毛冬青在制备治疗阿尔兹海默病药物方面的新用图
【技术领域】
[0001] 本发明涉及毛冬青的新用途，特别是毛冬青提取物及毛冬青总皂苷的新用途，即 在制备治疗抗阿尔兹海默病药物方面的新用途。
【背景技术】
[0002] 阿尔茨海默病（AD)和血管性痴呆（VD)是老年期痴呆中最常见的类型。《中国老 年学杂志》收载的"阿尔茨海默病发病机制中炎性反应的研宄进展"，公开了 AD占痴呆病人 总数的50%?60%，VD占15%?20%。AD症发病机理复杂，病因目前尚不明确。胆碱能 系统受损，导致突触部位乙酰胆碱（ACh)含量下降是公认的病因之一。研宄表明：乙酰胆碱 酯酶（AChE)在认识障碍的形成中起重要作用。AChE抑制剂能与AChE结合，使酶失去活性； 内源性的ACh大量堆积，脑内神经突触间乙酰胆碱含量增加，从而发挥治疗AD的作用。
[0003] 毛冬青主要化学成分为五环三萜酸及其皂苷、简单酚性化合物及其苷类、环烯醚 萜类化合物、木质素苷类，并含有香豆素类、糖类及氨基酸等多种化学成分。三萜皂苷类被 认为是毛冬青中的主要活性成分，也是其中研宄重点和热点。从毛冬青根中分离并鉴出的 三萜及其苷类有毛冬青酸，毛冬青皂苷甲，具栖冬青苷，毛冬青甙甲，毛冬青皂苷Bl等。毛 冬青已知成分还包括苯衍生物及其苷类：青心酮，氢醌（对苯二酚），高香草酸，秃毛冬青甲 素，原儿茶酸，对羟基苯乙醇，原儿茶醛等。
[0004] 毛冬青（《广西中草药》），功用主治为清热解毒，活血通脉。治风热感冒，肺热喘 咳，喉头水肿，扁桃体炎，痢疾，冠心病，脑血管意外所致的偏瘫，血栓闭塞性脉管炎，丹毒， 烫伤，中心性视网膜炎，葡萄膜炎，以及皮肤急性化脓性炎症。用于冠状动脉硬化性心脏病、 急性心肌梗塞、血柱闭塞性脉管炎；外用治烧、烫伤，冻疮。
[0005] 临床应用：①治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病；②治疗脑血栓形成；⑧治疗动脉 粥样硬化症；④治疗血栓闭塞性脉管炎；⑤治疗烧伤；⑥治疗中心性视网膜炎；⑦治疗葡萄 膜炎等。
[0006] 有报道，毛冬青总皂苷可有效解决制备治疗短暂脑缺血综合症的药物（专利申请 号为CN102058635A)。而由毛冬青总黄酮、总皂苷组成的毛冬青皂酮胶囊也有报道可治疗短 暂性脑缺血发作（专利号CN102058636A)。
[0007] 目前没有文献资料提到冬青科毛冬青或毛冬青总皂苷可用于治疗阿尔兹海默病。
【发明内容】
[0008] 本发明的目的是提供毛冬青在制备治疗阿尔兹海默病药物方面的新用途；
[0009] 本发明的另一目的是提供毛冬青提取物在制备治疗阿尔兹海默病药物方面的新 用途；
[0010] 本发明的另一目的是提供毛冬青总皂苷在制备治疗阿尔兹海默病药物方面的新 用途；
[0011] 本发明的另一目的是提供毛冬青提取物的制备方法；
[0012] 本发明的另一目的是提供毛冬青总皂苷的制备方法。
[0013] 本发明的目的是通过下列的技术方案实现的：
[0014] 本发明原料来源：
[0015] 毛冬青为冬青科植物毛冬青（I IexpubescensHook. etArn. [I.tricheclataHayata])的根。毛冬青别名：乌尾丁、痈树、六月霜、细叶冬青、细叶青、苦 田螺、老鼠啃、山冬青、毛披树、茶叶冬青、水火药、喉毒药、米碎丹、高山冬青、猫秋子草、毛 雌子、美仔蕉、毛莱、六青、矮梯、耐糊梯、火烙木、山熊胆、毒药、酸味木。夏、秋采，切片晒干。 生于山野坡地、丘陵的灌木丛中。分布广东、广西、安徽、福建、浙江、江西、台湾等地。。收载 在《广西中药材标准》1990年版第63页。【性味】苦、甘，凉。【功能与主治】散风热，清头目， 除烦渴。用于头痛，齿痛，目赤，耳鸣，耳中流胺，热病烦渴，病疾。
[0016] 发明人在研宄阿尔兹海默病的治疗过程中发现，冬青科植物毛冬青特别是毛冬青 所含总皂苷表现出能减少脑内AChE活性，同时还具有神经保护作用，实现了对阿尔兹海默 氏病病理进程的干预和病理症状的显著改善，从而有效治疗阿尔兹海默病。
