L-半胱氨酸组合物在预防、清除（或消除）吸烟、饮酒时所产生的致癌因素乙醛的应用
【技术领域】：
[0001] 本发明涉及L-半胱氨酸药物组合物在吸烟、饮酒时所产生上呼吸道、上消化道乙 醛致癌的方面的应用，属于药品的技术领域。
【背景技术】：
[0002] 癌是威胁人类健康长寿的大敌，每年要夺去数千万人的生命，现已证明，上呼吸 道、上消化道发生的癌与人类的嗜烟、长时间反复过量饮酒和不良饮食习惯成正相关。2009 年10月，国际癌症研究机构宣布：乙醛为一类致癌物，大量存在于烟草、含酒精饮料中。据 估计，发达国家中高达80%的口腔、咽和食管癌都是由吸烟和喝酒引起的。芬兰的研究人员 指出，这类上消化道病变的流行部分原因是由于饮酒和吸烟导致上消化道接触到乙醛，这 时致癌因素就乘机同时而入，诱发癌的生成。
[0003] L-半胱氨酸是生物体内一种常见的氨基酸，中文名称又称之为半氨基酸，目前主 要用于化妆品领域和食品产业当中，主要目的是作为添加剂或者改良剂使用，而目前医药 领域中使用更是很局限，主要用于祛痰；特别是用于治疗支气管炎和化痰的作用。数据显 示，与乙醛接触而诱发的癌症占据40%的比例，为此开发和研究一种新型、有效的消除致癌 的药物是目前亟待解决的问题，对大量吸烟、饮酒及不良习惯的人群的上呼吸道、上消化道 癌症的发生带来了福音，在去除致癌物乙醛的同时，还可收到保护肝、肾，降低血脂，促进血 液循环和NO(-氧化氮）的释放，在免疫保护方面发挥重要作用。同时减少和降低癌症对 人类的侵害，节约大量医药资源，保护人类健康。
【发明内容】
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[0004] 本发明的目的在于通过药物组合使用，解决清除通过消化道、呼吸道进入人体的 一类致癌物乙醛。预防与吸烟、饮酒及不良饮食习惯的人群的上呼吸道、上消化道癌症的发 生。
[0005] 为了解决上述的问题，本发明采用如下技术方案：
[0006] 本发明涉及一种L-半胱氨酸药物组合物由活性成分L-半胱氨酸与银杏叶提取 物、人参、原花青素蜂王浆、微量元素中的一种或一种以上组合制成；
[0007] 上述的L-半胱氨酸药物组合物，其活性成分光学异构体、药用盐及水合物；
[0008] 上述的L-半胱氨酸药物组合物，其活性成分按照重量份计：含有5~100份的 L-半胱氨酸和10~200份的其他活性成分；其活性成分优选10份L-半胱氨酸与30份银 杏叶提取物、人参、原花青素蜂王浆、微量元素中的一种或一种以上组合组成。
[0009] 上述的L-半胱氨酸药物组合物，药物组合物可以制成医学上药物制剂及其医疗 器械。
[0010] 上述的L-半胱氨酸药物组合物，该药物组合物用于于预防、清除吸烟、饮酒时上 呼吸道、上消化道乙醛致癌的方面的应用。
[0011] 本申请人进行了 L-半胱氨酸和银杏叶提取物、L-精氨酸、人参、原花青素、微量元 素中的一种或一种以上组合分别进行了药效学实验研究，以进一步阐述本发明提供的药物 组合物的有益效果。
[0012] 一药物组合物配比筛选实验
[0013] 发明人通过不同组方的L-半胱氨酸药物组合物进行了配伍，通过正交实验制定 了以下实验方案：并通过药物组合物对乙醛的消除作用及对A549细胞内环境抗氧化的影 响研究，再次证明了以下药物组合具有很好的疗效。
[0014] I. 1具体药物组分配比组合物A1~G1
[0015] 表1药物组分配比组合物A1~G1组
[0017] 以上选择配比，" + "表示配比，表示不配比，通过"药物组合物对乙醛消除作用 的研究"药理实验证明，上述药物配伍组合物对乙醛诱导的A549细胞损伤具有明显的保护 作用。
