NAELEGECQGLEARNRELRERAESV,其中，加下划线残基(MG-HM)为 6XHis 标签前导序列，粗体残基（RQ-KK)为Penetratin序列，斜体残基（DY-DK)为Flag标签，正 常字体残基（MA-PD)为间隔氨基酸，粗斜体残基（LE-AE)为d/n序列，加下划线粗体残基 (LE-SV)为在第一缬氨酸后被截短的ATF5亮氨酸柃链：（2)MGSSHHHHHHSSGLVPRGSHMLEYGRK KRRQRRRYPYDVPDYAMASMTGGQQMGRDPDLEQRAEELARENEELLEKEAEELEQENAELEGECQGLEARNRELRE RAESV,其中，加下划线残基(MG-LE)为6XHis标签前导序列，粗体残基（YG-RR)为TAT序列， 斜体残基（YP-YA)为HA标签，正常字体残基（MA-PD)为间隔氨基酸，粗斜体残基（LE-AE) 为d/n序列，加下划线粗体残基(LE-SV)为在第一缬氨酸后被截短的ATF5亮氨酸拉链；（3) MGSSHHHHHHSSGLVPRGSHMRQIKIffFQNRRMKffKKLEQRAEELARENEELLEKEAEELEQENAELEGECQGLEA RNRELKERAESV其中，加下划线残基(MG-HM)为6XHis标签前导序列，粗体残基（RQ-KK)为 Penetratin序列，斜体残基（LE-AE)为d/n序列，加下划线粗体残基(LE-SV)为在第一结页 氨酸后被截短的ATF5 亮氨酸拉链；以及（4)RQIKIWFQNRRMKWKKLEQRAEELARENEELLEKEAEE LEQENAELEGECQGLEARNRELKERAESV其中，耜体残基(RQ-KK)为Penetratin序列，斜体残基 (LE-AE)为d/n序列，加下划线粗体残基(LE-SV)为在第一缬氨酸后被截短的ATF5亮氨酸 拉链。在某些实施例中，显性阴性细胞穿透ATF5为化学合成。
[0068] 4. 2D/N-ATF5组合物的使用
[0069]根据本文所述的方法，可通过削弱、干扰或钝化细胞中ATF5的活性来抑制细胞中 的ATF5。例如，可通过提供能够抑制细胞中天然ATF5功能或活性的显性阴性ATF5分子来 抑制细胞中ATF5的功能或活性。在某些实施例中，d/n-ATF5为CP-d/n-ATF5。
[0070] 在某些实施例中，细胞中ATF5的功能和活性被至少抑制1%、5%、10%、20%、 30 %、40 %、50 %或更高（包括明确列举数值之间的中间范围，例如5-10 %、10-20 %、 20-30%、40-50%或者高于50%，包括50% -100% )。在某些实施例中，通过抑制ATF5的 表达来降低ATF5的功能和活性。这种表达可至少被抑制1%、5%、10%、20%、30%、40%、 50 %或更高（包括明确列举数值之间的中间范围，例如5-10 %、10-20 %、20-30 %、40-50 % 或者高于50 %，包括50 % -100 % )。在某些实施命名，表达降低60 %、80 %或90 %，如图11 所示。
[0071] 在某些实施例中，本发明提供了用于治疗和预防需要治疗的治疗对象的体内肿 瘤，所述方法包括对治疗对象施用含有CP-d/n-ATF5以及视情况可选择的药学上可接受的 载体的药物组合物。CP-d/n-ATF5以有效治疗被施用该组合物的治疗对象的体内肿瘤的剂 量给予。本文中所使用的短语"有效"是指有效改善或最小化临床损伤或肿瘤症状。例如，临 床损伤或肿瘤症状可通过以下方式得到改善或最小化：减少治疗对象的任意疼痛或不适； 延长治疗对象的存活时间，这是不使用这种治疗方法时所不能实现的存活时间；抑制或阻 止肿瘤的生长或扩散；或者限制、延迟、终止或控制肿瘤细胞的成熟和增殖。可有效治疗需 要治疗的治疗对象的体内肿瘤的CP-d/n-ATF5的量将根据不同情况的特定因素而有所有 不同，包括肿瘤的类型、肿瘤的分期、治疗对象的体重、治疗对象病情的严重程度以及施用 方法。这个量很容易由本领域技术人员确定。