[0017] AD等神经元退行性疾病发病机理复杂，其中AChE活性异常导致是AD等老年疾 病发病的重要因素。淀粉样肽的沉积在AD病人脑内是由淀粉样肽核心与一些蛋白质组成 的，其中包括乙酰胆碱酯酶。通常乙酰胆碱酯酶活性在AD脑中的大部分区域都较低，但在 淀粉样斑块内及周围的乙酰胆碱酯酶活性增加..有人发现AChE启动P-淀粉样肽组装成 Aheta纤丝，Aheta可与单体，二聚体，四聚体，八聚体的AChE组成复合物。该复合物比单独 的Aheta纤丝更具有细胞毒性。因此，通过降低AChE活性能够产生一定的抗AD的作用。
[0018] 目前已有大量的研宄证实了降低AChE活性在治疗AD的重要作用。毛冬 青总皂苷作为降低AChE活性作用机制可能是：毛冬青总皂苷能与乙酰胆碱酯酶 (acetylcholinesterase，AChE)结合为复合物而显著抑制AChE，此外还表现出广泛的神经 保护以及对抗氧化应激、改善脑缺血损伤、修复记忆损害等作用。当然，毛冬青总皂苷对AD 大鼠的保护作用可能是一个复杂的机制，其具体机制还需做进一步研宄。虽然目前对其具 体作用机制还不完全明了，但毛冬青总皂苷对AD等模型动物脑损伤、神经元退变都具有较 好的治疗及保护作用，其对AD等神经元退变疾病的防治提供了另一种启示：即抑制AChE活 性在AD等神经元退行性疾病中可能扮演着重要角色，而通过抑制AChE活性的使用对神经 元退行性疾病可能取得不错的疗效。
[0019] 本发明专利临床应用的安全性较高，在治疗阿尔兹海默病的药物治疗中不失为一 种好药，其拓宽了治疗阿尔兹海默病的新方法，同时为患者解决了现有技术治疗阿尔兹海 默病时出现的不良反应。
[0020] 因此，申请人提供毛冬青、毛冬青提取物、毛冬青总皂苷能够用于治疗阿尔兹海默 病药物方面的新用途。
[0021] 本发明还公开了毛冬青提取物在制备治疗阿尔兹海默病药物的应用，所述毛冬青 提取物的制备包括以下步骤：
[0022] 毛冬青粉碎，加入浓度为50-75%乙醇加热回流提取三次，每次乙醇用量为药材总 重量10-20倍，每次提取时间为30-60分钟，提取温度为60-80°C，合并提取液，浓缩，过滤， 得毛冬青提取物。
[0023] 本发明公开的毛冬青总皂苷在制备治疗阿尔兹海默病药物的应用，所述毛冬青总 皂苷通过以下步骤制备：
[0024] 取毛冬青粉碎，加入浓度为50-75%乙醇加热回流提取三次，每次乙醇用量为药材 总重量10-20倍量，每次提取时间为30-60分钟，提取温度为60-80°C，合并提取液，调pH值 为4-5,上大孔树脂，用浓度为30%乙醇冲洗树脂柱，弃去冲洗液，再用浓度为50-60%乙醇 洗脱，收集洗脱液，浓缩、干燥，得毛冬青总阜苷。
[0025] 本发明公开的毛冬青总皂苷在制备治疗阿尔兹海默病药物的应用，所述毛冬青总 皂苷还可以通过以下步骤制备：
[0026] 取毛冬青粉碎，加入浓度为60%乙醇加热回流提取三次，每次乙醇用量为药材总 重量10倍，每次提取时间为60分钟，提取温度为65°C，合并提取液，调pH为4. 5,上大孔树 月旨，用浓度为30%乙醇冲洗树脂柱，弃去冲洗液，再用浓度为60%乙醇洗脱，收集洗脱液， 浓缩、干燥，得毛冬青总皂苷。
[0027] 本发明提供的毛冬青、毛冬青提取物、毛冬青总皂苷用于治疗阿尔兹海默病药物 方面的新用途具有以下优点：
[0028] 1、毛冬青、毛冬青提取物、毛冬青总皂苷从紫金牛科花酸藤子属毛冬青中而得，安 全无毒，可长期服用。
[0029] 2、在"对AD大鼠记忆能力的影响"实验中发现，AD模型大鼠空间学习记忆能力试 验结果提示本发明能显著提高大鼠的空间学习记忆能力；毛冬青提取物及毛冬青总皂苷明 显减少了大鼠脑组织AChE活性增加，这些数据表明毛冬青、毛冬青提取物、毛冬青总皂苷 对AD大鼠脑组织AChE活性具有明显的改善作用，治疗效果最优为毛冬青总皂苷，毛冬青提 取物次之，但两者均显示出显著的治疗效果。
【具体实施方式】
[0030] 下面通过实施例进一步说明本发明。应该理解的是，本发明的实施例是用于说明 本发明而不是对本发明的限制。根据本发明的实质对本发明进行的简单改进都属于本发明 要求保护的范围。除非另有说明，本发明中的乙醇量的百分数是体积百分数，V/V表示溶液 的体积比。
[0031] 实施例1 :毛冬青提取物的制备
[0032] 取IOkg毛冬青粉碎，加入浓度为50%的乙醇水浴提取3次，每次的