从天然植物中提取的药效活性物质及其用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于天然植物提取技术领域，具体为从天然植物中提取的药效活性物质及 其用途。
【背景技术】
[0002] 近年来，肿瘤的发病率逐年升高，严重威胁着人类的生命健康，抗肿瘤药物的研发 也引起了各国政府的高度关注。肿瘤是机体在各种致癌因素作用下，局部组织的某一个细 胞在基因水平上失去对其生长的正常调控，导致其克隆性异常增生而形成的异常病变。学 界一般将肿瘤分为良性和恶性两大类。恶性肿瘤作为全球较大的公共卫生问题之一，极大 地危害人类的健康，并将成为新世纪人类的第一杀手。
[0003] 吊球草办piis Mart, et Gal.为唇形科山香属一年生草本植物，又 被称作石柳（广东澄迈），四俭草（广东儋县），螭蜍蜊（广东临高），四方骨（广东海南），假 走马风（广东海南，广西）等等。产于广西，广东及海南，生于开旷荒地上。原产热带美洲， 现广布于全热带，对本土植物有一定的化感作用。吊球草茎直立、粗壮，高0.5-1. 5m，呈四 棱形。叶纸质，披针形；长8-18cm ;上面疏被短硬毛，下面沿脉疏被柔毛，余部密被腺点，边 缘有钝齿；叶柄长1-3. 5cm。花多数，密集成腋生、单生的球形小头状花序，直径约1. 5_，具 苞片；花萼果时增大，萼齿锥尖；花冠乳白色，长约6mm，外被微柔毛，冠檐二唇形，上唇短， 先端2圆裂，下唇3裂，中裂片较大；子房裂片球形，无毛。小坚果长圆形，腹面具棱，栗褐 色，基部具2个白色着生点。本属植物有350-400种，均产自美洲热带至亚热带地区。中 国有4种，均见于我国南部沿海。吊球草在广东作为民间用药，用于治疗或辅助治疗肝炎、 溃疡、水肿。吊球草的挥发油具有较好的抗菌、抗氧化和细胞毒活性。
[0004] 天然药物具有疗效著，毒副作用较小且价格相对便宜的特点。中医中药是中华民 族文化的结晶，据有五千年的悠久历史，其疗效在长期的实践中所确定我国中草药资源非 常丰富，药用植物总数达15000余种，其中不少为中国特有植物，而且大多数尚未进行 研宄开发。吊球草作为一种天然植物，从未发现有对吊球草进行抗肿瘤活性研宄的报道。
【发明内容】
[0005] 针对现有技术中存在的上述问题，本发明的目的在于设计提供一种从天然植物中 提取的药效活性物质及其用途的技术方案，本发明的药效活性物质能明显抑制H22小鼠的 肿瘤生长，延长生存时间，具有显著的抗肿瘤作用。
[0006] 所述的从天然植物中提取的药效活性物质，其特征在于采用以下方法制备： 1) 原料的粉碎和提取：将吊球草晒干后适当切碎，置破碎提取器的容器中，按照吊球草 干重Ikg则含水乙醇用量为5-8升的比例，将碎吊球草用55% -80%含水乙醇进行破碎提 取1-3次，每次1-4分钟； 2) 闪蒸浓缩和脱色：将步骤1)得到的提取液抽滤或甩滤，弃去滤渣，将提取液在 60-75?采用真空薄膜浓缩装置进行闪蒸浓缩至原体积的1/2-1/3 ;按照吊球草干重1-3% 的比例加入粉状活性炭，室温下超声处理0. 5-2小时，抽滤，除去活性炭，继续在60-75°C采 用真空薄膜浓缩装置进行闪蒸浓缩至原体积的1/6-1/8 ; 3) 乙醚萃取物的制备：将步骤2)得到的浓缩液超声分散到水中，水的用量为浓缩液体 积的25-35% ;用乙醚做溶剂萃取3-6次，每次用量为浓缩液体积的1-3倍；每次静止分层 后，分去乙醚层；合并乙醚萃取液，在旋转蒸发仪中常压浓缩蒸出乙醚，得到乙醚萃取部位 的浓缩液；继续将乙醚萃取部位的浓缩液进行真空旋蒸浓缩，抽成干粉，得到乙醚提取物干 粉； 4) 乙酸乙酯萃取物的制备：将乙醚萃取后分出的水层浓缩液，改用乙酸乙酯做溶剂萃 取3-6次，每次用量为浓缩液体积的1. 