亮氨酸和烟酸降低脂质水平的制作方法
【专利说明】亮氨酸和烟酸降低脂质水平 夺叉引用
[0001] 本申请要求2013年3月15日提交的美国临时专利申请号61/800, 363的优先权， 该临时申请通过引用以其整体并入本文。
【背景技术】
[0002] 代谢障碍如高脂血症和肥胖以及对健康和死亡率的相关影响呈现了对公共健康 的显著负担。例如，在临床上被定义为身体质量指数超过30kg/m2的肥胖据估计影响了 35. 7%的美国成年人口。在美国，据估计肥胖导致每年约110, 000-365, 000例死亡。肥胖 可以导致高脂血症，其特征在于血流中包括胆固醇、胆固醇酯、磷脂和甘油三酯在内的脂质 过量，并且可以进一步导致糖尿病、血管疾病、癌症、肾病、传染病、外部原因、故意的自我伤 害、神经系统病症和慢性肺病（NEnglJMed2011 ;364:829-841)。据估计，受试者表现出 向心性肥胖和至少两种其他代谢障碍（如高胆固醇、高血压或糖尿病）的代谢综合征影响 了 25%的美国人口。
[0003] 高脂血症一一肥胖和其他病况的一种症状，可以用包括烟酸在内的多种药物来治 疗。烟酸是维生素B3(尼克酸）的一种形式。当以高剂量（l-3g/天）服用时，烟酸可以治 疗高脂血症，因为它能够降低总脂质、LDL、胆固醇、甘油三酯和脂蛋白，或者升高血流中的 HDL脂蛋白。它还可以降低动脉粥样硬化斑块的进展和冠心病的发病率和死亡率。
[0004] 然而，烟酸可能具有显著的副作用，因此可能通常是不良耐受的。一种显著的副作 用可能是严重的皮肤血管舒张和潮红反应，因此尽管已经很好地证明了安全性和有效性， 但是很少作为处方开出（CarlsonLA.Nicotinicacid:thebroad-spectrumlipiddrug. A50thanniversaryreview.JIntMed2005 ;258:94_114)。尽管副作用在持续（SR)和 延长（ER)释放制剂中略微减弱，但是副作用仍然持续到足以限制药物的使用。因此，存在 对于在不降低其治疗效果的情况下减少烟酸的副作用的迫切需求。
【发明内容】
[0005] 本申请提供了用于治疗受试者的高脂血症的组合物、方法和试剂盒。该组合物、方 法和试剂盒可以包括与烟酸组合的亮氨酸和/或亮氨酸代谢物。本发明解决了用高剂量烟 酸治疗受试者时的负面的副作用。
[0006] 本发明的组合物可以口服或通过其他途径如静脉内给药来施用。用于口服的组合 物可以包括丸剂、片剂、胶囊等。
[0007] 在一个方面，本发明提供包含至少约250mg亮氨酸和/或约25mg-种或多种亮氨 酸代谢物以及至少约lmg烟酸和/或烟酰胺核苷和/或一种或多种烟酸代谢物的组合物。
[0008] 在本发明的另一方面，提供了包含至少约250mg亮氨酸和/或约25mg-种或多种 亮氨酸代谢物以及一定量的烟酸和/或烟酰胺核苷和/或一种或多种烟酸代谢物的组合 物，其中该组合物基本上不含丙氨酸、甘氨酸、谷氨酸和脯氨酸中的每一种。
[0009] 在又一方面，本发明还提供包含至少约250mg亮氨酸和/或约25mg-种或多种亮 氨酸代谢物以及一定量的烟酸和/或烟酰胺核苷和/或烟酸代谢物的组合物，其中烟酸和 /或烟酸代谢物的所述量在不存在组分（a)的情况下不足以降低脂质含量。
[0010] 在本发明的再一方面，提供了包含一定量的亮氨酸和/或一种或多种亮氨酸代谢 物以及一定量的烟酸和/或烟酰胺核苷和/或一种或多种烟酸代谢物的组合物，其中向有 需要的受试者施用该组合物，进一步地其中相比于在降低受试者的脂质含量方面与该组合 物具有相同有效性的仅烟酸的剂量，该组合物在所施用的受试者中引起程度降低的皮肤血 管舒张。
