一种脂质体包覆脱氢水飞蓟宾磷脂复合物及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种脂质体包覆脱氢水飞蓟宾磷脂复合物及其制备方法，属于新材料 和药物控释技术等领域。
【背景技术】
[0002] 脱氢水飞蓟宾它优异的药理特性已经被广泛应用于肝脏保健和治疗各种肝脏疾 病，并作为一种保护剂对抗一些肝毒素和霉菌毒素，主要是作为一种有效的自由基清除剂 和抗氧化剂。
[0003] 脱氢水飞蓟宾是水飞蓟宾2, 3位脱氢的氧化产物，结构式如下所示：
[0004]
[0005]在天然水飞蓟产物中均有发现它的踪迹，这种化合物是导致水飞蓟提取物显黄色 主要组成，但它不易在自然产物中分离提纯出，所以对其药效和生物活性的研宄鲜有报道， 现有的研宄一般以水飞蓟宾为原料通过碱催化氧化的半合成法制备成。它显示了比母体更 优异的抗氧化活性和药理活性，在抗肿瘤和抗恶性细胞增殖的应用中也表现出比水飞蓟宾 有效的治疗效果，有研宄发现它对一些皮肤病（如，牛皮癣、特应性皮瘆等）表现出很好的 治疗效果。但研宄发现，脱氢水飞蓟宾较差的水溶性和脂溶性，生物利用度低是制约其临床 应用的瓶颈。
[0006] 脂质体是由磷脂分子在水中自组装形成的一种闭合双分子层包裹着水相核的有 序组合体。将脂溶性或水溶性差的药物包载在质体囊泡即纳米脂质体中，利用其纳米级粒 径优势、极好的亲水性、亲脂性、天然的靶向性、长效性、包容性等特性，增强药物吸收速度、 生物利用度、拓展药物给药方式已经成为药物应用研宄的热点。另外天然磷脂纳米脂质体 本身还具有清除血管壁胆固醇、软化血管、提高免疫力等保健功能，是一种安全的天然保健 药物，以天然磷脂为原料的脂质体被誉为"生物导弹"，在医药、保健食品、化妆品和基因工 程等领域得到广范的应用。
[0007] 鉴于脱氢水飞蓟宾给药时存在溶解性差、生物利用度低的问题，需要寻找一种可 解决脱氢水飞蓟宾的溶解性或生物利用度低等问题的新型药物载体体系。
【发明内容】
[0008] 针对现有技术的不足，本发明提供了一种脂质体包覆脱氢水飞蓟宾磷脂复合物及 其制备方法。
[0009] 本发明的技术方案：
[0010] 一种脂质体包覆脱氢水飞蓟宾磷脂复合物，该脂质体包覆脱氢水飞蓟宾磷脂复合 物包括内核和外层，以脱氢水飞蓟宾磷脂复合物为内核，以脂质体为外层；所述磷脂复合物 中脱氢水飞蓟宾与磷脂的摩尔比0. 25:1~3:1 ;所述的脂质体中磷脂复合物与磷脂质量比 为1:1~1:8,包覆脱氢水飞蓟宾磷脂复合物的脂质体为球形颗粒混悬液，其粒径为200~ 1600nm，包封率为 35. 2 ~95. 8 %。
[0011] 一种脂质体包覆脱氢水飞蓟宾磷脂复合物的制备方法，是以脱氢水飞蓟宾磷脂复 合物和磷脂为主要原料，采用逆向蒸发法或注入法制备，其中：
[0012] 所述的逆向蒸发法步骤为：(A)将脱氢水飞蓟宾磷脂复合物溶于有机溶剂乙醇和 乙醚混合液中，乙醇与乙醚的体积比是0. 5:1~1. 5:1，脱氢水飞蓟宾磷脂复合物在有机溶 剂中的浓度以质量体积比计为1~7g/L; (B)将磷脂溶于有机溶剂乙醇和乙醚混合液中，乙 醇与乙醚的体积比是0. 5:1~1. 5:1，脂质体在有机溶剂中的浓度以质量体积比记为3~ 30g/L，20~40°C超声处理1~8min; (C)将步骤（A)所得液体与步骤（B)所得液体混合， 加入PBS缓冲液，混合液体与PBS缓冲液体积比1:1~1:3. 3,冰浴超声1~8min⑶15~ 25°C旋转蒸发30~90min，即得脱氢水飞蓟宾磷脂复合物脂质体；
