马尾藻多糖在制备用于治疗或预防肠病毒71型感染的组合物中的用图
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种马尾藻多糖在制备用于治疗或预防肠病毒71型感染的组合物中 的用途，其中该组合物典型地可作为医药组合物、食品添加物及清洁卫生用品的添加物。
【背景技术】
[0002] 肠病毒71型属于小核糖核酸病毒科（Picornaviridae),肠病毒属 (Enterovirus),是目前已知的肠病毒中最后被发现的一种。肠病毒71型感染脑髓及脑干 造成突发性中枢神经的病症，如：昏睡、急躁、呼吸困难、脑炎、无菌性脑膜炎、手足口症、疱 疹性咽峡炎以及心脏衰竭休克，容易造成儿童重症，对儿童危害极大。
[0003] 在物理化学特性上，肠病毒71型病毒颗粒不易受酸碱影响，故其感染力在酸性环 境下，可被稳定的保留下来。由于肠病毒71型不具由脂质所形成的外套膜（envelope)结 构，属于种裸病毒，故对乙醇具有耐受性，使得酒精无法发挥抑制作用。此外，一般家庭常用 的清洁剂对肠病毒71型亦无杀菌效果。目前也没有药物或疫苗可以有效的对抗肠病毒71 型所引起的感染。
[0004] 马尾藻（Sargassum)是褐藻中的一类海藻，属褐藻门，鹿角菜目、马尾藻科，其分布 在世界许多海域，在台湾可见于北部、东北部沿岸海域以及澎湖、绿岛、兰屿等区域，特别于 渗湖海域具有相当多的产量。马尾藻多糖（Sargassum polysaccharide)是从马尾藻中萃 取的一种易溶于水、黏度较高的多糖类物质。有报导显示马尾藻多糖具有增强免疫力、抑制 肿瘤细胞、抗氧化和抗病毒等药理活性，但对于抗病毒的药理机制尚不明确，尤其针对肠病 毒少有深入探讨。
[0005] 因此，针对肠病毒71型，仍有需要找出可有效对抗其感染的活性成分，特别是来 自日常生活的天然食材，不但可达治疗功效，亦有无毒及容易取得的优点。
【发明内容】
[0006] 本发明提供了一种马尾藻多糖在制备用于治疗或预防肠病毒71型感染的组合物 中的用途。
[0007] 在部分具体实施例中，本发明的马尾藻多糖可经硫酸化处理，使得处理后的马尾 藻多糖中，硫酸根含量达10% (w/w)以上、20% (w/w)以上、40% (w/w)以上、或60% (w/w) 以上。在一特定具体实施例中，本发明的马尾藻多糖中，硫酸根含量达60-70% (w/w)。
[0008] 具体而言，本发明的组合物可增加对于肠病毒71型感染的抑制率，例如，降低细 胞感染肠病毒71型的比例、抑制肠病毒71型的RNA合成以及抑制肠病毒71型引起的细胞 病变及细胞凋亡。
[0009] 本发明的各个具体实施例的细节说明如后。本发明的其他特征将会经由以下各个 具体实施例中的详细说明及权利要求而清楚呈现。
[0010] 无须进一步的阐述，相信本发明所属技术领域中的技术人员基于前述说明即可利 用本发明至最广的程度。因此，可以理解以下的说明仅仅是作为例示说明之用，而非以任何 方式限制其余的揭露内容
【附图说明】
[0011] 图1显示马尾藻多糖的HPLC图谱，其中图I (A)为马尾藻多糖标准品的HPLC图 谱，及图I (B)为硫酸化马尾藻多糖的HPLC图谱。
[0012] 图2显示不同浓度的马尾藻多糖标准品及硫酸化马尾藻多糖对于肠毒病71型的 抑制效果。
【具体实施方式】
[0013] 本发明分析马尾藻多糖，首次证实其针对肠病毒71型的感染有良好的抑制效果， 尤其是增加硫酸根含量的马尾藻多糖，可进一步提高其抑制肠病毒71型的效果。马尾藻多 糖无毒且容易取得，相较于有毒性且昂贵的化学药物接受度高，特别是针对高危险的婴幼 儿而言。因此，本发明对于肠病毒71型所引起的疾病的治疗及防治做出了巨大贡献。
[0014] 除非另有指明，所有在此处使用的技术性和科学性术语具有如同本发明所属领域 技术人员一般所了解的意义。
