炭角菌酮在制备抗霉菌性阴道炎药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明设及炭角菌酬在妇科治疗方面的应用，特别设及炭角菌酬治疗抗霉菌性阴 道炎的应用。
【背景技术】：
[0002] 霉菌性阴道炎或念珠菌性阴道炎即外阴阴道假丝念珠菌病（WC)，是由念珠菌引 起的一种常见多发的外阴阴道炎症性疾病。白色念珠菌为条件致病菌，10%~20%的非孕 妇女及30%的孕妇阴道中有此菌寄生，但菌量少，不引起症状。只有当全身及阴道局部免疫 能力下降，尤其是局部细胞免疫力下降，白色念珠菌大量繁殖，才会引发阴道炎症状。
[0003] 大炭角菌XylariaeuglossaRr.属于子囊菌亚口（Ascomycotina)炭角菌科 狂ylariaceae)，是一种营腐木生的稀少的高等真菌，生长在林中的树粧及掉落的枝条上， 在中国主要分布于西南各省，数量少。大炭角菌在当地山区也有药用。大炭角菌中提取、分 离、纯化得到的运种新化合物，命名为炭角菌酬，炭角菌酬的结构如下：
[0004]
【发明内容】
[0005] 本发明首次发现炭角菌酬具有和抗霉菌性阴道炎活性。
[0006] 技术方案
[0007] 炭角菌酬在制备抗霉菌性阴道炎药物中的应用。 阳00引有益效果
[0009] 本发明首次发现其具有显著的抗霉菌性阴道炎活性，其为进一步开放成妇科药 物，提供基础，具有很好的市场推广价值和经济价值。
【具体实施方式】
[0010] 实施例1
[0011] 风干粉碎的大炭角菌子实体巧kg)用氯仿-甲醇（1 : 1)混合溶剂提取3次，每 次冷浸2地，合并提取液并减压浓缩得250g浸膏。将浸膏置于水和氯仿中悬浮分层，氯仿 层（170g)经硅胶柱色谱，氯仿-甲醇（100 :ο~ο: 100)梯度洗脱得7个组分（组分A~G)。组分F(氯仿-甲醇100 : 15)经Se地adexLH-20柱色谱，氯仿-甲醇（1 : 1) 洗脱；在254nm巧光下有强烈黄色和蓝白色巧光的部分继续用石油酸-丙酬硅胶柱色谱，从 85 : 15部分得到炭角菌酬（150mg)。
[0012] 黄绿色粉末，*α巧抓91.65(c0. 57，CHC13)。分子式为C34册4010([M+田+，准分 子离子峰 603. 2230,计算值 603. 2230)。IRVmax邸r(cm-1) :3442, 2962, 2930, 2851，1612 ;UVAmaxMeOH(nm) : 278, 206, 388, 317 ；EI-MSm/z: 602 ([Μ]+, 100), 584([Μ-H20]+,45)，566 ([M-2H20]+, 10) ;FAB-MSm/z:601[M-H+- ;1H-應R(400MHz,CDC13) δ: 2. 87 (2H,m,H-2)，3. 12 (IH,d,J= 17.OHz,H-4a)，3. 17 (IH,d,J= 17.OHz,H-4b)，6. 95 (1 H,s,H-5)，7. 06 (IH,s,H-10)，1. 50 (3H,s, 3-CH3)，3. 77 (3H,s, 6-0CH3)，3. 45 (3H,s, 8-0CH3) ，14. 93 (IH,s, 9-OH)，2. 82 (2H,m,H-2' )，2. 58 (IH,d,J= 16. 7Hz,H-4'a)，2. 90 (IH,d,J= 16. 7Hz，H-4'b), 6.16(1?s,H-5' ),6.46 (lH，s，H-7' ),1.28 (3H，s, 3' -C册），4.01 (3H，s ，6' -OOB), 3. 61 (3H,s, 8' -OOB), 15. 47(1H，s, 9' -OH) ;13C-NMR(100MHz，CDCU)δ:202. 4 (C-1), 52. 0 (C-2), 70. 9 (C-3), 43. 7 (C-4), 102. 6 (C-5), 160. 0 (C-6) ,121.8 (C-7), 158. 7 (C-8)，164. 8(C-9), 117. 3(C-10), 136. 6(C-4a), 113. 9(C-8a), 109. 6(C-9a), 141. 3(C-10a), 29 .0(3-CH3)，56.(K6-0CH3)，61.7@-0CH3)，202.4(C-l')，51.4(C-2')，70.5(C-3')，41.8(C-4 '),98. 3(C-5' ),164. 7(C-6' ),97. 5(C-7' ),162. 0(C-8' ),165. 9(C-9' ),119. 8(C-10' )，135.4(C-4'a)，110.6(C-8'a)，110.0(C-9'a)，141.8(C-10'a)，28.9(3' -CH3)，56.2巧'-OC册)，55. 