治疗Tau病变的方法
【专利说明】治疗Tau病变的方法
[0001] 交叉引用
[0002] 本申请要求2012年8月16日提交的美国临时专利申请No. 61/683, 902,2013年1 月18日提交的61/754, 085, 2013年3月14日提交的61/781，823, 2013月4月19日提交 的61/813, 797,和2013年6月10日提交的61/833, 355的权益，每项申请通过提及完整并 入。
[0003] 通过提及并入作为文本文件提供的序列表
[0004] 序列表与本文一起以文本文件提供，"IPRN-745W0 SeqList_ST25. txt"，其在2013 年8月15日创建，并且具有69KB的大小。文本文件的内容通过提及完整并入本文。
[0005] 发明背景
[0006] 微管相关蛋白tau是中枢神经系统中丰富的，并且由神经元生成。tau的主要功能 是稳定微管。成年人脑中存在6种tau同种型；tau同种型是单一基因的可变剪接的产物。
[0007] tau病变（Tauopathy)是一类源自tau蛋白在脑的所谓神经原纤维缠结 (neurofibrillary tangle, NFT)中的病理聚集的神经变性性疾病。tau病变的一些例 子包括额颞叶痴呆（frontotemporal dementia, FTD)、阿尔茨海默氏病（Alzheimer' s disease)、进行性核上性麻痹（progressive supranuclear palsy)、皮质基底变性 (corticobasal degeneration)、和客页颞叶变性（frontotemporal lobar degeneration) 〇
[0008] 本领域中需要治疗tau病变的方法，及适合于在此类方法中使用的试剂。
[0009] 发明概述
[0010] 本公开内容提供了治疗tau病变的方法，其涉及施用抗Tau抗体。本公开内容还 提供了在所述方法中使用的抗Tau抗体和包含其的配制剂。
[0011] 特征
[0012] 本公开内容提供了分离的人源化单克隆抗体，其特异性结合Tau多肽的氨基酸 15-24内的表位。在一些情况中，表位不包含磷酸化的氨基酸。在一些情况中，表位不包含 硝化的氨基酸。在一些情况中，表位包含磷酸化的氨基酸、硝化的氨基酸、或磷酸化的氨基 酸和硝化的氨基酸两者。
[0013] 本公开内容提供了分离的抗体，其包含人源化轻链框架区；和人源化重链框架区， 其中分离的抗体与包含以下的抗体竞争对Tau多肽的N端区中的表位的结合：a)轻链区， 其包含：i)包含SEQ ID NO: 1或SEQ ID NO: 7的氨基酸序列的八CDRl ; (ii)包含SEQ ID NO:2 或 SEQ ID NO:8 的氨基酸序列的八CDR2;和（iii)包含 SEQ ID NO:3 或 SEQ ID NO:9 的氨基酸序列的' CDR3 ;和b)重链区，其包含：⑴包含SEQ ID NO:4或SEQ ID NO: 10氨 基酸序列的Vh CDRl ;(ii)包含SEQ ID NO: 5或SEQ ID NO: 11的氨基酸序列的Vh CDR2 ;和 (iii)包含SEQ ID N0:6或SEQ ID N0:12的氨基酸序列的￥11 CDR3。在一些情况中，轻链 区和重链区存在于不同的多肽中。在一些情况中，轻链区和重链区存在于单一多肽中。在 一些情况中，重链区是同种型IgGl、IgG2、IgG3或IgG4的。在一些情况中，重链区是同种型 IgG4的。在这些中的一些实施方案中，铰链区包含S241P取代。参见例如Angal等（1993) Mol. Immunol. 30:105。在一些情况中，抗体是 Fv、scFv、Fab、F (ab'）2 或 Fab'。在一些情 况中，抗体包含共价连接的非肽合成聚合物，例如聚（乙二醇）聚合物。在每种情况中，所 述抗体直接或经由接头与促进穿过血脑屏障的载体分子、肽或蛋白质融合。在一些情况中， 表位在Tau多肽的氨基酸15-24内。在一些情况中，人源化轻链框架区包含表3中描述的 1、2、3、4、5、6、7、8、9或10处氨基酸取代。在一些情况中，人源化重链框架区包含表2中描 述的1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12处氨基酸取代。
