双氢青蒿素在制备抑制肿瘤生长药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及抗肿瘤药物技术领域，特别是双氢青蒿素在制备抑制肿瘤生长药物中 的应用。
【背景技术】
[0002] 肿瘤是机体在各种致癌因素的作用下，控制细胞生长增殖的机制失常导致其克隆 性异常增生而形成的新生物。肿瘤一般分为良性及恶性肿瘤，最常见的恶性肿瘤即为通常 所说的癌症。肿瘤是由于相关基因发生突变或损坏，基因表达失常或紊乱而产生的疾病，肿 瘤细胞的功能、结构、代谢与正常细胞均有不同，其生物学特性主要为细胞增殖失控、具有 侵入周边组织的能力、可通过体内循环系统或淋巴系统发生远端转移，并可以将其恶性特 征稳定遗传。
[0003] 流行病学研究显示，恶性肿瘤已成为危害人类健康的主要因素。据世界卫生组织 报告，每年全球恶性肿瘤新发生病例约为Iioo万，因恶性肿瘤死亡的病例约占全球每年总 死亡病例的13%。全球发病率最高的恶性肿瘤为肺癌、乳腺癌和结直肠癌，最常见的恶性肿 瘤死亡为肺癌、胃癌和肝癌。在全球范围内恶性肿瘤的总发病率呈上升趋势，预计到2020 年全球发病率将比现在升高50%，每年新增病例达到1500万人；2015年全球将有近900万 人死于恶性肿瘤，这一数字在2030年将会上升到1140万。根据我国卫生部全国肿瘤防治 研究办公室发布的数据显示，我国每年新发癌症病例约为220万，每年因癌症死亡病例约 为160万。我国常见肿瘤发病前10位是肺癌、胃癌、结直肠癌、肝癌、女性乳腺癌、食管癌、 胰腺癌、膀胱癌、脑瘤和淋巴瘤，占全部恶性肿瘤发病的76. 12% ;死亡前10位的肿瘤是肺 癌、肝癌、胃癌、食管癌、结直肠癌、胰腺癌、乳腺癌、白血病、脑瘤和淋巴瘤，占全部恶性肿瘤 死亡的84. 37%，表明恶性肿瘤是威胁我国居民健康的重大疾病。
[0004] 已有的肝癌常规治疗以及毒副作用如下：对肝癌较为有效的药物以顺钼（CDDP) 为首选，常用的还有5氟尿嘧啶（5Fu)、阿霉素（ADM)及其衍生物、丝裂霉素、依托泊苷 (VP16 )和氨甲喋呤等。一般认为单个药物静脉给药疗效较差，采用肝动脉给药和(或)栓塞， 以及配合内、外放射治疗应用较多，效果较明显。对某些中晚期肝癌无手术指征，且门静脉 主干癌栓阻塞不宜肝动脉介入治疗者和某些姑息性手术后肝癌患者可采用联合或序贯化 疗方案，常用联合方案为顺氯氨钼20mg+5Fu750mg~IOOmg静脉滴注共5天，每月一次，3~ 4次为一疗程。阿霉素40~60mg第一天，继以5Fu500mg~750mg静脉滴注连续5天，每月 一次连续3~4次为一疗程，上述肝癌化疗方案效果评价不一。
[0005] 常见的肝癌化疗副作用有以下几种：
[0006] 1、骨骼抑制：表现为外周血象下降，并伴有全身症状，如面色苍白，头晕失眠，气短 心悸等症状。
[0007] 2、全身反应：主要症状为神疲乏力、气短、头晕、食欲不振、便溏等。
[0008] 3、消化道反应：患者多有恶心呕吐、呃逆嗳气、纳呆、腹胀、大便稀溏或便秘等症 状。
[0009] 4、其他：如脱发、中毒性肝炎、肾功能损害等。
[0010] 其中，阿霉素（ADM)的不良反应：
[0011] 1、心脏毒性：可导致严重的心肌损伤和心力衰竭，心肌损伤程度与剂量有关，总量 在500mg/m2以上者可多见。与放射治疗或与丝裂霉素合用，会加重心脏毒性。
[0012] 2.剂量限制性毒性：骨髓抑制，白细胞、血小板减少和贫血，常见粒性和淋巴性细 胞减少。
[0013] 3.胃肠道反应：恶心、呕吐、口腔粘膜炎、食欲不振。
[0014] 4.敏感肿瘤在初次应用ADM时，可因大量瘤细胞破坏而致高尿酸血症，引起关节 疼痛或肾功能损害。