[0072] 本文所使用的术语"肿瘤"是指细胞的病理性增殖，包括肿瘤形成。术语"肿瘤形 成"以及本文中所使用的其他相关术语是指肿瘤细胞在不会引起或者将会导致正常细胞增 殖终止的情况下不受控制的持续倍增。肿瘤形成导致"赘生物"的形成，在本文中被定义为 任何新生的不正常生长，尤其是组织的新增长，此时细胞的这种增长是不受控制的和持续 性的。本文中所使用的肿瘤形成包括但不局限于，与同类型组织中的正常增殖相比，治疗对 象组织中细胞形态不规则，以及治疗对象组织中细胞病理性增殖。此外，肿瘤形成包括良性 肿瘤或恶性肿瘤。恶性新生物与良性新生物的区别在于前者显示出较高间变程度或者缺乏 分化和细胞定位，并且具有侵入和转移的特性。因此，肿瘤形成包括"癌症"，所述"癌症"包 括血液癌症，本文中所使用的"癌症"是指具有失去正常控制这种独有特质的肿瘤细胞的增 殖，从而导致不受控制的生长、缺乏分化、侵袭局部组织并且发生转移。
[0073] 另外，本文中所使用的术语"神经肿瘤"是指神经细胞的致瘤形式（即变异的神经 细胞），包括星形细胞瘤细胞（即，所有星形细胞瘤的细胞，包括但不局限于I-IV级星形细 胞瘤、间变型星形细胞瘤、星形母细胞瘤、纤维性星形细胞瘤、原浆性星形细胞瘤、肥胖型星 形细胞瘤和多形性成胶质细胞瘤）、神经胶质瘤、成神经管细胞瘤、成神经细胞瘤以及其他 脑肿瘤。脑肿瘤侵袭并破坏正常组织，产生诸如感觉运动障碍和认知功能障碍、颅内压增 高、脑水肿以及压迫脑组织、脑神经和脑血管这样的症状。肿瘤转移可包括颅骨转移或任何 颅内结构转移。恶性肿瘤的大小、位置、生长速度和病理分级决定了脑肿瘤的严重程度。非 恶性肿瘤生长缓慢、很少有细胞分丝、无坏死、并且无血管增殖。恶性肿瘤生长迅速并入侵 其他组织。但是它们很少分布于中枢神经系统之外，这是因为它们通过局部生长导致死亡。
[0074] 脑肿瘤可根据位置分类（例如，脑干、小脑、大脑、颅神经、室管膜、脑膜、神经胶 质、松果体区、脑下垂体和颅骨）或者根据组织类型分类（例如，脑膜瘤、原发性中枢神经系 统淋巴瘤或者星形细胞瘤）。常见的儿童原发肿瘤为小脑星形细胞瘤和成神经管细胞瘤、室 管膜瘤、脑干神经胶质瘤、成神经细胞瘤和先天性肿瘤。对于成年人来说，原发肿瘤包括脑 膜瘤、神经鞘瘤和大脑两半球的神经胶质瘤（尤其是恶性多形性成胶质细胞瘤和间变型星 形细胞瘤、以及其他良性星形细胞瘤和少突神经胶质瘤）。颅内肿瘤的总体发生率在男性与 女性中基本相同，但小脑髓母细胞瘤和多形性成胶质细胞瘤在男性中较为常见。
[0075] 神经胶质瘤是由任意一个发展期的神经胶质组织构成的肿瘤。神经胶质瘤占颅内 肿瘤的45%。神经胶质瘤包括脑和脊髓的所有原生内在肿瘤，包括星形细胞瘤、室管膜瘤 和神经细胞瘤。星形细胞瘤是由变异星形胶质细胞或星形细胞瘤细胞构成的肿瘤。这种肿 瘤已根据恶化增加分为不同等级：1级由纤维型或原浆型星形细胞构成；II级为星形母细 胞瘤，由含有大量细胞浆和两个或三个核的细胞构成；III级和IV级为多形性成胶质细胞 瘤形式，是一种快速生长的肿瘤，通常限于大脑两半球之内，由星形胶质细胞、成胶质细胞、 成星形细胞和其他星形胶质细胞瘤细胞混合构成。星形细胞瘤是一种原生中枢神经系统肿 瘤，常常发现于脑干、小脑和大脑之中。间变型星形细胞瘤和多形性成胶质细胞瘤常常位于 大脑之中。本发明还提供了促进赘生性细胞凋亡的方法，包括使赘生性细胞与ATF5抑制剂 接触。赘生性细胞可选自由以下各项组成的集群：乳腺、子宫、子宫内膜、胃、结肠、肝、胰腺、 肾脏、膀胱、前列腺、睾丸、皮肤、食道、舌头、嘴、腮腺、喉、咽、淋巴结、肺和脑。在一个实施例 中，赘生性细胞选自由以下各项组成的集群：成胶质细胞瘤、星形细胞瘤、神经胶质瘤、成神 经管细胞瘤和成神经细胞瘤。