[0011] 在另一方面，本发明进一步提供包含亮氨酸和/或一种或多种亮氨酸代谢物以及 至少约lmg烟酸和/或烟酰胺核苷和/或一种或多种烟酸代谢物的组合物，其中所述组合 物中组分（a)与（b)的摩尔比大于约20。
[0012] 在一些实施方案中，本文所述的该组合物包含至少约500mg亮氨酸和/或至少约 200mg所述一种或多种亮氨酸代谢物。在一些实施方案中，该组合物包含至少约250mg亮氨 酸和/或约25mg-种或多种亮氨酸代谢物。在一些实施方案中，亮氨酸和/或一种或多种 亮氨酸代谢物的量小于约lg。在一些实施方案中，亮氨酸和/或一种或多种亮氨酸代谢物 的量小于3g。
[0013] 本文公开的组合物可以基本上不含烟酰胺。在一些实施方案中，该组合物可以基 本上不含烟酸代谢物。在另一实施方案中，该组合物可以基本上不含烟酰辅酶A、烟尿酸 (nicotinuricacid)、烟酸单核苷酸、烟酸腺嘌呤二核苷酸和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸中的 每一种。在一些实施方案中，该烟酸和/或烟酰胺核苷和/或一种或多种烟酸代谢物是烟 酸。
[0014] 本文公开的组合物可以基本上不含亮氨酸代谢物。在一些实施方案中，该亮氨酸 和/或一种或多种亮氨酸代谢物是亮氨酸。
[0015] 在一些情况下，本文所述的组合物可以包括一定量的烟酸和/或烟酰胺核苷和/ 或一种或多种烟酸代谢物，该量可能小于约lg。在一些情况下，烟酸和/或烟酰胺核苷和/ 或一种或多种烟酸代谢物的量可以小于约250mg。在一些实施方案中，烟酸和/或烟酰胺 核苷和/或一种或多种烟酸代谢物的量可以为约l-l〇〇mg。在再一些实施方案中，烟酸和/ 或烟酰胺核苷和/或一种或多种烟酸代谢物的量可以为至少约lmg。
[0016] 在一些实施方案中，本文公开的组合物可以包括一定量的烟酸和/或烟酰胺核苷 和/或一种或多种烟酸代谢物，该量能够实现小于约l〇〇nM的烟酸和/或烟酰胺核苷和/或 一种或多种烟酸代谢物的血清水平。在本发明的另一方面，烟酸和/或烟酰胺核苷和/或 一种或多种烟酸代谢物的量可以能够实现约10nM的烟酸和/或烟酰胺核苷和/或一种或 多种烟酸代谢物的血清水平。在又一方面，烟酸和/或烟酰胺核苷和/或一种或多种烟酸 代谢物的量可以能够实现约l-l〇〇nM的烟酸和/或烟酰胺核苷和/或一种或多种烟酸代谢 物的血清水平。
[0017] 在一些情况下，本文公开的组合物可以有效地使受试者的甘油三酯水平、总胆固 醇或LDL水平降低至少约5%。在一些情况下，该组合物中组分（a)和（b)的量在施用于受 试者时可以协同地降低所述受试者的脂质含量。在一些实施方案中，该组合物中的组分（a) 和组分（b)可以协同地增强受试者的体重增加的降低、受试者的脂肪氧化的增加或受试者 的Sirtl激活的增加。
[0018] 在一些实施方案中，在不存在亮氨酸和/或一种或多种亮氨酸代谢物的情况下， 本文所述的组合物中烟酸和/或烟酰胺核苷和/或烟酸代谢物的量可能不足以降低脂质含 量。
[0019] 在一些情况下，本文公开的组合物可以包含在食品中。
[0020] 在一些实施方案中，本发明的组合物包含的亮氨酸和/或一种或多种亮氨酸代谢 物的一部分可以是游离形式。在一些实施方案中，该亮氨酸和/或一种或多种亮氨酸代谢 物的一部分可以是盐形式。
[0021] 在本发明的一些方面，该组合物可以进一步包含白藜芦醇。
[0022] 在一些情况下，该组合物可以配制用于口服给药。在一些情况下，该组合物可以是 片剂、胶囊、丸剂、颗粒、乳剂、凝胶、包封在胶囊中的多个珠粒、粉末、悬浮液、液体、半液体、 半固体、糖浆、浆液或可咀嚼形式。
[0023] 在一些情况下，本文所述的组合物中包含的组分（a)和组分（b)可以分开包装。在 一些实施方案中，组分（a)和组分（b)可以混合。
