组合物及其在抗肿瘤药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明设及有机合成和药物化学领域，具体设及组合物、制备方法及其用途。
【背景技术】
[0002] 癌症是对人类生命健康危害最大的疾病之一，每年都有大量的人死于癌症。抗癌 药物的研发一直是药学研究的热点。抗肿瘤药物中有74%是天然产物或其衍生物，如紫杉 醇及其衍生物就是目前临床上应用效果比较好的抗肿瘤药物。因此，从天然产物中寻找化 合物或先导化合物并进行结构修饰获得其衍生物，从而得到高效低毒的潜在药物最有重要 价值。
[0003] 本发明设及的化合物I是一个2011年发表（AntonellaMaggioetal. , 2011. Artalbicacid,asesquiterpenewithanunusualskeletonfromArtemisia a化a(Asteraceae)f;romSicily.Tetr址e化onLetters, 52(2011)4543 - 4545)的化合物， 我们对化合物I进行了结构修饰，获得了两个新的衍生物即化合物HI和化合物IV，并用化 合物HI和化合物IV制备了组合物并对该组合物抗肿瘤活性进行了评价，其具有抗肿瘤活 性。
【发明内容】
[0004] 本发明公开了一个新的组合物，该组合物由化合物III和化合物IV组成，该组合 物中化合物III和化合物IV的质量百分数分别为40%和60%。 阳0化]
[0006] 药效学实验表明，本发明的组合物具有较好的抗肿瘤作用。
[0007] W下通过实施例对本发明作进一步详细的说明，但本发明的保护范围不受具体实 施例的任何限制，而是由权利要求加W限定。
【具体实施方式】
[0008] 实施例1化合物Arta化icacid的制备
[0009] 化合物Arta化icacid(I)的制备方法参照AntonellaMaggio等人发表的 文南犬(AntonellaMaggioetal. , 2011.Artalbicacid,asesquiterpenewithan unusualskeletonfromArtemisiaalba(Asteraceae)fromSicily.Tetrahedron Letters, 52(2011)4543 - 4545)的方法。
[0010]
W11] 实施例2Arta化icacid的O-漠乙基衍生物（n)的合成 阳01引将化合物I(266mg，1.OOmmol)溶于10血苯，向溶液中加入四下基漠化锭灯BAB) (0. 08g)，1，2-二漠乙烧化760g，20.OOmmol)和6血的50 %氨氧化钢溶液。混合物在40 摄氏度揽拌16h。1化之后将反应液倒入冰水中，立即用二氯甲烧萃取两次，合并有机相 溶液。然后对有机相溶液依次用水和饱和食盐水洗涂5次，再用无水硫酸钢干燥，最后减 压浓缩去除溶剂得到产物粗品。产物粗品用硅胶柱层析纯化（流动相为：石油酸/丙酬 =100:1.0,v/v)，收集栋色集中洗脱带并挥去溶剂即得到化合物II的栋色粉末（272mg， 73% )O
[0013] 咱NMR巧OOMHz,DMSO-de) 5 11. 41 (S, 1H)，6. 06 (S, 1H)，5. 76 (S, 1H)，4. 99 (S, 1H)，4 .71 (s, 1H), 4. 56 (s, 1H), 3.86(s, 2H), 3. 54 (s, 2H), 2. 65 (s, 1H), 2. 43 (s, 2H), 2. 33 (s, 2H), 2 .10 (S, 1H)，1. 64 (S, 3H)，1. 54 (S, 1H)，1. 44 (S, 2H)，0. 95 (S, 3H).
[0014] "CNMR(125MHz,DMS0-d6) 5 201. 95 (S), 175. 93 (S), 149. 13 (S), 148. 15 (S), 117. 0 5 (S)，109. 43 (S)，81.86(S)，70. 27 (S)，57.68(S)，41. 26 (S)，39. 07 (S)，38.86(S)，35. 69 (S) ，33. 36 (S)，30. 72 (S)，20. 44 (S)，18. 42 (S).
[0015] HRMS(ESUm/z[M+H]+calcdforC口H2sBr〇4:373. 1014;found373. 1017.
