包含溶血磷脂酰胆碱或其衍生物的脂质纳米物质及其制备方法

包含溶血磷脂酰胆碱或其衍生物的脂质纳米物质及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及含有溶血磷脂酰胆碱或其醚衍生物的脂质纳米物质及其制备方法、减 少上述化合物的红细胞溶血现象和凝集现象的方法、包含上述脂质纳米物质的药剂学制 剂。
【背景技术】
[0002] 溶血磷脂酰胆碱（LPC，lysophosphatidylcholine)作为氧化低密度脂蛋白的主 要结构成分，通过使包含单核细胞、噬菌细胞及中性白细胞的多种免疫活性细胞活性化， 来对败血症产生比较有用的效果。并且，通过向腹膜炎动物模型和盲肠结扎穿刺伤（CLP， Cecal Ligation and Puncture)动物模型投用溶血磷脂酰胆碱来显著地抑制由腹膜炎引 起的死亡率，并通过先天性免疫增强作用来对包括肺炎、骨髓炎、蜂窝组织炎等在内的多种 细菌感染疾病治疗具有效果（韩国登录特许第10-0842160号，韩国登录特许第10-0849448 号）。并且，溶血磷脂酰胆碱可以用作急性呼吸窘迫综合征及多器官功能障碍综合征的治疗 剂（韩国登录特许第10-0842159号）。
[0003] 然而，溶血磷脂酰胆碱化合物因对水相介质（aqueous phase)的溶解度极低而在 上述溶血磷脂酰胆碱化合物溶解于如无菌水、注射用水、去离子水及缓冲溶剂的医药品制 备用水相来给药时，即使体内利用率低或溶血磷脂酰胆碱化合物为增溶制剂，也在向体内 给药之后从体液及组织中析出等稳定的药剂学制剂的开发受到限制。并且，溶血磷脂酰胆 碱化合物诱导红细胞的溶血及凝集（Tanaka Y.et al.，J Biochem. 94 (3) :833-40 (1983))， 而在动物实验中，在向皮下给药时，呈现出溶血磷脂酰胆碱自身的显著的局部刺激性 (Ryborg AK，et al.，Acta Derm Venereol. 80(4) :242_6(2000))，因此需要开发用于克服上 述问题的新型的剂型。
[0004] 在本说明书全文中参照了多个论文及特许文献，并且显示了所引用的论文及特许 文献。所引用的论文及特许文献的公开内容的全部作为参照插入于本说明书，并更加明确 地说明本发明所属技术领域的水准及本发明的内容。

【发明内容】

[0005] 要解决的问题
[0006] 本发明人员为了解除溶血磷脂酰胆碱所呈现出的低溶解度问题、局部刺激性问题 及红细胞溶血和凝集现象问题而进行了研究。结果，将溶血磷脂酰胆碱以脂质纳米物质形 态剂型化，并通过动物实验确认上述脂质纳米物质剂型不会引起局部刺激性，并且确认可 显著地改善溶血卵磷脂的红细胞溶血及凝集现象，由此完成了本发明。
[0007] 因此，本发明的目的在于，提供脂质纳米物质，上述脂质纳米物质包含溶血磷脂酰 胆碱或其醚衍生物。
[0008] 本发明的再一目的在于，提供上述脂质纳米物质的制备方法。
[0009] 本发明的另一目的在于，提供减少溶血磷脂酰胆碱或其醚衍生物的毒性的方法。
[0010] 本发明的还一目的在于，提供减少溶血磷脂酰胆碱或其醚衍生物的红细胞溶血现 象或凝集现象的方法。
[0011] 本发明的又一目的在于，提供包含溶血磷脂酰胆碱或其醚衍生物的口服或非口服 给药用药剂学制剂。
[0012] 通过
【发明内容】
、发明要求保护范围及附图，本发明的其他目的及优点将变得更加 明确。
[0013] 解决问题的手段
