龋齿的无创伤治疗用的木瓜蛋白酶牙科用凝胶组合物及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及特别是使用手工用于牙齿中腐烂的牙本质的软化的化学组合物的龋 齿的无创伤治疗。
【背景技术】
[0002] 根据世界卫生组织（WHO)，90 %的人口患有龋齿并且80 %不愿意去牙医诊所，因 为他们害怕局部麻醉和由涡轮机（钻孔机）产生的声音，同时将技术描述为消极的并且高 度排斥，因为他们认为噪音、振动和压力为全面牙齿修复的障碍。
[0003] 手工去除龋齿组织的技术看来成了对所有年龄的患者提供更大的安慰的选择。对 关于该问题的文献和临床病例进行一些研究后，选择性的手工去除龋齿组织时协同工作的 特定酶的作用是惊人的，由此提高技术并且使患者和牙医二者更容易接受。
[0004] 从70年代开始，几位研究者基于健康的牙齿结构的最大保留原则，提出去除龋齿 的不同组成的制剂。
[0005]在 1975 年，Habib等人（HabibC.M.，KronmanJ.，GoldmanM?，用 GK-IOl(N-氯甘氨酸）的胶原和轻脯氨酸改变治疗的化学评价。Pharmacol.Ther. Dent.，v. 2, 209-215, 1975)开始该方法，其通过使用具有非特异性蛋白水解作用的5 %次 氯酸钠去除腐烂的牙齿组织。然而，次氯酸钠对于口腔组织是有毒的、刺激的试剂，为此，以 解决所述不便为目的，提出了包括将甘氨酸、氯化钠和氢氧化钠添加至5%次氯酸钠中的方 案。改进的制剂称为GK-101并且由N-单氯甘氨酸组成（GoldmanM.，KronmanJ.H.;对去 除龋齿的化学机械手段的初步报道。J.Am.Dent.Assoc. 1976 ;93 (6) : 1149-53)。即使这使 得该方法比单独的次氯酸盐更有效，但其去除龋齿组织较慢。此外，该方法不包括进行填充 的粘接的牙科材料，因此涡轮机的使用对于成形窝洞的形状仍是必需的。
[0006] 向包含N-单氯甘氨酸的制剂中添加氨基丁酸，由此获得以名称Caridex销售的 组合物（SchutzbankS.G.，GalainiJ.，KronmanJ.H.，GoldmanM.，ClarkeR.E.A.GK-101 和GK101E在龋齿去除中的效果的体外研究的对比。J.Dent.Res. 1978;57:861-864)。即 使当Caridex破坏銅齿的牙本质胶原更有效时，Caridex也具有一定的临床限制，其中我们 可以提到：其具有较高的成本、其需要具有泵的大容器、其需要大量溶液、其加热期间存在 几个问题并且具有短的保质期（BeeleyJ.A.,YipH.K.,StevensonA.G?，化学机械銅齿去 除：技术的回顾和最新进展。Br.Dent.J. 2000 ;188:427-430)。
[0007] 为了使其更有效且更容易处理，该Caridex凝胶发展为Carisolv体系，所述 Carisolv体系包括两种试剂：具有三种不同氨基酸：赖氨酸、亮氨酸和谷氨酸的溶液的 羧甲基纤维素系凝胶；第二组分为0.5 %次氯酸钠溶液。尽管实现了保留健康的牙齿 组织并且减少旋转工具的使用的优点（EricsonD.，Zi_ermanM.，RaberH.，Gotrik B.,BornsteinR.，ThorellJ.;銅齿的化学机械去除的新方法的功效和安全性的临床评 价。CariesRes. 1999 ;33:171-177)，但Carisolv的使用不能系统化，因此由于如需要强化 训练和专业记录以及需要特定工具（这增加该方案的成本）等使用困难，使得其应用限制 在小部分人。
[0008] 以使用于去除龋齿的该化学机械系统的使用全球化为目的，凝胶类制品在2003 年投放市场，该制品的主成分为木瓜蛋白酶，类似于人类胃蛋白酶的从木瓜获得的酶。
[0009] 该制品由两位研究者，圣保罗大学和大都会桑托斯（UniversitiesofSaoPaulo andMetropolitanadeSantos)的儿童牙科教授SandraKalilBussadori博士和来自制 药公司F6rmula& Farmdcia的MdrciaBougasMiziara博士在巴西创造，并且给出商 品名Papacarie0
[0010]Papacarie包括作为活性成分的木瓜蛋白酶、氯胺T、羧甲基纤维素、氯化钠、 对羟基苯甲酸甲酯、氢氧化钠、色料和足量的蒸馏水，从而完成制剂（W02005020946A1)， 后来用由木瓜蛋白酶、氯胺T、果胶、聚乙二醇、丙二醇和着色剂组成的凝胶来改进 (TO2014016644A1)。
