包含不饱和脂肪酸和一氧化氮释放化合物的组合物及其用于增强认知和相关功能的用图
【专利说明】包含不饱和脂肪酸和一氧化氮释放化合物的组合物及其用 于増强认知和相关功能的用途
[0001] 本申请为2008年12月19日提交的发明名称为"包含不饱和脂肪酸和一氧化氮释 放化合物的组合物及其用于增强认知和相关功能的用途"的PCT申请PCT/US2008/013870 的分案申请，所述PCT申请进入中国国家阶段日期为2010年6月30日，申请号为 200880123505. X〇
[0002] 相关申请的夺叉参考
[0003] 本申请要求2008年1月4日提交的美国临时专利申请号61/010, 097和2008年7 月30日提交的美国临时专利申请号61/137, 382的优先权，它们的公开内容引入本文作为 参考。
技术领域
[0004] 概括而言，本发明涉及用于增强认知功能的组合物和方法，特别涉及包含不饱和 脂肪酸和一氧化氮释放化合物的组合物及它们在动物中增强认知功能的应用。
【背景技术】
[0005] 在年老的或衰老的动物经常患有某些程度的认知损害。经常观测到的变化包括 随年龄进展的认知功能的下降以及脑形态学和脑血管功能的与年龄有关的变化，例如脑衰 老。年龄相关的或与年龄有关的认知损害本身可以表现为多种形式，例如短期记忆丧失、学 习能力下降、学习速度下降、注意力下降、运动能力下降和/或痴呆等。在一些情况下，这些 认知下降的具体病因不详。在其他情况下，认知损害源自认知性疾病、障碍或综合征的发作 或发展，例如阿尔茨海默病（AD)。已知与年龄有关的认知下降有别于AD，并且可以独立于 AD发生。
[0006] 认知损害的动物模型很大地促进了包括其生理学、神经学、解剖学和病理学在内 的这类病症的研究。狗是有效的模型动物，它们证实了在学习和记忆中与年龄有关的认知 下降，其依据认知工作的功能而改变（Adams B等人，2000a ;Chan AD等人，2002 ;Su M-Y等 人，1998和Tapp Η)等人，2003)。尽管由于狗作为伴侣动物的作用对其认知下降研究从其 权利角度来说是有用的，但所观察到的下降反映了人类中所见到的与年龄有关的认知下降 这一事实，使得这项研究更有价值（Adams B等人，2000b)。老年的狗发展出与正常衰老的 人和AD患者中所见到的病理学状况有关的神经病理学，如β-淀粉样蛋白（Cotman CW和 Berchtold, 2002 ;和Cummings BJ等人，1996)。但是，狗没有证实AD的每个标记，特别是 没有观察到含有tau蛋白的神经原纤维缠结（Dimakopoulos AC等人，2002)。因此，狗的病 症是不同的，被称为犬认知功能障碍综合征（CCDS)。
[0007] 健康的狗和不健康的狗例如那些诊断患有CCDS的狗可在临床上存在进行性的认 知损害和神经病理学改变（London ED等人，1983)。此外，衰老的狗和那些诊断患有CXDS 的狗显示出各种行为障碍。例如，它们可能不会对它们的名字或熟悉的命令作出反应，可能 在熟悉的环境中迷路或迷惑，可能对它们的主人或客人不再欢迎或作出反应，可能表现出 白天活动减少，可能绕圈走，可能躲避情感，以及可能失去排尿控制或排便控制。
[0008] 尽管已经取得了进展，但还是需要开发改善认知的组合物和方法，特别是在衰老 的人和其他动物中。还需要用于治疗和/或预防认知损害、神经变性病症、中风和痴呆的组 合物和方法。所述治疗可用于改善所有相关动物的整体生活质量。对于伴侣动物，这些治 疗会提高主人的满意度，并增进主人与伴侣动物的关系。
【发明内容】
[0009] 因此，本发明的一个目的是提供用于增强动物认知功能的组合物和方法。
[0010] 本发明的另一个目的是提供在动物中减少或预防社会交往下降、减少或预防与年 龄有关的行为变化、增加可训练性、保持最佳大脑功能、促进学习和记忆、减少记忆损失、延 缓大脑老化、预防或治疗中风以及预防或治疗痴呆的方法。