[0024] 本文所述的组合物可以基本上不含选自丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半 胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、组氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、 苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、异亮氨酸和酪氨酸的每种氨基酸。在一些情况下，该组合物可以基 本上不含选自丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、 组氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、异亮氨酸和 酪氨酸的每种游离氨基酸。在一些情况下，该组合物可以含有少于约〇. 1%的选自丙氨酸、 精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、组氨酸、赖氨酸、甲硫氨 酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、异亮氨酸和酪氨酸的每种游离氨基 酸。在一些实施方案中，该组合物可以含有少于约10 %的非亮氨酸氨基酸。
[0025] 在另一方面，可以包含在本文所述的组合物中的一种或多种亮氨酸代谢物可以选 自酮-异己酸（KIC)、a-羟基-异己酸和HMB。在一些实施方案中，本文公开的组合物不 能包含烟酰胺。
[0026] 在又一方面，本文公开的组合物可以进一步包含一种或多种能够降低脂质积累的 治疗剂。在一些实施方案中，可以包含在本文所述的组合物中的一种或多种治疗剂可以选 自HMG-CoA抑制剂、贝特类药物（fibrate)、胆汁酸螯合剂、依泽替米贝（ezetimibe)、洛美 他派（lomitapide)、植物留醇类（phytosterols)、CETP诘抗剂、奥利司他（orlistat)及其 任意组合。
[0027] 在一些实施方案中，本文所述的组合物中组分（a)与（b)的摩尔比可以大于约20。
[0028] 在一些实施方案中，可将本文所述的组合物配制为单位剂型。
[0029] 在另一方面，本发明还提供了试剂盒，其包含本文所述的组合物的单位剂量的多 日供应，以及指导在多日的一段时间内施用所述多日供应的说明书。
[0030] 在又一方面，本发明进一步提供了降低有需要的受试者中的总胆固醇水平的方 法，其包括向所述受试者施用本文公开的组合物以实现该受试者中的总胆固醇水平。在一 些实施方案中，本发明还提供了降低有需要的受试者中的总脂质含量的方法，其包括向所 述受试者施用本文公开的组合物以实现该受试者中的总脂质含量。
[0031] 在一个方面，本发明还提供了降低有需要的受试者中的总胆固醇水平的方法，其 包括向所述受试者施用一定剂量的包含亮氨酸和/或一种或多种亮氨酸代谢物和一定量 的烟酸和/或烟酸代谢物的组合物，以实现该受试者中的总胆固醇水平。
[0032] 在一些实施方案中，可以在本文公开的方法中使用的烟酸和/或烟酰胺核苷和/ 或烟酸代谢物的量可以小于约250mg。在一些实施方案中，可以在本文公开的方法中使用 的烟酸和/或烟酰胺核苷和/或烟酸代谢物的量可以小于约l〇〇mg。在一些实施方案中， 可以在本文描述的方法中使用的烟酸和/或烟酰胺核苷和/或烟酸代谢物的量可以小于约 25mg。在一些实施方案中，可以在本文描述的方法中使用的烟酸和/或烟酰胺核苷和/或 烟酸代谢物的量可以小于约l〇mg。在一些实施方案中，可以在本文公开的方法中使用的组 合物的剂量可以是单位剂量。
