苦参啶的医药用图
【技术领域】
[0001] 本发明涉及医药食品保健品领域，特别是涉及一种苦参黄酮类化合物的用途及其 相关广品。
【背景技术】
[0002] 疱疹病毒（Herpesviruses)是群中等小的双股DNA病毒，有100以上成员，因代表 种--单纯疱疹病毒能引起匐行性疱疹而得名。根据其理化性质分a、PY三个亚科a 疱疹病毒(如单纯疱疹病毒、水痘一带状疱疹病毒）增殖速度快，引起细胞病变。3疱疹病 毒(如巨细胞病毒)，生长周期长，感染细胞形成巨细胞。Y疱疹病毒(如EB病毒)，感染的靶 细胞是淋巴样细胞，可引起淋巴增生。疱疹病毒感染的宿主范围广泛，可感染人类和其他脊 椎动物。
[0003] 苦参为豆科槐属植物苦参Sophoraflavescens.的干燥根，具有清热燥湿、杀虫、 利尿等功效。苦参啶是苦参中所含的一种黄酮类化合物。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的旨在提供一种苦参啶的新的用途及其相关产品。
[0005] 具体地说，本发明的第一方面是提供了苦参啶在制备预防或治疗疱疹病毒感染的 药物中的应用。
[0006] 在一优选例中，所述的苦参啶是作为唯一的活性成分应用于预防或治疗疱疹病毒 感染的药物的制备中。
[0007] 本发明的第二方面是提供了一种防治疱疹病毒感染的药物组合物，其特征在于， 它含有有效量的苦参啶。
[0008] 本发明各个方面的细节将在随后的章节中得以详尽描述。通过下文以及权利要求 的描述，本发明的特点、目的和优势将更为明显。
【具体实施方式】
[0009] 本发明的问世部分是基于这样一个意外发现：苦参啶可以显著抑制疱疹病毒的生 长。因此，苦参啶有望开发成为一种可预防或者治疗疱疹病毒感染的药物。
[0010] 进而，本发明的第一方面是提供了苦参啶在制备预防或治疗疱疹病毒感染的药物 中的应用。
[0011] 较优选地，所述的苦参啶是作为唯一的活性成分应用于预防或治疗疱疹病毒感染 的药物的制备中。
[0012] 本发明的第二方面是提供了一种防治疱疹病毒感染的药物组合物，它含有有效量 的苦参啶。
[0013] 如本发明所用，本发明的苦参陡（kuraridin)分子式：C26H3(l06，分子量：438,CAS 号：34981-25-4,其化学结构如下：
[0015]如本领域的普通技术人员所知，本发明的苦参啶可通过商业途径购买获得或通过 化学方法合成，其亦可用本领域的常规方法从豆科槐属植物苦参Sophoraflavescens的干 燥根中提取获得。其纯度均符合药用标准。
[0016] 本发明的苦参啶可以单独使用或以药物组合物的形式使用。药物组合物包括作为 活性成分的本发明的苦参啶及可药用载体。较佳地，本发明的药物组合物含有0. 1~99. 9% 重量百分比的作为活性成分的本发明的苦参啶。"可药用载体"不会破坏本发明的苦参啶的 药学活性，同时其有效用量，即能发挥药物载体作用时的用量对人体无毒。
[0017] 所述可药用载体包括但不限于：软磷脂、硬脂酸铝、氧化铝、离子交换材料、自乳化 药物传递系统、吐温或其他表面活化剂、血清蛋白、缓冲物质如磷酸盐、氨基乙酸、山梨酸、 水、盐、电解质如硫酸盐精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐、硅酸镁、饱和脂肪酸 部分甘油酯混合物等。
[0018] 其他常用的药物辅料如粘合剂(如微晶纤维素)、填充剂(如淀粉、葡萄糖、无水乳 糖和乳糖珠粒)、崩解剂(如交联PVP、交联羧甲基淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠、低取代羟丙 基纤维素)、润滑剂(如硬脂酸镁）以及吸收促进剂、吸附载体、香味剂、甜味剂、赋形剂、稀释 齐II、润湿剂等。
[0019] 本发明的苦参啶以及其药物组合物可按本领域常规方法制备并可以通过肠道或 非肠道或局部途径给药。口服制剂包括胶囊剂、片剂、口服液、颗粒剂、丸剂、散剂、丹剂、膏 剂等；非肠道给药制剂包括注射液等；局部给药制剂包括霜剂、贴剂、软膏剂、喷雾剂等。优 选为口服制剂。
[0020] 本发明的苦参啶以及其药物组合物的给药途径可以为口服、舌下、经皮、经肌肉或 皮下、皮肤粘膜、静脉、尿道、阴道等。
[0021] 下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明 而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条 件或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则所有的百分数、比率、比例、或份数按 重量计。
[0022] 除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意 义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文 中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。
[0023] 本发明提到的上述特征，或实施例提到的特征可以任意组合。本专利说明书所揭 示的所有特征可与任何组合物形式并用，说明书中所揭示的各个特征，可以任何可提供相 同、均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特别说明，所揭示的特征仅为均等或相似 特征的一般性例子。
[0024] 实施例1苦参啶的细胞毒性及病毒抑制试验
[0025] 1. 1.细胞毒性试验（MTT法）：
[0026]【实验材料】
