一种治疗慢性咽炎的口含片的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及医药技术领域，特别是一种治疗慢性咽炎的口含片。
【背景技术】
[0002] 慢性咽炎为细菌或病毒引起的疾病，常因急性咽炎反复发作造成，主要症状为咽 痛、咽喉干燥及刺痒、咽部异物感、刺激性咳嗽等症状，严重影响患者的生活和工作。近年 来，随着环境污染的加重，患慢性咽喉炎的人数越来越多，特别是具有吸烟、饮酒习惯的成 年人，发病率更高。目前慢性咽炎一般采用抗菌素治疗，但治疗效果并不明显，且长期使用 造成细菌耐药性增强，疗效进一步降低。
[0003] 由细菌引发的慢性感染性疾病发作频繁反复且难以彻底根治，随着对细菌引起的 临床疾病的研究，人们发现细菌在其生长过程中能够为适应环境而生存，其自身分泌一些 胞外基质，从而在惰性材料或活性的材料表面形成一种与浮游细菌相对应的生长方式，这 种能够起到保护作用并能继续由自身向外分泌游离细菌的膜状结构被称之为细菌生物膜 (bacterial biofilm，BBF)，BBF是引起细菌对抗生素耐药性和慢性感染性疾病反复发作的 主要原因之一。寻找出对BBF具有抑制或杀灭作用的药物对人类健康具有着非常重要的意 义。目前应用的抗菌药物仅能针对游离病菌进行抑制或杀死，都不能彻底清除BBF，因而带 来很多临床问题的产生，如反复发作，耐药性增强等，这给治疗慢性感染性疾病药物的研制 提出了新的要求，而中药在治疗慢性感染性疾病方面有着丰富的临床实践并取得了良好的 效果，在临床中它已成为治疗细菌感染性疾病的一种重要的治疗或辅助治疗方法。
[0004] 近年来，我们在天然产物中筛选对细菌和细菌生物膜有抑制作用的成分。在实验 中我们发现人参、鱼腥草和罗汉果的水提取物对革兰氏阳性和阴性菌不仅有明显的抑制作 用，对它们形成的细菌生物膜也有明显的抑制或破坏作用。根据单味药的实验结果，我们进 行了复方药物的筛选，得到对多种细菌和细菌生物膜具有明显抑制作用的处方；同时根据 需要，加入甘草和陈皮，增加其镇咳作用和缓解咽部的不适感，在抗菌的同时减轻慢性咽炎 的临床症状。本发明完成前，尚未发现将人参、鱼腥草、罗汉果、甘草、陈皮的水提取物制成 含片的报道。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种治疗慢性咽炎的天然药物组合物，该组合物由药食兼用 品组成，对人体无毒副作用、使用方便。其特征在于是由以下的原料和比例组成：
[0006] 人参 1000-1250 克鱼腥草 2000-2500 克
[0007] 罗汉果 2000-2500 克甘草 750-1000 克
[0008] 陈皮 1000-1250 克。
[0009] 优选的处方是，该中药组合物按照重量份数比，由以下原料药制成：
[0010] 人参1000克鱼腥草2000克罗汉果2000克甘草750克
[0011] 陈皮 1000 克。
[0012] 本发明的另一目的是提供了该组合物的制备方法，该方法包括以下步骤：
[0013] (1)将人参、鱼腥草、罗汉果、甘草和陈皮分别除杂质，洗净切成2-3毫米厚的小片 或2厘米长的小段；
[0014] (2)人参与甘草混合，以8倍量的水浸泡3小时，加热至沸腾，保持沸腾2小时，停 止加热，待降至室温时，过滤，残渣加入6倍量水煎煮2小时，过滤，合并滤液，浓缩至40°C测 相对密度为1. 06的浓缩液，低温放置待用；
[0015] (3)罗汉果和鱼腥草以8倍量的水浸泡3小时，加热至沸腾，保持沸腾1小时，停止 加热，待降至室温时，过滤，残渣加入6倍量水煎煮1小时，过滤，合并滤液，浓缩至40°C测相 对密度为1. 06的浓缩液，低温放置待用；
[0016] (4)陈皮以水蒸气蒸馏法提取挥发油，收集得到的含挥发油蒸馏液；
[0017] (5)人参、甘草和鱼腥草、罗汉果的浓缩液和陈皮蒸馏液混合，适当浓缩至稠膏，加 入适量辅料作为分散剂和矫味剂，制成颗粒，干燥，压成1克/片的素片；