[0015] 双氢青蒿素是一种内含过氧化基团的倍半萜内酯类小分子化合物，是青蒿素经硼 氢化钠还原得到的化合物，属于青蒿素衍生物。所述的青篙素是一年生草本植物青蒿的提 取物。近年来，国内外很多研究都表明这倍半萜内酯类化合物具有确切的抗肿瘤作用，可选 择性抑制或杀灭多种肿瘤细胞，且耐受性良好，毒副反应较少，并且对于多药耐药的肿瘤细 胞具有活性。另外，在动物水平上倍半萜内酯类化合物的抗肿瘤作用已获证实，Chen等研究 表明，其可有效抑制人卵巢癌裸鼠移植瘤的生长。这类化合物可通过多种途径发挥抗肿瘤 作用，包括自由基介导的细胞损伤，阻滞细胞周期，诱导细胞凋亡及抗肿瘤血管生成等。林 芳等发现，经这类化合物作用24h后，乳腺癌细胞MCF-7的细胞周期被阻滞在GO、Gl期，S 期细胞显著减少。Disbrow等发现该类化合物可通过激活线粒体Caspase途径而诱导Hela 细胞凋亡。Longo等经实验证明，在鼠胚胎的培养液中加入不同浓度的该类化合物进行培养 48h后，鼠胚胎的生长发育受到不同程度的抑制，严重者尿黄囊血管完全被破坏，胚胎死亡， 并认为其最初的作用是影响尿黄囊中的红细胞，随着药物浓度及作用时间的增加进而抑制 血管的生长。
[0016]但尚缺乏对双氢青蒿素在多种肿瘤细胞株上的抗肿瘤活性的综合考察，以及在多 个人癌裸鼠异种移植模型上的系统的药效学评价。
[0017] 铁是一切生命体不可缺少的元素，广泛参与重要的生命代谢过程，在DNA的合成、 电子传递氧运送等过程中起到重要作用。肿瘤细胞由于其核酸代谢旺盛，需要大量的铁质； 众多研究结果显示，机体中铁的储量与很多肿瘤的风险正相关，如直肠癌、肝癌、肾癌、肺癌 及胃癌。在人体，小肠是吸收铁的唯一部位。肠吸收的铁与血液内转铁蛋白（transferrin， Tf)结合后，通过细胞膜上的两种转铁蛋白受体（transferrin receptor, TfR) TfRl和 TfR2,介导摄取转铁蛋白结合铁。TfRl是一种在所有的有核细胞中都有表达的细胞表面糖 蛋白，对细胞铁摄取起到重要作用。肿瘤细胞中TfRl表达高于正常细胞，以更快的速率摄 取铁，TfRl高表达与肿瘤细胞高频率增殖相关。TfR2在正常细胞不表达，但常常在肿瘤细 胞中表达，特别是卵巢癌、结肠癌、恶性胶质瘤细胞株中的表达。
[0018] 双氢青蒿素内含过氧化桥结构，可在二价铁离子的作用下裂解产生自由基，进而 产生细胞杀伤作用。此前有研究显示，双氢青蒿素类化合物与氨基乙酸硫酸亚铁共孵育，能 明显提高白血病CCRF-CEM细胞和人星形细胞瘤U373细胞对其的敏感性。但目前尚缺乏铁 离子对其体内外抗肿瘤作用的影响的系统报道。
【发明内容】
[0019] 本发明的目的是提供一种双氢青蒿素在制备抑制肿瘤生长药物中的应用，尤其肝 癌肿瘤、乳腺癌肿瘤或肠癌肿瘤，特别是人肝癌HepG-2、人肝癌QGY、人肝癌SMMC、人乳腺癌 Bcap-37、人肠癌Colo-205、小鼠黑色素瘤B16。
[0020] 为实现上述目的，本发明采取以下技术方案：
[0021] 将双氢青蒿素20g在20°C以下低温粉碎过120目筛，将乳糖60g、微晶纤维素60g、 羧甲基淀粉钠15g、十二烷基硫酸钠5g、硬脂酸镁、聚维酮K30均过80目筛；称取乳糖、微晶 纤维素、羧甲基淀粉钠和十二烷基硫酸钠，混合均匀，用2. 5%聚维酮K30水溶液为粘合剂制 软材，24目筛制粒，颗粒于60°C干燥至含水量约为2%-3%;过24目筛整粒，加入处方量的双 氢青蒿素和总质量〇. 5%的硬脂酸镁，混合均匀，制成片剂或装入硬胶囊中，制成胶囊剂。
[0022] 进一步的，本发明还可以通过以下方式实现：
[0023] 将双氢青蒿素20g在20°C以下低温粉碎过120目筛，称取双氢青蒿素、乳糖60g、 微晶纤维素60g、羧甲基淀粉钠15g、十二烷基硫酸钠5g和总质量0. 5%的硬脂酸镁，混合均 匀，制成片剂或装入硬胶囊中，制成胶囊剂。
[0024] 进一步的，本发明还可以通过以下方式实现：
[0025] 将双氢青蒿素20g在20°C以下低温粉碎过120目筛，将乳糖60g、微晶纤维素60g、 羧甲基淀粉钠15g、十二烷基硫酸钠5g、硬脂酸镁、聚维酮K30均过80目筛；称取双氢青蒿 素、乳糖、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠和十二烷基硫酸钠，混合均匀，22目筛制颗粒，成品颗 粒混合均匀后加入总质量0. 5%的硬脂酸镁，混合均匀，制成片剂或装入硬胶囊中，制成胶 囊剂。
[0026] 优选的，所述药物包括双氢青蒿素，以及青蒿素、青蒿素衍生物中的一种。
[0027] 优选的，所述所述药物包括双氢青蒿素，以及阿霉素、顺钼、环磷酰胺、硫酸亚铁、 索拉菲尼中的一种。
[0028] 本发明的