[0076] 例如，但不用作限制用途，通过测试显示对TAT-d/n-ATF5(l-3yM范围）敏感的 细胞系包括U87 (人成胶质细胞瘤）；U373 (人成胶质细胞瘤）；LN229 (人成胶质细胞瘤）； C6 (大鼠成胶质细胞瘤）；Mel501 (人黑色素瘤）；H2452 (人间皮瘤）；MDA-MB-468 (人乳腺 癌）。通过测试显示对PEN-d/n-ATF5 (3yM)敏感的细胞系非限制清单包括：Panc-1 (人胰 腺癌）；SH-SY5Y(人成神经细胞瘤细胞）；以及HCT-116(结肠癌肿瘤）。本发明的方法可在 试管内进行也可在治疗对象体内进行。本文所使用的"细胞凋亡"是指完全或部分地由基 因控制的细胞死亡。
[0077] 如以下实例所述，某些CP-d/n_ATF5组合物是有效的跨物种抗肿瘤药剂，例如，大 鼠/小鼠CP-d/n-ATF5对于人类癌症是有效的。因此，在某些实施例中，CP-d/n-ATF5可 包含大鼠或小鼠d/n-ATF5肽序列，治疗对象可以任意一种动物，包括但不局限于哺乳动物 (例如，人类、家畜或商业用动物）。在某些实施例中，CP-d/n-ATF5可包含大鼠或小鼠d/ n-ATF5肽序列，治疗对象是人类。
[0078] 根据本发明的方法，可通过已知程序将CP-d/n_ATF5施用给人类或动物治疗对 象，包括但不局限于口服、肠胃外给药、鼻腔给药和经皮给药。优选地，抑制剂或抑制因子通 过颅内注射、脊柱内注射、鞘内注射或皮下注射进行肠胃外给药。
[0079] 4. 3D/N-ATF5 药物组合物
[0080] 对于口服给药，CP-d/n-ATF5可以制成胶囊、片剂、粉末、颗粒、或悬液。CP-d/ n-ATF5制剂可含有传统添加剂，例如乳糖、甘露醇、玉米淀粉或马铃薯淀粉。CP-d/n-ATF5 制剂还可与黏合剂一起使用，例如结晶纤维素、纤维素衍生物、阿拉伯树胶、玉米淀粉或凝 胶。此外，CP-d/n-ATF5制剂可与崩解剂一起使用，例如玉米淀粉、马铃薯淀粉或羧甲纤维 素钠。CP-d/n-ATF5制剂还可与无水磷酸二氢钙或羧基乙基淀粉钠一起使用。最后，CP-d/ n-ATF5还可与润滑剂一起使用，例如滑石或硬脂酸镁。
[0081] 对于肠胃外给药（即，通过除消化道外的渠道注射给药），CP-d/n-ATF5可与和治 疗对象血液等渗压的无菌水溶液结合。这种CP-d/n-ATF5制剂的制备可通过将固体活性成 分溶解于含有生理上可相容物质（例如氯化钠、甘氨酸等）的水中，水的pH值调节到与生 理条件相适应，得到水溶液，然后对溶液做灭菌处理。CP-d/n-ATF5制剂可盛装在单元剂量 容器内或多剂量容器内，例如密闭安瓿或小瓶。CP-d/n-ATF5制剂可以以任意一种注射方式 投送，包括但不局限于筋膜注射、囊内注射、颅内注射、皮内注射、鞘内注射、肌肉注射、眶内 注射、腹膜内注射、脊柱内注射、胸骨内注射、血管内注射、静脉注射、软组织注射、皮下注射 或舌下注射。
