒子的组合物与含水介质接触产生的稳定溶液。本发明还进一步涉及药物治疗的方法，包括用本发明的组合物或溶液治疗某种患者。
特殊稠合吡咯并咔唑，如吲哚并咔唑，已经被表征包括如下星形孢菌素和雷别卡霉素(Moody et al.,如上述)；K-252a,K-252b(Kaseet al.,如上述)；K-252c(也叫作星形孢菌素配质)(Moodyet al.,如上述),K-252d和它的衍生物(发表于日本专利申请60-257652,60-295172,62-327858,62-327859,和60-295173)。K-252a,K-252b,K-252c，和K-252d不溶于水(Nakanishi et al.,J.Antibodies,34:1066,(1986))。
一般来说，稠合吡咯并咔唑显示很低的水溶性。星形孢菌素衍生物的干的药物制剂(糖衣药丸，片剂，胶囊)在美国专利U.S.P5,093,330中已有描述，它们可能含有聚乙二醇和聚乙烯吡咯烷酮。包括吲哚并咔唑的传统的药物配方描述在USP5,043,335和PCT公开号WO93/00909中。含水的吲哚并咔唑组合物描述于USP5,599,808中。
自乳化药物提供系统(“SEDDS”)已经开发用于显示水溶性非常低但油溶性好的药物。例如，参见Shab等的International Journal ofPharmaceutics(荷兰)，106:15-23,(1994)。尽管它们的水溶性低，稠合咔唑一般不适合于SEDDS，这是由于他们的油溶性低。
本发明的另一目的是提供一种稳定的悬浮体，它含有悬浮的稠合吡咯并咔唑颗粒，通过口服方法大大改善生物可利用率。
本发明的另一目的是提供一种制备含稠合吡咯并咔唑颗粒的稳定悬浮体的方法，包括将本发明的可形成粒子的组合物与含水介质接触。
本发明的另一目的是提供一种治疗哺乳动物的一种疾病或失调的方法，包括施用治疗有效量的本发明的可形成粒子的组合物。
这些或其他的目的，将在下面的详细描述中明显地体现，并通过本发明者的发现达到，即稠合吡咯并咔唑或它的衍生物可与适当浓度的一种或多种表面活性剂配制成一种非水的可形成粒子的组合物，其中该组合物在与含水介质接触时立刻分散为悬浮的粒子。发明的详细描述因此，在第一个具体实施方式
中，本发明提供一种无水的可形成粒子的组合物，它含有一种稠合吡咯并咔唑和一种表面活性剂。在优选的具体实施方式
中，该稠合吡咯并咔唑具有结构式Ⅰ，或它的一种立体异构体或其药物可接受的盐类形式， 其中环B和环F独立地选自a)一种不饱和6元环碳环芳香环，其中的1至3个碳原子可以被氮原子取代；b)一种不饱和的5元环碳环芳香环，和c)一种不饱和的5元环碳环芳香环，其中或者1)一个碳原子被一个氧原子、氮原子或硫原子取代；2)两个碳原子被一个硫和一个氮、一个氧和一个氮或者两个氮原子取代；或者3)三个碳原子被三个氮原子取代；G-X-W选自a)-(Z1Z2)C-N(R1)-C(Z1Z2)-；b)-CH(R1)-C(=O)-N(R1)-；和c)-N(R1)-C(=O)-CH(R1)-；Z1和Z2在各自出现时，是独立地选自H,H；H,OR；H,SR；H,N(R)2；和一个组中其中Z1和Z2一起形成一个选自=O,=S和=NR的部分；前提条件是至少一种Z1和Z2对形成=O；R选自H、取代的或未取代的具有1至6个碳原子的烷基、OH、具有1至4个碳原子的烷氧基、OC(=O)R1a、OC(=O)NR1cR1d、O(CH2)pNR1cR1d、O(CH2)pOR1b、取代或未取代的具有6至10个碳原子的芳香基烷基、和取代或未取代的杂芳香基烷基；R1独立地选自；a)H、取代的或未取代的具有1至6个碳原子的烷基、取代或未取代的芳香基、取代或未取代的芳香基烷基、取代或未取代的杂芳香基、和取代或未取代的杂芳香基烷基；b)C(=O)R1a；c)OR1b；d)C(=O)NHR1b、NR1cR1d、(CH2)pNR1cR1d、(CH2)pOR1b、O(CH2)pOR1b和O(CH2)pNR1cR1d；R1a选自取代或未取代的烷基、取代或未取代的芳香基和杂芳香基；R1b选自H和取代的或未取代的具有1至6个碳原子的烷基；R1c和R1d各自独立地选自H、取代的或未取代的具有1至4个碳原子的烷基、和具有结构式-(CH2)2-X1-(CH2)2-的连接基团X1选自-O-、-S-、和-CH2-；R2选自H、SO2R2a、CO2R2a、C(=O)R2a、C(=O)NR2cR2d和1至8个碳原子的烷基、2至8个碳原子的烯基、2至8个碳原子的炔基，其中1)每个烷基、烯基、炔基是未取代的；或者2)每个烷基、烯基、炔基被1-3个R5取代；R2a选自1至6个碳原子的烷基、芳香基、OR2b,CONH2、NR2cR2d、(CH2)pNR2cR2d、和O(CH2)pNR2cR2d；R2b选自H和取代的或未取代的具有1至6个碳原子的烷基；R2c和R2d各自独立地选自H，取代的或未取代的具有1至6个碳原子的烷基，和一个结构式-(CH2)2-X1-(CH2)2-的连接基团；R3和R4在各自出现时，是独立地选自a)H、芳香基、杂芳香基、F,Cl、Br、I、CN、CF3、NO2、OH、OR9、O(CH2)pNR11R12、OC(=O)R9、OC(=O)NR11R12、O(CH2)pOR10、CH2OR10、NR11R12、NR10S(=O)2R9、和NR10C(=O)R9；
b)CH2OR14；c)NR10C(=O)NR11R12、CO2R10、C(=O)R9、C(=O)NR11R12、CH=NOR10、CH=NR10、(CH2)pNR11R12、(CH2)pNHR14、和CH=NNR11R12；d)S(O)yR9、(CH2)pS(O)yR9、CH2S(O)yR14；e)具有1至8个碳原子的烷基、具有2至8个碳原子的烯基、和具有2至8个碳原子的炔基，其中1)每个烷基、烯基、或炔基是未取代的；或者2)每个烷基、烯基、或炔基被1至3个R5取代；R5选自具有6至10个碳原子的芳香基、杂芳香基、芳香基烷氧基、杂环烷氧基、羟基烷氧基、烷基氧-烷氧基、羟基烷硫基、烷氧基-烷硫基、F、Cl、Br、I、CN、NO2、OH、OR9、x2(CH2)pNR11R12、x2(CH2)pC(=O)NR11R12、x2(CH2)pOC(=O)NR11R12、x2(CH2)pCO2R9、x2(CH2)pS(O)yR9、x2(CH2)pNR10C(=O)NR11R12、OC(=O)R9、OC(=O)NHR9、邻四氢吡喃基、NR11R12、NR10C(=O)R9、NR10CO2R9、NR10C(=O)NR11R12、NHC(=NH)NH2、NR10S(O)2R9、S(O)yR9、CO2R9、C(=O)NR11R12、C(=O)R9、CH2OR10、CH=NNR11R12、CH=NOR10、CH=NR9、CH=NNHCH(N=NH)NH2、S(=O)2NR11R12、P(=O)(OR10)2、OR14、和具有5至7个碳原子的单糖化合物，其中该单糖的每个羟基是独立地或者不被取代或者被H、具有1至4个碳原子的烷基、具有2至5个碳原子的烷基羰基氧、或具有1至4个碳原子的烷氧基所取代；X2是O、S、或NR10；Q选自1)NR6；2)一种未取代的1至3个碳原子的亚烷基；3)一种取代的1至3个碳原子的亚烷基；4)CH=CH、CH(OH)CH(OH)、O、S、S(=O)、S(=O)2、C(=O)、C(=NOR11)、C(OR11)(R11)、C(=O)CH(R13)、CH(R13)C(=O)、C(R10)2、C(=NOR11)CH(R13)、CH(R13)C(=NOR11)、CH2Z、Z-CH2、CH2ZCH2；Z选自(R11)C(OR11)、O、S、C(=O)、C(=NOR11)、和NR11；R6选自H、SO2R2a、CO2R2a、C(=O)R2a、C(=O)NR1cR1d、和1至8个碳原子的烷基、2至8个碳原子的烯基、2至8个碳原子的炔基，其中1)每个烷基、烯基、和炔基是未取代的；或者2)每个烷基、烯基、和炔基被1-3个R5取代；或交替地，当Q是NR6或C(R10)2时，R6或一个R10与R2连接形成 