[0014] 根据本发明的一实施方式，本发明提供脂质纳米物质，上述脂质纳米物质包含（a) 含有甘油三酯、油及卵磷脂的脂质结构物；以及（b)作为药剂学活性成分的溶血磷脂酰胆 碱或其醚衍生物。
[0015] 本发明人员为了解除溶血磷脂酰胆碱所呈现出的低溶解度问题、局部刺激性问题 及红细胞溶血和凝集现象问题而进行了研究。结果，将溶血磷脂酰胆碱以脂质纳米物质形 态剂型化，并通过动物实验确认上述脂质纳米物质剂型不会引起局部刺激性，并且确认可 显著地改善溶血卵磷脂的红细胞溶血及凝集现象。
[0016] 在本说明书中所使用的术语"脂质结构物（lipid construct) "意味着使用包含甘 油三酯、油及卵磷脂的脂质混合物来制备的纳米大小的物质（例如，纳米粒子），术语"脂质 纳米物质（lipid nanomaterial) "意味着一同包含上述脂质结构物和溶血磷脂酰胆碱或其 衍生物的纳米大小的物质。只要上述脂质纳米物质为具有纳米大小的物质，其形态及形状 就不受特殊限制。
[0017] 根据本发明的一实例，上述脂质纳米物质为脂质纳米粒子（1 ipid nano particle)。在一个特定例中，上述脂质纳米粒子的直径为1~lOOOnm，在再一特定例中， 上述脂质纳米粒子的直径为1~500nm，在另一特定例中，上述脂质纳米粒子的直径为2~ 200nm，在还有一特定例中，上述纳米粒子的直径为50~200nm。若上述脂质纳米粒子的大 小小于lnm，则药物包封率会降低，若大小大于lOOOnrn，则很难用作注射剂。
[0018] 根据本发明的一实例，本发明的脂质结构物（或脂质纳米物质）为乳状的纳米粒 子。
[0019] 根据本发明的一实例，在上述脂质结构物的结构成分中，甘油三酯及油为形成脂 质结构物（或脂质纳米物质）的结构的脂质成分，卵磷脂为乳化剂（emulsifier)。
[0020] 根据本发明的一实例，上述甘油三酯可以为中链甘油三酯（MCT，middle chain triglyceride)。上述中链甘油三酯为甘油（glycerol)的〇；-(：12脂肪酸酯化合物。可在 本发明中使用的中链甘油三酯包含Miglyol 812(辛酸/癸酸甘油三酯（Caprylic/Capric Triglyceride))、Miglyol 818 (辛酸 /癸酸 / 亚油酸甘油三酯（Caprylic/Capric/Linoleic Triglyceride) )、Miglyol 829 (辛酸 / 癸酸 / 琥泊甘油三酯（Caprylic/Capric/Succinic Triglyceride))及它们的组合。
[0021] 根据本发明的一实例，上述油为植物性油。可在本发明中使用的植物性油包含大 豆油、棕榈油、菜籽油、葵花籽油、花生油、棉籽油、棕榈仁油、椰子油、罂粟籽油、红花油、芝 麻油、玉米油、橄榄油、芥花油及它们的组合。
[0022] 根据本发明的一实例，上述卵磷脂包含鸡蛋卵磷脂、大豆油卵磷脂、非转基因 (Non-GMO)卵磷脂、油菜籽（rapeseed)卵磷脂、向日葵卵磷脂、溶血卵磷脂（Lysolecithin) 及它们的组合。
[0023] 根据本发明的一实例，上述脂质结构物还可包含：磷脂质，可用于形成上述脂质结 构物的结构；离子脂质，可用于防止脂质结构物相互凝集；以及稳定剂，可用于将脂质结构 的结构稳定化。