[0082] 在某些实施例中，CP-d/n_ATF5可制成用于鼻内投送。对于鼻腔给药，含有CP-d/ n-ATF5制剂的溶液或悬液可被制成用于以传统方式直接向鼻腔施用，例如，使用滴管、吸液 管或喷雾。也可根据本发明使用其他投送鼻腔喷雾组合物的方法，例如通过定量雾化吸入 器（MDI)吸入。按规定使用多种类型的MDI进行吸入给药。这些类型的设备包括呼吸作动 MDI、干粉吸入器（DPI)、与MDI结合的垫片/气压保持器、以及喷雾器。本文中所使用的术 语"MDI"是指一种吸入投药系统，包括，例如，容纳溶解或悬浮于推进剂的活性药剂的容器， 所述推进剂可选择地具有一种或多种赋形剂；定量阀；致动器；以及咬嘴。容器通常装满活 性药剂溶液或悬液（例如鼻腔喷雾组合物）以及推进剂（例如一种或多种氢氟烷）。压下 致动器时，定量溶液成雾状散开以供吸入。含有活性药剂的粒子被推向咬嘴，随后这些粒子 在此处被治疗对象吸入。该药剂可以以单剂量或多剂量形式提供。例如，在使用滴管或吸 液管时，病人可施用适宜的预设体积的溶液或悬液来达到这一目的。在使用喷雾时，例如通 过计量雾化喷雾栗来实现上述目的。为了改善鼻腔投药和增加药物存留，根据本发明的药 物成分可包入用环糊精制成的胶囊、或用预计可增强投药和鼻黏膜存留的药剂配制。
[0083]用于或适于本发明组合物鼻腔给药的市售给药设备包括：AER0NEB?(美国加利福 尼亚州旧金山，Aerogen)、AERONEBG0?(Aerogen);PARILCPLUS?、PARIBOY?N、PARI? eflow(美国专利 6, 962, 151 公开的一种喷雾器）、PARILCSINUS?、PARISINUSTAR?.、 PARISINUNEB?、VibrENT?和PARIDURANEB? (美国加利福尼亚州蒙特利或德国慕尼 黑，PARIRespiratoryEquipment，Inc.) ;MICR0AIR?(美国伊利诺斯州弗农希尔斯， OmronHealthcare，Inc)、HAL0LITETM(美国马萨诸塞州波士顿，ProfileTherapeutics Inc)，RESPIMAT?(德国，BoehringerIngelheim)、AER0D0SE?(美国加利福尼亚州山景城 Aerogen，Inc)、0MR0NELITE?(美国伊利诺斯州弗农希尔斯，OmronHealthcare，Inc)、 OMRONMICROAIR?(美国伊利诺斯州弗农希尔斯，OmronHealthcare，Inc)、MABISMIST? II(美国伊利诺斯州森林湖，MabisHealthcare，Inc)、LUMISC0PE? 6610(美国新泽西 州东布朗士维克，TheLumiscopeCompany，Inc)、AIRSEPMYSTIQUE?(美国纽约布法罗， AirSepCorporation)、AC0RN_1? 和AC0RN-II?(美国纽约托托高瓦，VitalSigns，Inc)、 AQUAT0WER?(美国爱荷华州阿德尔，MedicalIndustriesAmerica)、AVA-NEB?(美国加利福 尼亚州特曼库拉，HudsonRespiratoryCareIncorporated)、AER0CURRENT?使用一次性容 器AEROCELL?(美国乔治亚州亚特兰大，AerovectRxCorporation)、CIRRUS?(美国纽约利 物浦，IntersurgicalIncorporated)、DART?(美国南卡罗来纳州格林伍德，Professional MedicalProducts)、DEVILBISS?PULMOAIDE(美国宾夕法尼亚州萨默塞特，DeVilbiss Corp)、DOWNDRAFT?(美国科罗拉多州恩格尔伍德，Marquest)、FANJET?(美国科罗拉多州 恩格尔伍德，Marquest)、MB_5?(意大利博韦佐，Mefar)、MISTYNEB?(美国加利福尼亚州巴 伦西亚，Baxter)、SALTER8900?(美国加利福尼亚州艾汶SalterLabs)、SIDESTREAM?(英 国苏塞克斯，Medic-Aid)、UPDRAFT-II?