治疗皮肤t细胞淋巴瘤的组合物和方法
【专利说明】治疗皮肤T细胞淋巴瘤的组合物和方法
[0001] 相关申请的交叉引用
[0002] 本申请要求35U.S.C. § 119 (e)下2013年1月7日提交的美国临时申请号 61/749, 739的优先权，该申请在此以其全部通过引用被并入本文。
[0003] 关于联邦资助的研究或开发的声明
[0004] 该发明在国立卫生研究院授予的授权号5R01CA122569-4和R01FD004092下由政 府支持作出。政府在发明中具有一定的权利。
[0005] 发明背景
[0006] 皮肤T细胞淋巴瘤（CTCL)是一种相对罕见的疾病，在美国具有每年每100, 000个 人约0. 29例的发病率。即使在东部欧洲CTCL被报道为通常的约一半，但是该偏差可归于 疾病的医生知晓差异而不是发生的真正差异。在美国，每年有约1，500个鉴定的新病例，并 且每年约100-200例死亡。CTCL通常见于老年人（诊断的年龄中值是55-60岁），并且攻 击男人是女人的两倍。诊断的平均预期寿命是7-10年，甚至没有治疗。
[0007] CTCL是白血细胞的不痛性（低级）癌症，其主要影响皮肤，其次只影响其它部位。 该疾病包括称作辅助T(TH)细胞的T淋巴细胞的不能控制的增殖。辅助T细胞的增殖导致 这些异常细胞渗透或浸润进皮肤的真皮和表皮层。皮肤可与痒的、轻微脱皮损害反应，虽然 最大浸润的部位不必然对应损害部位。损害最常位于躯干，但是可存在于身体的任何部分。 在最常见的疾病--也称作蕈样肉芽肿病（MF)--过程中，斑块状损害发展成可触知的斑 块，其是深红色并具有更限定的边缘。最后，皮肤肿瘤可发展。最后，癌症可发展成皮肤外 累及，常常在淋巴结或内脏中。在稀有病例中，受累者可发展塞扎里综合征（SS)，MF的白血 病变形。
[0008]CTCL的增殖性T淋巴细胞被表征为表型CD4+/CD45R0+/CLA+/CCR4+。MF和SS在 外周血的累及方面不同。MF通常出现，而没有通过循环恶性T细胞的外周血的明显累及，而 SS通常包括散布到血流中的恶性T细胞。外周血的累及通常与细胞介导的免疫有关，包括 TH1型细胞因子如，例如，IFN-y和E-2的产生减少，和TH2-型细胞因子如，例如，E-4和 IL-5的产生增加。
[0009]CTCL患者，特别地SS患者，IL-12产生缺乏，至少部分由减少数目的髓样树突细 胞--其是重要的IL-12生产者--产生。IL-12刺激NK细胞和T细胞的增殖，增加NK细 胞的细胞溶解活性，并刺激IFN-y产生，这反过来增加DCs和单核细胞引起的IL-12的产 生。
[0010]TH1型细胞因子的外源施用在治疗的患者中产生可测量的临床反应。例如， IFN-a、IFN-Y和/或IL-12的施用已用于这样的治疗，但是具有低副作用发生和刺激免 疫系统多个组分的能力的有效治疗剂的鉴定继续。
[0011] 近年已有较多的努力来发现通过刺激免疫系统的某些关键方面，以及通过抑制某 些其它方面来起作用的新药化合物（参见，例如，美国专利号6, 039, 969和6, 200, 592)。这 些化合物，在本文称作免疫应答改性剂（IRMs)，似乎通过导致细胞因子生物合成、共刺激分 子的诱导和增加的抗原递呈能力的称作Toll样受体（TLRs)的基本免疫系统机制起作用。
[0012] 它们可用于治疗多种多样的疾病和状况。例如，某些IRMs可用于治疗病毒疾病 (例如，人乳头瘤病毒、肝炎、疱疹）、瘤形成（例如，基底细胞癌、鳞状细胞癌、光化性角化 病、黑素瘤）、和TH2介导的疾病（例如，哮喘、变态反应性鼻炎，、特应性皮炎）、自身免疫疾 病（例如，多发性硬化），并且还用作疫苗佐剂。
