人工培养阴道菌群移植在妇科炎症中的应用方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种人工培养阴道菌群移植在妇科炎症中的应用方法，通过以菌治菌的方法，实现女性下生殖道疾病的治疗与保护。
【背景技术】
[0002]在人体体表和外界相通的腔道中经常共生着许多微生物菌群，它们发挥着对宿主有益的重要生理作用。正常微生物群、宿主和环境之间始终处于动态平衡状态，形成一个相互依存、相互制约的系统，这个平衡一旦破坏，就可能致病。
[0003]女性下生殖道是人体重要的微生态区。健康妇女阴道排出物中，厌氧菌与需氧菌的比例为5:1，活菌数为12?10 9/ml，菌数可达8 XlOVml。寄生着200多种微生物，以特殊形式生长于正常人阴道粘膜表面，主要的常住菌有乳杆菌、表皮葡萄球菌、大肠埃希菌、棱状杆菌、粪链球菌等。
[0004]多种女性下生殖道疾病是由于阴道微生态系统平衡失调所致，如细菌性阴道炎，霉菌性阴道炎，滴虫性阴道炎等。目前治疗阴道感染的措施主要是运用抗生素、灭滴灵、雌激素以及酸化阴道的制剂等来杀灭阴道内的病原微生物。但是，上述疗法在某种程度上会抑制正常的菌群，引起致病菌或条件致病菌的过度繁殖，从而造成反复感染或多重感染，增加治疗的的难度和成本。许多研究表明，利用阴道正常微生态中的乳酸杆菌制成的制剂对阴道感染的预防和治疗都具有良好的疗效，包括卷曲乳杆菌、詹氏乳杆菌、格氏乳杆菌、阴道乳杆菌、约氏乳杆菌、嗜酸乳杆菌和发酵乳杆菌等。
[0005]本发明主要采用多种阴道乳酸菌进行复合，选用最佳组合实现用于女性下生殖道疾病治疗的微生态制剂，具有安全简单、无抗药性、降低诱发其他感染和复发的可能等优点。
【发明内容】
[0006]本发明的目的在于提供一种人工培养阴道菌群移植在妇科炎症中的应用方法，可以通过调节女性下生殖道内环境和菌群组成，实现维护阴道微生态平衡，长期、有效、快捷地治疗由阴道菌群失衡引起的感染性疾病。
[0007]本发明所述应用方法包括下列步骤:
1、阴道益生菌分离:采集健康组女性下生殖道排泄物样品，续培养系统内通N2保持厌氧，发酵罐置于37°C水浴，罐内pH在线控制为6.5，运行体积500mL，以35 mL / h稀释速率栗进栗出；待恒化器稳定后，接种粪便样品；每隔3d做一次活菌计数，每天取新鲜培养液，一 80°C保存；利用平板分离技术分离益生菌；
所述益生菌为:青春双歧杆菌、两歧双歧杆菌、动物双歧杆菌、短双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、长双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、卷曲乳杆菌、德氏乳杆菌、保加利亚乳杆菌、发酵乳杆菌、格氏乳杆菌、瑞士乳杆菌、德氏乳杆菌、副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、鼠李糖乳杆菌或唾液乳杆菌中的一种或几种联合使用； 2、阴道益生菌的冻干:将筛选出的益生菌群进行二次活化；将益生菌群制成冻干粉；
3、微胶囊的制备:选择海藻酸钠为囊材，以果胶为辅材，果胶液浓度为2%，果胶液与益生菌液体积比为1:1，海藻酸钠与果胶质量比为2:1，CaCL2浓度为0.3 moL / L ;双歧杆菌微胶囊直径为I?2 mm ;
4、益生菌栓塞制备方法:将上述益生菌冻干粉或微胶囊包裹于具有良好生物兼容性的无生物毒性的薄膜上，通过塞入女性阴道部位达到菌体的释放和女性疾病的治疗。
[0008]5、益生菌胶囊的制备:益生菌冻干粉或微胶囊包裹于胶囊中，通过塞入女性阴道部位达到菌体的释放和女性疾病的治疗。
[0009]本发明的有益效果:本发明可通过调节女性下生殖道内环境和菌群组成，实现维护阴道微生态平衡，长期、有效、快捷地治疗由阴道菌群失衡引起的感染性疾病。
【具体实施方式】
[0010]本发明所述应用方法包括下列步骤:
