一种可吸收的微孔真空多聚糖微粒球的制备方法与用图
【技术领域】
[0001]本发明涉及医药领域，具体是一种可吸收的微孔真空多聚糖微粒球的制备方法与用途。
【背景技术】
[0002]目前，医疗市场上的止血材料品种繁多，包括传统的棉制材料、生物医用高分子材料、人工合成蛋白敷料、矿物质材料、液体类材料、金属类敷料等。随着现代科学技术的高速发展，医用止血敷料的研究取得了非常快的进展，各种新型医用敷料不断涌现，性能也越来越优良。天然活性高分子生物止血材料由于具有很高的生物功能和生物适应性，在保护伤口、加速创面愈合方面具有强大的优势，因此近年来从自然界现有的动、植物中提取可吸收的天然高分子止血材料引起了各国医学界和产业界的广泛关注，许多大型医药公司致力于研究开发新型止血材料，但从天然植物马铃薯淀粉中提取高分子多聚糖止血材料的文献报道甚少。国内使用的微孔多聚糖止血微球，由美国Medafor公司研制的一种止血材料，价格昂贵，加重了患者的经济负担。因此，研究一种止血迅速、无毒性、无抗原性、价格便宜，具有自主知识产权的高分子多聚糖类止血产品是国内学者必须面对的课题。
[0003]国内外已经开发出多种新型止血材料，应用较普遍的止血敷料有传统的明胶海绵、海藻酸盐、胶原蛋白以及新近出现的胶原复合物、壳聚糖和沸石等。动物实验及临床应用都取得了一定的效果，但不同的止血材料，有着不同的凝血机制，且以上材料都存在一定的缺陷。
[0004]其中明胶海绵的吸收速率较慢，一般需要4周以上，因此会增加伤口的感染风险，影响伤口愈合。胶原蛋白海绵来自动物组织的胶原提取物，虽然其具有优异的止血性能，但终为异种蛋白，容易出现排异性，易引起病人过敏反应，并导致感染人源性和动物性疾病，如肝炎等；临床上表现为病人过敏反应、伤口愈合慢和伤口易感染并发症，故临床使用受到很大限制。并且蛋白胶不易储存和运输、使用不便等。
[0005]天然生物多聚糖产品发展迅速，其产品主要包括植物多聚糖及虾蟹类的提取物甲壳素、壳聚糖等。其具有优异的生物相容性、无毒、无刺激性、不易引起机体过敏反应，同时不会引起传染或感染人源性及动物源性疾病，使用安全可靠。但该类材料一般溶解性较差，材料易脆，力学强度低，加工过程中一般需加酸溶解，作用于人体易引起副反应，容易造成周围组织充血、红肿现象、流泪等副反应。
[0006]国内有关于多聚糖止血方面的文献报道。有的文献通过剂型改造和结构改变将壳聚糖制作成粉剂，并再加入一定钙、锌离子制成一种新型壳聚糖止血粉，壳聚糖不是从植物淀粉中提取物；有的文献探讨了由纯化的植物多聚糖经特殊工艺制作而成的可吸收性多聚糖止血海绵对创伤愈合的影响；有文献公开了一种以马铃薯生淀粉为原料制作多聚糖止血粉的方法，即膨化、水解、乳化、精制、干燥，产品成多微孔状态；有的文献涉及到的止血微粒的药用成分是从马铃薯淀粉中提取的微孔多聚糖经交联后形成的表面带微孔的球形颗粒，经糊化、乳化和石蜡油分散、表氯醇交联、乙酸乙脂分液、无水乙醇清洗脱水、烘箱干燥而成。涉及到的多聚糖止血粉为表面带有微孔，内部无真空的颗粒，均与本发明的不同。
[0007]国外发明的一种来源于植物淀粉止血材料微孔多聚糖止血微球，是美国Medafor公司2002年研发的一种为AristaTM的可吸收性止血材料(美国专利US6060461)，2006通过美国FDA认证，其有效成分是微孔多聚糖。当其作用于出血创面时，微孔多聚糖分子能迅速吸收血液中的水分，并使血液中有效成分在颗粒表面聚集，形成凝胶状混合物，达到即刻止血的功效；同时内源性凝血因子被激活，局部形成凝血块，能在数十秒中完成凝血。由于其来自植物淀粉，可在人体内被体液中的淀粉酶降解为单糖，能在体内消化吸收。此止血过程仅为物理过程，材料内不含任何动物潜在的疾病，无免疫反应、无过敏反应，对伤口愈合无任何毒副作用，是一种优秀的局部止血材料。但显微结构显示其微球表面为裂隙并非微孔，内部亦无真空，应用于大面积软组织出血创面止血时，因其粘附性、吸液性不够强，止血效果受到限制，出血量较多时会被血流冲走。本发明涉及的微孔真空多聚糖微球可吸收止血粉，为表面有微孔内部为真空，是目前唯一能和国外同类产品相媲美的止血材料。