[0033] 在本发明的另一方面，公开了减少烟酸和/或烟酰胺核苷和/或一种或多种烟酸 代谢物的副作用的方法，其中该副作用的特征可在于施用烟酸和/或烟酰胺核苷和/或该 一种或多种烟酸代谢物的受试者中的皮肤血管舒张的增加，并且该方法包括向受试者施用 包含有效量的亮氨酸和/或一种或多种亮氨酸代谢物的组合物，其可与烟酸和/或一种或 多种烟酸代谢物施用。
[0034] 在一些实施方案中，本文所述的方法可以包括口服施用该组合物。
[0035] 在一些情况下，在本文所述的方法中使用的亮氨酸和/或亮氨酸代谢物的有效量 可以包含至少约500mg亮氨酸和/或至少约200mg所述一种或多种亮氨酸代谢物。在一些 情况下，亮氨酸和/或亮氨酸代谢物的有效量可以包含至少约250mg亮氨酸和/或至少约 25mg所述一种或多种亮氨酸代谢物。
[0036] 在一些实施方案中，本文公开的方法可以涉及烟酸和/或烟酰胺核苷和/或一种 或多种烟酸代谢物，如果单独施用，其为亚治疗量。在一些实施方案中，在本文所述的方法 中使用的烟酸和/或烟酰胺核苷和/或一种或多种烟酸代谢物可以是小于约lg的量。在 一些实施方案中，在本文公开的方法中使用的烟酸和/或烟酰胺核苷和/或一种或多种烟 酸代谢物可以是小于约250mg的量。在一些实施方案中，在本文所述的方法中使用的烟酸 和/或烟酰胺核苷和/或一种或多种烟酸代谢物的量可以为约l-l〇〇mg。
[0037] 在一些情况下，本文所述的方法可以使用一定量的烟酸和/或烟酰胺核苷和/或 一种或多种烟酸代谢物，该量能够实现约l-l〇〇nM的烟酸和/或烟酰胺核苷和/或一种或 多种烟酸代谢物的血清水平。
[0038] 在本发明的又一方面，提供了降低有需要的受试者中的动脉粥样硬化斑块大小的 方法。该方法包括向所述受试者施用一定剂量的包含亮氨酸和/或一种或多种亮氨酸代谢 物和一定量的烟酸和/或烟酸代谢物的组合物，以实现该受试者中的总动脉粥样硬化斑块 大小。
[0039] 在一些实施方案中，可以在本文所述的方法中使用的烟酸和/或烟酰胺核苷和/ 或烟酸代谢物的量可以小于约250mg。在一些实施方案中，烟酸和/或烟酰胺核苷和/或烟 酸代谢物的量可以为约l-l〇〇mg。在一些实施方案中，烟酸和/或烟酰胺核苷和/或烟酸代 谢物的量可以小于约25mg。
[0040] 在一些情况下，本文所述的方法可以包括向所述受试者施用所述组合物至少约1 年。
[0041] 在一些实施方案中，在本文所述的方法中使用的组合物的剂量可以是单位剂量。 援引并入
[0042] 本说明书中提到的所有出版物、专利和专利申请均在此通过引用而并入，其程度 如同具体地和单独地指出每个单独的出版物、专利或专利申请通过引用而并入。
【附图说明】
[0043] 本发明的新颖特征在随附的权利要求中具体阐述。通过参考以下对在其中利用到 本发明原理的说明性实施方案加以阐述的详细描述和附图，将会获得对本发明的特征和优 点的更好的理解，在附图中：
[0044] 图1显示了烟酸和烟酰胺核苷的化学结构。
[0045] 图2显示了烟酸和亮氨酸和/或白藜芦醇对C2C12肌管中的Sirtl激活的影响。 NA指烟酸；Leu指亮氨酸；R指白藜芦醇。*p〈0. 05;#p= 0. 0001。数据表示为距对照值 的％变化。
[0046] 图3显示了烟酸和亮氨酸和/或白藜芦醇对3T3-L1脂肪细胞中的P-AMPK/AMPK比 例的影响。NA指烟酸；Leu指亮氨酸；R指白藜芦醇。*p〈0. 01。数据表示为距对照值的％ 变化。
[0047] 图4显示了亮氨酸（0. 5mM)/烟酸（10nM)对秀丽隐杆线虫（C.elegans)中的脂质 水平的影响（*P= 〇. 012)。NA指烟酸；Leu指亮氨酸。