其中R7和R8各自独立地选自H、OH、具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、具有6至10个碳原子的取代或未取代的芳香基烷基、取代或未取代的杂芳香基烷基、(CH2)pOR10、(CH2)pOC(=O)NR11R12、和(CH2)pNR11R12；或者R7和R8一起形成一个结构式为CH2-X3-CH2的连接基团；X3是一个键、O、S、或N(R10)；R9选自具有1至6个碳原子的烷基、(CH2)r芳香基和(CH2)r杂芳香基；R10选自H、具有1至6个碳原子的烷基、(CH2)r芳香基和(CH2)r杂芳香基；R11和R12在各自出现时，独立地选自1)H和具有1至6个碳原子的取代或未取代的烷基；或者2)R11和R12一起形成-(CH2)2-X1-(CH2)2-；Y选自O、S、N(R10)、N+(O-)(R10)、N(OR10)、和CH2；J选自由一个键、O、CH=CH、S、C(=O)、CH(OR10)、N(R10)、N(OR10)、CH(NR11R12)、C(=O)N(R17)、N(R17)C(=O)、N(S(O)yR9)、N(S(O)yNR11R12)、N(C(=O)R17)、C(R15R16)、N+(O-)(R10)、CH(OH)CH(OH)、和CH(O(C=O)R9)CH(OC(=O)R9)所组成的组中；R13选自具有1至4个碳原子的烷基、芳香基、具有7至14个碳原子的芳香基烷基；R14是氨基酸除去羧基中的羟基后的残余物；
R15和R16在各自出现时，是选自H、OH、C(=O)R10、O(C=O)R9、烷基-OH和CO2R10；R17选自由H、烷基、芳香基、和杂芳香基所组成的组中；m和n独立地选自0、1、和2；p独立地选自1、2、3、和4；r独立地选自0、1、和2；和y独立地选自0、1、和2。
在一些优选的具体实施方式
中，环B和F是苯基。在其它优选的具体实施方式
中，G-X-W选自CH2NR1C(=O)、C(=O)NR1CH2、和C(=O)NR1C(=O)。在其它优选的具体实施方式
中，Q是NR6。
在其它优选的具体实施方式
中，稠合的吡咯并咔唑具有结构式Ⅱ-a 在一些更优选的具体实施方式
中，Z1和Z2是H,R3和R4选自H、烷基、Cl、Br、CH2OH、CH2SOCH2CH3、CH2SO2CH2CH3、NHCONHC6H5、CH2SCH2CH3、CH2SC6H5、NHCO2CH3、CH2OC(=O)NHCH2CH3、N(CH3)2、CH=NNH,CH2N(CH3)2、CH2OCH2CH3,R7选自H和烷基，和R15和R16独立地选自H、烷基、OH、CH2OH、烷氧基和CO2烷基。在某些更优选的具体实施方式
中，稠合咔唑是如表1-A和1-B所示的吲哚并咔唑。
在某些优选的具体实施方式
中，该可形成粒子的组合物进一步含有有机溶剂、脂类、或抗氧剂中的一种或多种。在某些优选的具体实施方式
中，表面活性剂的量为至少约20％(W/W)。在某些更优选的具体实施方式
中，表面活性剂的量为至少约40％(W/W)。在某些更优选的具体实施方式
中，表面活性剂的量为至少约50％(W/W)。
在某些优选的具体实施方式
中，表面活性剂选自聚乙二醇硬脂酸酯、d-∝-生育酚基聚乙二醇琥珀酸酯、poloxy硬脂酸酯、poloxy蓖麻油、聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯、聚乙二醇醚、饱和的聚乙二醇化的甘油酯、聚乙二醇的脂肪酸酯、羟基化的卵磷脂、中等链长的单甘油酯、中等链长的脂肪酸酯、和聚乙烯-丙烯二醇共聚物。在其它优选的具体实施方式
中，所述脂类是一种椰子脂肪酸和丙二醇的二酯。在其它优选的具体实施方式
中，所述有机溶剂选自丙二醇、丙烯碳酸酯、二甲基异山梨醇、和聚乙二醇(PEG)。在其它优选的具体实施方式
中，所述抗氧剂选自抗坏血酸、抗坏血酸的一种脂肪酸酯、和丁基化的羟基苯甲醚。
在一些优选的具体实施方式
中，稠合的吡咯并咔唑存在的浓度为约1至约300mg/ml。在一些更优选的具体实施方式
中，稠合的吡咯并咔唑存在的浓度为约1至约100mg/ml。在一些更进一步优选的具体实施方式
中，稠合的吡咯并咔唑存在的浓度为约1至约50mg/ml。
在一些
具体实施例方式
中，该组合物在室温下是一种半固体或固体。在一些更优选的具体实施方式
中，该半固体或固体是胶囊或片剂的形态。
在另一
具体实施例方式
中，本发明提供一种含有稠合的吡咯并咔唑颗粒在一种含水的悬浮介质中的稳定悬浮体。在一些优选的具体实施方式
中，所述颗粒具有小于约400nm的直径。在一些更优选的具体实施方式
中，所述颗粒具有小于约100nm的直径。
在另一
具体实施例方式
中，本发明提供一种形成含有稠合的吡咯并咔唑悬浮粒子的稳定悬浮体的方法，该方法包括将存在于非水液体中的稠合吡咯并咔唑与一种含水介质接触，所述非水液体中含有20％至大于99％量的表面活性剂。在一种优选的方法中，可形成粒子的组合物是与含水介质在体外接触。在另一优选的方法中，可形成粒子的组合物是与含水介质在体内接触。
在另一
具体实施例方式
中，本发明提供一种形成含有稠合的吡咯并咔唑悬浮粒子的稳定悬浮体的方法，该方法包括(a)将稠合的吡咯并咔唑溶解于一种非水液体中以形成可形成粒子的组合物，该非水液体含有20％至大于99％量的表面活性剂；和(b)将该可形成粒子的组合物与含水介质接触形成稳定悬浮体。
在另一
具体实施例方式
中，本发明提供一种治疗哺乳动物的疾病或失调的方法，该方法包括给哺乳动物施用治疗有效量的存在于非水的含有至少20％(W/W)量的可形成粒子的组合物中的稠合吡咯并咔唑。
在另一
具体实施例方式
中，本发明提供一种治疗哺乳动物的疾病或失调的方法，该方法包括(a)将存在于非水的含有至少20％(W/W)量的表面活性剂的可形成粒子的组合物中的稠合吡咯并咔唑与一种含水介质接触，从而形成含有悬浮粒子的稳定悬浮体；和(b)给该哺乳动物施用治疗有效量的该稳定悬浮体。
在一些优选的具体实施方式
中，表面活性剂的量至少为40％(W/W)。在其它优选的具体实施方式
中，疾病或失调是一种神经病学上的失调，或癌症例如前列腺癌。在其它的优选的具体实施方式
中，患者是哺乳动物。
这里给出的材料、方法、和实例是试图说明，而不是试图限制本发明的范围。所有发表的文献、专利申请、专利和这里提及的其它的参考文献一起作为参考。除非另加定义，所有的技术和科学的术语具有它们所属领域的意义。
本发明涉及非水的可形成粒子的组合物，它含有稠合吡咯并咔唑和表面活性剂。通过与含水介质接触，该可形成粒子的组合物立刻分散成为悬浮粒子，从而形成稳定的悬浮体，显著改进口服给药的稠合吡咯并咔唑化合物的生物利用率。
本发明的可形成粒子的组合物在室温下可以是液体、半固体或者固体。如果是液体，该组合物可以包含在胶囊中。如果是半固体或固体，该组合物可以是胶囊或片剂的形式。
如这里所用，“非水”组合物试图意指一种含有0％至约10重量％水的组合物。如这里所用，“可形成粒子的组合物”意指一种在进入一种含水介质后立刻分散为悬浮粒子的组合物。如这里所用，“悬浮粒子”意指胶束、微球、微滴或其它基本上非晶体的物理结构，它在一种含水介质中保持悬浮，而基本上不发生相分离。如这里所用，“含水介质”意指任何含有大于10％水的介质，在其中本发明的组合物可以形成粒子。
初始时，一种稠合吡咯并咔唑溶于非水的可形成粒子的组合物。接着，该可形成粒子的组合物与一种含水介质接触形成含水悬浮体。通过与含水介质接触，含有稠合吡咯并咔唑的非水的可形成粒子的组合物立刻形成适当大小的粒子，即，无须引入能量。因此，当开始溶于非水的可形成粒子的组合物中时，与直接放入相似的含有预先形成粒子的含水悬浮物的溶解度相比较，稠合吡咯并咔唑可以具有较高的溶解度。
该可形成粒子的组合物可以与含水介质在体外接触，即使其在被哺乳动物摄取前预先稀释。另一方面，与含水介质的初始接触可以在体内，例如，与哺乳动物胃肠道中的组合物的含水物质接触。