5-3倍量；静止分层后，分去乙酸乙酯层；合并乙酸 乙酯萃取液，在闪蒸浓缩装置中，55-65?真空减压浓缩蒸出乙酸乙酯后，得到乙酸乙酯萃 取部位的浓缩液；继续将浓缩液进行真空干燥成粉，得到乙酸乙酯提取物干粉； 5) 正丁醇萃取物的制备：将乙酸乙酯萃取后分出的水层浓缩液，改用正丁醇萃取2-5 次，每次用量为浓缩液体积的0. 5-1. 5倍量，静止分层后，分去正丁醇层；合并正丁醇萃取 液，在70-85°C下在闪蒸浓缩装置中进行真空减压浓缩，蒸出正丁醇后得到正丁醇部位浓缩 液；继续将浓缩液进行真空干燥成粉，得到正丁醇提取物干粉； 6) 将乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物按照重量比1:1. 5-2. 5组合，得到抗肿瘤药效活 性物质。
[0007] 所述的从天然植物中提取的药效活性物质，其特征在于步骤1)中：按照吊球草干 重Ikg则含水乙醇用量为6-7升的比例，将碎吊球草用60% -70%含水乙醇进行破碎提取 2次，每次2-3分钟。
[0008] 所述的从天然植物中提取的药效活性物质，其特征在于步骤2)中：将提取液在 70°C采用真空薄膜浓缩装置进行闪蒸浓缩至原体积的1/2. 5。
[0009] 所述的从天然植物中提取的药效活性物质，其特征在于步骤2)中：按照吊球草干 重1. 5-2. 5%的比例加入粉状活性炭，室温下超声处理1-1. 5小时，抽滤，除去活性炭，继续 在70°C采用真空薄膜浓缩装置进行闪蒸浓缩至原体积的1/7。
[0010] 所述的从天然植物中提取的药效活性物质，其特征在于步骤3)中：水的用量为浓 缩液体积的28-32% ;用乙醚做溶剂萃取4-5次，每次用量为浓缩液体积的1. 5-2. 5倍。
[0011] 所述的从天然植物中提取的药效活性物质，其特征在于步骤4)中：将乙醚萃取后 分出的水层浓缩液，改用乙酸乙酯做溶剂萃取4-5次，每次用量为浓缩液体积的2-2. 5倍 量；60°C真空减压浓缩蒸出乙酸乙酯后，得到乙酸乙酯萃取部位的浓缩液。
[0012] 所述的从天然植物中提取的药效活性物质，其特征在于步骤5)中：将乙酸乙酯萃 取后分出的水层浓缩液，改用正丁醇萃取3-4次，每次用量为浓缩液体积的1倍量；合并正 丁醇萃取液，在80°C下在闪蒸浓缩装置中进行真空减压浓缩，蒸出正丁醇后得到正丁醇部 位浓缩液。
[0013] 所述的从天然植物中提取的药效活性物质，其特征在于步骤6)中：乙酸乙酯萃取 物和正丁醇萃取物按照重量比1:2组合，得到抗肿瘤药效活性物质。
[0014] 所述的从天然植物中提取的药效活性物质在制备防治抗肿瘤药物制剂中的应用。
[0015] 上述从天然植物中提取的药效活性物质及其用途，其天然活性物质对人肝癌细胞 的增殖具有明显的抑制作用，对H22小鼠肝脏实体瘤和腹水瘤均具有明显的抑瘤作用，特 别是高剂量组，能明显抑制H22小鼠的肿瘤生长，延长小鼠的存活时间，为治疗肝肿瘤，延 长生存时间和提高生命质量提供了时机。
【具体实施方式】
[0016] 以下结合具体实施例对本发明作进一步说明。