[0027] 非洲绿猴肾细胞（vero)购自ATCC公司。细胞于含10%胎牛血清（Gibco)的DMEM (Gibco)培养基中，在37°C、5%C02条件下培养。
[0028]MTT为购自生工生物公司，DMS0购自国药试剂公司。
[0029]【实验方法】
[0030] 苦参啶对vero细胞毒性作用通过MTT法测得。具体步骤如下：
[0031] 1.样品制备：将苦参啶溶解于二甲亚砜中，得到浓度为50mM的溶液。
[0032] 2.细胞经胰酶消化并洗涤后悬浮于含10%胎牛血清的DMEM培养基中，经台盼蓝染 色排除法计活细胞数，并调节细胞悬浮密度至2X105细胞/mL。
[0033] 3.在平底96孔板中，每孔加入100ill细胞，每孔中细胞总数为2X104。于37°C、 5%C02细胞培养箱中培养过夜。
[0034] 4.吸去每孔的培养基，每孔不同浓度的样品，使终浓度为100、50、25、12. 5iiM。每 浓度3个复孔，每孔200iU，同时设正常细胞对照组，阳性药物对照组（ACV)、DMS0溶剂组及 DMEM溶剂作为背景。
[0035] 5.将加药的细胞在37°C、5%C02细胞培养箱中培养72h。
[0036] 6.每天观察并记录细胞毒性。培养72h后，每孔加入20iil5mg/mLMTT溶液，继续 在培养箱中培养4h，加入150iiLDMS0。
[0037] 在570/650nm波长下测定吸光度。
[0038] 8.根据光吸收值计算细胞相对抑制率。计算公式如下：
[0039] 抑制率=(A细胞组一A药物组）/ (A细胞组一A调零组）X100%
[0040] 9.通过Excel软件计算苦参啶对细胞毒性作用的CC5(I。
[0041]【实验结果】
[0042] 苦参啶对vero细胞毒性作用体外试验结果表明：苦参啶的CC5(I为 22. 740±0. 215。
[0043] 1. 2.病毒抑制试验（MTT法）：
[0044]【实验材料】
[0045] 非洲绿猴肾细胞（vero)购自ATCC公司。单纯疱疹I型（HSV-l)KOS株购自ATCC 公司。细胞于含10%胎牛血清（Gibco)的DMEM(Gibco)培养基中，在371：、5%0)2条件下培 养。
[0046] 结晶紫购自生工生物公司，甲醇购自国药试剂公司。
[0047]【实验方法】
[0048] 苦参啶对vero细胞抗HSV-1抑制作用通过MTT法测得。具体步骤如下：
[0049]1.样品制备：将苦参啶分别溶解于二甲亚砜中，得到浓度为50mM的溶液。
[0050] 2.细胞经胰酶消化并洗涤后悬浮于含10%胎牛血清的DMEM培养基中，经台盼蓝染 色排除法计活细胞数，并调节细胞悬浮密度至2X105细胞/mL。
[0051] 3.在平底96孔板中，每孔加入100iiL细胞，每孔中细胞总数为2X104。于37°C、 5%C02细胞培养箱中培养过夜。
[0052] 4.吸去每孔的培养基，每孔加入病毒液100TCID50/孔和不同浓度（以最大无毒浓 度下）的苦参啶样品混合后加入vero细胞中。每浓度3个复孔，每孔200yL，同时设正常 细胞对照组，病毒对照组、阳性药物对照组（ACV)及DMS0溶剂组。
[0053] 5.将加药和病毒的细胞在37°C、5%C02细胞培养箱中培养72h。
[0054] 6.每天观察CPE，并记录；显微镜下观察细胞病变程度（CPE)，以确定苦参啶对病 毒的抑制作用，记录方式：〇%细胞病变为"一"，〈25%细胞病变为" +"，25%~50%细胞病变 为"++"，50%~75%细胞病变为"+++"，>75%细胞病变为"++++"，以出现"一"的最小浓度 为抗病毒活性最佳。
[0055] 7.培养72h后，每孔加入20iiL5mg/mLMTT溶液，继续在培养箱中培养4h，加入 150iiLDMS0在570/650nm波长下测定吸光度。
[0056] 8.根据光吸收值计算细胞相对存活率。计算公式如下：
[0057] 存活率=(药物组一病毒感染组）/(细胞组一病毒感染组）X100%
[0058] 9?通过Excel软件计算苦参啶对HSV-1抑制作用的IC5Q。
[0059]【实验结果】
[0060] 苦参啶对HSV-1抑制作用体外试验结果表明：苦参啶的IC5Q为8. 111±0. 214。
[0061] 治疗指数SI=CC5(I/IC5(I，SI>2表示低毒高效，1〈SI〈2表示高毒低效，SK1表示无效。
[0062]表1苦参啶 CC5。（ iiM)、IC5。（ iiM)及SI值
[0064]由表1可见：苦参啶具有较好的抗疱疹病毒活性，有望作为活性成分用于制备抗 疱疹病毒药物制剂，具有药用前景。
[0065] 本发明所涉及的多个方面已做如上阐述。然而，应理解的是，在不偏离本发明精神 之前提下，本领域专业人员可对其进行等同改变和修饰，所述改变和修饰同样落入本申请 所附权利要求的覆盖范围。
【主权项】
1. 苦参啶在制备预防或治疗疱疹病毒感染的药物中的应用。2. 如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的苦参啶是作为唯一的活性成分应用 于预防或治疗疱疹病毒感染的药物的制备中。3. -种防治疱疹病毒感染的药物组合物，其特征在于，它含有有效量的苦参啶。
【专利摘要】本发明涉及医药保健品学领域，特别涉及一种苦参啶的医药用途及其产品。本发明的苦参啶可用于制备防治疱疹病毒感染的药物。
【IPC分类】A61K31/12, A61P31/22
【公开号】CN104940176
【申请号】CN201410122717
【发明人】徐宏喜, 刘猛顺, 谭红胜, 韩全斌, 吴蓉, 蔡双璠
【申请人】上海中医药大学
【公开日】2015年9月30日
【申请日】2014年3月28日