当对可形成粒子的组合物进行预稀释时，优选的稀释比是从大约1∶1000(1份制剂比999份含水介质)至大约1∶2(1份制剂比1份含水介质)。更优选的稀释比是从大约1∶500(1份制剂比499份含水介质)至大约1∶3(1份制剂比2份含水介质)。按照一般的规则，对人类给药的合适的比例是大约1∶250，粗略地对应于1ml单位剂量分散到8-盎司的玻璃杯的含水液体中。
另外还发现，产生的含有悬浮的稠合吡咯并咔唑粒子的溶液是稳定的悬浮体。优选的是含在这种介质中的粒子具有小于400nm的直径。更优选的是这种粒子具有小于100nm的直径。
含有给定量制剂的给定体积水的光学透明度给出粒子大小的有用的显示。这是由于粒子散射可见光，较大的粒子造成较强的散射。一般来说，光学透明性越强，粒子的尺寸越小。高的光学透明性，即不可见的或接近可见的兰色光雾，一般指示粒子尺寸小于100nm。显著的兰色光雾一般指示粒子尺寸在大约100nm至400nm。并不试图用理论限制，可以注意到，对给定的配方，粒子的尺寸基本上趋于常数，而与稀释比无关。
本发明的制剂在室温下是液体、半固体或固体可能依赖于选择的成分或其它的相关因素如商业生存性，给药和类似的因素。例如，一种固体或半固体制剂有利于将单位制剂的稠合吡咯并咔唑制成胶囊型，包括硬明胶和软明胶胶囊、和片剂。当液体或固体制剂与含水介质例如胃肠道的液体接触时，制剂分散为悬浮的粒子，其中的稠合吡咯并咔唑是生物学上有效的。
惰性组分(即稠合吡咯并咔唑以外的组分)在室温下全部是液体的组合物可以通过不用加热的简单的组分混合来制备。称出需要量的稠合吡咯并咔唑并溶于惰性组分的混合物中，不需要加热。适度的加热，优选小于60℃，能够加速惰性组分的完全混合，并加速稠合吡咯并咔唑的溶解，或两者都加速。
含有一种或多种在室温下为固体组分的组合物的制备在适当高的温度下进行，优选小于60℃。适度的加热是有用的，而过度的加热会造成制剂的一种或多种组分的分解。例如，吐温-80在温度60℃以上会出现分解。在短链的聚乙二醇例如PEG 400存在并在60℃至90℃的温度范围内，能观察到一些稠合吡咯并咔唑的不稳定性。
吐温80的分解可能在90℃保持一个小时以上时出现。正如本领域一般的熟练人员所知，热的有害作用是随时间累积的。因此，当加热时，温度和时间将会相互制约平衡。
本发明全部的可形成粒子的组合物的配方有很宽的范围。优选的是可形成粒子的组合物中所有稠合吡咯并咔唑以外的组分是食品级材料或GRAS(一般认为是安全的)材料。关于GRAS材料的信息可以在“无活性添加物指南”(Inactive Ingredient Guide)，美国食品和药品局出版(药品信息资源分部，Rockville,MD)中找到。该书披露的全部内容在此整体引作参考。“无活性添加物指南”提供了被证实或在一定条件下被证实的供人类所用的通常市售药品产品的所有无活性添加物的列表。
本发明的组合物优选含有一种表面活性剂。尽管表面活性剂可以以任何产生可形成粒子的组合物的量存在，典型的组合物含有从20％至大于99％的表面活性剂。优选的表面活性剂的量为至少30％，至少40％，或至少50％，依赖于组合物的其它组分。
表面活性剂包括但不限于，聚氧乙烯硬脂酸酯，聚氧乙烯蓖麻油，聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯(脱水山梨醇类)，聚乙二醇醚，饱和的聚乙二醇化的甘油酯，聚乙二醇脂肪酸酯，羟基化的卵磷脂，中等链长的单甘油酯，中等链长的脂肪酸酯，聚乙烯/丙烯二醇共聚物，聚乙二醇硬脂酸酯，d-∝-生育酚基聚乙二醇琥珀酸酯，聚氧亚烃基(poloxyl)硬脂酸酯(例如，Myrj-52)，和聚氧亚烃基蓖麻油。
聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯(聚脱水山梨醇类)是非离子表面活性剂(洗涤剂)，它可以由混合的脂肪酸组成。商业上现有的例子是吐温20(聚氧乙烯(20)脱水山梨醇单月桂酸酯)，吐温40(聚氧乙烯(20)单棕榈酸酯)，和吐温80(聚氧乙烯(20)脱水山梨醇单油酸酯)。
优选的聚乙二醇醚是PEG-4-异辛基苯基醚，这是一种非离子表面活性剂。商业上现有的聚乙二醇醚表面活性剂的例子是TritonX-100、TritonX-114、TritonX-405、和TritonN-101。非离子表面活性剂是优选的。
其它有用的表面活性剂的例子是饱和的聚乙二醇化的甘油酯，由单、二、或三甘油酯组成；聚乙二醇的二脂肪酸酯，例如Gelucire44/14；羟基化的卵磷脂，例如CentroleneA；中等链长的单甘油酯，例如甘油基单辛酸酯(Imwitor308，CapmulMCM C-8)；中等链长的单甘油酯和二甘油酯，例如，甘油基辛酸酯/癸酸酯，(CapmulMCM)；聚乙烯/丙烯二醇共聚物；环氧乙烷和环氧丙烷的嵌段共聚物(例如，Poloxamer 188,PluronicF-68)；乙氧基化的蓖麻油(例如,CremophorEL)；和乙氧基化的羟基硬脂酸(例如,SolutolHS 15)。某些表面活性剂在室温下是固体或半固体，例如，Poloxamer 188，甘油基单辛酸酯，和Gelucire44/14。另外的表面活性剂是那些可以在“药物赋形剂手册，第二版，由药学出版社，伦敦和美国药学联合会出版”中找到，该书是本领域通用的教科书，在此整体引作参考。
可形成粒子的组合物也可以包括一种有机溶剂，一种脂类，一种抗氧剂或一种这些组分的结合。这些组分包括可在“药物赋形剂手册”中找到的那些组分，并且包括任何在本领域已知的在药学配方中可用的组分。适当组分的选择是本领域熟练人员所知的。
在本发明的一些具体实施方式
中，引入一种有机溶剂能改进可形成粒子的组合物中的稠合吡咯并咔唑的溶解度。一些有用的有机溶剂在室温下形成固体(或半固体)，例如，聚乙二醇1450。有机溶剂的作用可能部分地依赖于可形成粒子的组合物中的特定的稠合吡咯并咔唑。按照一般的指导，有机溶剂包括但并不限于，丙烯碳酸酯，二甲基异山梨醇，苄醇，和二元醇如丙二醇和聚乙二醇(PEG)。如这里所用，“聚乙二醇”或“PEG”意味着一种一般结构式为H(OCH2CH2)nOH的液体或固体聚合物，其中的n至少是4。
在本发明的一些具体实施方式
中，合适的抗氧剂是作为一种组分包括在可形成粒子的组合物中的。如这里所用，“抗氧剂”是试图指任何可用于阻滞氧化反应的变质作用，或抑制氧或过氧化物促进的反应的物质。抗氧剂包括但并不限于，抗坏血酸；抗坏血酸的脂肪酸酯，例如，抗坏血酸棕榈酸酯；和丁基化的羟基苯甲醚。抗氧剂在稠合吡咯并咔唑含有一种对氧化反应敏感的官能团例如硫醇或硫醚时是特别有用的。这种稠合吡咯并咔唑的特殊例子是吲哚并咔唑化合物Ⅱa-51，它含有两个硫醚官能度。一种抗氧剂可以通过清除氧化性化合物或抑制氧化反应起作用。
在本发明的一些具体实施方式
中，合适的脂类包括在可形成粒子的组合物的组分中。如这里所用，“脂类”是试图指一种脂肪，油，蜡，固醇，甘油醚，甘油三酯，或它们的结合。引入脂类能够改变粒子的特征，包括粒子尺寸。脂类能够改变粒子特征的一种方式是造成微乳状液而不是胶束的形成。脂类导致的粒子特征变化也能够影响生物活性。
尽管这里描述的组合物可以令人信服地使用任何具有差的水溶解度特征的治疗学上的物质，可形成粒子的组合物优选含有稠合吡咯并咔唑。可形成粒子的组合物中的稠合吡咯并咔唑以1至300mg/ml的浓度存在。更优选的是稠合吡咯并咔唑以1至100mg/ml的浓度存在。更进一步优选的是稠合吡咯并咔唑以1至50mg/ml的浓度存在。
如这里所用，“稠合吡咯并咔唑”意指一种化合物，它具有稠合吡咯并咔唑核结构 其中G、X、或W中的至少一个是氮原子，B是一种芳香基或杂芳香基团，并且*是指另外的稠合环系统的连接点。
这里提供的核结构是一般的指导方式，并不是用作限制本发明的范围。例如，一些核指示一些原子的存在是用于说明的目的。这种原子可以键合另外的基团，或进一步被取代而不偏离本发明的精神。
因此，吡咯并咔唑核结构包括但并不限于，结构式Ⅰa的结构 其中的Q可以是含有一个或多个氮或碳的部分。这种结构包括但并不限于吲哚并咔唑，茚并咔唑，和桥式茚并咔唑。