【发明内容】
[0008]本发明的目的在于提供一种生物相容性好、吸水性好、止血时间短、可吸收的微孔真空多聚糖微粒球的制备方法与用途，以解决上述【背景技术】中提出的问题。
[0009]为实现上述目的，本发明提供如下技术方案:
[0010]一种可吸收的微孔真空多聚糖微粒球的制备方法，包括以下步骤:
[0011](1)膨化、糊化:将植物淀粉加入挤压膨化机内，进行膨化、糊化处理，在挤压过程中挤压膨化机挤压摩擦产生热量，压力在3?5MPa、温度控制在175?185°C的高温状态，植物淀粉膨化。植物淀粉吸收这些热量而且受到强烈的剪切，分子链间氢键断裂，分子链发生移动，造成淀粉颗粒部分解体，发生糊化。通过挤压膨化机上的小孔挤出，出口的温度控制在120°C，然后收入容器进行干燥。即得到膨化、糊化的淀粉微球。此方法处理后其糊化度能达到98%以上，而传统加热糊化率仅为80?85%，且操作方便、设备简单、受热均匀、工业化易生产。
[0012](2)乳化、穿孔、交联:取大豆油、司盘80和吐温80，混合，在60?80°C恒温水浴锅中，充分搅拌30?60分钟，其中司盘80与吐温80质量比为0.8?1.2: 1，然后缓缓注入到膨化、糊化的淀粉微球中，持续搅拌。大豆油与淀粉微球的体积质量比为5?10: 1，体积质量比的单位为ml/g，司盘80、吐温80组成的混合乳化剂与淀粉微球的质量比为0.5?2: 1。将乳化后的淀粉微球，配制成重量百分比为30?40%的乳浊液，然后加入酶液穿刺致孔，酶液中的酶与乳浊液中淀粉微球的质量比为0.08?0.12: 1，温度控制在60°C，溶液的pH值维持在4?6.5，反应24小时，用0.5?1.0mol/L的HC1溶液将溶液的pH值调节到4?5.5，得到微孔真空球状变性淀粉酸性溶液。用交联剂交联处理强化其结构，增强多孔微球力学强度，即得到性能优异的微孔真空淀粉乳白色液体，交联剂与微孔真空球状变性淀粉酸性溶液的质量比为1?2: 1。
[0013](3)去溶剂化处理:将上述产物静置分层，弃上层清液，取下层乳白色液体，加入乙酸乙酯或石油醚充分搅拌后，分液，加入乙酸乙酯或石油醚的质量是下层乳白色液体的10倍；再静置分层，取下层乳白色液体，加入下层乳白色液体5倍质量的无水乙醇清洗，再搅拌，然后真空抽滤至水分抽干，得到微孔真空变性淀粉微粒球固体粉末。
[0014](4)去除色素和热原:再将所得微孔真空变性淀粉微粒球固体粉末倒入蒸馏烧瓶中，放置在磁力搅拌器加热盘中，加入3?5倍的蒸馏水中，持续搅拌，静置分层，弃上层清液，再将下层乳白色液体重复洗涤3?5次。向洗涤后的白色乳浊液中加入蒸馏水重新溶解，按微孔真空变性淀粉微粒球固体粉末:活性炭=1: 5的质量比加入活性炭，以除去色素和热原。10?12h后，用5?20μπι的滤芯过滤，去除活性炭。得到微孔真空多聚糖微粒球乳浊液。
[0015](5)干燥、筛分、包装、灭菌:将上述所得的微孔真空多聚糖微粒球乳浊液在120°C进行喷雾干燥，经20 μ m与100 μ m的微孔筛筛分，即得20?100 μ m的微孔真空多聚糖微粒球。在无菌条件下包装，再用钴60灭菌。
[0016]作为本发明进一步的方案:步骤(1)中淀粉在挤压过程中的压力为4MPa、温度为180。。。
[0017]作为本发明进一步的方案:酶为穿孔剂。
[0018]作为本发明进一步的方案:交联剂为三偏磷酸钠。
[0019]作为本发明进一步的方案:司盘80与吐温80质量比为1: 1。
[0020]作为本发明进一步的方案:酶液中的酶与乳浊液中淀粉微球的质量比为0.1: 1。
[0021]作为本发明进一步的方案:活性炭的粒度为20?40目。
[0022]作为本发明进一步的方案:步骤(5)中用50 μπι的微孔筛再次进行筛分，即得20?50 μπι、51?100 μπι两种规格的微孔真空多聚糖微粒球，且两种规格的微孔真空多聚糖微粒球均匀程度达到95%以上。
[0023]作为本发明进一步的方案:植物淀粉采用马铃薯淀粉、小麦淀粉、甘薯淀粉、木薯淀粉、玉米淀粉中的一种或两种以上的混合物。
[0024]所述的可吸收的微孔真空多聚糖微粒球用于制备止血药物。