[0017] 实施例3Arta化icacid的0-(赃嗦基）乙基衍生物（III)的合成
[00化]将化合物II(187mg，0. 5mmol)溶于25血乙腊当中，向其中加入无水碳酸钟 (345mg，2. 5mmol)，舰化钟（84mg，0. 5mmol)和无水赃嗦（3446mg，40mmol)，混合物加热回流4h。反应结束后将反应液倒入20mL冰水中，用等量二氯甲烧萃取2次，合并有机相。依次 用水和饱和食盐水洗涂合并之后的有机相，再用无水硫酸钢干燥，减压浓缩去除溶剂得到 产物粗品。产物粗品用硅胶柱层析纯化（流动相为：石油酸/丙酬=100:1. 5, v/v)，收集 淡栋色集中洗脱带并挥去溶剂即得到化合物III的栋色粉末（124. 7mg，66%)。 阳019] Ih NMR(500MHz，DMS0-d6)5ll.56(s，lH)，6.22(dt，J = 3. 9, 1.8Hz, 1H) , 5. 92 (dt, J = 4. 0, 1. 9Hz, IH) , 4. 9 I - 4. 80 (m, 2H) , 4. 76 - 4. 67 (m, IH)，3. 65 (t, J = 7.6Hz, 2H)，2. 80 (m, 5H)，2. 70-2. 62 (m,6H)，2. 45 (td, J = 12. 2, 0.6Hz, 4H)，2. 23 (dd, J = 24. 7, 17. 4Hz, IH)，I. 79 (t, J = 2. OHz, 3H)，I. 72 - I. 51 (m, 3 H), I. 20 (s, IH), I. 10 (s, 3H).
[0020] "c NMR (125MHz, DMS0-d6) 5 202. 02 (S)，176. 02 (S)，149. 24 (S)，148. 28 (S)，117. 2 0 (S)，109. 50 (S)，81. 95 (S)，67. 17 (S)，57. 81 (S)，54.66(S)，54. 31 (S)，45. 42 (S)，41. 39 (S) ，39. 17 (S)，38. 98 (S)，35. 78 (S)，30. 84 (S)，20. 53 (S)，18. 53 (S).
[0021] HRMS(ESI) :m/z[M+田+calcd for Cs化5N2O4:379. 2597 ;found:379. 2592。
[0022]
阳02引实施例4 Arta化ic acid的0-(咪挫基）乙基衍生物（IV)的合成[0024]将化合物II (187mg，0. 5mmol)溶于25血乙腊当中，向其中加入无水碳酸钟 (345mg，2. Smmol)，舰化钟（84mg，0. Smmol)和咪挫（870mg，IOmmol)，混合物加热回流地。反 应结束后将反应液倒入35mL冰水中，用等量二氯甲烧萃取S次，合并有机相。依次用水和 饱和食盐水洗涂合并之后的有机相，再用无水硫酸钢干燥，减压浓缩去除溶剂得到产物粗 品。产物粗品用硅胶柱层析纯化（流动相为：石油酸/丙酬=100:0.6, v/v)，收集褐色集 中洗脱带并挥去溶剂即得到化合物IV的栋色粉末（109. 8mg，61 %)。 阳0巧]电NMR巧00MHz，DMS0-d6) 5 19. 91(s, 1H)，8. 07(s, 1H)，7.：M(s，1H)，6. 95(s, 1H)，6 .28 (s, IH)，5. 93 (s, IH)，4.86(d, J = 12. OHz, 2H)，4. 77 (s, IH)，4. 19 (d, J = 16. 7Hz, 2H)，4. 04 (s, 2H), 2. 81 (s, IH), 2. 71 (s, 2H), 2. 64 (s, 2H), 2. 14 (s, IH), I. 83 (d, J = 12. OHz, 5H), I. 66(s, IH), I. 14(s, 3H).
[0026] "c NMR (125MHz, DMS0-d6) 5 202. 12 (S)，176. 12 (S)，149. ：M (S)，148. 38 (S)，139. 96(S)，128. 96 (S)，119. 59 (S)，117. 28 (S)，109. 63(s)，82. 08 (S) ,67. 99 (S) ,57. 89 (S) ,44. 05 (S)，41. 50 (S)，39. 28 (S)，39. 04 (S)，35. 89 (S)，30. 95 (S)，20. 64 (S)，18. 64 (S).
