一种四方藤中总香豆素的新型提取工艺的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种中药提取技术领域，具体是指一种四方藤中总香豆素的新型提取 工艺。
【背景技术】
[0002] 四方藤为葡萄科白粉藤属植物戟叶白粉藤的干燥根茎，主要分布于我国广西、广 东、海南等南方地带，具有祛风除湿，活血通络的功效，主要用于治疗风湿痹痛、腰肌劳损、 肢体麻痹、跌打损伤等。四方藤中富含岩石、菜素等香豆素类化合物，而现有的对四方藤总 香豆素提取工艺较为复杂，且提取效率低。
[0003] 基于此，研究并开发设计了一种四方藤中总香豆素的新型提取工艺。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于：提供一种四方藤中总香豆素的新型提取工艺。
[0005] 本
【发明内容】
的具体技术方案为：一种四方藤中总香豆素的新型提取工艺，称取干 燥至恒重的四方藤样品，回流提取，过滤，将所得滤液用乙醇定容至250ml，精确吸取样品溶 液0.1 ml于IOml容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度，混匀，用无水乙醇作参照，在280nm波 长处测定吸光度，计算总香豆素的提取率。
[0006] 进一步地，为了更好的实现本发明，还包括以下技术特征，所述乙醇浓度为50% - 70%〇
[0007] 进一步地，为了更好的实现本发明，还包括以下技术特征，所述乙醇浓度为60%。
[0008] 进一步地，为了更好的实现本发明，还包括以下技术特征，所述料液比为1 :8- 1 : 24。
[0009] 进一步地，为了更好的实现本发明，还包括以下技术特征，所述料液比为1 :16。
[0010] 进一步地，为了更好的实现本发明，还包括以下技术特征，所述回流提取时间为 0. 5h -2. 5h〇
[0011] 进一步地，为了更好的实现本发明，还包括以下技术特征，所述提取时间为2h。
[0012] 进一步地，为了更好的实现本发明，还包括以下技术特征，所述提取次数为1一5 次。
[0013] 进一步地，为了更好的实现本发明，还包括以下技术特征，所述提取次数为3次。
[0014] 实验部分：
[0015] 1仪器与材料
[0016] I. 1仪器紫外可见分光光度计Lambda650, R-1001型旋转蒸发仪，生产厂家：郑州 长城科工贸有限公司；BS124s型电子天平，生产厂家：赛多利斯科学仪器有限公司，DZF-IB 型真空干燥箱，生产厂家：上海跃进医疗器械厂；ZKW型电子恒温水浴锅，生产厂家：郑州长 城科工贸有限公司。
[0017] 1.2材料四方藤购于广西桂林市药材市场，经鉴定为葡萄科白粉藤属植物四方藤 的干燥藤；岩石菜素对照品（中国食品药品检定研究院）；无水乙醇（AR)。
[0018] 2 方法
[0019] 2.1总香豆素含量测定
[0020] 对照品溶液的制备：精确称取105°C干燥至恒重的岩石菜素对照品0. 5g，用无水 乙醇溶解，转入至100mL量瓶中，用污水乙醇定容，摇匀，即配得0. 05mg/ml岩白菜对照品溶 液。
[0021] 2. 1. 2标准曲线的绘制：精确量取对照品溶液0、1. 0、2. 0、3. 0、4. 0、5. 0、6. Oml分 别置于IOml量瓶中，无水乙醇溶液定容至10ml，摇勾，以无水乙醇做空白对照，于280nm波 长处测定其吸光度，以吸光度（A)为纵坐标，岩石菜素的质量浓度为横坐标，绘制标准曲 线，得到线性回归方程。
[0022] 总香豆素提取率的测定：精确称取5. 0g，已干燥至恒重的四方藤样品，按不同提 取条件进行回流提取，过滤，将所得滤液用乙醇定容至250ml，精确吸取样品溶液0.1 ml于 IOml量瓶中，用无水乙醇定容至刻度，混匀，以无水乙醇作参照，在280nm波长处测定吸光 度。由回归方程计算溶液中总香豆素的浓度，并计算样品总香豆素的提取率。
