一种含尿激酶的药物冻干制剂及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药领域，涉及一种含尿激酶的药物冻干制剂的制备方法。
【背景技术】
[0002] 1、概述尿激酶，其活性成份来源于新鲜人尿中提取的一种能激活纤维蛋白溶酶 原的酶。它是由高分子量尿激酶（Mw54000)和低分子量尿激酶（Mw33000)组成的混合物。
[0003] 1. 1药理毒理：本品直接作用于内源性纤维蛋白溶解系统，能催化裂解纤溶酶原 成纤溶酶，后者不仅能降解纤维蛋白凝块，亦能降解血循环中的纤维蛋白原、凝血因子V和 凝血因子VID等，从而发挥溶栓作用。本品对新形成的血栓起效快、效果好。本品还能提高血 管ADP酶活性，抑制ADP诱导的血小板聚集，预防血栓形成。本品在静脉滴注后，患者体内 纤溶酶活性明显提高；停药几小时后，纤溶酶活性恢复原水平。但血浆纤维蛋白或纤维蛋白 原水平的降低，以及它们的降解产物的增加可持续12-24小时。本品显示溶栓效应与药物 剂量、给药的时间窗明显的相关性。本品毒性很低，小鼠静脉注射半数致死量大于100万国 际单位/公斤体重。亦无明显抗原性，致畸性、致癌性和致突变性。临床应用罕有过敏反应 报道。但是，鉴于本品增加纤溶酶活性，降低血循环中的未结合型纤溶酶原和与纤维蛋白结 合的纤溶酶原，可能出现严重的出血危险。
[0004] 1. 2药代动力学：本品在人体内药代动力学特点尚未完全阐明。本品静脉给予后 经肝脏快速清除，血浆半衰期<20分钟。少量药物经胆汁和尿液排出。肝硬化等肝功能受 损患者其半衰期延长。
[0005] 1. 3适应症：本品主要用于血栓栓塞性疾病的溶栓治疗。包括急性广泛性肺栓塞、 胸痛6-12小时内的冠状动脉栓塞和心肌梗死、症状短于3-6小时的急性期脑血管栓塞、视 网膜动脉栓塞和其他外周动脉栓塞症状严重的骼-股静脉血栓形成者。也用于人工心瓣手 术后预防血栓形成，保持血管插管和胸腔及心包腔引流管的通畅等。溶栓的疗效均需后继 的肝素抗凝加以维持。
[0006] 1. 4制剂与规格：注射用尿激酶冻干制剂为尿激酶加适宜冻干保护剂的无菌冻干 品，为白色或类白色的冻干块状或粉状物。通用名称：注射用尿激酶；英文名称：Urokinase forInjection0
[0007] I. 5贮藏：遮光，密闭，在10°C以下保存。
[0008] 2、注射用尿激酶工艺技术现状
[0009]尿激酶冻干制剂的生产流程为：药液配制一灌装半加塞一冷冻干燥、压塞一乳 盖一目检一包装。现有的生产工艺如下：
[0010] 2. 1处方组成：尿激酶；人血白蛋白；甘露醇；右旋糖酐；氯化钠；注射用水加至 1000-2000ml〇
[0011] 2. 2药液配制：称取处方量甘露醇、右旋糖酐、氯化钠溶解于总配制量50%的注射 用水中，用pH调节剂调节pH值4. 5~7. 0,（pH调节剂为：5 %NaOH溶液或5 %的HCl溶 液）。加处方量尿激酶搅拌溶解，加配制量0. 05 %的活性炭室温搅拌30分钟，过滤至澄明， 用除菌滤器过滤后备用。
[0012] 2. 3冷冻干燥：取上述精滤液，按每瓶Iml分装于2ml管制瓶中，管制瓶置冷冻干 燥机制品室板层，预冻2小时至-40°C保温4小时，开启捕水器制冷开关，于保温结束后，开 启真空栗，当真空栗读数降至20帕以下时，逐渐升高板层温度至-5°C，保温8小时，升温至 〇°C继续保温3小时，当制品温度与板层温度接近时，继续升高板层温度至30°C并保温5小 时以上，当制品温度与板层温度再次接近时结束冻干，真空落盖、压塞、包装。
[0013] 3、现有工艺存在的问题
[0014] 3. 1尿激酶为生化药物，在水溶液中稳定性较差，由于尿激酶冻干制剂在生产过程 中，先要配制成水溶液，再经过灌装到冷冻干燥结束前，尿激酶处于非干燥状态，产品质量 不稳定：