[0011] 木瓜蛋白酶从生长在如巴西、印度、锡兰、南非和夏威夷等热带国家的绿色成熟木 瓜番木瓜的叶子和果实的胶乳中提取。
[0012] 木瓜蛋白酶为具有杀菌、抑菌和抗炎特性，专门对牙齿坏死组织起作用的蛋白水 解酶，这是因为其不包含抑制木瓜蛋白酶的蛋白水解作用的血浆抗蛋白酶a1-抗胰蛋白 酶。由于此，坏死组织的软化发生，从而在保留健康组织的同时，清创部分分解的胶原纤维， 这是由于其未脱矿并且不具有任何暴露的胶原纤维。
[0013] 用于Papacarie制剂的另一组分为氯胺。氯胺由具有用于根管冲洗的杀菌和消毒 性的氯和铵组成。氯胺为腐烂的牙本质的额外化学软化剂，从而因为氢键被破坏而影响胶 原的第二和/或第四结构，这使得腐烂组织的去除更容易。当通过使用扫描电子显微镜和 维氏显微硬度检查氯胺的效果时，观察到氯胺的使用导致腐烂的牙本质的外层中的开口牙 本质小管。
[0014] 氯胺为通常危害人体健康的组分。氯胺摄入人体后的几分钟可患有恶心、发绀、循 环性虚脱、口吐白沫和呼吸衰竭。在进行透析的患者中水容器中的氯胺导致高铁血红蛋白 血症和溶血。当吸入氯胺时，还导致支气管痉挛。
[0015] 由于Papacarie的各组分，使得Papacarie实现了使銅齿的去除更容易与高抗菌 性的协同作用并且不使用特定的牙科工具。
[0016]Papacarie的主要优点为需要较少的手工压力、对介入的专业人士引起较少的疲 倦和对患者方面引起较少的敏感性。
[0017] 该凝胶特别推荐用于以下情况：在幼儿、儿童、青少年和/或恐惧症的成年人或者 具有特别需求的患者中降低牙髓暴露的风险的无症状的深龋齿损坏；根龋的去除；牙周病 治疗时齿根面的化学机械处理，使得牙结石或牙垢的去除和齿根隔离更容易；以及由于其 可接受的成本使得用于公共卫生。
[0018] 没有提到禁忌症。无数研究显示，没有由于凝胶与口腔组织的直接接触引起的刺 激。然而，存在不应该施用Papacarie的一定状况：当有与慢性感染过程相一致的症状如 瘘、自发性疼痛或叩诊疼痛时，在具有可能改变宿主的免疫反应的系统性疾病如糖尿病、血 液恶质病等的患者中。
[0019] 该制品必须在适当冷却下保存并且为了在室温下施用必须在使用前十五分钟从 冰箱中取出。
[0020] 专利申请AR号P20120101629,公开号为AR085779A1中描述了基于木瓜蛋白酶 和果胶的另一凝胶。该文献的权利要求1的目的是去除龋齿组织的化学牙科制剂、用于龋 齿或龋齿组织去除的所述化学牙科制剂的制造方法和施用方式；其特征在于包括：2%与 6 %之间的蛋白水解酶，优选30,OOOU/mg木瓜蛋白酶；0. 2 %与1 %之间的抗真菌剂，优选 氯胺T;0. 1%与0. 3%之间的抗菌着色剂，优选甲苯胺蓝；所有上述组分由在去离子水中为 3% -6%，并且用在去离子水中的稀释的三乙醇胺溶液调节至pH5/7的稳定剂、优选柑橘 果胶来支持。
[0021] 因此，根据涉及木瓜蛋白酶-果胶体系的现有技术的目前状态，木瓜蛋白酶凝胶 的最大获得值在600-l，800U/mg的范围（参见专利申请AR085779A1)并且在木瓜蛋白 酶-丙二醇-聚乙二醇体系中，最大获得值为约600U/mg(参见W02014016644A1)。
[0022] 因此，当评价所有上述体系的优点与缺点时，结论是，具有通过改进该酶的承载方 式重新配制的木瓜蛋白酶系酶凝胶是可取的，其更稳定并且对于急性的和慢性的龋齿二者 具有更大的作用能力，其还具有按时间顺序增强的作用，不需要特定工具并且避免潜在的 有毒产品的使用。
【发明内容】
[0023] 本发明涉及用于手工施用的凝胶牙科化学组合物，其目的是使牙齿（dental pieces)上龋腐的牙本质软化以随后用工具手工去除，而不求助于用钻孔机的传统方法。
[0024] 因此，本发明的目的是龋齿的无创伤治疗用凝胶形式的木瓜蛋白酶的牙科用组合 物，其包括最终活性为至少3,OOOU/mg的木瓜蛋白酶，其中木瓜蛋白酶与药学上可接受的 着色剂、防腐剂和溶剂一起用PH= 7的缓冲液-C3 6多元醇-果胶-C2 6链烷醇胺-非离子 型乳化剂混合物生物包封。
[0025] 优选，pH= 7的缓冲液选自磷酸氢二钠或磷酸氢二钾（Na2HPO4,K2HPO4) /柠檬酸 (C6H8O7)，氯化钠（NaCl) /柠