如这里所用，“茚并咔唑”意指结构式Ⅰa的一种化合物，其中Q是氮，Y是一个化学键 这些化合物意指包括但并不限于，结构中的咔唑上的氮和吲哚形成环状桥部分 这种桥式结构包括但并不限于如K-252d所示的微生物导出材料的衍生物。
如这里所用，“茚并咔唑”意指结构式Ⅰa的一种化合物，其中的Q不是氮。这些化合物包括但并不限于其中Q是一个或多个碳的化合物。例如，在一些茚并咔唑中，Q是单个的碳原子 如这里所用，“桥式茚并吡咯并咔唑”意指结构式Ⅰa的一种化合物，其中Q是含有至少一个碳原子的部分，它与咔唑衍生物的氮原子连接形成桥部分 适合于本发明的可形成粒子的组合物的稠合吡咯并咔唑是稳定的化合物。这里所用的“稳定化合物”或“稳定结构”是指一种化合物，它足以坚固到从反应混合物中保持完好地分离成有用纯度，并优选能够配方成一种有效的治疗制剂。
稠合吡咯并咔唑可以进一步被取代。此处所用的“取代”是指标记原子上的一个或多个氢原子被此处称为“取代基”的选择的基团所取代，只要不超过被取代原子的价态。取代的结果产生稳定的化合物。
如这里所用，术语“烷基”意味着一种具有1至8个碳原子的直链、环、或支链的烷基基团，例如，甲基，乙基，丙基，异丙基，丁基，异丁基，仲丁基，叔丁基，戊基，异戊基，新戊基，1-乙基丙基，己基，辛基，环丙基，和环戊基。含有烷基基团的烷基部分，例如烷氧基，烷氧基羰基，和烷基氨基羰基基团，具有上述定义烷基的相同意义。低碳烷基基团是优选的，它们是具有1至4个碳原子的如上述定义的烷基基团。
烷基基团和含有取代基团的烷基部分例如芳烷基、烷氧基、芳香基烷氧基，羟基烷氧基，烷氧基-烷氧基，羟基-烷硫基、烷氧基-烷硫基、烷基羰基氧，羟基烷基和酰氧基基团可以是被取代或未被取代的。取代的烷基基团具有1至3个独立选择的取代基，优选羟基、低碳烷氧基，低碳烷氧基-烷氧基，取代或未取代的芳香基烷氧基-低碳烷氧基，取代或未取代的杂芳香基烷氧基-低碳烷氧基，取代或未取代的芳香基烷氧基，取代或未取代的杂芳香基烷氧基，卤素，羧基，低碳烷氧基羰基，硝基，氨基，单-或二-低烷基氨基，二氧戊环，二氧六环，二硫戊环，二硫酮，呋喃，内酯，或内酰胺。
如这里所用，术语“烯基”意指包括含有至少一个碳-碳双键的直链、环、或支链的烃链。烯基基团的例子包括乙烯基，丙烯基，3-甲基丁烯基，和环己烯基。如这里所用，术语“炔基”意指包括含有至少一个碳-碳三键的直链、环、或支链的烃链。炔基基团的例子包括乙炔基，丙炔基，3-甲基丁炔基，和环己炔基。
如这里所用，含有酰基基团如酰氧基的“酰基”部分意指包括具有1至6个碳原子的直链、支链、或环的烷酰基基团，例如，甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁酰基、戊酰基、新戊酰基或己酰基。
如这里所用，术语“碳环”是指环状基团，其中的环的部分仅由碳原子组成。这些包括但并不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基。术语“碳环芳香环”意指包括的碳环也是芳香环。术语“杂环”是指环状基团，其中环的部分包括至少一个杂原子如O、N或S。杂环基基团包括杂环芳香基和杂环烷基基团。
如这里所用，术语“芳香基”意味着一种含有6至12个碳原子的芳香环例如苯基、联苯基和萘基。优选的芳香基基团包括未取代或取代的苯基和萘基。如这里所用的术语“杂芳香基”是指芳香环中的一个或多个环碳原子被杂原子(即非碳原子)如O、N或S代替。优选的杂芳香基包括吡啶基、嘧啶基、吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、三唑基、四唑基、喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、噻唑基、吡唑基和苯并噻唑基基团。术语“杂原子烷基”是指环烷基基团中的一个或多个环碳原子被杂原子如O、N或S取代。
如这里所用，术语“芳烷基”(或者“芳香基烷基”)意指具有7至15个碳原子的含有一个烷基并带有芳香基的基团。芳烷基的例子包括但不限于苄基、苯乙基、二苯甲基和萘甲基基团。取代的芳香基，取代的杂环和取代的芳烷基各自含有1至3个独立地选择的取代基，它们优选的是低碳烷基、羟基、低碳烷氧基、羧基、低碳烷氧基羰基、硝基、氨基、单或双的低烷基胺、和卤素。
优选的由氮原子形成的杂环基团包括吡咯烷基、哌啶基、哌啶子基、吗啉基、吗啉子基、硫代吗啉子基、N-甲基哌嗪基、吲哚基、异吲哚基、咪唑、咪唑啉、噁唑啉、噁唑、三唑、噻唑啉、噻唑、异噻唑、噻二唑、三嗪、异噁唑、羟吲哚、吲哚氧基、吡唑、吡唑啉酮、嘧啶、吡嗪、喹啉、异喹啉、和四唑基团。优选的由氧原子形成的杂环包括呋喃、四氢呋喃、吡喃、苯并呋喃、异苯并呋喃、和四氢呋喃基团。优选的由硫原子形成的杂环包括噻吩、硫茚、四氢噻吩、和苯并噻吩。
如这里所用，“羟烷基”基团是上面带有羟基基团的烷基基团。如这里所用，“羟基烷氧基”基团是上面带有羟基基团的烷氧基基团。如这里所用，“卤素”是指氟、氯、溴和碘。
如这里所用，术语“杂芳香基烷基”是指芳香基烷基基团，其芳香环部分含有一个杂原子。术语“氧”指示一个氧原子的存在。因此“烷氧”基是通过一个氧连接的烷基，并且“羰基氧”基团是通过一个氧原子连接的羰基。
如这里所用，术语“杂环烷基”和“杂环烷氧基”意味着一个烷基或一个烷氧基，它们的烷基部分带有一个杂环基团。术语“芳香基烷氧基”意味着一个烷氧基，它的烷基部分带有一个芳香基基团。如这里所用，术语“烷基羰基氧”意味着一个如式-O-C(=O)-烷基的基团。
如这里所用，术语“烷氧基-烷氧基”是指一个烷氧基基团，它带有一个连接在它的烷基部分的烷基氧取代基。术语“烷氧基-烷硫基”是指一个烷硫基基团(即基团的结构式为-S-烷基)，它含有一个连接在它的烷基部分的烷氧基取代基。术语“羟基-烷硫基”是指一个烷硫基基团(即基团的结构式为-S-烷基)，它含有一个连接在它的烷基部分的羟基取代基。
如这里所用，术语“单糖类”具有其单糖的习惯的含义。如这里所用，术语“氨基酸”是指一个分子中含有氨基和羧基两个基团。氨基酸的具体例子包括a-氨基酸；即一般式为HOOC-CH(NH2)-(支链)的羧酸。氨基酸的支链包括天然出现的和非天然出现的部分。非天然出现的(即非天然的)氨基酸支链是用于取代天然出现的氨基酸支链的部分，例如氨基酸的模拟物。例如可参见Lehninger的“生物化学”，第二版，Worth公司出版，1975，第73-75页，在这里引作参考。在一些具体实施方式
中，这里描述的化合物的取代基包括除去其羧基中的羟基以后的残余物；即式-C(=O)CH(NH2)-(支链)的基团。
稠合吡咯并咔唑优选的是以治疗有效的量存在于这里所描述的组合物中。如这里所用，“治疗有效的量”是指能有效防止或治疗特定失调的化合物的量。这种失调包括但并不限于那些病理学的和神经病学的失调，它们与目标受体的异常活动有关，其中的治疗或防止包括通过受体与活性药品物质的接触，抑制、诱导或促进这种活动。将会理解，稠合吡咯并咔唑的浓度和剂量将依赖于给药的总剂量、使用化合物的化学特征、摄取的途径、病人的年龄、体重和症状等因素。通过一般的指导，人类的剂量可以在每天给药0.1mg至大约1000mg的范围。优选的剂量是大约1mg至大约500mg的每天两次给药。更优选的剂量是大约10mg至大约300mg，每天两次。
稠合吡咯并咔唑是以本领域的熟练技术人员所知的各种形态存在。这些形态包括但不限于药物可接受的盐类，助药剂，多形体，立体异构体等。术语“药物可接受的”是指那些化合物、材料、组合物、和/或药剂形态，在健康的医疗判断的范畴内，适于与人类和动物的组织接触而没有过度的毒性、刺激、过敏反应或其它的与合理的效益/危险比相匹配的并发症。
