一种治疗高血压的竹节参提取物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及中药提取物领域，具体涉及一种竹节参提取物及含有该提取物的药物 制剂，该提取物可以应用于治疗高血压。
【背景技术】
[0002] 竹节参为五加科（Araliaceae)植物竹节参Panaxjaponicus C. A. Mey.的干燥根 茎，又名竹节人参、竹节七等，其根茎横卧，呈竹鞭状，肉质肥厚，白色，结节间具凹陷茎痕， 有羽叶三七、狭叶竹节参及珠子参等变种，广泛分布于日本及中国西南至中部地区。竹节参 性温，味甘、微苦，归肝、脾、肺经，具有滋补强壮、散瘀止痛、止血、祛痰等功效。
[0003] 竹节参最主要的成分为皂苷，其量因产地不同而有所变化。日本报道其根茎含粗 皂苷约23. 6%，而我国文献报道其根中含皂苷仅约为5%。除此之外，竹节参还含有丰富 的氨基酸、多糖，少量的挥发油及无机元素等成分。其皂苷类成分根据母核类型及取代基 的不同可分为齐墩果烧型（Oleanane type)、达玛烧型、奥寇梯木醇型（Octillol type) 及甾醇型等。①齐墩果烷型：齐墩果烷型五环三萜皂苷为竹节参总皂苷的主要有效成分 之一，其种类较达玛烷型少，但量较达玛烷型要高。②达玛烷型：达玛烷型四环三萜皂苷 为竹节参的另一主要有效成分。根据母核羟基多少，达玛烷型皂苷分为20 (S)-原人参二 醇型和20(S)_原人参三醇型，两者间的区别取决于达玛烷母核的C6位是否含有羟基或 由羟基衍生的0-糖苷取代基。③奥寇梯木醇型：此类皂苷均具有20 (S)，24 (S)-环氧达 玛-3 β，6 α，12 β，25-四醇的母核结构。伪人参皂苷F11是奥寇梯木醇型皂苷的代表组分， 同时还有伪人参皂苷RT4，叶三七皂苷A、B、C等。
[0004] 现代药理学研究表明，竹节参具有多种生物活性，如对消化系统、中枢神经系统、 心血管系统、免疫系统、炎症、糖尿病、肥胖、慢性疲乏综合症、肿瘤均有不同程度的药理作 用。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提供一种竹节参提取物，其制备方法和液相分析方法，含有该 提取物的药物制剂及利用该提取物制备治疗高血压的药物的用途。
[0006] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
[0007] -种竹节参提取物，该提取物由以下方法制备：
[0008] (a)以重量计，每100份药材包含竹节参80~90份和大黄10~20份，混合粉碎， 用60 %乙醇溶液热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液；(b)将步骤 (a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，减压 浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁醇萃取物用水溶 解，过滤，用大孔树脂富集活性成分，先用8%乙醇冲洗12个柱体积除去大极性成分，再用 70%乙醇洗脱10个柱体积，收集70%洗脱液，减压浓缩即得。
[0009] 进一步地，步骤（C)中所述大孔树脂为AB-8型大孔树脂。
[0010] 为了能够通过建立HPLC指纹图谱的方法控制不同批次制备的提取物的批间差 异，所述提取物的液相分析方法为：
[0011] 色谱柱：Agilent Zorbax SB-C18 柱（4. 6mmX 250mm，5 μ m);
[0012] 流动相：A为乙腈，B为0. 4%磷酸溶液；
[0013] 梯度洗脱程序：0· 01 ~5min，A 10%- 15% ;5 ~15min，A 15%-48% ;15 ~ 25min，A48% - 78% ;25 ~40min，A 78%- 10% ;
[0014] 流动相流速：1. OmL · min S
[0015] 检测波长：260nm ;柱温：30°C ;进样量：10 yL。
[0016] 药物制剂，含有治疗有效量的所述提取物和药学上可接受的载体。
[0017] 所述的提取物在制备治疗高血压的药物中的应用。
[0018] 所述的药物制剂在制备治疗高血压的药物中的应用。
[0019] 本发明提取物用作药物时，可以直接使用，或者以药物制剂的形式使用。
[0020] 所述药物制剂含有治疗有效量的本发明竹节参提取物，其余为药物学上可接受 的、对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。
[0021] 所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料 以及药物制品辅剂。将本发明的药物制剂以单位体重服用量的形式使用。本发明提取物可 通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控 释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等；用于注射时，可制成灭菌的 水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。
[0022] 本发明的优点：本发明通过对干燥的竹节参进行提取、除杂、富集处理，能得到具 有治疗高血压的提取物；本发明提供的液相分析方法可以用于建立该提取物的指纹图谱， 用于控制不同批次制备的提取物的批间差异。