[0011] 本发明的进一步的目的是提供以套盒形式生产的产品，所述套盒包含一种或多种 可用于制备本发明组合物的化合物以及可用于增强动物认知功能的食物或其他成分与装 置。
[0012] 本发明的另一个目的是提供包含本发明组合物和附于包装上的标签的包装，所述 标签指示本包装的内容物和/或将本组合物施用于动物的益处。
[0013] 使用用于增强认知功能的新的组合物和方法实现了一个或多个这些其它的目的。 通常，所述组合物包含一种或多种不饱和脂肪酸和一氧化氮释放化合物。所述方法通常包 括施用增强动物认知功能，特别是预防、减少和/或延缓与年龄有关的认知下降、认知损 害、神经变性病症、中风和痴呆的有效量的组合物。
[0014] 本领域技术人员容易看出本发明的其它和进一步的目的、特征和优点。
[0015] 发明详沐
[0016] 定义
[0017] 下列缩写可用于本文：AA，花生四烯酸；ALA，α -亚麻酸；AN0VA，方差分析；DHA， 二十二碳六烯酸；DPA，二十二碳五烯酸；ΕΡΑ，二十碳五烯酸；LA，亚油酸；UFA，不饱和脂肪 酸（用于本文的UFA指一种或多种这类脂肪酸）；N0, 一氧化氮；N0RC，一氧化氮释放化合 物；和L-Arg，L-精氨酸。
[0018] 术语"动物"是指能从本发明的一个或多个方法中获益的任何动物，其包括增强认 知功能；改变认知、运动或行为机能；减少或预防社会交往降低；减少或预防与年龄有关的 行为变化；增加可训练性；保持最优大脑功能；促进学习和记忆；减少记忆损失；延迟脑的 老化；预防或治疗中风；预防或治疗痴呆；和/或维持头脑清晰和机敏。通常，所述动物是 人、鸟类动物（avian)、牛类动物（bovine)、犬科动物（canine)、马类动物（equine)、猫科动 物（feline)、山羊类动物（hicrine)、狼类动物（lupine)、鼠科动物（murine)、绵羊类动物 (ovine)和猪类动物（porcine)。优选地，术语"动物"是指需要增强认知功能的动物或可从 认知功能的改善中获益的动物。"伴侣动物"是任何家养的动物，且非限制性地包括猫、狗、 兔、豚鼠、雪貂、仓鼠、小鼠、沙鼠、马、奶牛、山羊、绵羊、驴、猪等。优选地，动物是人或伴侣动 物如狗或猫。
[0019] 术语"增强认知功能"是指在动物中增加认知、运动或行为功能或者预防、减少或 延缓认知、运动或行为功能的降低中的一种或几种。
[0020] 术语"不饱和脂肪酸"或"UFA"是指多不饱和脂肪酸或单不饱和脂肪酸，包括具有 至少一个双键的一元羧酸。UFA包括（n-6)脂肪酸，例如亚油酸（LA)和花生四烯酸（AA)，和 (n-3)脂肪酸，如二十碳五烯酸（EPA)、α-亚油酸（ALA)、二十二碳五烯酸（DPA)和二十二 碳六烯酸（DHA)。UFA还包括肉豆蔻烯酸、棕榈油酸、油酸、亚油酸、顺-异油酸和芥酸。
[0021] 术语"鱼油"是指粗品或纯品的相对富含UFA的脂肪或油提取物，其来自海洋动 物，优选地为冷水鱼，例如但不限于鲑鱼、金枪鱼、鲭鱼、鲱鱼、海?卢鱼、条纹石飽、大比目鱼、 鲶鱼和沙丁鱼，以及鲨鱼、虾和蛤，或其任何组合。鱼油通常是原料供应商所使用的领域的 术语，包括不同的UFA含量和纯度的范围或产品。
[0022] 术语"一氧化氮释放化合物"或"N0RC"是指在动物中引起或能导致一氧化氮的释 放的任何化合物。所述化合物的实例包括L-精氨酸、含L-精氨酸的肽类或蛋白质，及其已 知的或确定释放一氧化氮的类似物或衍生物，如精氨酸α -酮戊二酸、GEA3175、硝普钠、硝 酸甘油、S-亚硝基-N-乙酰基-青霉胺、硝基甘油、S-NO-谷胱甘肽、NO-缀合的非留类抗 炎药（例如，NO-萘普生、NO-阿司匹林、NO-布洛芬、NO-双氯芬酸、NO-氟比洛芬和NO-酮 洛芬）、NO-释放性化合物-7、NO-释放性化合物-5、NO-释放性化合物-12、NO-释放性化 合物-18、二氮烯镐二醇盐（diazenium diolates)及其衍生物、二乙胺NO-亲核复合体 (NONOate)，以及在动物中引起一氧化氮、特别是"游离"NO释放的任何有机或无机化合物、 生物分子或其类似物、同系物、缀合物或衍生物。NORC还被定义为包括能够在体内代谢时转 化为一氧化氮释放化合物的补充物，例如瓜氨酸和鸟氨酸。