[0024] 根据一个特定例，可向上述脂质结构物添加的磷脂质为可形成任意的磷脂质或脂 质体的磷脂质的组合体。例如，可在本发明中使用包含从鸡蛋、大豆或其他食物源获得的天 然磷脂质、半合成磷脂质或合成磷脂质的卵磷脂（HSPC)、脂质链的长度多样的磷脂质及非 饱和磷脂质。具体地，可使用选自由二硬脂酰磷脂酰胆碱（DSPC)、氢化大豆卵磷脂（HSPC)、 鸡蛋卵磷脂（Egg PC)、氢化鸡蛋卵磷脂（HEPC)、二棕榈酰磷脂酰胆碱（DPPC)、肉豆蔻酰磷 脂酰胆碱（DMPC)及它们的组合组成的组中的一种以上。
[0025] 根据一个特定例，可向上述脂质结构物添加的粒子脂质为阴离子脂质或阳离子脂 质。上述阴离子脂质的例可以举出豆蔻酰磷脂酰甘油（DMPG)、过氧磷脂酰甘油（DLPG)、二 棕榈酰磷脂甘油（DPPG)、二硬脂酰磷脂酰甘油（DSPG)、豆蔻酰磷脂酸（DMPA)、二硬脂酸酯 磷脂酸（DSPA)、过氧磷脂酸（DLPA)、二棕榈酰基磷脂酸（DPPA)及它们的组合。并且，作为 上述阳离子脂质的例，可以举出二油酰三甲基铵丙烷（D0TAP)、二甲基辛胺（DM0A)、二油酰 磷脂酰乙醇胺（DOPE)、二烷基二甲基溴化铵（DXDAB)、二烷基三甲基铵丙烷（DXTAP)及它们 的组合。
[0026] 根据一个特定例，可向上述脂质结构物添加的稳定剂为乙二胺四乙酸（EDTA， ethylenediaminetetraacetate)或其盐（例如，钠盐）。
[0027] 根据本发明的一实例，上述脂质结构物的甘油三酯：油：卵磷脂的重量比可为 1:0. 5~10:1~15。在一个特定例中，上述重量比为1:0. 5~3:2~10,在另一特定例中， 上述重量比为1:0. 5~2:2~5。
[0028] 本发明的脂质纳米物质作为药剂学活性成分，包含溶血磷脂酰胆碱或其醚衍生 物。众所周知，上述溶血磷脂酰胆碱或衍生物对败血症、细菌感染疾病（例如，腹膜炎、肺 炎）、急性呼吸困难综合征及多发性器官衰竭等疾病（疾病）有效。
[0029] 根据本发明的一实例，上述溶血磷脂酰胆碱可以由以下述化学式1表示。
[0030] 化学式1 :
[0032] 在上述化学式中，札为C 4 3。的烷基或具有一个或一个以上的双键的C 4 3。的烯基。
[0033] 根据一个特定例，由上述化学式1表示的溶血磷脂酰胆碱选自由L-a_溶血磷脂酰 胆碱、硬脂酰；L-a-溶血磷脂酰胆碱、肉豆蔻酰；L-a-溶血磷脂酰胆碱、棕榈酰；DL-a-溶血 磷脂酰胆碱、棕榈酰；以及L-a-溶血磷脂酰胆碱、油酰组成的组中。
[0034] 根据本发明的一实例，上述溶血磷脂酰胆碱的醚衍生物可以由以下述化学式2表 不。
[0035] 化学式2 :
[0037] 在上述化学式中，私为C 4 3。的烷基或具有一个或一个以上双键的C 4 3。的烯基。
[0038] 根据一个特定例，由上述化学式2表示的溶血磷脂酰胆碱的类似物选自由L-a-溶 血磷脂酰胆喊、y _〇_喊性_1_烯基；L_a_溶血磷脂酰胆喊、γ -〇-烷基；DL-Q-溶血磷脂酰 胆碱、γ -0-十六基；以及L-Q-溶血磷脂酰胆碱、γ -0-十六基组成的组中。
[0039] 根据本发明的一实例，上述溶血磷脂酰胆碱或其醚衍生物和脂质结构物的重量比 可以为1:1~50。在一个特定例中，上述重量比为1:1~10,在另一特定例中，上述重量比 为1:3~7〇
[0040] 根据本发明的一实例，与溶血磷脂酰胆碱或其醚衍生物相比，上述脂质纳米物质 具有如下特性：（i)溶解度提高、（ii)毒性减少、（iii)红细胞溶血现象减少和/或（iv)红 细