[0023] 单因素试验考察：
[0024] 乙醇浓度对四方藤中总香豆素提取率的影响：
[0025] 称取5份四方藤，每份5. 0g，分别以50 %、60 %、70 %、80 %、90 %的乙醇溶液浓度 按料液比为1 :1〇的条件喜爱进行回流提取，时间为2h，然后测定配制样品溶液的吸光度。 根据线性回归方程计算样品中总香豆素的提取率。结果分析可知：总香豆素提取率随乙醇 浓度增大而增大，先增加后有所下降。当乙醇浓度为60%时提取率达到最大，之后随着乙醇 浓度的增大，总香豆素提取率反而下降，分析原因：乙醇浓度的增加，脂溶性物质溶出量增 加，同时溶剂的极性下降，导致香豆素类化合物的溶解度下降等。
[0026] 2. 2. 2料液比对四方藤中总香豆素提取率的影响：称取5份四方藤、每份5. 0g，分 别用料液比1 :8、1 :12、1 :16、1 :20、1 :24的60%乙醇回流提取2h，过滤，配制样品溶液，并 测定其吸光度，根据线性回归方程计算出样品中总香豆素的提取率。
[0027] 随着料液比的增加，香豆素的提取率随溶剂量的加大而增加，当料液比超过1 :16 时，提取率速度变化的幅度趋于平缓。料液比太小不利于四方藤中总香豆素转移到提取液 中；料液比过大，不利于浓缩及溶剂的回收，故选取1 :16、1 :20、1 :24三个水平作出正交试 验设计。
[0028] 2. 2. 3提取时间对四方藤总香豆素提取率的影响称取5份四方藤，每份5. 0g，用 50ml60%乙醇分别回流提取0. 5、1、1. 5、2、2. 5h，过滤，计算样品中总香豆素的提取率。
[0029] 当提取2h后香豆素提取率增长的速度减缓并有下降趋势。因为总香豆素类物质 在高温下长时间受热易分解，考虑到以上因素及生产周期的要求，故选择I. 5、2、2. 5h、三个 水平进行正交试验设计。
[0030] 2. 2. 4提取次数对四方藤中总香豆素提取率的影响：称取5份四方藤，每份5. 0g， 用50ml60%乙醇回流提取2h，提取次数分别为1、2、3、4、5次，过滤，配制样品溶液，并测定 其吸光度。
[0031] 随着提取次数的增加，总香豆素的提取率增大，当提取3次后，提取率趋于稳定， 此时再增加提取次数时提取率影响不大。因此，选择提取1、2、3次三个水平进行正交实验 设计。
[0032] 2. 3正交试验
[0033] 2. 3. 1正交试验设计：在单因素试验基础上，采用L9(34)正交试验设计，选择乙醇 浓度（A)，料液比（B)、提取时间（C)，提取次数（D)这4个因素，进行正交试验，以四方藤总 香豆素提取率为考察指标，正交试验设计见表1 :
[0034] 正交试验结果：由表2和表3可知，影响四方藤中总香豆素提取率的因素为A(乙 醇浓度）>C(提取时间）>B(料液比）>D(提取次数），且乙醇浓度、提取时间对总香豆 素提取率有显著的影响。根据表2可以确定四方藤中总香豆素提取的最佳提取工艺条件为 A1B1C2D2,即乙醇浓度50%，料液比1:16,提取时间为2h，提取2次，在该提取工艺条件下， 总香豆素提取率为11. 56%高于正交表中的任何一次试验，证明该工艺稳定可行。
[0035] 表1为水平因素表
[0043] 本发明与现有技术相比，具有以下优点及有益效果：
[0044] 本发明采用的提取工艺简单实用，提取率高，是四方藤中获取总香豆素的有效方 法，在工业生产中广泛的推广应用价值。
【具体实施方式】
[0045] 下面结合实施例对本发明作进一步地详细说明，但本发明的实施方式不限于此。
[0046] 实施例1 :