[0013] 所述的注入法步骤为：(A)将脱氢水飞蓟宾磷脂复合物溶于有机溶剂乙醇和乙醚 混合液中，乙醇与乙醚的体积比是0. 5:1~1. 5:1，脱氢水飞蓟宾磷脂复合物在有机溶剂中 的浓度以质量体积比计为1~7g/L; (B)将磷脂溶于溶于有机溶剂乙醇和乙醚混合液中，乙 醇与乙醚的体积比是0. 5:1~1. 5:1，脂质体在有机溶剂中的浓度以质量体积比记为3~ 30g/L，20~40°C超声处理1~8min; (C)将步骤（A)所得液体与步骤（B)所得液体混合， 用注射器将步骤（C)得到的混合液体缓慢注入到PBS缓冲液中，混合液体与PBS缓冲液体 积比1:1~1:3. 3,冰浴超声1~8min; (D) 15~25°C旋转蒸发30~90min，即得脱氢水飞 蓟宾磷脂复合物脂质体。
[0014] 所述的脂质体包覆脱氢水飞蓟宾磷脂复合物经离心，-20°C贮存，制成包覆脱氢水 飞蓟宾磷脂复合物的脂质体混悬液。
[0015] 上述的脂质体包覆脱氢水飞蓟宾磷脂复合物的制备方法中：所述脂质体包覆脱氢 水飞蓟宾磷脂复合物经离心，-20°c贮存，制成包覆脱氢水飞蓟宾脂质体磷脂复合物的混悬 液。
[0016] 本发明提供的脂质体包覆脱氢水飞蓟宾磷脂复合物及其制备方法，可同时解决脱 氢水飞蓟宾脂溶性和水溶性差、生物利用度低等问题。且脂质体包覆脱氢水飞蓟宾磷脂复 合物具有制备简单、水分散性好、载药量易控、结构稳定、药物缓释效果好等特点，可用于保 健品、化妆品、药物控制释放技术等领域。
[0017] 本发明的技术特点如下：
[0018] 1.发明了一种脂质体包覆脱氢水飞蓟宾磷脂复合物，载药量易控，且载药效果 好；
[0019] 2.所发明的脂质体包覆脱氢水飞蓟宾磷脂复合物，具有良好的分散性和稳定性。
【具体实施方式】
[0020] 通过下文的实施例来进一步说明本发明，所用实施例不应当构成对本发明的限 制。
[0021] 实施例I
[0022] 脱氢水飞蓟宾磷脂复合物脂质体的制备
[0023] 称取IOmg脱氢水飞蓟宾磷脂复合物溶于L5ml乙醇/乙醚（体积比1:1)中，再 称取30mg大豆磷脂溶于I. 5ml乙醇/乙醚（体积比1:1)中；将上述两溶液混合得到澄清 透明的溶液。之后加入IOmlPBS缓冲液，冰水浴超声3分钟，在室温下旋转蒸发至溶液中 不在爆沸，继续旋转蒸发30min，即得脂质体。将所得的脂质体溶液稀释5倍后，用NanoNS 进行检测，脂质体的平均粒度在317~323nm之间，包封率为70%。
[0024] 实施例2
[0025] 脱氢水飞蓟宾磷脂复合物脂质体的制备
[0026] 称取IOmg脱氢水飞蓟宾磷脂复合物溶于L5ml乙醇/乙醚（体积比1:1)中，再 称取80mg大豆磷脂溶于I. 5ml乙醇/乙醚（体积比1:1)中；将上述两溶液混合得到澄清 透明的溶液。将所得的溶液用细针筒缓慢注入到3mlPBS缓冲液，冰水浴超声1分钟，在室 温下旋蒸至溶液不在爆沸，继续旋蒸50min，即得脂质体。将所得的脂质体溶液稀释5倍后， 用NanoNS进行检测脂质体的平均粒度在269-297nm之间，包封率为93 %。
[0027] 实施例3
[0028] 脱氢水飞蓟宾磷脂复合物脂质体的制备
[0029] 称取IOmg脱氢水飞蓟宾磷脂复合物溶于L5ml乙醇/乙醚（体积比1:1)中，再 称取60mg大豆磷脂溶于I. 5ml乙醇/乙醚（体积比1:1)中；将上述两溶液混合得到澄清 透明的溶液。将所得的溶液用细针筒缓慢注入到IOmlPBS缓冲液，冰水浴超声2分钟，在 室温下旋蒸至溶液不在爆沸，继续旋蒸60min，即得脂质体。将所得的脂质体溶液稀释5倍 后，用NanoNS进行检测脂质体的平均粒度在210-220nm之间，包封率为95. 8%。