如这里所用，“药物可接受的盐类”是指所披露的化合物的衍生物，其中的母体化合物通过制成它们的酸或碱的盐而改进。药物可接受的盐类的例子包括但并不限于，碱性残余物例如胺的无机酸或有机酸盐，酸性残余物例如羧酸的碱金属或有机盐，等等。药物可接受的盐类包括传统的无毒盐类或母体化合物形成的季铵盐，例如，从无毒的无机或有机酸形成。例如，这些传统的无毒盐类包括那些从无机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等得到的衍生物；从有机酸例如从乙酸、丙酸、琥珀酸、羟基乙酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、双羟萘酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、对氨基苯磺酸、2-乙酸基苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙烷二磺酸、草酸、羟乙磺酸等制得的盐。
本发明的药物可接受的盐类可以从含有碱或酸部分的母体化合物用传统的方法合成。一般说来，这些盐类可以通过将这些化合物的游离酸或碱的形态与化学计量的适当的碱或酸在水或有机溶剂或两者的混合物中反应制备。一般说来，非水介质优选如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈。合适的盐类的列表可在Remington的“药物科学”，第17版，Mack出版公司出版，Eastan,PA,1985，第1418页找到，其披露的内容在此引作参考。
本发明的稠合吡咯并咔唑可以以助药剂的形式存在。如这里所用，“助药剂”是试图包括任何共价键键合的载体，当这种助药剂给药到哺乳动物患者时，它在体内释放出本发明的如结构式(Ⅰ)的母体活性药物或其他结构式的化合物。由于已知这种助药剂能促进大量的需要药品的质量(例如，溶解度、生物活性和制造等)，本发明的化合物可以以助药剂的形态提供。因此，本发明规划了所要求的化合物的助药剂、含有该化合物的组合物以及提供这种化合物的方法。
本发明的一种化合物，例如结构式Ⅰ的助药剂，可通过改进存在于化合物中的官能团来制备，这种改进的分解方式为或常规地转变或在体内转变为母体化合物。
于是，助药剂包括，例如，本发明的化合物，其中的羟基、氨基、或羧基被任何基团键合，当助药剂给药到哺乳动物患者时，再分别分解形成游离羟基、游离氨基、或游离羧基。其例子包括但不限于醇和胺的官能团的乙酸酯、甲酸酯和苯甲酸酯衍生物；和烷基、碳环、芳香基、和烷基芳香基的酯如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、环丙基、苯基、苄基和苯乙基的酯等。
本发明的化合物可用一系列本领域熟练技术人员已知的方法制备。例如，本化合物的合成可用如下描述的方法，或在其基础上变化的为熟练人员所知的方法。本发明相关的披露的所有工艺过程预期可在任何规模实施，包括毫克、克、若干克、千克、若干千克或商业上的工业规模生产。
可以理解，本发明的化合物可以含有一个或多个不对称取代的碳原子，并且可以分离出光学活性的或消旋的形态。因此，包括所有手性的，或非对映异构的消旋形态和所有几何异构形态，除非特别地指出特殊的立体化学或异构体形态。怎样制备和分离这些光学活性形态在本领域是众所周知的。例如，立体异构体的化合物可用标准的技术分离，包括但不限于，消旋形态的再溶解，常规的、反向的、和手性的色谱法，选择性成盐，再结晶等，或用从手性原材料的合成或仔细的标的手性中心的合成。
将会容易地理解，存在的官能团在合成过程中可以含有保护基团。例如，结构式Ⅰa化合物的氨基酸支链取代基可被保护基团，如苄氧基羰基或t-丁氧基羰基基团取代。保护基团本质上是能够选择性地附加在官能团上或从官能团上除去的化学官能团，例如，羟基基团和羧基基团。这些基团存在于化合物中使暴露在化学反应条件下的化合物的官能团惰性化。本发明可以使用各种保护基团。优选的保护基团包括苄氧基羰基(Cbz；Z)基团或叔-丁氧基羰基(Boc)基团。根据本发明的其它保护基团可以在Greene,T.W.和Wuts P.G.M.的“有机合成中的保护基团”，第二版，Willy and Son出版，1991中找到。
稠合吡咯并咔唑，例如吲哚并咔唑可用已知的方法合成，例如，美国专利USP4923986；4877776；5093330；5461146；5468872；5621110；5621101；5516771和5599808；和PCT公开号WO93/08809和WO97/46565，披露的内容在此整体引作参考。另外的制备方法在Moody et al.,J.Org.Chem.57:2105-2114(1992)中给予了阐述。
稠合吡咯并咔唑，例如吲哚并咔唑，以及另外的化合物，其中的Q不是单个氮原子，可用已知的方法合成，例如，USP5475110；5591855；5594009；5705511；5616724和5801190；披露的内容在此整体引作参考。
稠合吡咯并咔唑，例如桥式茚并咔唑，可用已知的方法合成，例如，美国专利申请号09/325140，披露的内容在此整体引作参考。
在上述所有文献中公开的稠合吡咯并咔唑预期可用于本发明的可形成粒子的组合物。其它典型的稠合吡咯并咔唑是表Ⅰ-A和Ⅰ-B中提出的吲哚并咔唑，其中每个条目对应于附带的结构。
表Ⅰ-A Ⅱ-a化合物 R4R3R15R16z1；z2Ⅱa-1 H HCH2N3OH H；HⅡa-2NHCONHC6H5HCO2CH3OH H；HⅡa-3CH2SOC2H5HCO2CH3OH H；HⅡa-4 H HCH2OH OCH3H；HⅡa-5 H HCONHC2H5OH H；HⅡa-6 H HCH=NNH-2- OH H；H咪唑啉Ⅱa-7 H HCH2NH-Gly OHH；HⅡa-8 H HCON(CH3)2OHH；HⅡa-9 H H-CH2NHCO2-(with X) H；HⅡa-10 Br HCO2CH3OHH；HⅡa-11 H HCONH2OHH；HⅡa-12 H HCH2OH OHH；HⅡa-13 H HCONHC3H7OHH；HⅡa-14 H HCH2NH-Serine OHH；HpⅡa-15 H H CH2SOCH3OHH；HⅡa-16H H CH=NOH OHH；HⅡa-17H H CON-吗啉 OHH；HⅡa-18H H CH2NH-脯氨酸OHH；HⅡa-19H HCH=NNHC(=NH)NH2OHH；HⅡa-20Br Br CO2CH3OH=OⅡa-21H H CONH(CH2)2OH OHH；HⅡa-22H H CO2CH3OH=OⅡa-23H H HOHH；HⅡa-24H H CH=NNHCONH2OHH；HⅡa-25H H CH2OCOCH3OHH；HⅡa-26H H -CH2OC(CH3)2O-(与x) H；HⅡa-29 NHCONHC2H5H CO2CH3OHH；HⅡa-30 CH2SC2H5H CO2CH3OHH；HⅡa-31Br H CH2OH OHH；HⅡa-32Br Br CO2CH3OHH；HⅡa-33 CH2SC6H5H CO2CH3OHH；HⅡa-34C1 C2 CO2CH3OHH；HⅡa-36H H CONHC6H5OHH；HⅡa-37H H CH2SO OHH；HⅡa-38H H CHNHCO2C6H5OHH；HⅡa-39 NHCONHC2H5NHCONHC2H5CO2CH3OHH；HⅡa-40 N(CH3)2H CO2CH3OHH；HⅡa-41CH3H CO2CH3OHH；HⅡa-42 CH2OCONHC2H5H CO2CH3OHH；HⅡa-43 NHCO2CH3H CO2CH3OHH；HⅡa-44Br Br CH2OHOHH；HⅡa-45Br Br CONHC6H5OHH；HⅡa-46Br Br CONHCH2CH2OHOHH；HⅡa-47 CH2OC2H5H CO2CH3OHH；HⅡa-48 CH2N(CH3)2H CO2CH3OHH；HⅡa-49 CH2SO2C2H5H CO2CH3OHH；HⅡa-50 CH2S H CO2CH3OHH；HⅡa-51 CH2SC2H5CH2SC2H5CO2CH3OHH；HⅡa-52 CH=NNHH CO2CH3OHH；HⅡa-53 CH2S H CO2CH3OHH；HⅡa-54 CH2S(O) H CO2CH3OHH；HⅡa-55 CH2S(O) H CO2CH3OHH；HⅡa-56 CH2SC2H5CH2OH CO2CH3OHH；HⅡa-57 H H CH2NHCO2CH3OHH；HⅡa-58 Br H CONH2OHH；HⅡa-59 H H CH2SC6H5OHH；HⅡa-60 H H CH2S-2-吡啶基OHH；HⅡa-61 H H CH2SOC6H5OHH；H表Ⅰ-B 化合物R4R3R2R6Z1；Z2Ⅳa-11H HCH2CH=CH2H H；HⅣa-2 BrH HH H；HⅣa-3 H HCH2CH=CH2CH2CH=CH2H；HⅣa-41H H HCH2CH=CH2H；HⅣa-5 H H HH =OⅣa-6 H H HH H；H′Ⅳa-1和Ⅳa-4是组分的1.5至1.0混合物。
