一种大鼠采精方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种大鼠采精方法。
【背景技术】
[0002] 在动物实验研宄过程中，特别是动物人工授精和生殖毒理学研宄过程中，动物精 子成为实验的必须材料，而如何获得实验动物的精子成为必须要解决的问题。目前，动物的 采精方法主要应用电刺激的方法，但是电刺激对动物损伤较大，且对于小型动物（如大鼠） 的电刺激操作不容易实施。同时大鼠又是一种典型的实验动物。因此用适宜的方法进行大 鼠采精具有重要的科研意义。本发明所采用的采精方法至今并未发现与本发明相同或类似 的报导。
【发明内容】
[0003] 为克服现有技术的缺点与不足，本发明的首要目的在于提供一种大鼠采精方法。
[0004] 本发明的目的通过下述技术方案实现：一种大鼠采精方法，包括以下步骤：先用 润湿的脱脂棉球擦拭雄性大鼠外生殖器，刺激排精；若没有排精，再用振动采精仪一台，消 毒过的离心管，镊子一个，移液枪一把，恒温水浴锅一个，保定瓶一个，采精方法运用非麻醉 保定方法，具体操作步骤如下：
[0005] 1)将雄性大鼠头朝里放入保定瓶中，转动瓶身使大鼠背部朝下，腹部朝上，暴露生 殖器部位，实现大鼠保定；
[0006] 2)在步骤1)的大鼠保定之后，用温生理盐水润湿的无菌棉球小心擦洗大鼠的阴 茎龟头部，防止精液被污染；用镊子夹持一个无菌棉球，从头指向尾的方向轻轻擦拭大鼠生 殖器外部1~2min，擦拭的作用是唤起大鼠阴茎勃起，为振动做准备；个别敏感的大鼠在擦 拭的过程中就会射精；
[0007] 3)进行振动采精仪刺激，采用大鼠振动接触棒接触大鼠刺激部位，刺激部位为以 阴茎为中心半径为Icm的区域和阴茎与睾丸纵膈之间的区域；采精仪的振动幅度始终设置 为2mm，振动频率最开始的2min设置为70~80Hz，2min刺激后没有射精的大鼠将频率调 到90Hz，刺激过程中发生射精立即停止，累积刺激时间不得超过IOmin;累积刺激IOmin没 有射精的大鼠，认为这一次采精失败，休息一天再重复操作；
[0008] 4)大鼠射精后，将胶块部分转移到离心管中，液体部分用移液枪移吸取也转移到 离心管中，获得大鼠精液；然后置于37°C的恒温水浴锅中备用；大鼠采精频率每两天一次， 注意适当补充营养。
[0009] 步骤1)的过程中若大鼠出现排尿，立即用温水润湿的无菌棉球擦洗干净。
[0010] 步骤3)中所述的大鼠振动接触棒为长3. 5厘米，外径0. 4厘米，内径0. 3厘米的 透明聚乙烯管子；接触大鼠生殖器的一端磨光滑，另一端安装在振动采精仪的卡槽里面。
[0011] 所用的保定瓶可以根据大鼠体重选取不同大小；
[0012] 所述的振动采精仪的振动探头可以根据需求不同选取适合需要的长度；
[0013] 在采精的过程中大鼠的表现很安静舒适，不需要麻醉。
[0014] 本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：
[0015] 本发明中的大鼠采精方法操作简单、快速、可重复，对大鼠温和没有损伤，更符合 动物福利保护的要求；且在采精的过程中大鼠的表现很安静舒适，不需要麻醉。所述方法采 集获得的大鼠精子可以用于大鼠人工授精，精子冷冻保存，生殖毒理学研宄，充分发挥优良 雄性大鼠的繁殖效率，也有利于保存优良大鼠的遗传物质；减少实验中雄性大鼠的使用数 量，降低实验成本。
【具体实施方式】
[0016] 下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
[0017] 实施例1
[0018] 实验选取选取15只18周龄的健康雄性大鼠。
[0019]所用的米精仪的型号：abattery-operatedFertiCareBPersonaIvibrator(Mu lticept,Rungsted,Denmark)〇
[0020] 本发明提供了一种大鼠采精方法，包括以下步骤：先用润湿的脱脂棉球擦拭雄性 大鼠外生殖器，刺激排精；若没有排精，再用振动采精仪一台，消毒过的离心管，镊子一个， 移液枪一把，恒温水浴锅一个，保定瓶一个，采精方法运用非麻醉保定方法，具体操作步骤 如下：
[0021] 1)将雄性大鼠头朝里放入保定瓶中，转动瓶身使大鼠背部朝下，腹部朝上，暴露生 殖器部位，实现大鼠保定；