[0027] HRMS(ESI) :m/z[M+H]+calcdforC20H29N204:361. 2127 ;found:361. 2122。
[0028]
[0029] 实施例5体外抗肿瘤活性筛选
[0030] 筛选细胞株为化pG2(人肝癌细胞），PANC-I(人膜腺癌），MCF-7(人乳腺癌细胞）， SW620(人结肠癌细胞），A549(人肺癌细胞），HGC-27(人胃癌细胞），L02(人正常肝实质细 胞）。 阳03U 组合物的制备：将研磨之后过200目网的40mg化合物III的粉末和研磨之后过 200目网的60mg化合物IV的粉末装入带盖的小管中并用满轮揽拌仪混合即得到IOOmg组 合物，使用时用水溶解运IOOmg的组合物即得到组合物的溶液。
[0032] 实验方法：
[0033] 取对数生长期状态良好的细胞，膜蛋白酶消化，制成5XIO4细胞/mL的悬液。将 细胞悬液移入96孔培养板，每孔100y以置37°C、5%C〇2条件下培养2地。
[0034] 将受试化合物III、化合物IV和组合物分别用DMSO配制成一定浓度的母液，再用 RPMI1640培养基将衍生物母液稀释成不同作用浓度的稀释液。移去旧培养基，加入不同浓 度的含药培养基，每孔lOOyL。另设空白对照组。药物作用4化后，吸弃含药培养基，于每 孔加入无血清、无酪红1640培养基100yL再加入MlT溶液巧mg/mL) 10yL继续溫育地。
[0035] 吸去各孔内上清液，每孔加入DMSO150化，暗处振荡lOmin，使结晶物充分溶解， 酶标仪测定490nm处各孔的光吸收值（OD值），计算细胞的增殖抑制率：抑制率（％ )= (1-用药组平均OD值/空白对照组平均OD值）X100 %。应用SPSS16. 0软件进行数据处 理并计算癌细胞增殖的半数抑制浓度（ICJ，结果见表1。
[0036] 表1化合物或组合物对7种癌细胞的体外增殖抑制作用
[0037]
[0038] 如表I结果所示，组合物对不同的肿瘤细胞均具有一定的增殖抑制作用；而对于 正常的肝实质细胞L02的ICs。非常大（MOiiM)、没有增殖抑制作用，说明安全性非常高。化 合物III和化合物IV对于所有肿瘤细胞没有增殖抑制作用。组合物表现出较好的抗癌活 性，具有开发抗癌药物的潜力。
[0039] 实施例6本发明所设及组合物片剂的制备
[0040] 取2克组合物，加入制备片剂的常规辅料18克，混匀，常规压片机制成100片。
[0041] 实施例7本发明所设及组合物胶囊的制备
[0042] 取2克组合物，加入制备胶囊剂的常规辅料如淀粉18克，混匀，装胶囊制成100 粒。
【主权项】
1. 一种组合物，其特征为该组合物由化合物III和化合物IV组成，该组合物中化合物 III和化合物IV的质量百分数分别为40%和60%，2. 如权利要求1所述的组合物的制备方法，其特征为：将化合物III的粉末和化合物 IV的粉末按照质量百分数分别为40%和60%充分混合。3. 如权利要求1所述的组合物在抗肿瘤药物中的应用。4. 如权利要求3所述的组合物在抗肿瘤药物中的应用，其特征为：所述肿瘤为消化系 统肿瘤。5. 如权利要求4所述的组合物在抗肿瘤药物中的应用，其特征为：所述消化系统肿瘤 为肝癌、胰腺癌、结肠癌或者胃癌。6. 如权利要求3所述的组合物在抗肿瘤药物中的应用，其特征为：所述肿瘤为乳腺癌 或者肺癌。
【专利摘要】本发明涉及有机合成和药物化学领域，具体涉及组合物及其在抗肿瘤药物中的应用。本发明公开了一种组合物及其制备方法。药理学实验表明，本发明的组合物具有抗肿瘤的作用，具有开发抗肿瘤药物的价值。
【IPC分类】A61P35/00, A61K31/4164, A61K31/495, C07D295/088, C07D233/60
【公开号】CN105343079
【申请号】CN201510888090
【发明人】丁秋菊
【申请人】南京海澳斯生物医药科技有限公司
【公开日】2016年2月24日
【申请日】2015年12月7日