一些优选的吲哚并咔唑是具有下列结构的结构式Ⅱa-4,Ⅱa-12,和Ⅱa-51表示的化合物。 本发明的非水的可形成粒子的组合物显著改进了稠合吡咯并咔唑的生物利用率。例如，在水中，化合物Ⅱa-12基本上没有溶解度。在纯的吐温80中，它具有28.43mg/ml的溶解度。当直接放置在2％的吐温80水溶液中时，化合物Ⅱa-12具有0.18mg/ml的溶解度。当开始溶于吐温80(一种可形成粒子的组合物)并接着用水稀释50倍时(产生2％吐温80的水溶液)，最终的溶解度是0.57mg/ml。
因此，开始将稠合吡咯并咔唑溶于这种特定的可形成粒子的组合物中，在最终的溶液中稠合吡咯并咔唑的溶解度达到了高于3.2倍的增加。因为开始与含水介质的接触在体外或在体内出现，非水的可形成粒子的组合物可用于哺乳动物的稠合吡咯并咔唑的治疗给药。
本发明的另一特征是提供形成含有稠合吡咯并咔唑粒子的稳定悬浮物的方法。该方法典型地包括(a)将稠合吡咯并咔唑溶解于一种含有大约20％至大于99％量的表面活性剂的非水液体中，由此形成含有稠合吡咯并咔唑的可形成粒子的组合物，和(b)将该可形成粒子的组合物与含水介质接触。可形成粒子的组合物可与含水介质在体外或体内接触。优选的表面活性剂的量为至少30％，并且更优选的是至少40％，特别优选的是至少50％。可形成粒子的组合物选择地含有一种有机溶剂，一种脂类，一种抗氧剂或这些组分的结合。
本发明的另一特征是提供治疗哺乳动物例如人类中的神经病学上的疾病或失调的方法。该方法包括将稠合吡咯并咔唑配制成非水的、含有稠合吡咯并咔唑的可形成粒子的组合物，其中所含表面活性剂的量为至少20％(W/W)，并给哺乳动物施用治疗有效量的可形成粒子的组合物。在该方法的一种具体实施方式
中，可形成粒子的组合物与含水介质在体外接触，并形成稳定悬浮物。然后将治疗有效量的稳定悬浮物对哺乳动物给药。在另一具体实施方式
中，是将治疗有效量的可形成粒子的组合物直接对哺乳动物给药，它在体内与含水介质接触。
本发明的另一特征是提供治疗哺乳动物例如人类的癌症的方法。该方法包括将一种稠合吡咯并咔唑配制成非水的、含有稠合吡咯并咔唑的可形成粒子的组合物，其中所含表面活性剂的量为至少20％(W/W)，并给哺乳动物施用治疗有效量的可形成粒子的组合物。在该方法的一种具体实施方式
中，可形成粒子的组合物与含水介质在体外接触，并形成稳定悬浮物。然后将治疗有效量的稳定悬浮物对哺乳动物给药。在另一具体实施方式
中，是将治疗有效量的可形成粒子的组合物直接对哺乳动物给药，它在体内与含水介质接触。
本发明进一步用下述的实施例予以说明。这些实施例仅提供说明的目的，并不能认为是对本发明的范围或内容的限制。
根据本发明的大量的可形成粒子的组合物，使用各种组分并以相对不同的含量配制。一些可形成粒子的组合物的配方提供在如下的表2中。
表2典型配方



在老鼠中的生物利用率化合物Ⅱa-12在老鼠前列腺癌型的肿瘤显示了抗癌活性。涉及配制成非水的可形成粒子的组合物的化合物Ⅱa-12的生物利用率的研究使用老鼠进行。药物动力学参数在对老鼠静脉给药(i.v.)或口服给药后进行测定。此外，考察了化合物Ⅱa-12的三种不同配方单次给药后的绝对口服生物利用率(F)。
雄性Sprague-Dawley老鼠被或者给予大剂量的尾部静脉给药，或者通过管饲法口服三种配方中一个剂量。配方描述于下面的表2A中。配方(a)不是可形成粒子的组合物。
表2A对老鼠研究的配方

在预定时间点收集血液样品。化合物Ⅱa-12的血浆水平用高压液相色谱(HPLC)测定。药物动力学参数的平均值汇总于下面的表3中。在表3中，Cmax是血浆浓度峰值；Tmax是对应于血浆浓度峰值的时间；Tt/2是显著消失半衰期；AUC0-4是曲线下的面积(血清浓度对应时间曲线)；F％是绝对生物利用率(总剂量/曲线下面积)。
表3药物动力学数据总结

亲水的配方(a)的口服生物利用率较可形成粒子的组合物(b)和(c)的低。这些数据表明通过使用本发明的可形成粒子的组合物，在老鼠中的生物利用率可以显著地改进，即大于300％。狗中的生物利用率在禁食的小猎兔狗中测定了化合物Ⅱa-12两种液体配方的生物利用率。使用交叉研究设计，两个分开的配方，从表1中的配方16和配方18对一组六只狗给药。在交叉设计中，包括一种静脉剂量作为第三配方。每只狗接受10mg剂量的化合物Ⅱa-12。当用高压液相色谱(HPLC)的荧光检测时，血浆浓度取准到1mg/kg剂量。对药物动力学参数进行了测定，包括血浆浓度峰值(Cmax)；对应于血浆浓度峰值的时间(Tmax)；显著消失半衰期(Tt/2)；曲线下的面积(AUC0-4)；和绝对生物利用率(F％)。
化合物Ⅱa-12 1mg/kg静脉剂量后的血浆浓度-时间曲线适合于两相开放式模型，明显的分布体积值为0.96L/kg(0.70-1.43L/kg范围)和1.35L/kg(0.69-202L/kg范围)分别对于Vα和Vβ。血浆浓度随着1.16小时(0.89-1.38小时的范围)的终点消失半衰期而下降。化合物Ⅱa-12的血浆清净在1mg/kg大剂量静脉给狗用药后是0.79L/hr.kg(0.40-1.08L/hrkg范围)。
化合物Ⅱa-12以给药后两小时记录的峰值浓度从两种液体配方快速吸收。峰值血浆浓度对于吐温/丙烯碳酸酯/PG和吐温/PG配方平均分别为269±175ng/ml(94-469ng/ml范围)和219±143ng/ml(96-458ng/ml范围)。两种配方的绝对生物利用率非常相似，分别平均为41.6±84％和39.3±11.3％。
使用狗对涉及配制成非水的可形成粒子的组合物的化合物Ⅱa-12的生物利用率进行了分开的研究。在对8个分开的配方口服给药后测定药物动力学参数。每只狗每天的化合物Ⅱa-12的剂量为50mg。使用平行研究设计，对每个配方在一组三只狗中进行评价。
在研究中使用体重为7.9-14.2kg的小猎兔狗。对狗禁食过夜后用药，但容许任意给水。研究完成后给动物进食。
各个配方(胶囊或液体)对一组三只狗给药，剂量50mg。配方描述于下面的表4中。配方C和D不是可形成粒子的组合物。
表4对狗研究的配方


参考配方和配方A-C在研究的第一星期中给药。配方D-G在接着的一星期洗出期间给药。液体配方A、E、F和G在用药前完全混合。各种液体的剂量(2ml)放入注射器中并喷入每只狗的喉咙后部，接着给水约10ml。接受胶囊配方的每只狗也给予相似量的水。
序列的加入肝素的血液样品从每只狗的颈静脉在给药前和给药后0.25、0.5、1.0、1.5、2、3、4、6、9和15小时取得。血液样品在冰浴中迅速冷冻。在收集两小时内，对样品离心分离(2500rpm 10分钟)，血浆转移到聚丙烯管中并在-20℃冷冻备用于后面的分析。
化合物Ⅱa-12的血浆水平用高压液相色谱(HPLC)测定，如后面所描述。各样品中的血浆浓度用标记狗血浆标准的峰面积比(母体/内标)对浓度进行最小二乘方线性回归分析(无权)计算。血浆浓度取准到5mg/kg剂量。
药物动力学参数的平均值(±SD,N=3)汇总于下面的表5中。在表5中，Cmax是血浆浓度峰值；Tmax是对应于血浆浓度峰值的时间；Tt/2是显著消失半衰期；AUC0-4是曲线下的面积(血清浓度对应时间的曲线)；％是配方H的相对生物利用率。
表5药物动力学数据总结