[0048] 图5显示了在LDL受体敲除小鼠中，用添加至西方饮食（WesternDiet，WD)中的 亮氨酸（Leu，24g/kg饮食）、Leu(24g/kg饮食）+ 烟酸（NA，50mg/kg饮食）、Leu(24g/kg饮 食）+NA(250mg/kg饮食）和NA(l，000mg/kg饮食）处理四周对血浆总胆固醇的影响。
[0049] 图6显示了在LDL受体敲除小鼠中，用添加至西方饮食（WD)中的亮氨酸（Leu， 24g/kg饮食）、Leu(24g/kg饮食）+ 烟酸（NA，50mg/kg饮食）、Leu(24g/kg饮食）+NA(250mg/ kg饮食）和NA(1，000mg/kg饮食）处理四周对血浆总胆固醇酯的影响。
[0050] 图7显示了在LDL受体敲除小鼠中，用添加至西方饮食（WD)中的亮氨酸（Leu， 24g/kg饮食）、Leu(24g/kg饮食）+ 烟酸（NA，50mg/kg饮食）、Leu(24g/kg饮食）+NA(250mg/ kg饮食）和NA(1，000mg/kg饮食）处理四周对血浆甘油三酯的影响。
[0051] 图8显示了烟酸和亮氨酸对秀丽隐杆线虫的寿命的影响。NA指烟酸；Leu指亮氨 酸。*p〈0. 0001。数据表示为随时间推移的％存活。
【具体实施方式】
[0052] 本文所用的术语仅仅是为了描述具体实施方案的目的，而并非旨在限制本发明。 如本文使用的，单数形式"一个"、"一种"和"该"也意图包括复数形式，除非上下文另有明 确指示。此外，就术语"包含"、"包括"、"具有"、"有"、"带有"或其变化形式在【具体实施方式】 和/或权利要求中的使用来说，这些术语旨在以类似于术语"含有"的方式包含在内。
[0053] 术语"约"或"大约"意思是如本领域普通技术人员所确定的，对于特定的值在可 接受的误差范围内，这将部分地取决于该值如何测量或确定，即测量系统的限制。例如，按 照本领域的实践，"约"可能意味着在1个或多于1个标准差以内。或者，"约"可能意味着 给定值的可达20%、可达10%、可达5%或可达1 %的范围。或者，特别是对于生物系统或 过程，该术语可能意味着在值的数量级内，优选在5倍以内，更优选在2倍以内。在本申请 和权利要求书中描述特定值的情况下，除非另有说明，否则应当假定术语"约"的意思是在 特定值的可接受的误差范围内。
[0054] 如本文使用的，术语"受试者"或"个体"包括哺乳动物。哺乳动物的非限制性实例 包括人和小鼠，包括转基因和非转基因小鼠。本文描述的方法可用于人类治疗、临床前和兽 医应用。在一些实施方案中，受试者为哺乳动物，在一些实施方案中，受试者为人。其他哺乳 动物包括但不限于，猿、黑猩猩、猩猩、猴子；驯养动物（宠物），如狗、猫、豚鼠、仓鼠、小鼠、 大鼠、兔和雪貂；驯养家畜，如牛、水牛、野牛、马、驴、猪、绵羊和山羊；或通常在动物园中见 至I撤野生动物，例如熊、狮、虎、豹、象、河马、犀牛、长颈鹿、玲羊、树懒、瞪玲、斑马、角马、草 原犬鼠、无尾熊、袋鼠、熊猫、大熊猫、鬣狗、海豹、海狮和海象。
[0055] 术语"施用"和"给药"被定义为通过本领域已知的途径向受试者提供组合物，该途 径包括但不限于静脉内、动脉内、□服、肠胃外、颊部、局部、经皮、直肠、肌肉内、皮下、骨内、 经粘膜或腹膜内给药途径。在本申请的某些实施方案中，施用组合物的口服途径可能是优 选的。
[0056] 如本文使用的，"药剂"或"生物活性剂"是指生物学、药学或化学化合物或其他部 分。非限制性的实例包括简单或复杂的有机或无机分子、肽、蛋白质、肽核酸（PNA)、寡核苷 酸（包括，例如，适体和多核苷酸）、抗体、抗体衍生物、抗体片段、维生素衍生物、糖、毒素或 化疗化合物。可以合成各种化合物，例如，小分子和寡聚物（例如，寡肽和寡核苷酸），以及 基于多种核心结构的合成有机化合物。另外，多种天然来源也可以提供化合物以供筛选，例 如植物或动物提取物等。熟练技术人员可以容易地认识到，对于本发明的药剂的结构性质 没有限制。