[0014] 本公开内容提供了分离的抗体，其中抗体是Fv、scFv、Fab、F(ab'）2或Fab'，且其 中抗体与包含以下的抗体竞争对Tau多肽的N端区中的表位的结合：a)轻链区，其包含：i) 包含 SEQ ID NO: 1 或 SEQ ID NO: 7 的氨基酸序列的 ' CDRl; (ii)包含 SEQ ID NO: 2 或 SEQ ID NO:8的氨基酸序列的' CDR2 ;和（iii)包含SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:9的氨基酸序 列的' CDR3 ;和b)重链区，其包含：⑴包含SEQ ID NO:4或SEQ ID NO: 10的氨基酸序列 的 Vh CDRl ;(ii)包含 SEQ ID NO: 5 或 SEQ ID NO: 11 的氨基酸序列的 Vh CDR2 ;和（iii)包 含SEQ ID N0:6或SEQ ID NO: 12的氨基酸序列的Vh OTR3。在一些情况中，分离的抗体包含 人源化轻链框架区。在一些情况中，人源化轻链框架区包含表3中描述的1、2、3、4、5、6、7、 8、9或10处氨基酸取代。在一些情况中，分离的抗体包含人源化重链框架区。在一些情况 中，人源化重链框架区包含表2中描述的1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12处氨基酸取代。
[0015] 本公开内容提供了分离的抗体，其中分离的抗体包含人轻链恒定区和人重链恒定 区，且其中分离的抗体与包含以下的抗体竞争对Tau多肽的N端区中的表位的结合：a)轻 链区，其包含：i)包含SEQ ID NO: 1或SEQ ID NO:7的氨基酸序列的八CDRl; (ii)包含 SEQ ID NO:2 或 SEQ ID NO:8 的氨基酸序列的 ' CDR2 ;和（iii)包含 SEQ ID NO:3 或 SEQ ID NO:9的氨基酸序列的' CDR3;和b)重链区，其包含：⑴包含SEQ ID NO:4或SEQ ID NO: 10的氨基酸序列的Vh CDRl ; (ii)包含SEQ ID NO: 5或SEQ ID NO: 11的氨基酸序列的 Vh CDR2 ;和（iii)包含 SEQ ID NO:6 或 SEQ ID NO: 12 的氨基酸序列的 Vh CDR3。
[0016] 本公开内容提供了药物配制剂，其包含：a)本公开内容的抗Tau抗体；和b)药学 可接受赋形剂。
[0017] 本公开内容提供了药物配制剂，其包含：a)特异性结合Tau的N端部分内的表位 的抗体，其中该抗体包含：⑴包含SEQ ID NO: 1或SEQ ID NO: 7的氨基酸序列的' CDRl ; (ii)包含 SEQ ID NO: 2 或 SEQ ID NO:8 的氨基酸序列的八 CDR2; (iii)包含 SEQ ID NO: 3 或SEQ ID NO:9的氨基酸序列的八CDR3;(iv)包含SEQ ID NO:4或SEQ ID NO: 10的氨 基酸序列的Vh CDRl ; (V)包含SEQ ID NO: 5或SEQ ID NO: 11的氨基酸序列的Vh CDR2 ;和 (vi)包含SEQ ID NO: 6或SEQ ID NO: 12的氨基酸序列的Vh CDR3 ;和b)适合于对人施用的 药学可接受赋形剂，其中配制剂不含内毒素。