[0023] 术语"有效量"是指化合物、材料、组合物、药物或其他物质的量，其能有效地达到 特定的生物效果。这些效果包括但不限于一种或多种下述效果：增强认知功能、增加白天活 动、改善学习（学习的速度和容易性）、提高注意力、改善社会行为、改善运动能力和/或改 善脑血管功能，特别是对于衰老的动物。在各种实施方案中，"有效量"是指适于预防任何一 种或多种上述功能的降低的量，或在某些实施方案中，是指改善任何一种或多种上述功能 的量，所述功能例如认知功能或行为、学习速度或能力、解决问题能力、注意力的范围和专 注于任务或问题的能力、运动功能或行为和社会行为等。在其他的实施方案中，有效量适于 减少动物认知技能或功能的下降程度或速度，和/或有效量适于延缓此类降低的开始。所 述效力可以例如通过对动物或动物群体施用本发明的组合物来实现。优选地，所述下降的 预防、减少或延缓，或个体或群体的改善是相对于一个同类群组（cohort)而言的，例如还 未接受处理的对照动物或同类群体，或已施用组合物或药物的对照动物或同类群体。
[0024] 术语"认知功能"是指脑的特定的、正常的或适当的生理活性，其包括一种或多种 以下生理活性：心理稳定性、记忆/回忆能力、解决问题能力、推理能力、思考能力、判断能 力、识别或选择能力、学习能力、学习容易性、感知、直觉、注意力和意识。"增强的认识功能" 或"改善的认识功能"是指脑的特定的、正常的或适当的生理活性的任何改善，包括一种或 多种按本领域中任何合适的方法测定的下述生理活性：心理稳定性、记忆/回忆能力、解决 问题能力、推理能力、思考能力、判断能力、识别或选择能力、学习能力、学习容易性、感知、 直觉、注意力和意识。
[0025] 术语"行为"是指动物由于对给定的刺激或设定的情况产生响应或反应而作出的 任何事。"增强的行为"或"改善的行为"是指动物由于对给定的刺激或设定的情况产生响 应或反应而作出的任何事的任何改善。"行为"与本文中的"行为功能"同义使用。
[0026] "运动功能"或"运动行为"是指影响或造成动物运动的组织的生物活性。这类组织 包括但不限于肌肉和运动神经元。"增强的运动行为（或功能）"或"改善的运动行为（或 功能）"是指影响或造成动物运动的组织的生物活性的任何改善。
[0027] 在个体（表型）中任何上述种类或特定类型的特性或功能中的术语"下降"通常 是指与该特性或功能的改善或增强相反。组合物的"有效量"可以是完全预防下降或实质 上预防下降（"预防"下降）、减少在任何时期或在任何时间点下降的程度或速率（"减少" 下降）、延缓下降的发生、程度或进展（"延缓"下降）所需要的量。当用于未患病的衰老动 物（例如，"健康的衰老动物"）时，"下降"的预防、减少或延缓通常是更有效的对比基础。 可以认为预防、减少或延缓是相对于未接受过处置（例如所感兴趣的饮食或补充剂）的对 照或同类群组。可以在个体基础上或在某些实施方案中在群体基础上，测定和考虑预防、减 少或延缓有害的特性或病症的发作、或特定功能下降的速率。预防、减少或延缓下降的净效 应是在每单位时间内或在给定的终点时认知、运动或行为功能的较少下降。换言之，对于个 体或群体而言，理想的是维持认识、运动和行为功能在最高可能的水平上持续最长可能的 时间。因而，对于任何实施方案而言，认知、运动或行为功能不需要有净增加。对于本文的 目的，可以将个体与对照个体、组或群体进行比较。同样可以将群体与实际个体比较，以使 对个体的测定标准化，或与组或群体比较，其也是有用的。