【附图说明】
[0023] 图1为竹节参提取物HPLC液相图谱。
【具体实施方式】
[0024] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0025] 实施例1 :提取物制备（竹节参85份，大黄15份）
[0026] 药材来源：竹节参和大黄干燥根茎购自安徽亳州中药材市场。
[0027] 主要试剂：食品级乙醇购自上海凌峰化学试剂有限公司；医药级AB-8大孔树脂购 自天津波鸿树脂有限公司；乙腈为HPLC级，购于TEDIA ;85 %磷酸为HPLC级，购于TEDIA ; 色谱用纯净水为哇哈哈纯净水。
[0028] 制备方法：将8. 5kg干燥的竹节参和I. 5kg的大黄干燥根茎混合粉碎，用60 %乙 醇溶液热回流提取（25LX3次），合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液（2L);将 所得乙醇提取浓缩液用水稀释至3L，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和水 饱和的正丁醇（3LX3次）萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁 醇萃取物212g ; (c)正丁醇萃取物用I. 5L水溶解，医用脱脂棉过滤，用AB-8大孔树脂（2kg， 柱体积I. 5L)富集活性成分，先用8 %乙醇冲洗12个柱体积（18L)除去大极性成分，再用 70%乙醇洗脱10个柱体积（15L)，收集70 %洗脱液，减压浓缩，即得竹节参提取物约120g。
[0029] 实施例2 :提取物制备（竹节参80份，大黄20份）
[0030] 制备方法：将8kg干燥的竹节参和2kg的大黄干燥根茎混合粉碎，用60 %乙醇溶 液热回流提取（25LX3次），合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液（2L);将所得 乙醇提取浓缩液用水稀释至3L，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和水饱和 的正丁醇（3LX3次）萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃 取物212g ; (c)正丁醇萃取物用I. 5L水溶解，医用脱脂棉过滤，用AB-8大孔树脂（2kg，柱体 积I. 5L)富集活性成分，先用8%乙醇冲洗12个柱体积（18L)除去大极性成分，再用70% 乙醇洗脱10个柱体积（15L)，收集70 %洗脱液，减压浓缩，即得竹节参提取物约120g。
[0031] 实施例3 :提取物制备（竹节参90份，大黄10份）
[0032] 制备方法：将9kg干燥的竹节参和Ikg的大黄干燥根茎混合粉碎，用60 %乙醇溶 液热回流提取（25LX3次），合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液（2L);将所得 乙醇提取浓缩液用水稀释至3L，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和水饱和 的正丁醇（3LX3次）萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃 取物212g ; (c)正丁醇萃取物用I. 5L水溶解，医用脱脂棉过滤，用AB-8大孔树脂（2kg，柱体 积I. 5L)富集活性成分，先用8%乙醇冲洗12个柱体积（18L)除去大极性成分，再用70% 乙醇洗脱10个柱体积（15L)，收集70 %洗脱液，减压浓缩，即得竹节参提取物约120g。
[0033] 实施例4 :提取物制备（竹节参75份，大黄25份）
[0034] 制备方法：将7. 5kg干燥的竹节参和2. 5kg的大黄干燥根茎混合粉碎，用60 %乙 醇溶液热回流提取（25LX3次），合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液（2L);将 所得乙醇提取浓缩液用水稀释至3L，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和水 饱和的正丁醇（3LX3次）萃取，减压浓缩，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁 醇萃取物212g ; (c)正丁醇萃取物用I. 5L水溶解，医用脱脂棉过滤，用AB-8大孔树脂（2kg， 柱体积I. 5L)富集活性成分，先用8 %乙醇冲洗12个柱体积（18L)除去大极性成分，再用 70%乙醇洗脱10个柱体积（15L)，收集70 %洗脱液，减压浓缩，即得竹节参提取物约120g。
[0035] 实施例5 :提取物制备（竹节参95份，大黄5份）
[0036] 制备方法：将9. 5kg干燥的竹节参和0. 5kg的大黄干燥根茎混合粉碎，用60 %乙 醇溶液热回流提取（25LX3次），合并提取液，浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液（2L);将 所得乙醇提取浓缩液用水稀释至3L，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和水 饱和的正丁醇（