[0017] 实施例1 (1)原料的粉碎和提取：将吊球草晒干后适当切碎，置破碎提取器的容器中，用折合吊 球草干重8倍量的70%含水乙醇进行破碎提取2次，每次2分钟。（2)闪蒸浓缩和脱色： 将得到的提取液抽滤或甩滤，弃去滤渣，将提取液在70°C以下采用真空薄膜浓缩装置进行 闪蒸浓缩至原体积的一半。加入折合药材干重2%的粉状活性炭，室温下超声处理1小时， 抽滤，除去活性炭，继续在70°C以下采用真空薄膜浓缩装置进行闪蒸浓缩至原体积的1/8。 (3)乙醚萃取物的制备：将浓缩液超声分散到水中，水的用量为浓缩液体积的30%。用乙醚 做溶剂萃取6次，每次用量为浓缩液体积的1.5倍量。每次静止分层后，分去乙醚层。合并 乙醚萃取液，在旋转蒸发仪中常压浓缩蒸出乙醚，得到乙醚萃取部位的浓缩液。继续将乙醚 萃取部位的浓缩液进行真空旋蒸浓缩，抽成干粉，得到乙醚提取物干粉。（4)乙酸乙酯萃取 物的制备：将乙醚萃取后分出的水层浓缩液，改用乙酸乙酯做溶剂萃取6次，每次用量为浓 缩液体积的2倍量。静止分层后，分去乙酸乙酯层。合并乙酸乙酯萃取液，在闪蒸浓缩装置 中，60°C以下真空减压浓缩蒸出乙酸乙酯后，得到乙酸乙酯萃取部位的浓缩液。继续将浓缩 液进行真空干燥成粉，得到乙酸乙酯提取物干粉。（5)正丁醇萃取物的制备：将乙酸乙酯萃 取后分出的水层浓缩液，改用正丁醇萃取5次，每次用量为浓缩液体积的0. 5倍量，静止分 层后，分去正丁醇层。合并正丁醇萃取液，在80°C以下在闪蒸浓缩装置中进行真空减压浓 缩，蒸出正丁醇后得到正丁醇部位浓缩液。继续将浓缩液进行真空干燥成粉，得到正丁醇提 取物干粉。将乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物按照重量比1:1组合，得到抗肿瘤药效活性 物质。
[0018] 提取时间是指累计破碎提取时间，即破碎提取器的电机需要工作一段时间后停止 工作几十秒，电机得到休息后再工作，以免由于连续操作时间过长而影响电机寿命。
[0019] 实施例2 (1)原料的粉碎和提取：将吊球草晒干后适当切碎，置破碎提取器的容器中，用折合吊 球草干重7倍量的60%含水乙醇进行破碎提取1次，每次3分钟。（2)闪蒸浓缩和脱色：将 得到的提取液抽滤或甩滤，弃去滤渣，将提取液在70°C以下采用真空薄膜浓缩装置进行闪 蒸浓缩至原体积的一半。加入折合药材干重1. 5%的粉状活性炭，室温下超声处理1. 5小时， 抽滤，除去活性炭，继续在70°C以下采用真空薄膜浓缩装置进行闪蒸浓缩至原体积的1/7。 (3)乙醚萃取物的制备：将浓缩液超声分散到水中，水的用量为浓缩液体积的30%。用乙醚 做溶剂萃取5次，每次用量为浓缩液体积的2倍量。每次静止分层后，分去乙醚层。合并乙 醚萃取液，在旋转蒸发仪中常压浓缩蒸出乙醚，得到乙醚萃取部位的浓缩液。继续将乙醚萃 取部位的浓缩液进行真空旋蒸浓缩，抽成干粉，得到乙醚提取物干粉。（4)乙酸乙酯萃取物 的制备：将乙醚萃取后分出的水层浓缩液，改用乙酸乙酯做溶剂萃取3次，每次用量为浓缩 液体积的2.5倍量。静止分层后，分去乙酸乙酯层。合并乙酸乙酯萃取液，在闪蒸浓缩装置 中，60°C以下真空减压浓缩蒸出乙酸乙酯后，得到乙酸乙酯萃取部位的浓缩液。继续将浓缩 液进行真空干燥成粉，得到乙酸乙酯提取物干粉。（5)正丁醇萃取物的制备：将乙酸乙酯萃 取后分出的水层浓缩液，改用正丁醇萃取2次，每次用量为浓缩液体积的1. 5倍量，静止分 层后，分去正丁醇层。合并正丁醇萃取液，在80°C以下在闪蒸浓缩装置中进行真空减压浓 缩，蒸出正丁醇后得到正丁醇部位浓缩液。继续将浓缩液进行真空干燥成粉，得到正丁醇提 取物干粉。将乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物按照重量比1:2组合，得到抗肿瘤药效活性 物质。 实施例3 (1)原料的粉碎和提取：将吊球草晒