[0015] 3. 2在药液配制过程中，活性炭在原料、辅料全部溶解后的药液中加入，在过滤脱 炭的同时，尿激酶也有部分被吸附，从而使含量降低。
[0016] 3. 3采用5%HCl溶液或5%NaOH溶液为pH调节剂，药液pH值与产品冻干后再复 溶的PH值差别较大。且在强酸HCl或强碱NaOH溶液中，多肽生化药物稳定性受影响，易引 起含量降低。
[0017] 3. 4在冷冻干燥过程中冻干时间超过22小时，冻干时间越长，尿激酶处于非干燥 状态时间越长，产品质量越不稳定；同时冻干时间越长，能耗越大，生产成本越高。
[0018] 中国专利公开号CN1730098A，公开了一种含活性尿激酶原的组合物、其冻干方法 及冻干制剂，所述尿激酶原组合物，含有适量的尿激酶原、赋形剂（糖类和/或多元醇，选 自甘露醇、蔗糖、海藻糖、甘露醇、乳糖、葡萄糖、山梨醇、麦芽糖中的一种或几种）、缓冲溶液 (磷酸盐缓冲液或Tris-HCl缓冲液）和盐类（氯化钠），还包括保护剂（白蛋白）。该组合 物的冷冻干燥方法包括以下步骤：i)取所述组合物，放入预先降温至_35°C~_45°C的冻干 机，预冻2-4h;ii)然后开始抽真空，升温至-25°C~_35°C;iii)当容器内水分基本升华后 进行第二次升温，使其温度上升至_25°C~-35°C，稳定后保持0. 5h~I. 5h。
【发明内容】
[0019]本发明的目的是提供一种含尿激酶的药物冻干制剂及其制备方法。本发明要解决 的技术问题如下：1)传统方法制备尿激酶冻干制剂时，经过配制、冷冻干燥过程后含量下 降，达到5%以上；2)传统方法采用5%HCl溶液或5%NaOH溶液为pH调节剂，冻干前药液 的PH值与冻干后复溶药液的pH值差别较大，且易引起含量降低；3)传统方法冻干时间过 长，尿激酶处于非干燥状态时间长，产品质量不稳定，同时能耗大，生产成本高。
[0020] 本发明第一方面是提供一种含尿激酶的药物冻干制剂，其原料含有以下成分：尿 激酶，L-精氨酸，甘露醇和注射用水。
[0021] 具体地，以10000支计，所述含尿激酶的药物冻干制剂，其原料含有以下成分：尿 激酶1亿-250亿单位，L-精氨酸5-20mg，甘露醇100-300g，注射用水加至10000-30000ml。
[0022] 优选地，以10000支计，所述含尿激酶的药物冻干制剂，其原料含有以下成 分：尿激酶10亿-150亿单位，L-精氨酸10-15mg，甘露醇150-200g，注射用水加至 10000-30000ml〇
[0023] 进一步优选地，以10000支计，所述含尿激酶的药物冻干制剂，其原料含有以 下成分：尿激酶25亿-50亿单位，L-精氨酸10-15mg，甘露醇150-200g，注射用水加至 10000-20000ml〇
[0024] 更优选地，以10000支计，所述含尿激酶的药物冻干制剂，其原料含有以下成分： 尿激酶50亿单位，L-精氨酸15mg，甘露醇200g，注射用水加至20000ml。
[0025] 本发明第二方面是提供上述含尿激酶的药物冻干制剂的制备方法，该方法包括以 下步骤：
[0026] 1)取处方量的甘露醇，加入注射用水溶解，加活性炭，煮沸，保温，过滤脱炭，得溶 液①；
[0027] 2)在所述溶液①中加入处方量的L-精氨酸，搅拌得溶液②；
[0028] 3)取处方量的尿激酶原粉，加入注射用水溶解，得溶液③；
[0029] 4)合并所述溶液②、溶液③，再用注射用水补足体积至总量，调pH值至4. 5~ 7. 0,经微孔滤器除菌过滤后，分装；
[0030] 5)冷冻干燥。
[0031] 上述方法中：
[0032] 步骤1)中所述注射用水量以使甘露醇充分溶解为宜，例如注射用水用量为甘露 醇重量的10-50倍；一般活性炭用量为溶解甘露醇后所得药液重量的1%。-5%。，较佳的活性 炭用量为2%。；一般煮沸后保温10-30分钟，优选保温15分钟。
[0033] 步骤3)中优选所述注射用水温度小于25°C;-般所述注射用水用量为注射用水