给药后从0至t小时(最后的可测定血浆浓度的时间点)的曲线下的面积使用线性梯形规则对血浆时间曲线进行计算。外延至无穷大的残余面积由最后测定的血浆浓度(Ct)除以最终消失速率常数决定，并加在AUC0-t上以产生曲线下的总面积(AUC0-4)。相对于参考配方的生物利用率用各配方的AUC0-4除以参考配方得到的AUC0-4进行计算。
化合物Ⅱa-12的血浆浓度，在用乙酸乙酯∶己烷(体积比1∶1)在中性pH下进行液-液抽提后，用带有荧光检测的逆相高压液相色谱测定。有机溶剂挥发后，样品用甲醇和0.1％三氟乙酸的水溶液(最终体积比1∶1)的系列等分试样进行重新组成。母体化合物和内标(化合物Ⅱa-4)从共同抽提的血浆污染物用25cm×4.6cm 5μm Prodigy柱分离。荧光分析(λem=288nm,λex=390nm)用于定量分析。这种高压液相色谱(HPLC)定量分析在0-5000ng/ml的浓度范围是线性的。这些数据表明，通过使用可形成粒子的组合物，狗中的生物利用率可以显著地改进，即大于300％。在猴子中的生物利用率涉及制备成非水的可形成粒子的组合物的化合物Ⅱa-12的生物利用率研究使用猴子进行。药物动力学参数在静脉给药(i.v.)和口服给药(p.o.)后测定。试验由四只雄性猕猴属猴子组成。静脉给药剂量是一个大剂量，剂量水平3mg/kg。口服剂量的给药是软胶囊，剂量水平10mg/kg(2个胶囊/猴/剂)。口服配方描述于下面的表6中。
表6在猴子中的配方研究

静脉给药配方是PEG 1450:Pluronic7；F68羟基丙基-β-环糊精水。
在预定时间点收集血液样品。化合物Ⅱa-51的血浆水平用高压液相色谱(HPLC)测定。药物动力学参数用不间断方法估计。药物动力学参数的平均值汇总于下面的表7中。在表7中，Cmax是血浆浓度峰值；Tmax是对应于血浆浓度峰值的时间；Tt/2是显著消失半衰期；AUC是曲线下的面积；F％是绝对生物利用率。
在静脉给药后，平均清除值是1.1±0.1L/hr/kg，平均体积分布是4.9±0.7L/kg。这些结果指出，在静脉给药后，化合物Ⅱa-51具有很大的体积分布，快速清除和适当的Tt/2。基于口服给药，配方D具有比本实验中的其它配方较好的生物利用率。化合物Ⅱa-51在亲水粒子中比在亲脂粒子中具有较好的吸收，说明吸收依赖于配方。
正如本领域的熟练人员所知，本发明的大量的改进和变化可能在上述的说明中阐明。因此，本发明不一定按这里特别描述的实施，本发明的范围试图包括所有这些变化。
表7药物动力学数据汇总

权利要求
1．一种含有稠合吡咯并咔唑和表面活性剂的组合物，其中的组合物是非水的和可形成粒子的。
2．根据权利要求1的组合物，其中的稠合吡咯并咔唑具有结构式 或者是它的一种立体异构体或药物可接受的盐，其中环B和环F独立地选自a)一种不饱和6元环碳环芳香环，其中的1至3个碳原子可以被氮原子取代；b)一种不饱和的5元环碳环芳香环，和c)一种不饱和的5元环碳环芳香环，其中或者1)一个碳原子被一个氧原子、氮原子或硫原子取代；2)两个碳原子被一个硫和一个氮、一个氧和一个氮或者两个氮原子取代；或者3)三个碳原子被三个氮原子取代；G-X-W选自a)-(Z1Z2)C-N(R1)-C(Z1Z2)-；b)-CH(R1)-C(=O)-N(R1)-；和c)-N(R1)-C(=O)-CH(R1)-；Z1和Z2在各自出现时，是独立地选自H,H；H,OR；H,SR；H,N(R)2；和一个基团其中Z1和Z2一起形成一个选自=O、=S和=NR的部分；前提条件是至少一种Z1和Z2对形成=O；R选自H、取代的或未取代的具有1至6个碳原子的烷基、OH、具有1至4个碳原子的烷氧基、OC(=O)1a、OC(=O)NR1cR1d、O(CH2)pNR1cR1d、O(CH2)pOR1b、取代或未取代的具有6至10个碳原子的芳香基烷基、和取代或未取代的杂芳香基烷基；R1独立地选自；a)H、取代的或未取代的具有1至6个碳原子的烷基、取代或未取代的芳香基、取代或未取代的芳香基烷基、取代或未取代的杂芳香基、和取代或未取代的杂芳香基烷基；b)C(=O)R1a；c)OR1b；d)C(=)NHR1b、NR1cR1d、(CH2)pNR1cR1d、(CH2)pOR1b、O(CH2)pOR1b、和O(CH2)pNR1cR1d；R1a选自取代或未取代的烷基、取代或未取代的芳香基和杂芳香基；R1b选自H和取代的或未取代的具有1至6个碳原子的烷基；R1c和R1d各自独立地选自H、取代的或未取代的具有1至4个碳原子的烷基、和结构式为-(CH2)2-X1-(CH2)2-的连接基团；X1选自-O-、-S-、和-CH2-；R2选自H、SO2R2a、CO2R2a,C(=O)R2a、C(=O)NR2cR2d和1至8个碳原子的烷基、2至8个碳原子的烯基、2至8个碳原子的炔基，其中1)每个烷基、烯基、和炔基是未取代的；或者2)每个烷基、烯基、和炔基被1-3个R5取代；R2a选自1至6个碳原子的烷基、芳香基、OR2b、CONH2、NR2cR2d、(CH2)pNR2cR2d、和O(CH2)pNR2cR2d；R2b选自H和取代的或未取代的具有1至6个碳原子的烷基；R2c和R2d各自独立地选自H、取代的或未取代的具有1至6个碳原子的烷基，和一个结构式为-(CH2)2-X1-(CH2)2-的连接基团；R3和R4在各自出现时，是独立地选自a)H、芳香基，杂芳香基、F、Cl、Br、I、CN、CF3、NO2、OH、OR9、O(CH2)pNR11R12、OC(=O)R9、OC(=O)NR11R12、O(CH2)pOR10、CH2OR10、NR11R12、NR10S(=O)2R9、和NR10C(=O)R9；b)CH2OR14；c)NR10C(=O)NR11R12、CO2R10、C(=O)R9、C(=O)NR11R12、CH=NOR10、CH=NR10、(CH2)pNR11R12、(CH2)pNHR14、和CH=NNR11R12；d)S(O)yR9、(CH2)pS(O)yR9、CH2S(O)yR14；e)具有1至8个碳原子的烷基、具有2至8个碳原子的烯基、和具有2至8个碳原子的炔基，其中1)每个烷基、烯基、或炔基是未取代的；或者2)每个烷基、烯基、或炔基被1-3个R5取代；R5选自具有6至10个碳原子的芳香基、杂芳香基、芳香基烷氧基、杂环烷氧基、羟基烷氧基、烷基氧-烷氧基、羟基烷硫基、烷氧基-烷硫基、F、Cl、Br、I、CN、NO2、OH、OR9、x2(CH2)pNR11R12、x2(CH2)pC(=O)NR11R12、x2(CH2)pOC(=O)NR11R12、x2(CH2)pCO2R9、x2(CH2)pS(O)yR9、x2(CH2)pNR10C(=O)NR11R12、OC(=O)R9、OC(=O)NHR9、邻四氢吡喃基、NR11R12、NR10C(=O)R9、NR10CO2R9、NR10C(=O)NR11R12、NHC(=NH)NH2、NR10S(O)2R9、S(O)yR9、CO2R9、C(=O)NR11R12、C(=O)R9、CH2OR10、CH=NNR11R12、CH=NOR10、CH=NR9、CH=NNHCH(N=NH)NH2、S(=O)2NR11R12、P(=O)(OR10)2、OR14、和具有5至7个碳原子的单糖其中该单糖的各羟基独立地或者不被取代或者被H、具有1至4个碳原子的烷基、具有2至5个碳原子的烷基羰基氧、或具有1至4个碳原子的烷氧基所取代；X2是O、S、或NR10；Q选自1)NR6；2)一种未取代的1至3个碳原子的亚烷基；3)一种取代的1至3个碳原子的亚烷基；4)CH=CH、CH(OH)CH(OH)、O、S、S(=O)、S(=O)2、C(=O)、C(=NOR11)、C(OR11)(R11)、C(=O)CH(R13)、CH(R13)C(=O)、C(R10)2、C(=NOR11)CH(R13)、CH(R13)C(=NOR11)、CH2Z、Z-CH2、CH2ZCH2；Z选自C(R11)(OR11)、O、S、C(=O)、C(=NOR11)、和NR11；R6选自H、SO2R2a、CO2R2a、C(=O)R2a、C(=O)NR1cR1d、和1至8个碳原子的烷基、2至8个碳原子的烯基、2至8个碳原子的炔基，其中1)每个烷基、烯基、和炔基是未取代的；或者2)每个烷基、烯基、和炔基被1-3个R5取代；或者交替地，当Q是NR6或C(R10)2时，R6或一个R10与R2连接形成 