[0013] 许多IRM化合物是小的有机分子咪唑并喹啉胺衍生物（参见，例如，美国专利 号4, 689, 338)，但是许多其它化合物种类也已知（参见，例如，美国专利号5, 446, 153 ; 6, 194,425 ;和6, 110,929 ;和国际公开号TO2005/079195)，并且更多的仍然正被发现。其 它IRMs具有更高的分子量，如寡核苷酸，包括CpGs(参见，例如，美国专利号6, 194, 388)。
[0014] 本领域仍然存在对可用于治疗难治的疾病或病症如CTCL的新的和改进的组合物 的需要。本发明解决这种需要。
[0015] 发明概述
[0016] -方面，本发明包括在需要其的对象中治疗或改善皮肤T细胞淋巴瘤（CTCL)的方 法。在某些非限制的实施方式中，方法包括局部、经皮、真皮内或病灶内施用给对象治疗有 效量的包括免疫应答改性剂（IRM)化合物的药物组合物，借此对象中的CTCL被治疗或改 善。
[0017] 另一方面，本发明包括增加遭受CTCL的对象中细胞介导的免疫应答的方法。在某 些非限制的实施方式中，方法包括局部、经皮、真皮内或病灶内施用给对象治疗有效量的包 括IRM化合物的药物组合物，借此对象中的细胞介导的免疫应答增加。
[0018] 在以上方面中的任意或本文描述的发明的任何方面的多种实施方式中，施用给对 象的组合物是局部的。在发明的某些实施方式中，IRM化合物包括4-氨基-a，a-二甲 基-2-乙氧基甲基-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉（quinolin)-l-乙醇或其药学上可接受的 盐。在发明的其它实施方式中，组合物包括凝胶。在发明的其它实施方式中，组合物包括约 0. 01% (w/w)IRM至约0. 5% (w/w)的IRM。在发明的其它实施方式中，组合物包括约0. 03% (w/w)IRM至约 0? 06% (w/w)的IRM。
[0019] 在以上方面中的任意或本文描述的发明的任何方面的多种实施方式中，将组合物 施加到对象的至少一个CTCL损害。在发明的某些实施方式中，施用导致施加组合物的至少 一个CTCL损害的至少部分清除。在发明的其它实施方式中，施用导致未施加组合物的至少 一个CTCL损害的至少部分清除。在发明的其它实施方式中，施用导致对象中全部CTCL损害 的50%或更大的清除。在发明的其它实施方式中，施用给对象的IRM的量是约1yg/kg至 约10mg/kg。在发明的其它实施方式中，施用给对象的IRM的量是约100ng/损害至约lmg/ 损害。在发明的其它实施方式中，组合物以每天至少一次、每周至少一次、或每月至少一次 的频率施用给对象。在发明的其它实施方式中，组合物在至少一天、至少一周、至少一个月、 或至少一年的期间里重复施用给对象。
[0020] 在以上方面中的任意或本文描述的发明的任何方面的多种实施方式中，施用激活 对象中系统性细胞介导的抗肿瘤免疫应答。在发明的某些实施方式中，施用引起对象中至 少一个损害中活化的NK细胞或活化的T细胞的浸润。在发明的其它实施方式中，施用导致 对象中至少一个损害中增加水平的粒酶或IFNa。在发明的其它实施方式中，施用激活对象 血液中循环髓样树突细胞或循环NK细胞。在发明的其它实施方式中，活化的循环髓样树突 细胞具有增加⑶80表达。
[0021] 在以上方面中的任意或本文描述的发明的任何方面的多种实施方式中，组合物在 第一治疗期期间和第二治疗期期间施用给对象，其中第一治疗期和第二治疗期由非治疗期 分开。在发明的某些实施方式中，组合物在第一治疗期期间以每天至少一次、每周至少一 次、或每月至少一次的频率施用给对象。在发明的其它实施方式中，凝胶在第二治疗期期间 以每天至少一次、每周至少一次、或每月至少一次的频率施用给对象。在发明的其它实施方 式中，第一治疗期是至少约两周、至少约三周、至少约四周、至少约五周、至少约六周、至少 约七周或至少约八周。在发明的其它实施方式中，第二治疗期是至少约两周、至少约三周、 至少约四周、至少约五周、至少约六周、至少约七周或至少约八周。在发明的其它实施方式 中，将第一治疗期和第二治疗期分开的非治疗期是至少约一周、至少约两周、至少约三周或 至少约四周。在发明的其它实施方式中，对象是哺乳动物。在发明的其它实施方式中，哺乳 动物是人。
