一种丝瓜络抗氧化活性提取物的制备方法及其用图
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种丝瓜络提取物的制备方法及其用途。
【背景技术】
[0002] 人体在氧化代谢的过程中会产生大量含氧自由基，自由基通过细胞运输过程会破 坏其它分子的结构，导致细胞受损，使人体各预防细胞机能下降、衰老，可诱发癌症、糖尿 病、心血管疾病、肾脏病、动脉硬化、缺血性心脏病、神经系统疾病、眼睛疾病等百余种疾病。 研究表明，通过补充抗氧化物质能够保持机体自由基的产生与消除达到平衡，从而防止自 由基对细胞和组织的损伤，是预防各疾病的有效措施之一，食用功能性的抗氧化食品也是 一种既方便又有效的补充抗氧化剂的方法。
[0003] 丝瓜络，即萌芦科植物丝瓜（Luffacylindrical(L.)Rome)的干燥成熟果实的维 管束，具有通经活络、清热解毒、利尿消肿等功效。丝瓜络含有留醇、三萜、皂苷、黄酮、酚类、 蛋白质、氨基酸及有机酸等成分。丝瓜络在临床上广泛用于治疗胸胁疼痛、腹痛、腰痛、睾丸 肿痛、肺热咳嗽、妇女闭经、乳汁不通、痈肿痔疮、便血崩漏等疾病。现代研究表明，丝瓜络对 心肌缺血过程中的心肌具有保护作用。另外，丝瓜络在降血脂、抑制体重增加、抗炎、镇痛镇 静及抗过敏等方面也取得了良好的效果，但其抗氧化活性的研究在文献中几乎未见报道。 基于抗氧化活性与多种药理作用相关，本发明提供了丝瓜络的抗氧化活性提取物及其制备 方法，该提取物具有较强的清除DPPH自由基的能力，且FRAP试验测定其具有较强的总抗氧 化能力，因此，本发明提供的丝瓜络抗氧化提取物既可以作为从天然植物中获得的抗氧化 剂在食品等领域应用，也可以作为丝瓜络的药理活性提取物将来开发成新药应用于临床。
【发明内容】
[0004] 本发明是要解决现有丝瓜络抗氧化活性提取物的制备方法有有机溶剂残留，安全 性差，且成本高的问题，提供一种丝瓜络抗氧化活性提取物的制备方法及其用途。
[0005] 本发明丝瓜络抗氧化活性提取物的制备方法，包括如下步骤：
[0006] -、取丝瓜络药材，加入10倍质量的质量百分浓度为75 %的乙醇溶液，浸泡8~ 12h，超声25~40min，过滤，分别收集固相物A和液相物A，将固相物A加入10倍质量的质 量百分浓度为75%的乙醇溶液中浸泡6~8h，超声25~40min，过滤，收集液相物B，然后 将液相物A和液相物B混合，得到浸提液；
[0007] 二、将浸提液减压浓缩得浸膏；
[0008] 三、将浸膏用蒸馏水溶解后上到聚酰胺色谱柱上，先用蒸馏水洗涤4个柱体积，再 用质量浓度为30%的乙醇溶液洗脱4个柱体积，收集洗脱液，然后减压浓缩洗脱液至干，得 到的固体即为丝瓜络抗氧化活性提取物。
[0009] 上述丝瓜络抗氧化活性提取物在制备抗氧化药物和抗氧化食品中的用途。
[0010] 本发明的有益效果：
[0011] 本发明的制备方法中仅使用了水和乙醇，绿色环保、无有机溶剂残留，且安全性 高。本发明方法采用聚酰胺色谱柱，与葡聚糖凝胶色谱等相比价格较低，降低了方法的成 本。提取方法采用了超声提取法和冷浸法相结合，避免了加热回流提取对活性成分的破坏， 提高了提取率，提取所得浸膏的收率多5%，抗氧化活性提取物的收率多0. 1%。聚酰胺柱 色谱具有富集效率高，可重复利用的优点，降低了成本，具有可行性。
[0012] 本发明制备的丝瓜络抗氧化活性提取物，通过对DPPH自由基清除试验及FRAP法 测定其抗氧化能力试验证明了该提取物具有优良的抗氧化活性，可与药物赋形剂制成适合 于临床使用的抗氧化药物或添加到食品中作为抗氧化食品添加剂使用。本发明的制备方法 中仅使用了水和乙醇，绿色环保、无有机溶剂残留，且安全性高。提取方法采用了超声提取 法，既避免了加热回流提取对活性成分的破坏，又提高了提取率。聚酰胺柱色谱具有富集效 率高，可重复利用的优点，降低了成本，具有可行性。