(美国加利福尼亚州特曼库拉HudsonRespiratory Care)、WHISPERJET? (美国科罗拉多州恩格尔伍德，MarquestMedicalProducts)、 AI0L0S?(瑞典卡尔斯塔德，AiolosMedicnnskTeknik)、INSPIR0N?(美国伊利诺斯州班 诺克本，IntertechResources，Inc.)、OPTIMIST?(美国德克萨斯州麦卡伦，Unomedical Inc.)、PR0D0M0tm、SPIRA?(芬兰海门林纳，RespiratoryCareCenter)、AERx?Essence? 和 Ultra?(美国加利福尼亚州海沃德，AradigmCorporation)、S0NIK?LDINebulizer(美国 加利福尼亚州萨克拉曼多，EvitLabs)、ACXUSPRAY?(美国纽约富兰克林湖BDMedical)、 ViaNaseID?(美国华盛顿州博塞尔，electronicatomizer;Kurve)、OptiMist?设备 或OPTINOSE?(挪威奥斯陆）、MADNasal?(美国犹他州盐湖城，WolfeToryMedical， Inc. )、Freepod?(法国玛尔刚市，Valois)、Dolphin?(Valois)、Monopowder?(Valois)、 Equadel?(Valois)、VP3?和VP7 ?(Valois)、VP6Pump?(Valois)、StandardSystems Pumps?(德国拉多永夫米尔，Ing.ErichPfeiffer)、AmPump?(Ing.ErichPfeiffer)、 CountingPump?(Ing.ErichPfeiffer)、AdvancedPreservativeFreeSystem?(Ing. ErichPfeiffer)、UnitDoseSystem?(Ing.ErichPfeiffer)、BidoseSystem?(Ing. ErichPfeiffer)、BidosePowderSystem? (Ing.ErichPfeiffer)、SinusScience?(美 国加利福尼亚州阿马里洛，AerosolScienceLaboratories，Inc.)、ChiSys?(英国雷丁， Archimedes)、Fit-Lizer?(Bioactis，Ltd，SNBL子公司（日本东京）、SwordfishV?(美 国德克萨斯州奥斯丁，MysticPharmaceuticals)、DirectHaler?Nasal(丹麦哥本哈根， DirectHaler)以及SWIRLER?RadioaerosolSystem(美国宾夕法尼亚州斯普林城（Spring City)，AMICI，Inc.)。
[0084] 对于经皮给药，CP-d/n_ATF5可与皮肤渗透增强剂结合，例如丙二醇、聚乙二醇、 异丙醇、乙醇、油酸、N-甲基吡咯烷酮等，所述增强剂提高CP-d/n-ATF5的皮肤渗透性，使 CP-d/n-ATF5可以穿过皮肤进入体内循环的血液。CP-d/n-ATF5组合物还可以与聚合体物 质结合，例如乙基纤维素、羟丙基纤维素、乙烯/醋酸乙烯酯、聚乙烯吡咯烷酮等，形成凝胶 形式的组合物，该组合物可溶解于溶剂（例如二氯甲烷）中，蒸发至所需的粘度，然后施加 到基底材料上形成贴片。
[0085] 本发明还提供了治疗组合物，所述组合物包含CP-d/n_ATF5,以及可选择地包含药 学上可接受的载体。药学上可接受的载体在与组合物中其他成分相容的意义上必须是"可 接受的"，并且对组合物接受者必须是无害的。本文中所使用的药学上接受的载体选自用作 制药配方材料的各种有机或无机材料，这些材料可混入镇痛剂、缓冲剂、黏合剂、崩解剂、稀 释剂、