其中R7和R8各自独立地选自H、OH、具有1至6个碳原子的烷基、具有1至6个碳原子的烷氧基、具有6至10个碳原子的取代或未取代的芳香基烷基、取代或未取代的杂芳香基烷基、(CH2)pOR10、(CH2)pOC(=O)NR11R12、和(CH2)pNR11R12；或者R7和R8一起形成一个结构式为CH2-X3-CH2的连接基团；X3是一个键、O、S、或NR10；R9选自具有1至6个碳原子的烷基、(CH2)r芳香基和(CH2)r杂芳香基；R10选自H、具有1至6个碳原子的烷基、(CH2)r芳香基、和(CH2)r杂芳香基；R11和R12在各自出现时，独立地选自1)H和具有1至6个碳原子的取代或未取代的烷基；或者2)R11和R12一起形成-(CH2)2-X1-(CH2)2-；Y选自O、S、N(R10)、N+(O-)(R10)、N(OR10)、和CH2；J选自由一个键、O、CH=CH、S、C(=O)、CH(OR10)、N(R10)、N(OR10)、CH(NR11R12)、C(=O)N(R17)、N(R17)C(=O)、N(S(O)yR9)、N(S(O)yNR11R12)、N(C(=O)R17)、C(R15R16)、N+(O-)(R10)、CH(OH)CH(OH)、和CH(O(C=O)R9)CH(OC(C=O)R9)所组成的组中；R13选自具有1至4个碳原子的烷基、芳香基、和具有7至14个碳原子的芳香基烷基；R14是氨基酸除去羧基中的羟基后的残余物；R15和R16在各自出现时，是选自H、OH、C(=O)R10、O(C=O)R9、烷基-OH和CO2R10；R17选自H、烷基、芳香基、和杂芳香基；m和n独立地选自0、1、和2；p独立地选自1、2、3、和4；r独立地选自0、1、和2；和y独立地选自0、1、和2。
3．根据权利要求2的组合物，其中稠合吡咯并咔唑的环B和环F是苯基，G-X-W选自CH2NR1C(=O)、C(=O)NR1CH2和C(=O)NR1C(=O)，和Q是NR6。
4．根据权利要求3的组合物，其中的稠合吡咯并咔唑具有结构式
5．根据权利要求4的组合物，其中稠合吡咯并咔唑的R3和R4选自H、烷基、Cl、Br、CH2OH、CH2SOCH2CH3、CH2SO2CH2CH3、NHCONHC6H5、CH2SCH2CH3、CH2SC6H5、NHCO2CH3、CH2OC(=O)NHCH2CH3、N(CH3)2、CH=NNH、CH2N(CH3)2、和CH2OCH2CH3；R7选自H和烷基；和R15和R16独立地选自H、烷基、OH、CH2OH、烷氧基和CO2烷基。
6．根据权利要求5的组合物，其中的稠合吡咯并咔唑具有结构式
7．根据权利要求1的组合物，该组合物进一步含有一种有机溶剂。
8．根据权利要求1的组合物，该组合物进一步含有一种脂类。
9．根据权利要求1的组合物，该组合物进一步含有一种抗氧剂。
10．根据权利要求7的组合物，该组合物进一步含有一种抗氧剂。
11．根据权利要求10的组合物，该组合物进一步含有一种脂类。
12．根据权利要求1的组合物，其中表面活性剂的量为至少大约20％(W/W)。
13．根据权利要求1的组合物，其中表面活性剂的量为至少大约40％(W/W)。
14．根据权利要求1的组合物，其中表面活性剂的量为至少大约50％(W/W)。
15．根据权利要求1的组合物，其中的表面活性剂选自聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯、聚乙二醇醚、饱和的聚乙二醇化的甘油酯、聚乙二醇的脂肪酸酯、羟基化的卵磷脂、中等链长的单甘油酯、中等链长的脂肪酸酯、d-∝-生育酚基聚乙二醇琥珀酸酯、聚乙烯-丙烯二醇共聚物、聚氧亚烃基硬脂酸酯、聚氧亚烃基蓖麻油、和聚乙二醇羟基硬脂酸酯。
16．根据权利要求7的组合物，其中的有机溶剂选自丙二醇、丙烯碳酸酯、二甲基异山梨醇、和聚乙二醇。
17．根据权利要求8的组合物，其中的脂类是一种椰子脂肪酸和丙二醇的二酯。
18．根据权利要求9的组合物，其中的抗氧剂选自抗坏血酸、抗坏血酸的一种脂肪酸酯、和丁基化的羟基苯甲醚。
19．根据权利要求1的组合物，其中的稠合吡咯并咔唑以大约1至大约300mg/ml的浓度存在。
20．根据权利要求19的组合物，其中的稠合吡咯并咔唑以大约1至大约100mg/ml的浓度存在。
21．根据权利要求2的组合物，其中的稠合吡咯并咔唑以大约1至大约50mg/ml的浓度存在，表面活性剂的量为至少大约20％(W/W)并选自聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯、聚乙二醇醚、饱和的聚乙二醇化的甘油酯、聚乙二醇的脂肪酸酯、羟基化的卵磷脂、中等链长的单甘油酯、中等链长的脂肪酸酯、聚乙烯-丙烯二醇共聚物、聚氧亚烃基硬脂酸酯、聚氧亚烃基蓖麻油、聚乙二醇羟基硬脂酸酯、和d-∝-生育酚基聚乙二醇琥珀酸酯；并且该组合物进一步含有选自丙二醇、丙烯碳酸酯、二甲基异山梨醇、和聚乙二醇的有机溶剂。
22．根据权利要求21的组合物，其中的表面活性剂选自聚乙烯-丙烯二醇共聚物和聚氧亚烃基硬脂酸酯，有机溶剂选自丙二醇和聚乙二醇，并且稠合吡咯并咔唑具有结构式
23．根据权利要求21的组合物，其中的表面活性剂选自聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯和聚氧亚烃基硬脂酸酯，有机溶剂选自丙二醇和聚乙二醇，并且稠合吡咯并咔唑具有结构式
24．一种含有稠合吡咯并咔唑的在含水介质中的粒子的稳定悬浮体。
25．根据权利要求24的稳定悬浮体，其中的粒子的直径小于400nm。
26．根据权利要求25的悬浮体，其中的粒子具有小于100nm的直径。
27．一种形成含有稠合吡咯并咔唑的、悬浮粒子的稳定悬浮体的方法，该方法包括将非水液体中的稠合吡咯并咔唑与含水介质接触，所述非水液体含有从大约20％至大于99％量的表面活性剂。
28．根据权利要求27的方法，其中的可形成粒子的组合物与含水介质在体外接触。
29．根据权利要求27的方法，其中的可形成粒子的组合物与含水介质在体内接触。
30．一种形成含有稠合吡咯并咔唑的、悬浮粒子的稳定悬浮体的方法，该方法包括(a)将稠合的吡咯并咔唑溶解于一种非水液体中以形成一种可形成粒子的组合物，所述非水液体含有20％至大于99％量的表面活性剂；(b)将该可形成粒子的组合物与含水介质接触形成稳定悬浮体。
31．一种治疗哺乳动物的疾病或失调的方法，该方法包括给哺乳动物施用治疗有效量的存在于非水的可形成粒子的组合物中的稠合吡咯并咔唑，所述组合物含有至少20％(W/W)量的表面活性剂。
32．一种治疗哺乳动物的疾病或失调的方法，该方法包括(a)将存在于非水的含有至少20％(W/W)量的表面活性剂的可形成粒子的组合物中的稠合吡咯并咔唑与一种含水介质接触，由此形成含有悬浮粒子的稳定悬浮体；和(b)给哺乳动物施用治疗有效量的该稳定悬浮体。
33．根据权利要求31的方法，其中的失调是一种神经病学的失调。
34．根据权利要求31的方法，其中的失调是一种癌症。
35．根据权利要求32的方法，其中的失调是一种神经病学的失调。
36．根据权利要求32的方法，其中的失调是一种癌症。
37．根据权利要求34的方法，其中的癌症是前列腺癌。
38．根据权利要求36的方法，其中的癌症是前列腺癌。
39．由权利要求27的方法形成的稳定悬浮体。
全文摘要
公开了一种无水、含有稠合吡咯并咔唑的可形成粒子的组合物。通过与含水介质接触,该形成粒子的组合物立即分散成悬浮的粒子,从而形成稳定的悬浮体,显著改进生物利用率的口服给药的稠合吡咯并咔唑化合物。
文档编号A61K47/10GK1314900SQ99809409
公开日2001年9月26日 申请日期1999年8月6日 优先权日1998年8月6日
发明者戴维·A·迪克森, 皮尤施·R·帕特尔, 文森特·科瓦里, 埃夫赖姆·舍克, 约瑟夫·L·赫尔曼, 杰弗里·M·斯凯尔 申请人:赛福伦公司