[0022] 2)在步骤1)的大鼠保定之后，用温热生理盐水润湿的无菌棉球小心擦洗大鼠的 阴茎龟头部，防止精液被污染；用镊子夹持一个无菌棉球，从头指向尾的方向轻轻擦拭大鼠 生殖器外部1~2min，擦拭的作用是唤起大鼠阴茎勃起，为振动做准备；个别敏感的大鼠在 擦拭的过程中就会射精；
[0023] 3)进行振动采精仪刺激，采用大鼠振动接触棒接触大鼠刺激部位，刺激部位为以 阴茎为中心半径为Icm的区域和阴茎与睾丸纵膈之间的区域；采精仪的振动幅度始终设置 为2mm，振动频率最开始的2min设置为70~80Hz，2min刺激后没有射精的大鼠将频率调 到90Hz，刺激过程中发生射精立即停止，累积刺激时间不得超过IOmin;累积刺激IOmin没 有射精的大鼠，认为这一次采精失败，休息一天再重复操作；
[0024] 4)大鼠射精后，将胶块部分转移到离心管中，液体部分用移液枪移吸取也转移到 离心管中，获得大鼠精液；然后置于37°C的恒温水浴锅中备用；大鼠采精频率每两天一次， 注意适当补充营养。
[0025] 步骤1)的过程中若大鼠出现排尿，立即用温水润湿的无菌棉球擦洗干净。
[0026] 步骤3)中所述的大鼠振动接触棒为长3. 5厘米，外径0. 4厘米，内径0. 3厘米的 透明聚乙烯管子；接触大鼠生殖器的一端磨光滑，另一端安装在振动采精仪的卡槽里面。
[0027] 所用的保定瓶可以根据大鼠体重选取不同大小；
[0028] 所述的振动采精仪的振动探头可以根据需求不同选取适合需要的长度；
[0029] 在采精的过程中大鼠的表现很安静舒适，不需要麻醉。
[0030] 采集的大鼠精液可以用于生殖生物学研宄，或进行人工授精，也可以用于精子冷 冻保存。
[0031] 上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的 限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化， 均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1. 一种大鼠采精方法，其特征在于：包括以下步骤：先用润湿的脱脂棉球擦拭雄性大 鼠外生殖器，刺激排精；若没有排精，再用振动采精仪一台，消毒过的离心管，镊子一个，移 液枪一把，恒温水浴锅一个，保定瓶一个，采精方法运用非麻醉保定方法，具体操作步骤如 下： 1) 将雄性大鼠头朝里放入保定瓶中，转动瓶身使大鼠背部朝下，腹部朝上，暴露生殖器 部位，实现大鼠保定； 2) 在步骤1)的大鼠保定之后，用温生理盐水润湿的无菌棉球小心擦洗大鼠的阴茎龟 头部，用镊子夹持一个无菌棉球，从头指向尾的方向轻轻擦拭大鼠生殖器外部1~2min; 3) 进行振动采精仪刺激，刺激部位为以阴茎为中心半径为Icm的区域和阴茎与睾丸纵 膈之间的区域；采精仪的振动幅度始终设置为2mm，振动频率最开始的2min设置为70~ 80Hz，2min刺激后没有射精的大鼠将频率调到90Hz，刺激过程中发生射精立即停止，累积 刺激时间不得超过IOmin; 4) 大鼠射精后，将胶块部分转移到离心管中，液体部分用移液枪移吸取也转移到离心 管中，获得大鼠精液。
2. 根据权利要求1所述的大鼠采精方法，其特征在于：步骤1)的过程中若大鼠出现排 尿，立即用温水润湿的无菌棉球擦洗干净。
3. 根据权利要求1所述的大鼠采精方法，其特征在于：步骤3)中所述的大鼠振动接触 棒为长3. 5厘米，外径0. 4厘米，内径0. 3厘米的透明聚乙烯管子；接触大鼠生殖器的一端 磨光滑，另一端安装在振动采精仪的卡槽里面。
【专利摘要】本发明公开一种大鼠采精方法，属于生物技术领域。所述的大鼠采精方法具体步骤为：1.保定瓶保定大鼠；2.消毒器械和大鼠阴茎；3.用润湿的棉球擦拭大鼠外生殖器刺激射精，收集精液；4.使用振动采精仪进行刺激，收集精液。本发明中的大鼠采精方法操作简单、快速、可重复，对大鼠温和没有损伤，更符合动物福利保护的要求；且在采精的过程中大鼠的表现很安静舒适，不需要麻醉。所述方法采集获得的大鼠精子可以用于大鼠人工授精，精子冷冻保存，生殖毒理学研究，充分发挥优良雄性大鼠的繁殖效率，也有利于保存优良大鼠的遗传基因；减少实验中雄性大鼠的使用数量，降低实验成本。
【IPC分类】A61D19-02
【公开号】CN104758083
【申请号】CN201510100308
【发明人】杨世华, 王歌, 黄群山, 杨增明, 仇思恩, 刘晓星, 康平
【申请人】华南农业大学
【公开日】2015年7月8日
【申请日】2015年3月6日