[0047] -种四方藤中总香豆素的新型提取工艺，称取5.Og干燥至恒重的四方藤样品，回 流提取2次，过滤，料液比为1 :8,提取时间为2h，将所得滤液用50 %乙醇定容至250ml，精 确吸取样品溶液〇. Iml于IOml容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度，混匀，用无水乙醇作参 照，在280nm波长处测定吸光度，计算总香豆素的提取率。
[0048] 实施例2 :
[0049] -种四方藤中总香豆素的新型提取工艺，称取5.Og干燥至恒重的四方藤样品，回 流提取3次，过滤，料液比为1:16,提取时间为2. 5h，将所得滤液用60%乙醇定容至250ml， 精确吸取样品溶液〇. Iml于IOml容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度，混匀，用无水乙醇作参 照，在280nm波长处测定吸光度，计算总香豆素的提取率。
[0050] 实施例3 :
[0051] -种四方藤中总香豆素的新型提取工艺，称取5.Og干燥至恒重的四方藤样品，回 流提取1次，过滤，料液比为1:24,提取时间为lh，将所得滤液用70%乙醇定容至250ml，精 确吸取样品溶液〇. Iml于IOml容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度，混匀，用无水乙醇作参 照，在280nm波长处测定吸光度，计算总香豆素的提取率。
[0052] 以上所述，仅是本发明的较佳实施例，并非对本发明做任何形式上的限制，凡是依 据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化，均落入本发明的保护 范围之内。
【主权项】
1. 一种四方藤中总香豆素的新型提取工艺，其特征在于，称取干燥至恒重的四方藤样 品，回流提取，过滤，将所得滤液用乙醇定容至250ml，精确吸取样品溶液0.1 ml于IOml容量 瓶中，用无水乙醇定容至刻度，混匀，用无水乙醇作参照，在280nm波长处测定吸光度，计算 总香豆素的提取率。2. 根据权利要求1所述的一种四方藤中总香豆素的新型提取工艺，其特征在于：所述 乙醇浓度为50% - 70%。3. 根据权利要求2所述的一种四方藤中总香豆素的新型提取工艺，其特征在于：所述 乙醇浓度为60%。4. 根据权利要求1所述的一种四方藤中总香豆素的新型提取工艺，其特征在于：所述 料液比为1 :8- 1 :24。5. 根据权利要求4所述的一种四方藤中总香豆素的新型提取工艺，其特征在于：所述 料液比为1 :16。6. 根据权利要求5所述的一种四方藤中总香豆素的新型提取工艺，其特征在于：所述 回流提取时间为0. 5h - 2. 5h。7. 根据权利要求1所述一种四方藤中总香豆素的新型提取工艺，其特征在于：所述提 取时间为2h。8. 根据权利要求1所述一种四方藤中总香豆素的新型提取工艺，其特征在于：所述提 取次数为1 一5次。9. 根据权利要求8所述一种四方藤中总香豆素的新型提取工艺，其特征在于：所述提 取次数为3次。
【专利摘要】本发明公开了一种四方藤中总香豆素的新型提取工艺，称取干燥至恒重的四方藤样品，回流提取，过滤，将所得滤液用乙醇定容至250ml，精确吸取样品溶液0.1ml于10ml容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度，混匀，用无水乙醇作参照，在280nm波长处测定吸光度，计算总香豆素的提取率。本发明所采取的提取工艺简单实用，提取率高，是从四方藤中提取总香豆素的有效方法，在工业生产中有广泛的推广应用价值。
【IPC分类】A61K36/87
【公开号】CN105079307
【申请号】CN201510486668
【发明人】周洁
【申请人】成都易创思生物科技有限公司
【公开日】2015年11月25日
【申请日】2015年8月7日