[0022] 附图简述
[0023] 当与附图连起来阅读时，以下发明优选实施方式的详细描述将被更好地理解。为 了说明发明的目的，附图中显示目前优选的实施方式。然而，应当理解，发明不限于附图中 显示的实施方式的精确排列和机构。
[0024] 图1，包括图1A-1B，包括本申请中描述的临床试验中招收的患者的照片。图1A显 示瑞喹莫德施用之前的皮肤损害，图1B显示治疗第8周结束时的皮肤损害。这些结果证明 瑞喹莫德清除治疗的损害并引起远的损害的消退。
[0025] 图2是显示研究中招收的患者外周血中⑶80阳性髓样树突细胞的百分比的图。这 些结果指示CD80表达在这些细胞中在治疗的最初八周期间活化并在四周治疗间隙之后第 12周结束再次活化。
[0026] 发明详述
[0027] 本发明包括治疗对象中皮肤T细胞淋巴瘤（CTCL)的方法。具有晚期CTCL的患者 具有显著受损的产生细胞介导的免疫应答的能力，该损伤使得患者的免疫系统难以控制和 含有CTCL。在非限制的实施方式中，发明利用免疫应答改性剂（IRM)化合物，通过其它仍然 响应的免疫细胞群来刺激免疫应答以辅助控制和含有CTCL。
[0028] 本发明部分基于料想不到的发现，包括瑞喹莫德（4-氨基_a，a-二甲基-2-乙 氧基甲基-1H-咪唑并[4, 5-c]喹啉-1-乙醇或其盐）的制剂对于治疗CTCL特别有利，因 为它对治疗的靶损害提供局部的促炎效应，而远的损害由于系统免疫活化也响应。
[0029] 如本文所描述的，治疗的靶损害显示活化的细胞毒性T细胞和NK细胞一一显示增 加的粒酶和IFN-y表达--的显著的损害内移入。公开内容进一步提供系统免疫增加的 证据，包括血液中循环髓样树突细胞和NK细胞的渐进活化。在【具体实施方式】中，本发明的 制剂引起局部治疗的革G损害以及远处损害的尚临床应答率，并具有显者提尚系统性细胞免 疫的能力。本文的公开内容不仅与CTCL，还与其它皮肤癌的治疗有关。0
[0030] 定义
[0031] 除非另外限定，本文使用的所有的技术和科学术语通常具有与该发明所属领域技 术人员通常理解的相同的意思。虽然与本文描述的方法和材料相似或相等的任何方法和材 料可用于本发明的实施或测试，但是描述优选方法和材料。
[0032] 如本文所用，以下术语中的每个具有与它在该部分中相关的意思。
[0033] 本文使用冠词"一（a)"和"一（an)"来指一个或超过一个（S卩，至少一个）的冠 词的语法对象。作为实例，"一要素"指一个要素或超过一个要素。
[0034] 如本文所用，"约"当提到可测量的值如量、短暂的持续时间等时，意为包括与指定 值± 20 %或± 10 %、更优选± 5 %、甚至更优选± 1 %和更优选± 0. 1 %的变化，因为这样的 变化适合进行公开的方法。
[0035] 如本文所用，术语"IRM"指免疫应答改性剂。
[0036] "激动剂"如本文所用指可与受体（例如，TLR)结合引起细胞活性的化合物。激动 剂可以是直接结合受体的配体。可选地，激动剂可通过以下间接地与受体结合，例如，（a)与 直接结合受体的另一个分子形成复合物，或（b)另外导致另一个化合物的修饰以便其它化 合物直接结合受体。激动剂可被称作特定TLR的激动剂（例如，TLR6激动剂）或TLR的特 定组合的激动剂（例如，TLR7/8激动剂一TLR7和TLR8的激动剂）。
[0037] "细胞介导的免疫活性"如本文所用，指认为是细胞介导的免疫应答--如，例如， 至少一种TH1细胞因子产生的增加一一的部分的生