1、阴道益生菌分离:采集健康组女性下生殖道排泄物样品，续培养系统内通N2保持厌氧，发酵罐置于37°C水浴，罐内pH在线控制为6.5，运行体积500mL，以35 mL / h稀释速率栗进栗出。待恒化器稳定后，接种粪便样品。每隔3d做一次活菌计数，每天取新鲜培养液，一 80°C保存。利用平板分离技术分离益生菌；
所述益生菌为:青春双歧杆菌、两歧双歧杆菌、动物双歧杆菌、短双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、长双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、卷曲乳杆菌、德氏乳杆菌、保加利亚乳杆菌、发酵乳杆菌、格氏乳杆菌、瑞士乳杆菌、德氏乳杆菌、副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、鼠李糖乳杆菌或唾液乳杆菌中的一种或几种联合使用；
2、阴道益生菌的冻干:将筛选出的益生菌群进行二次活化；将益生菌群制成冻干粉；
3、微胶囊的制备:选择海藻酸钠为囊材，以果胶为辅材，果胶液浓度为2%，果胶液与益生菌液体积比为1:1，海藻酸钠与果胶质量比为2:1，CaCL2浓度为0.3 moL / L ;双歧杆菌微胶囊直径为I?2 mm ;
4、益生菌栓塞制备方法:将上述益生菌冻干粉或微胶囊包裹于具有良好生物兼容性的无生物毒性的薄膜上，通过塞入女性阴道部位达到菌体的释放和女性疾病的治疗。
[0011]5、益生菌胶囊的制备:益生菌冻干粉或微胶囊包裹于胶囊中，通过塞入女性阴道部位达到菌体的释放和女性疾病的治疗。
【主权项】
1.一种人工培养阴道菌群移植在妇科炎症中的应用方法，其特征是: A、阴道益生菌分离:采集健康组女性下生殖道排泄物样品，续培养系统内通N2保持厌氧，发酵罐置于37°C水浴，罐内pH在线控制为6.5，运行体积500mL，以35 mL / h稀释速率栗进栗出；待恒化器稳定后，接种粪便样品；每隔3d做一次活菌计数，每天取新鲜培养液，一 80°C保存；利用平板分离技术分离益生菌； B、阴道益生菌的冻干:将筛选出的益生菌群进行二次活化；将益生菌群制成冻干粉； C、微胶囊的制备:选择海藻酸钠为囊材，以果胶为辅材，果胶液浓度为2%，果胶液与益生菌液体积比为1:1，海藻酸钠与果胶质量比为2:1，CaCL2浓度为0.3 moL / L ;双歧杆菌微胶囊直径为I?2 mm ; D、益生菌栓塞制备方法:将上述益生菌冻干粉或微胶囊包裹于具有良好生物兼容性的无生物毒性的薄膜上，通过塞入女性阴道部位达到菌体的释放和女性疾病的治疗。2.根据权利要求1所述的一种人工培养阴道菌群移植在妇科炎症中的应用方法，其特征是:所述步骤(A)中的益生菌是:青春双歧杆菌、两歧双歧杆菌、动物双歧杆菌、短双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、长双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、卷曲乳杆菌、德氏乳杆菌、保加利亚乳杆菌、发酵乳杆菌、格氏乳杆菌、瑞士乳杆菌、德氏乳杆菌、副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、鼠李糖乳杆菌或唾液乳杆菌中的任何一种或几种联合使用。
【专利摘要】一种人工培养阴道菌群移植在妇科炎症中的应用方法，是利用女性阴道正常益生菌群对女性阴道疾病的调理作用，恢复女性菌群失调，从而达到维护女性泌尿生殖道健康的目的。其特点为采用以菌治菌的方法，通过维持女性下生殖道菌群的稳定，实现无耐药性、无毒副作用的微生态治疗法，制剂形式为阴道栓塞，制作简单，使用方便，成本较低。
【IPC分类】A61P31/00, A61K35/745, A61P15/02, A61K35/747, A61P33/02
【公开号】CN105193860
【申请号】CN201510619424
【发明人】陈廷涛, 辛洪波, 邓侃, 张榕吉, 唐先耀, 周海婷
【申请人】南昌大学
【公开日】2015年12月30日
【申请日】2015年9月25日