在一些情况中，抗体包含人源化轻链框架区。 在一些情况中，人源化轻链框架区包含表3中描述的1、2、3、4、5、6、7、8、9或10处氨基酸取 代。在一些情况中，抗体包含人源化重链框架区。在一些情况中，人源化重链框架区包含表 2中描述的1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12处氨基酸取代。在一些情况中，抗体是在脂质 体中包囊的。在一些情况中，抗体用促进穿过血脑屏障的药剂配制。在每种情况中，所述抗 体直接或经由接头与促进穿过血脑屏障的载体分子、肽或蛋白质融合。在一些情况中，抗体 是 Fv、scFv、Fab、F(ab'）2 或 Fab'。
[0018] 本公开内容提供了重组表达载体，其包含编码本公开内容的抗Tau抗体的核苷酸 序列，其中所述核苷酸序列与在真核细胞中有活性的转录控制元件可操作连接。本公开内 容提供了体外宿主细胞，其用本公开内容的重组表达载体遗传修饰。
[0019] 本公开内容提供了无菌容器，其包含本公开内容的药物配制剂。在一些情况中，容 器是注射器。
[0020] 本公开内容提供了治疗个体中的tau病变的方法，该方法包括对个体施用本公开 内容的抗Tau抗体，或本公开内容的药物组合物。
[0021] 本公开内容提供了治疗个体中的tau病变的方法，该方法包括对个体施用药物组 合物，所述药物组合物包含：a)与包含以下的抗体竞争对Tau多肽的N端区中的表位的结 合的抗体：i)图IB中描绘的抗体的轻链互补决定区（CDR);和图IA中描绘的抗体的重链 ⑶R ;或ii)图2B中描绘的抗体的轻链⑶R ;和图2A中描绘的抗体的重链⑶R ;和b)适合 于对人施用的药学可接受赋形剂。在一些情况中，抗体包含：（i)包含SEQ ID NO: 1或SEQ ID NO: 7的氨基酸序列的八CDRl; (ii)包含SEQ ID NO: 2或SEQ ID NO:8的氨基酸序列 的八CDR2 ; (iii)包含SEQ ID N0:3或SEQ ID N0:9的氨基酸序列的八CDR3 ; (iv)包含 SEQ ID NO:4 或 SEQ ID NO: 10 的氨基酸序列的 Vh CDRl; (V)包含 SEQ ID NO:5 或 SEQ ID NO: 11的氨基酸序列的Vh CDR2 ;和（vi)包含SEQ ID NO:6或SEQ ID NO: 12的氨基酸序列 的Vh OTR3。在一些情况中，抗体包含人源化轻链框架区。在一些情况中，抗体包含人源化 重链框架区。在一些情况中，抗体是在脂质体中包囊的。在一些情况中，抗体用促进穿过血 脑屏障的药剂配制。在每种情况中，所述抗体直接或经由接头与促进穿过血脑屏障的载体 分子、肽或蛋白质融合.在一些情况中，抗体是？￥、80?￥、？813、？(313'）2或？313'。在一些情 况中，施用是静脉内的。在一些情况中，施用是鞘内的。
[0022] 在一些情况中，主题抗Tau抗体的施用导致下列一项或多项的变化：a)脑组织中 游离的胞外tau的量；b)间质液（ISF)中游离的胞外tau的量；c)脑脊液（CSF)中游离的 胞外tau的量；d) tau的神经元至神经元扩散；e)神经元内tau聚集体的量；f)小角质和/ 或星细胞活化的程度；g)磷酸化的或超磷酸化的Tau的量；h) ISF或CSF中总的Tau或游离 的tau的量；i)胞内N端tau片段的量；j)神经元活动过度；k)CSF中Αβ 40和/或Αβ 42 的量；1)Αβ斑负荷；m)A|3 40和/或Αβ 42自神经元的分泌；η)淀粉样前体蛋白（APP)促 进剂活性；〇) APP mRNA和/或蛋白质水平；ρ) beta-分泌酶和/或gamma分泌酶的活性；q)