一种镇痛止血药物及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于中药深加工领域，具体涉及一种以民族药飞龙掌血深加工所得到的一 种镇痛止血药物及其制备方法和应用。
【背景技术】
[0002] 止血是一个复杂的生理过程，主要受血液凝固、血小板聚集和血管收缩等重要因 素影响。当血管损伤发生出血，组织自身的凝血机制充分表现出来，凝血酶原激活物活性增 强，形成增多，继而凝血酶原转变为凝血酶，凝血酶再催化纤维蛋白原转变为纤维蛋白，同 时也使机体产生对抗纤维蛋白溶解过程的因素。凡是能够促使出血停止的药物均称为止血 药，止血药主要是通过增强体内凝血因素或抑制凝因素，促使凝血，从而达到止血的目的。 临床上使用的天然止血药物主要通过缩短凝血时间、促进局部血管收缩、增强毛细血管抵 抗力并降低通透性、抑制纤溶过程、增加血小板数目、缩短凝血酶生成时间、增强血小板第 三因子活性等作用达到止血的功效。目前常用的多数止血药物功效单一，不能完全满足临 床需要，一些天然止血药物既有止血作用，又能够促进血液溶解、抑制血小板聚集，在临床 上表现出止血活血、行血祛瘀的奇特功效。
[0003] 飞龙掌血为芸香科飞龙掌血属植物飞龙掌血Tbi/Wia asiaiica ( L. ) Lam.的 干燥根或根皮，是一种重要的民族药物，在我国南方众多少数民族地区有广泛应用，被《中 华本草.苗药卷》、《中华本草.傣药卷》等民族医药典籍收载，苗族民间用其水煎剂及药酒 治疗跌打损伤、风湿性关节炎、毒蛇咬伤和外伤出血等多种病症 [1]。
[0004] 虽然飞龙掌血具有良好的镇痛止血效果[2]，但要发挥镇痛止血作用日服量用要达 到20-30g左右，由于飞龙掌血中含有较多生物碱毒性成分，如所含白屈菜红碱为神经肌肉 毒素，对心脏有强烈抑制作用，摄入过量可导致麻痹和死亡 [3]，因此，用飞龙掌血镇痛止血 一方面要服用较高剂量才能达到很好的治疗效果，另一方面，服药量大又会摄入较多毒素， 为解决这一矛盾，很有必要通过对飞龙掌血进行提取、分离和纯化，将飞龙掌血中具有止血 活性的香豆素类有效成分提取出来，将其中毒性生物碱成分分离出去，开发一种用药量少， 镇痛止血有效成分含量高，毒性作用低的药物。
[0005] [1]国家中医药管理局中华本草编委会.中华本草，苗药卷.贵阳，贵州科技 出版社，2005.
[2] 郝小燕，彭琳，叶兰，等.飞龙掌血生物总碱抗炎镇痛作用的研究.中西医结 合学报，2004，2(6): 450-452.
[3] 贾敏如，李星炜.中国民族药志要.北京，中国医药科技出版社，2005。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的，在于针对飞龙掌血镇痛止血有效成分含量低，毒性成分含量较高， 大量内服易引起中毒的问题，开发一种镇痛止血有效成分含量高，用药量少，毒副作用低的 药物，通过对飞龙掌血的提取、分离和纯化等方法，将飞龙掌血中具有镇痛止血作用的有效 成分提取、富集，将毒性成分分离出去，并将制得的药物应用于制备镇痛止血的药剂或药 物。
[0007] 本发明一种镇痛止血药物，是以飞龙掌血（TbWaJia asiaiica ( L. ) Lam.)的根 或根皮为原料，分别经水和乙醇溶液提取，再经提纯和分离而制得的一种黄棕色固体颗粒， 其主要成分香豆素类化学物质含量不低于25%，生物碱类物质低于5%，其余主要为淀粉、糖 类、鞣制、萜类和留醇类等物质，该药物具有良好的镇痛止血效果，镇痛效果堪比阿司匹林， 止血效果与云南白药相近。
[0008] 上述所指的香豆素类化合物是指茴芹香豆素、异茴芹香豆素、8-羟基-6-甲氧基 香豆素和珊瑚菜内酯等。
[0009] 上述所指的生物碱指白屈菜红碱。