[0018] 1. 2具体药物单位配比组合物A2~G2药物
[0019] 表2药物单位配比组合物A2~G2药物
[0021] 以上选择配比，通过"物组合物对乙醛消除作用的研究"药理实验证明，上述活性 成分单位配比组合物对乙醛诱导的A549细胞损伤具有明显的保护作用。其中药理研究表 明，其中配比采用活性成分IlO份与活性成分1130份效果明显，其中活性成分II配伍选择 B2效果更佳。
[0022] 二药物组合物对乙醛消除作用的研究
[0023] 1. 1材料、试剂与仪器
[0024] 非小细胞肺癌A549细胞由天津市肺癌研究所提供。乙酸（含量40% )、药物组 合物（A2~G2)、RPMI-1640培养基、胎牛血清、青链霉素混合液（100X)、胰蛋白酶、噻唑 蓝（MTT)、二甲基亚砜（DMSO)、PBS缓冲液、乳酸脱氢酶测定试剂盒、一氧化氮测定试剂盒、 BCA法测定超微量蛋白含量试剂盒、超氧化物歧化酶测定试剂盒南京建成生物工程研究所。 HERAce 11150二氧化碳培养箱德国贺利氏公司；BDS200-PH倒置生物显微镜重庆奥特光学 仪器公司；Multiskan Spectrum全波长酶标仪上海雷勃生物有限公司。
[0025] 1. 2细胞培养
[0026] 将A549细胞培养在含10%胎牛血清、青链霉素混合液（I X)的1640培养基中，于 37°C、饱和湿度、5% C02条件下培养，根据细胞生长状态每隔2~3d换液1次。待细胞长 满80%后，对细胞进行消化用于传代培养或用于实验。
[0027] I. 3MTT法检测细胞生长活性
[0028] 用含10 %胎牛血清的1640培养基稀释细胞至6 X 104个/mL，并接种至96孔培养 板，每孔加入100L细胞悬液（空白孔不加细胞，只加培养基）培养24h，待细胞长满80%左 右，换成无血清培养基继续培养24h，使细胞同步化；然后分别加入药物组合物（A 2~G2)、乙 醛等处理因素，每个剂量重复6孔，置培养箱中孵育24h后进行检测。吸弃上清液20L，每孔 加入20L质量浓度为5mg/mL MTT (终质量浓度为0. 5mg/mL)，继续孵育4h后弃培养基，每 孔加入150LDMS0终止反应，避光低速振摇IOmin使深紫色沉淀溶解，于酶标仪波长570nm 处测定OD值，实验重复3次。
[0029] 1. 4细胞上清液LDH活性测定
[0030] 用10 %胎牛血清的1640培养基稀释细胞至6 X 104个/mL，将细胞接种至24孔板 中，每孔加入细胞悬液lmL，置5% C02培养箱，37°C培养24h，待细胞贴壁长满培养板后，换 用含无血清的培养液培养24h使细胞同步化。随后加入不同处理因素继续培养24h，每组 培养3孔细胞。培养终止后，3000r/min离心3min，小心吸取上清液，按试剂盒说明书测定 LDH活力，实验重复3次。
[0031] 1. 5细胞上清液中NO活性测定
[0032] 将细胞制成密度为6 X 104个/mL的细胞悬液，接种在24孔培养板中进行培养，待 细胞长满80 %时，按上面分组处理，每组设3个复孔。每孔取上清液100L，按照南京建成生 物工程研究所试剂盒要求测定NO含量，实验重复3次。
[0033] 1 · 6细胞内SOD活力测定
[0034] 将细胞制成密度为6 X 104个/mL的细胞悬液，接种在24孔培养板中进行培养，待 细胞长满80%时，按上面分组处理，每组设3个复孔。终止培养后，加入细胞裂解液，4°C裂 解30min，12000r/min离心15min，取上清BCA法测定蛋白浓度，同时按照南京建成生物工程 研究所试剂盒要求测定SOD活