【主权项】
1. 一种脂质体包覆脱氢水飞蓟宾磷脂复合物，其特征在于，该脂质体包覆脱氢水飞蓟 宾磷脂复合物包括内核和外层，以脱氢水飞蓟宾磷脂复合物为内核，以脂质体为外层；所述 磷脂复合物中脱氢水飞蓟宾与磷脂的摩尔比0. 25:1~3:1 ;所述的脂质体中磷脂复合物与 磷脂质量比为1:1~1:8,包覆脱氢水飞蓟宾磷脂复合物的脂质体为球形颗粒混悬液，其粒 径为200~1600nm，包封率为35. 2~95. 8%。2. 权利要求1所述的脂质体包覆脱氢水飞蓟宾磷脂复合物的制备方法，其特征在于， 是以脱氢水飞蓟宾磷脂复合物和磷脂为主要原料，采用逆向蒸发法或注入法制备，其中： 所述的逆向蒸发法步骤为：(A)将脱氢水飞蓟宾磷脂复合物溶于有机溶剂乙醇和乙醚 混合液中，乙醇与乙醚的体积比是0. 5:1~1. 5:1，脱氢水飞蓟宾磷脂复合物在有机溶剂中 的浓度以质量体积比计为1~7g/L; (B)将磷脂溶于有机溶剂乙醇和乙醚混合液中，乙醇与 乙醚的体积比是0. 5:1~1. 5:1，脂质体在有机溶剂中的浓度以质量体积比记为3~30g/ L，20~40°C超声处理1~8min; (C)将步骤（A)所得液体与步骤（B)所得液体混合，加入 PBS缓冲液，混合液体与PBS缓冲液体积比1:1~1:3. 3,冰浴超声1~8min(D) 15~25°C 旋转蒸发30~90min，即得脱氢水飞蓟宾磷脂复合物脂质体； 所述的注入法步骤为：(A)将脱氢水飞蓟宾磷脂复合物溶于有机溶剂乙醇和乙醚混合 液中，乙醇与乙醚的体积比是0. 5:1~1. 5:1，脱氢水飞蓟宾磷脂复合物在有机溶剂中的浓 度以质量体积比计为1~7g/L; (B)将磷脂溶于溶于有机溶剂乙醇和乙醚混合液中，乙醇与 乙醚的体积比是0. 5:1~1. 5:1，脂质体在有机溶剂中的浓度以质量体积比记为3~30g/ L，20~40°C超声处理1~8min; (C)将步骤（A)所得液体与步骤（B)所得液体混合，用注 射器将步骤（C)得到的混合液体缓慢注入到PBS缓冲液中，混合液体与PBS缓冲液体积比 1:1~1:3. 3,冰浴超声1~8min; (D) 15~25°C旋转蒸发30~90min，即得脱氢水飞蓟宾 磷脂复合物脂质体。3. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述的脂质体包覆脱氢水飞蓟宾磷 脂复合物经离心，-20°C贮存，制成包覆脱氢水飞蓟宾磷脂复合物的脂质体混悬液。
【专利摘要】本发明公开了一种脂质体包覆脱氢水飞蓟宾磷脂复合物，是以脱氢水飞蓟宾磷脂复合物为内核，外层包覆脂质体而构成。所述脂质体以脱氢水飞蓟宾磷脂复合物和磷脂材料为主原料，采用注入法或逆向蒸发法制备，其中脱氢水飞蓟宾磷脂复合物不但负载于内核中，也可负载于外层脂质体的双分子层中或双分子层的表面。脱氢水飞蓟宾包封率以质量百分比计为复合物的35.2％～95.8％。其制备步骤依次包括脱氢水飞蓟宾的制备、脱氢水飞蓟宾磷脂复合物的制备、脱氢水飞蓟宾磷脂复合物脂质体的制备。本发明复合物具有制备过程简单、载药量易控、分散性好、结构稳定、粒径均匀等特点，可用于药物输送-缓释体系、保健品等领域。
【IPC分类】A61K31/357, A61K47/24, A61K9/127, A61P1/16
【公开号】CN104887630
【申请号】CN201510253292
【发明人】张秀娟, 吴倩倩, 贺高红, 尹文娟, 张凯哲
【申请人】大连理工大学
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2015年5月15日