[0018] 本发明提供了一种由人参、鱼腥草、罗汉果、甘草和陈皮水提取物在治疗慢性咽炎 的新作用，以及以该发现为基础开发的用于治疗慢性咽炎的组合物。本发明的组合物具有 耐缺氧作用，通过以下药效学实验得到证实。
[0019] (一）为了实现上述目的，对其进行了抑菌和抑制细菌生物膜形成作用的实验，本 发明采用的技术方案如下：
[0020] 1材料与设备
[0021] I. 1 菌株
[0022] 大肠杆菌（1. 1369):中国科学院微生物研究所；
[0023] 金黄色葡萄球菌（1. 0089):中国科学院微生物研究所；
[0024] 1. 2培养基
[0025] 营养肉汤培养基（NB)北京美坛公司；
[0026] 琼脂粉：北京鼎国生物技术有限责任公司；
[0027] 1. 3仪器设备
[0028] 二氧化碳培养箱：日本三洋电器有限公司；
[0029] 台式恒温振荡器（THZ-L)太仓市试验设备厂；
[0030] 双人净化工作台（SW-CJ-ZD):苏州净化设备有限公司；
[0031] 立式压力蒸汽灭菌器筒（01J2003-04):上海东亚压力容器制造有限公司；
[0032] 细菌浊度仪（WGZ-3-XJ)上海晰瑞仪器仪表有限公司；
[0033] 酶标仪（MK3)热电（上海）仪器有限公司；
[0034] 96孔细菌培养板：海门市天龙实验器材制造厂；
[0035] 2实验方法
[0036] 样品配制
[0037] 人参皂苷、茎叶皂苷及各单体溶液的配制：
[0038] 分别称取各样品10mg，用灭菌蒸馏水定容至1ml，制成浓度为lOmg/ml的样品。
[0039] 对照品的配制：
[0040] 称取注射用头孢咲辛钠IOmg,用灭菌蒸馏水定容为1ml，制成浓度为lOmg/ml的阳 性对照药品。
[0041] 2. 1菌悬液的制备及样品对菌悬液的作用
[0042] 2. I. 1菌悬液的制备
[0043] 分别将大肠杆菌和金黄色葡萄球菌活化后，挑取3-4个菌斑接种于5ml营养肉 汤（NB)液体培养基中，37°C摇床震荡培养18h至对数中期，用细菌浊度计调菌悬液浓度为 5CFU，用NB液体培养基稀释100倍，待用。
[0044] 2. 1. 2样品对菌悬液的作用
[0045] 96孔板1-4列为空白组，5-8列为样品组，9-12列为阳性对照组。将已稀释好的 菌悬液，用八通道微量进样器按如下方法加入96孔板内：1-4列每孔100 y 1菌悬液，5-8 列每孔90 y 1菌悬液+10 y 1样品，A-H行样品浓度依次倍比稀释浓度依次为1000 y g/ml， 500 y g/ml,250 y g/ml,125 y g/ml,62. 5 y g/ml,31. 25 y g/ml,15. 625 y g/ml,7. 82 y g/ml〇 9-12列每孔90 y I菌悬液+10 y I头孢对照品，A-H行头孢浓度依次倍比稀释浓度分别为 100 y g/ml，50 y g/ml，25 y g/ml，12. 5 y g/ml，6. 25 y g/ml，3. 125 y g/ml，1. 5625 y g/ml， 782 μg/ml。将96孔板置于恒温培养箱培养24小时，取出，倒出液体，蒸馏水反复清洗。加 入结晶紫100 y 1，染色30min，蒸馏水冲洗。加入脱氧胆酸钠100 y 1，脱色30min，600nm酶 标仪测OD值。该吸收值代表样品对细菌菌悬液的作用强弱。
[0046] 2. 2细菌生物膜的制备和样品对细菌生物膜的作用
[0047] 2. 2. 1生物膜的制备
[0048] 分别将5McF的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌菌悬液用NB液体培养基稀释100倍 后，用八通道微量进样器加入96孔板内，每孔100 y 1，放入37°C恒温培养箱中静置培养 24h，弃去菌悬液，余下作为被膜菌待用。
[0049] 2. 2. 2样品对细菌生物膜的作用
[0050] 将建立