1 (8' -OC册）。从IH-NMR和13C-NMR可W推测化合物是二聚体，包含了 2对甲氧 基、1对有强缔合的酪径基、2对有禪合的亚甲基、1对不饱和的酬幾基和2对禪合的芳香氨。 该二聚体通过C-7和C-10'相连。H-5 (δ6. 95)为单峰，运表明与H-5禪合的H-7被取代 了。而且，在化合物的HMBC谱上，Η-4'与2个芳香季碳C-4'a、C-9'a和1个芳香次甲 基C-10'相关，推测化合物1中C-10'上的氨被取代，故推断二聚体是通过C-7和C-10' 连接。化合物的CD谱表现为长波长处是负Cotton效应，短波长处是正的Cotton效应，CD: 2 00 (0. 03)，203 (0)，213 (-6. 07)，223 (0)，230 巧.73)。240 (2. 36)，250 (1. 82)，257 (2. 36)，268 ( 6. 07)，275 (0)，283 (-6. 07)，290 (-1. 68)，320 (0)，333 (0. 8的，350 (0)。根据Prelog-Helmchen 规则，化合物被定为（巧型轴向构型，根据Oedel规则，化合物中C-4'位亚甲基2个质子 化学位移值的差值Aδ= 0. 32 > 0. 08,因此化合物的C-3'位的绝对构型为S型；C-4位 亚甲基2个质子化学位移值的差值Δδ<0.08,C-3的绝对构型被定为R型。综上，鉴定 化合物1为（3氏3'5，巧-2,2'，3,3'-16付址7化0-3,3'，9,9'-16付址7化0巧-6,6'，8 ,8' -tetramethoxy-3, 3' -dimethyl-[7, 10' -bianthracene]-4, 4' -(IH, 1'H)-dione， 命名为炭角菌酬。 阳〇1引实施例2
[0014] 主料炭角菌酬化合物80mg，辅料38型脂肪酸甘油醋（购自sigma公司）2300mg混 合，制成栓剂。 阳015] 制备步骤：按处方量称取主、辅料，先将辅料加入胶体磨中，于50-55°C水浴中加 热融烙，缓慢加入炭角菌酬化合物并不断揽拌使混合均匀，注入栓剂灌注机中，灌注成型， 溢料重新融烙、注模，成品。
[0016] 实施例3
[0017] 材料与方法
[0018] 1、达克宁栓，由西安杨森制药有限公司生产；白色念珠菌：由中国医学科学院皮 肤病防治研究所提供，为临床分离菌株。
[0019] 样品组来自实施例2的栓剂。
[0020] 动物：日本大耳白家兔，雌性，健康，体重2-化g,由南京青龙山实验动物中屯、 提供。
[0021] 2、方法：首先建立家兔霉菌性阴道炎模型，再分组给药。取日本大耳家兔，先用接 种针，再用接种环分别在阴道口内2-4Cm处用"连续划线法"接种白色念珠菌，连续两天。 于第二次接种后第Ξ天作阴道涂片检查，结果白色念珠菌镜检阳性，证实造模成功。将上述 家兔随机分为分组，每组6只，即样品组，达克宁（阳性对照）组、模型组，另取6只家兔为 空白（正常对照组），样品组给药剂量为30mg/只/天，达克宁组给予达克宁栓30mg/只/ 天，模型组和空白对照组给溫生理盐水冲洗，连续屯天给药。于给药14d检查记录阴道局部 病变并取阴道、分泌物作涂片检查，于给药后第14天处死动物，分泌物检测。
[0022] 结果：
[0023] 1、阴道局部病变肉眼观察：家兔于接种白色念珠菌后，阴道充血、水肿、分泌物增 加。给药后，各给药组家兔阴道局部充血、水等病变逐渐好转，尤样品组明显。于治疗后第 屯日各给药组阴道局部病变明显减轻，至14日时多数恢复正常，与空白对照比较无明显差 异。见表2。结果显示，样品组优于阳性对照组。
[0024] 表2对阴道局部病变的影响 阳0巧]
[0026] 其中：A:无变化；B轻度充血，少量分泌物；C、中度充血、水肿、分泌物较多；D、重 度充血、水肿、分泌物极多
[0027] 2、分泌物检测：造模后涂片除空白组均查见白色念珠菌，于治疗后14d除了模型 组都未检到白色念珠菌，且组间无差异，见表3。
[0028] 表3治疗后阴道涂片检查结果
[0029]
【主权项】
1.炭角菌酮在制备抗霉菌性阴道炎药物中的应用。
【专利摘要】本发明涉及炭角菌酮在妇科治疗方面的应用，特别涉及炭角菌酮治疗抗霉菌性阴道炎的应用。本发明首次发现其具有显著的抗霉菌性阴道炎活性，其为进一步开放成妇科药物，提供基础，具有很好的市场推广价值和经济价值。
【IPC分类】A61P31/10, A61K31/122, A61P15/02
【公开号】CN105380932
【申请号】CN201510697523
【发明人】罗瑞雪
【申请人】苏州普罗达生物科技有限公司
【公开日】2016年3月9日
【申请日】2015年10月22日