[0010] 本发明所述的一种镇痛止血药物的制备方法，是按下列步骤制备： (1) 将飞龙掌血（71〇〇^3^7<3<36^<3以1?(3(1^)]^1111.)的根或根皮洗净、瞭干、粉碎过80 目筛； (2) 分别加入水、乙醇溶液：10% (v/v)、20% (v/v)、30% (v/v)、40% (v/v)、50% (v/v)、 60% (v/v)、70% (v/v)、80% (v/v)和95% (v/v)回流提取3次，每次I小时，料液比第一次 为1 :12,第二和三次为1 :10 ; (3) 将全部提取液合并，过滤，取滤液减压蒸馏蒸去溶剂，得提取浸膏，向浸膏中加入 1-2倍重的40-60°C热水，搅拌悬浮，得悬浮液； (4) 依次用0. 5-2倍体积的石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取1-3次； (5) 分别减压蒸馏蒸去溶剂，得石油醚萃取浸膏、氯仿萃取浸膏、乙酸乙酯萃取浸膏和 正丁醇萃取浸膏； (6) 合并氯仿和乙酸乙酯层浸膏，转移至AB-8型大孔吸附树脂柱上； (7) 分别以水、10% (v/v)、20% (v/v)、30% (v/v)、40% (v/v)、50% (v/v)、60% (v/v)、 70% (v/v)、80% (v/v)和95% (v/v)乙醇梯度洗脱，每个梯度洗脱5-8个柱体积，取50%-70% 乙醇洗脱液； (8) 将50%-70%乙醇洗脱液合并，采用喷雾干燥技术干燥后得到产品。
[0011] 上述步骤（2)所述的提取方式除了回流提取外还包括煎煮提取、索式提取、渗辘提 取或超临界流体萃取等。
[0012] 上述步骤（8 )所述干燥方法还包括常温减压干燥、冷冻干燥和真空微波干燥等。
[0013] 本发明一种镇痛止血药物的应用，是用于制备镇痛止血的药物或制剂。
[0014] 上述所指的药剂包括外用散剂、巴布剂、口服颗粒剂、胶囊剂和片剂等。
[0015] 本发明镇痛止血药物可与三七提取物或者市售三七总皂苷等具有活血化淤作用 的植物药提取物制成复方镇痛止血药物。
[0016] 本发明镇痛止血药物采用HPLC法进行分析检测，建立了其HPLC指纹图谱，同时测 定了药物中茴芹香豆素、异茴芹香豆素、珊瑚菜内酯、毛两面针素、8-羟基-6-甲氧基-香豆 素等香豆素类活性成分的含量，结果表明药物中香豆素类成分不低于25%，白屈菜红碱等生 物碱物质低于5%，其中白屈菜红碱含量低于0. 5%，大幅降低了毒性物质摄入量。
[0017] 本发明镇痛止血药物采用断尾法测定小鼠出血时间，以小鼠给药前后出血时间的 缩短为指标，来判断药物止血的效果。按体重分别口服灌胃给药，每日灌胃一次，连续7天， 于第7天给药30分钟后采用毛细玻管法测定小鼠凝血时间CT，次日采用剪尾法测定出血时 间BT，以小鼠给药前后凝血时间的缩短为指标，来判断止血药的效果，结果表明本发明产品 能显著缩短小鼠的出血时间和凝血时间，显示了良好的止血活性，表明其可能对内源性凝 血途径有促进作用。由给药剂量折算日均人用剂量约为5g生药，大大降低了服用生药量。
[0018] 本发明镇痛止血药物中加入淀粉、糊精、羧甲基淀粉钠、羧甲基纤维素钠、交联聚 维酮、微晶纤维素、乳糖、滑石粉、硬脂酸镁等常规辅料，按照常规工艺，制成临床可接受的 剂型，如外用散剂、巴布剂，口服颗粒剂、胶囊剂、丸剂和片剂等。 本发明镇痛止血药物还可以与三七提取物或市售三七总皂苷等具有活血化淤作用的 植物药提取物按1-100%的比例混合，照常规制剂方法将混合而成的原料药制成外用散剂、 巴布剂、口服颗粒剂、胶囊剂、丸剂和片剂等。
【附图说明】
[0019] 图1是本发明镇痛止血药物的HPLC色谱图， 其中3号峰为绿原酸，7号峰为两面针碱，11号峰为毛两面针素，12号峰为8-羟 基-6-甲氧基香豆素，13号峰为白屈菜红碱，14号峰为茵芋碱，15号峰为异茴芹香豆素，16 号峰为茴芹香豆素，20号峰为珊瑚菜内酯，香豆素类成分约占提取物的35. 2%，白屈菜红碱 等生物碱类物质降低到2. 0%以下。
【具体实施方式】
[0020] 实施例一(镇痛止血药物的制备）： (1) 取飞龙掌血（Toddalia asiatica ( L.) Lam.)的根或根皮6.0公斤，洗净、瞭干、 粉碎过80目筛； (2) 分别加入水、乙醇溶液：10% (v/v)、20% (v/v)、30% (v/v)、40% (v/v)、50% (v/v)、 60% (v/v)、70% (v/v)、80% (v/v)和95% (v/v)回流提取3次，每次I小时，料液比第一次 为1 :12,第二和三次为1 :10 ; (3) 将全部提取液合并，过滤，取滤液减压蒸馏蒸去溶剂，得乙醇浸膏1. 2公斤，向浸膏 中加入2. 5公斤60°C热水，搅拌悬浮，得悬浮液； (4) 依次用2倍体积的石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取3次； (5) 分别减