[0015] 本文所使用的"一"一词，如未特别指明，是指至少一个(一个或一个以上）的数量。
[0016] 在一方面，本发明是揭示一种马尾藻多糖在制备用于治疗或预防肠病毒71型感 染的组合物中的用途。
[0017] 马尾藻多糖是由马尾藻萃取而得的多糖，从化学上来说，它是一种以"岩藻糖"为 主的多糖体，是由岩藻糖（fucose)及硫酸盐（sulphate)组成的水溶性杂聚多糖成分，其中 岩藻糖以α-(1 - 2)、α-(1 - 3)或α-(1 - 4)互相键结成主键，而硫酸盐结合在C-2或 C-4的还原端上。具体而言，其具有的化学结构如下式（I):
[0019] 马尾藻多糖可由商业上获得，也可通过常规方法从马尾藻萃取而得，例如，以热水 浸泡藻体使其软化(例如，浸泡于约l〇(TC左右的热水约1-3小时),经酵素或酸化步骤处 理，然后离心、过滤，收集上清液。萃取后取得的上清液可进一步冷冻干燥，以利保存。在部 分具体实施例中，本发明使用的马尾藻多糖，其分子量范围为50kDa至1，OOOkDa、250kDa至 950kDa、或450kDa至850kDa。在一特定具体实施例中，本发明使用的马尾藻多糖具分子量 约 800kDa。
[0020] 较佳地，可进行增加硫酸根含量的步骤，以增加马尾藻多糖的硫酸根含量。在部 分具体实施例中，本发明可采用化学方法添加硫酸根，例如，加入氯磺酸-二甲基甲酰胺 (Chlorsulfonic acid-N, N-dimethylformamide，HC1S03/DMF)试剂进行反应，反应后以喊 (如NaOH)中和，然后离心、过滤，收集上清液。在部分具体实施例中，本发明的马尾藻多糖 中硫酸根含量达10% (w/w)以上、20% (w/w)以上、40% (w/w)以上、或60% (w/w)以上。在 一特定具体实施例中，本发明使用的马尾藻多糖中硫酸根含量达60-70% (w/w)。
[0021] 本发明的组合物可依传统上的常规方法，与任何一种或多种载体调配而成。例如， 将马尾藻多糖与适当载体混合，再将其制成所需剂型。
[0022] 本文所使用的"载体"一词意指用以携带马尾藻多糖形成所欲调配物形式的非活 性成分，包括任何标准药学上可接受的载体，其可与调配物的活性成分相容，且对欲施用的 个体无害，例如，水、生理盐水、甘油、乙醇、葡萄糖水、葡聚糖、乳糖、蔗糖、甘露醇、其类似物 或以上的组合。
[0023] 本发明的组合物尚可包括黏结剂、润滑剂、抗氧化剂、填充剂及保藏剂。可用的黏 结剂包括阿拉伯胶、海藻酸钠、乙基纤维素、洋菜、明胶、淀粉、羟基纤维素、羟丙基纤维素、 其类似物或以上的组合。可用的润滑剂包括硬脂酸、硬脂酸钙、硬脂酸镁、滑石、氢化油、腊、 其类似物或以上的组合。可用的抗氧化剂包括生育醇、二丁基羟基甲苯、丁基羟基甲氧苯、 抗坏血酸、其类似物或以上的组合。可用的填充剂包括微晶纤维素、乳糖、甘露醇、其类似物 或以上的组合。可用的保藏剂包括苯甲酸及其盐类、山梨酸及其盐类、对羟基苯甲酸酯类、 去水醋酸钠、过氧化氢、次氯酸钠、其类似物或以上的组合。
[0024] 在一具体实施例中，本发明的组合物是作为医药组合物，其可依投与途径调配成 各种剂型。举例而言，本发明的医药组合物可调配成为胶囊或锭剂，以进行口服投药。胶囊 可含有任何标准的医药可接受性物质，例如，明胶或纤维素。锭剂可根据常规方法，将组合 物与固态载体及润滑剂共同压制而调配。本发明的医药组合物亦可调配成注射剂型，所使 用的载体包括水溶液、等张盐水或葡萄糖液或是其他熟知的医药可接受性载体。本发明的 医药组合物尚可调配成乳膏、油剂、凝胶、乳液或喷雾剂，供局部施用。
[0025] 在另一具体实施例中，本发明的组合物是作为食品添加物。马尾藻多糖取自天然 食材，不具毒性，可直接添加至食品或营养品中，简单达成预防保健的功效，例如，添加至奶 粉或其他乳制品中提供婴幼儿食用。
[0026] 在又一具体实施例中，本发明的组