【附图说明】
[0013] 图1为FeSO^液标准曲线。
【具体实施方式】
[0014] 本发明技术方案不局限于以下所列举【具体实施方式】，还包括各【具体实施方式】间的 任意组合。
【具体实施方式】 [0015] 一：本实施方式丝瓜络抗氧化活性提取物的制备方法，包括如下步 骤：
[0016] -、取丝瓜络药材，加入10倍质量的质量百分浓度为75 %的乙醇溶液，浸泡8~ 12h，超声25~40min，过滤，分别收集固相物A和液相物A，将固相物A加入10倍质量的质 量百分浓度为75%的乙醇溶液中浸泡6~8h，超声25~40min，过滤，收集液相物B，然后 将液相物A和液相物B混合，得到浸提液；
[0017] 二、将浸提液减压浓缩得浸膏；
[0018] 三、将浸膏用蒸馏水溶解后上到聚酰胺色谱柱上，先用蒸馏水洗涤4个柱体积，再 用质量浓度为30%的乙醇溶液洗脱4个柱体积，收集洗脱液，然后减压浓缩洗脱液至干，得 到的固体即为丝瓜络抗氧化活性提取物。
[0019] 本实施方式的制备方法中仅使用了水和乙醇，绿色环保、无有机溶剂残留，且安全 性高。提取方法采用了超声提取法和冷浸法相结合，避免了加热回流提取对活性成分的破 坏，且提高了提取率。分离过程中使用的聚酰胺柱色谱具有富集效率高，可重复利用的优 点，降低了成本，适用于大规模生产。
【具体实施方式】 [0020] 二：本实施方式与一不同的是：步骤二所述浸膏的相 对密度为1. 10~1. 14。其它与一相同。
【具体实施方式】 [0021] 三：本实施方式与一或二不同的是：步骤二中减压浓 缩得浸膏的温度为50°C，即在50°C下进行减压浓缩。其它与一或二相同。
【具体实施方式】 [0022] 四：本实施方式与一至三之一不同的是：步骤三中浸 膏与溶解所用的蒸馏水的体积比为1:1。其它与一至三之一相同。
【具体实施方式】 [0023] 五：本实施方式与一至四之一不同的是：步骤三中洗 脱的流速为5mL/min。其它与一至四之一相同。
【具体实施方式】 [0024] 六：本实施方式与一至五之一不同的是：步骤三中减 压浓缩至干的温度为60°C，即在60°C下进行减压浓缩至干。其它与一至五之 一相同。
【具体实施方式】 [0025] 七：本实施方式与一至六之一不同的是：步骤三中所 述的柱体积是指柱床体积，即柱内聚酰胺的体积。其它与一至六之一相同。
【具体实施方式】 [0026] 八：本实施方式丝瓜络抗氧化活性提取物在制备抗氧化药物和抗氧 化食品中的用途。
[0027] 本实施方式制备的丝瓜络抗氧化活性提取物，通过对DPPH自由基清除试验及 FRAP法测定其抗氧化能力试验证明了该提取物具有优良的抗氧化活性，可与药物赋形剂制 成适合于临床使用的抗氧化药物或添加到食品中作为抗氧化食品添加剂使用。
[0028] 通过以下试验验证本发明的有益效果：
[0029] 试验1、本试验收集10批不同产地的丝瓜络进行提取分离；
[0030] 本试验丝瓜络抗氧化活性提取物的制备方法，包括如下步骤：
[0031] -、取200g丝瓜络药材，加10倍质量的质量百分浓度为75%的乙醇溶液，浸泡 12h，超声30min，过滤，分别收集固相物A和液相物A，将固相物A加入10倍质量的质量百 分浓度为75 %的乙醇溶液中浸泡8h，超声30min，过滤，收集液相物B，然后将液相物A和液 相物B混合，得到浸提液；
[0032] 二、将浸提液减压浓缩得浸膏；
[0033] 三、将浸膏用蒸馏水溶解后上到聚酰胺色谱柱上，先用蒸馏水洗涤4个柱体积，再 用30 %乙醇、75 %乙醇、95 %乙醇各洗脱4个柱体积，分别收集洗脱液，然后减压浓缩30 % 乙醇洗脱液至干，得到3