[0057] 术语"有效量"或"治疗有效量"是指本文所述的化合物的量，其足以实现预期的 应用，包括但不限于如下定义的疾病或病况治疗。治疗有效量可根据预期的应用（体外或 体内）或所治疗的受试者和疾病状况（例如，受试者的体重和年龄、病情的严重程度、给药 方式等）而不同，其可以由本领域普通技术人员容易地确定。该术语也适用于将会诱导靶 细胞中的特定应答（例如，增殖的减少或靶蛋白活性的下调）的剂量。具体剂量将根据所 选的具体化合物、要遵循的给药方案、其是否与其他化合物联合施用、给药时机、其所施用 到的组织和携带它的物理递送系统而变化。
[0058] 如本文使用的术语"能量代谢"是指伴随体内生化反应的能量的转化，该生化反 应包括细胞代谢和线粒体生物发生。能量代谢可以用本文描述的多种测量方法来量化，例 如但不限于，体重减轻、脂肪损失、胰岛素敏感度、脂肪酸氧化、葡萄糖利用、甘油三酯含量、 Sirt1表达水平、AMPK表达水平、氧化应激和线粒体生物量。
[0059] 当应用于本发明的组分，例如TOE5抑制剂，包括但不限于烟酸和/或烟酰胺核苷 和/或一种或多种烟酸代谢物，亮氨酸和亮氨酸代谢物（如HMB)和白藜芦醇时，术语"分离 的"是指缺乏至少一些其他组分的物质的制品，所述组分还可能存在于该物质或类似物质 天然存在或最初获得之处。因此，例如，分离的物质可通过使用纯化技术从来源混合物中富 集该物质来制备。富集可基于绝对量来测量，例如每单位体积的溶液的重量，或者其可相对 于来源混合物中存在的第二、潜在干扰性的物质来测量。本发明实施方案的越来越高的富 集是逐渐更优选的。因此，例如，2倍富集是优选的，10倍富集是更优选的，100倍富集是更 加优选的，1000倍富集是甚至更加优选的。物质还可以通过人工组装过程（如通过化学合 成）以分离的状态提供。
[0060] 药剂、激活剂或治疗剂的"亚治疗量"是这样的量：其小于该药剂、激活剂或治疗剂 用于预期应用的有效量，但是当与有效量或亚治疗量的另一种药剂或治疗剂联合时，由于 例如所得的有效作用中的协同效应和/或减少的副作用，可以产生期望的结果。
[0061] "协同的"或"协同"效应可以是这样的，其使得联用组合物的一种或多种效应大 于每种单独组分的一种或多种效应，或者其可以大于单独的每种组分的一种或多种效应之 和。协同效应可以比单独使用其中一种组分时对受试者的效应或当每种组分分别施用时的 叠加效应高大约或大于约 10%、20%、30%、50%、75%、100%、110%、120%、150%、200%、 250%、350%或500%或甚至更多。该效应可以是在此描述的任何可测量的效应。
[0062] 如本文使用的术语"基本上不含"是指具有少于约10%、少于约5%、少于约1%、 少于约0. 5%、少于0. 1%或更少的特定组分的组合物。例如，基本上不含非支链氨基酸的 组合物可以含有少于约1%的非支链氨基酸赖氨酸。百分比可以确定为总组合物的百分比 或组合物的子集的百分比。例如，基本上不含非支链氨基酸的组合物可以具有少于1 %的非 支链氨基酸，其作为总组合物的百分比或作为该组合物中的氨基酸的百分比。百分比可以 是质量、摩尔或体积百分比。
[0063] 术语"临床显著性"或"临床上显著的"表示被认为超出正常范围的行为和症 状，并且其特点是日常功能的困扰和损害。例如，临床上显著的皮肤血管舒张将是足 以引发患者关于继发于急性血管舒张的不适（包括潮红、瘙痒和/或麻刺感）的主诉 的水平。皮肤血管舒张的水平也可以通过本领域已知的任何方法来测量，如在Saumet J.L.等人，