[0028] 术语"衰老的"是指高龄的，所述动物超过了其特定的物种和/或物种内的品种的 平均生命周期的50%。例如，如果某个给定品种的狗的平均生命周期是10年，那么对本文 目的而言这个品种的超过5岁的狗被认为是"衰老"的。"健康的衰老动物"是没有已知疾 病、特别是没有与可能混淆效果的认知丧失损害有关的疾病的动物。在研究中使用健康的 衰老动物，同类群组的动物也优选健康的衰老动物，但具有合适的认知、运动或行为功能的 其他健康动物也可以适合用作比较的样本。如果使用具有特定疾病诊断或具有认知、运动 或行为缺陷的动物，那么所述的同类群组应该包括具有类似诊断的动物或存在类似于所述 疾病的指征或认知、运动或行为缺陷的的动物。
[0029] 术语"食品"或"食物产品"或"食品组合物"是指用于被动物（包括人）摄取并为 其提供营养的产品或组合物。
[0030] 本文所使用的"为人类消耗所制的食品"是明确旨在用于由人摄取的任何组合物。 术语"宠物食品"或"宠物食品组合物"是指旨在由动物、优选伴侣动物消耗的组合物。"完 全和营养平衡的宠物食品"是以适当的量和比例包含所有已知的对于食品的预期接受者或 消费者所需的营养素的食品，所述营养素基于例如在伴侣动物营养的领域中公认的权威推 荐。因而这类食品能用作摄取饮食的单一来源来维持生命或促进生产，而不添加补充性的 营养来源。营养平衡的宠物食品组合物是众所周知的并在本领域中使用。该术语包括任何 食品、饲料、点心、食物补充剂、零食（treat)、代餐或膳食替代品，无论是人用还是另一种动 物用。动物食品包括预期用于任何家养或野生动物用的食品或饲料。在优选实施方案中， 动物食品代表全营养食品组合物，例如丸状、挤出或干燥的食品。这类动物食品的实例包括 挤出的宠物食品，例如狗食和猫食。
[0031] 术语"饮食补充物"是旨在用于除正常动物饮食之外摄取的产品。饮食补充物可 以是任何形式，例如固体、液体、凝胶、片剂、胶囊、粉剂等。优选它们以方便的剂型提供。在 一些实施方案中，它们以散装的销售包装如散装粉末、液体、凝胶或油状物提供。在其他实 施方案中，补充剂以散装量提供，其包含于其他食物产品中，如点心、零食、补充棒、饮料等。
[0032] 术语"长期施用"是指一个月以上的反复施用或消耗的时期。对于某些实施方案 优选2个月、3个月或4个月以上的时期。还优选更长的时期，包括5、6、7、8、9或10个月以 上的时期。还优选11个月或1年以上的时期。本文还包括延长至1年、2年、3年以上或更 多年的更长期的应用。在某些衰老动物的情况下，该动物在其剩余的生命中按有规律的施 用方案持续消耗所述组合物。有时它是指消耗"延长的"时期。
[0033] 本文所用的"有规律的施用方案"是指至少每月一次、更优选每周一次给药或消耗 所述组合物。在某些实施方案中优选更频繁地给药或消耗，如每周两次、三次或七次。还更 优选的是包含至少每天消耗一次的方案。本领域技术人员应当理解，化合物或该化合物的 某些代谢产物或该化合物消耗后产生的某些代谢产物在血液中的浓度可以是评价或测定 给药频率的有用工具。不管在本文中是否明确地进行了例证，使所测的化合物的预期血液 浓度保持在可接受范围内的给药频率在本文中都是有效的。本领域技术人员应当理解，给 药频率是被消耗或被给药的组合物的函数，一些组合物可能需要更高或更低频率地施用， 以维持所测化合物所需要的血液水平。
[0034] 术语"口服施用"或"经口施用"是指动物摄取本文所述的一种或多种组合物、或 人饲喂或在指导下饲喂本文所述的一种或多种组合物给动物。其中人在指导下饲喂该组合 物，这种指导可以是介绍和/或告知人们使用该组合物可以和/或将提供提及的益处，例如 增强认知功能、改善肝功能、增加白天活动、改善学习、改善注意力、改善社会行为、改善运 动能力和/或改善脑血管功能，或减少、预防或延缓上述功能或特性的下降。该指导可以是 口头的指导（例如来自如医生、兽医或其他健康专业人士的口头说明）、或广播或电视媒体 (例如广告）、或书面指导（例如来自如医生、兽医或其他健康专业人士（如处方医师）所书 写的指导）、专业销售者或组织（例如通过如市场宣传手册、小册子或其他指导性的用具）、 书面媒体（例如因特网、电子邮件、网站或其他与计算机相关的媒体）和/或组合物的相关 包装（例如装有该组合物的容器上的标签），或其组合（例如，带有访问网站以获取更多信 息的说明的标签或包装说明书）。
[0035] 术语"认知药物"是指用于影响认知功能的任何化合物、组合物或药物，例如单胺 氧化酶B抑制剂如司来吉兰；血管扩张剂如尼麦角林和长春西汀；磷脂酰丝氨酸；丙戊茶 碱；抗胆碱酯酶药（胆碱酯酶抑制剂）如他克林、加兰他敏、利斯的明、长春西汀、多奈哌齐 rAMCEPT? (多奈哌齐盐酸盐））、美曲膦酯和毒扁豆碱；卵磷脂；胆碱拟胆碱药如米 拉美林和咕诺美林；离子型N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA)受体拮抗剂如美金刚；抗炎药如泼 尼松龙、双氯芬酸、吲哚美辛、丙戊茶碱、萘普生、罗非昔布、布洛芬和舒林酸；金属络合剂如 氯碘喹啉；银杏（Ginkgo biloba);双膦酸盐类；选择性雌激素受体调节剂如雷洛昔芬和雌 激素；植物雌激素；β和γ和分泌酶抑制剂；降胆固醇药如他汀类药物；降钙素；利塞膦酸 盐；阿仑膦酸盐；以及它们的组合。
[0036] 术语"联合"是指以相同或不同的频率、使用相同或不同的施用途径、在大约同一 时间或周期性地将包含UFA和NORC的组合物、食品组合物、认知药物或本发明其它的化合 物或组合物：（1) 一起在食品组合物中或（2)分别地施用给动物。"周期性地"是指以特定 活性剂可接受的施用日程施用所述活性剂，并以适合特定动物的方式将食品常规地喂食给 动物。"大约同一时间"一般是指将食物或活性剂在相同时间或彼此间隔在约72小时内施 用。"联合"尤其包括以下施用方案：其中认知药物在预定的期间施用并且含UFA和NORC的 组合物不确定地施用。
[0037] 当涉及动物时术语"单独的"是指单独的任何物种或种类的动物。
[0038] 术语"微生物"至少包括细菌、霉菌和其他真菌及酵母菌。益生菌是能在动物的胃 肠道中存活或甚至繁殖和茁壮成长的有益的微生物，益生菌通常能有助于动物的整体的健 康，并特别有助于动物的胃肠的健康。
[0039] 术语"单个包装"意指套盒的组分是在物理上相关联的，在一个或多个容器中或使 用一个或多个容器，并且其被认为是制造、分配、销售或使用的单位。容器包括但不限于包、 盒子或硬纸盒、瓶子、任何类型或设计或材料的包装、外包装、收缩包装、附着的组分（例 如，钉合的、粘合的等）或任何前述的组合。例如，单个包装套盒可提供物理上相关联的各 单独组合物和/或食品组合物的容器，以使它们被认为是制造、分配、销售或使用的单位。
[0040] 术语"虚拟包装"是指套盒的组分通过在一个或多个物理上的或虚拟的套盒组分 上的说明书（用于向使用者说明如何获得其他组分）而相关联，例如，在含有一个组分和指 导的包或其他容器中，所述指导向使用者说明去网站、联系记录的信息或回复传真服务、浏 览可视信息或联系看护者或指导者，以获得如何使用该套盒的说明书或关于套盒的一个或 多个组分的安全性或技术信息。能作为虚拟套盒的一部分而提供的信息包括使用说明书； 安全信息如材料安全数据表；毒物控制信息；潜在不良反应信息；临床研究结果；膳食信息 如食物组成或热量组成；关于认知、行为或运动功能的一般信息；影响认知、行为或运动功 能的疾病；治疗认知、行为或运动功能；或关于治疗或预防认知、行为或运动功能的一般信 息；关于认知、行为或运动功能