一种具有P-gp抑制作用的PLV2K-PLGA纳米粒的制备及在口服给药中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物制剂新剂型领域，设及具有P-gp抑制作用的PLV2K-PLGA纳米粒 的制备及在口服给药中的应用。
【背景技术】
[0002] 目前化疗是治疗癌症的主要手段，且给药方式W注射为主。运样短期效果较好，但 是其毒副作用很大，患者易产生很多不良反应，而口服化疗药则可W避免静注产生的毒副 作用，提高患者的顺应性，所W口服抗癌药物的化疗方式具有很好的市场前景。但很多抗肿 瘤药物如紫杉醇、长春新碱等，由于其水溶解性差、膜渗透性低W及肠腔中p-gp外排作用 等导致其口服生物利用度低，阻碍了 口服化疗的顺利开展。而聚合物纳米粒作为口服药物 的载体可通过如下几种途径提高药物的口服吸收（1)提高化疗药物的溶解性，保护药物免 受胃肠道的酶解；（2)通过胞吞作用跨过肠细胞粘膜，避免肠细胞p-gp对包裹在纳米粒内 部药物的外排；（3)通过派伊尔氏集合淋己结（Peyer'spatch,P巧上的Μ细胞介导经淋己 循环进入体循环，从而绕过了口静脉避免了肝脏的首过代谢，进一步提高了药物的口服吸 收。而且杂化材料PLV2K具有显著的长循环、P-gp抑制作用和协同抗肿瘤功能，进而使得 制备的PLV2K-PLGA纳米粒能显著提高抗肿瘤药物的溶解性和渗透性，提高其口服生物利 用度，对口服抗癌药物的开发提供了广阔的前景。
【发明内容】
阳00引本发明的目的在于提供一种具有p-gp抑制作用的PLV2K-PLGA纳米粒，其WPLGA为载体，W具有P-gp抑制作用的两亲性共聚物载体赖氨酸桥连的聚乙二醇2000二维生素 E班巧酸醋（PLV2K)为杂化材料而制备纳米粒。
[0004] 本发明是通过W下技术方案实现的： 阳0化]本发明所述的PLV2K-PLGA纳米粒包括药物、载体、PLV2K、表面活性剂，其中，药 物：载体=1~12. 5%，优选为1~5%，化V2K:载体=0. 01% -1%。
[0006] 所述的PLV2K为赖氨酸桥连的聚乙二醇2000二维生素E班巧酸醋，其制备见 ZL201210061032. 3 ； W〇7] 所述的载体为PLGA或PCL;
[0008] 所述的表面活性剂为聚氧乙締35藍麻油、吐溫-80、泊洛沙姆188、聚乙締醇PVA、 聚乙二醇1000维生素E班巧酸醋TPGS中的一种或几种，优选聚乙締醇PVA。
[0009] 所述的药物为难溶性药物、蛋白质或基因药物，所述的难溶性药选自：抗肿瘤药 物，选自紫杉醇及其同系物。
[0010] 本发明所述的纳米粒采用乳化溶剂挥发法制备，步骤如下：
[0011] 乳化溶剂挥发法是将一定量的载体材料、PLV2K和药物同时溶解于有机溶剂中形 成油化将油相滴加到含有表面活性剂的水相中，冰浴探头超声乳化5-lOmin，挥去有机溶 剂，即可得到带有蓝色乳光的纳米颗粒溶液。
[0012] 所述的油相与水相的体积比例为1 :1-6 ;
[0013] 所述的有机溶剂为二氯甲烧或氯仿；
[0014] 所述的水相中表面活性剂的浓度为0. 5% -3%，优选为1% -2% ;
[0015] 所述的超声功率为100-500W。
[0016] 本发明第二个目的在于提供上述所制备的纳米粒在药物制剂中的应用，尤其是在 提高多种药物的口服生物利用度中的应用。
[0017] 本发明具有W下有益效果：将赖氨酸桥连的聚乙二醇2000二维生素E班巧酸醋 (PLV2K)作为杂化材料制备PLGA纳米粒，方法简单易行，且纳米粒的粒径较小较均一，包封 率高，稳定性好。可作为难溶性药物、蛋白质或基因药物的储库。体外实验证明本发明纳米 粒具有p-gp抑制作用，且杂化材料的使用又能增强抗肿瘤效果，明显的提高了抗肿瘤药物 的口服生物利用度。
【附图说明】
[0018] 图1为本发明实施例1的PLV2K-PLGA纳米粒的动态光散射测定纳米颗粒粒径图。
[0019] 图2为本发明实施例1的PLV2K-PLGA纳米粒的透射电镜图。
[0020] 图3为本发明实施例1的载药PLV2K-PLGA纳米粒，原料药，空白辅料及物理混合 物的X射线衍射图。
[0021] 图4为本发明实施例2中载药PLV2K-PLGA纳米粒，TPGS-PLGA纳米粒及PLGA纳 米粒在抑7. 4中的释放行为图。
[0022] 图5为本发明实施例3的PLV2K-PLGA纳米粒，TPGS-PLGA纳米粒及PLGA纳米粒， 溶液剂在体原位肠灌流的化a)柱状图。
[0023] 图6为本发明实施例3的PLV2K-PLGA纳米粒，TPGS-PLGA纳米粒及PLGA纳米粒， 溶液剂在体原位肠灌流的（Papp)柱状图。
[0024] 图7为本发明实施例4的香豆素6溶液剂在大鼠十二指肠、空肠、回肠、结肠中的 分布。 阳0巧]图8为本发明实施例4的香豆素6-PLGA纳米粒在大鼠十二指肠、空肠、回肠、结肠 中的分布。
[0026] 图9为本发明实施例4的香豆素6-TPGS-PLGA纳米粒在大鼠十二指肠、空肠、回 肠、结肠中的分布。
[0027] 图10为本发明实施例4的香豆素6-PLV2K-PLGA纳米粒在大鼠十二指肠、空肠、回 肠、结肠中的分布。
[0028] 图11为本发明实施例5的细胞摄取结果图。
[0029] 图12为本发明实施例5的细胞摄取机制图。
[0030] 图13为本发明实施例6的PTX-PLV2K-PLGA纳米粒，PTX-TPGS-PLGA纳米粒及 PTX-PLGA纳米粒口服生物利用度图。
【具体实施方式】
[0031] 下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将发明限制在所述的实施 例范围之中。
[0032] 乳化溶剂挥发法制备紫杉醇PLV2K-PLGA纳米粒
[0033] 考察载体种类对纳米粒的影响，分别W聚己内醋（P化)、聚乳酸-径基乙酸共聚物 (PLGA)为载体制备纳米粒，通过纳米粒的粒径、zeta电位、载药量、包封率等参数确定PLGA 为最佳载体。
[0034] 考察表面活性剂种类对纳米粒的影响，分别W聚氧乙締35藍麻油、吐溫-80、泊洛 沙姆188、聚乙締醇（PVA)、聚乙二醇1000维生素E班巧酸醋灯PG巧为表面活性剂制备纳 米粒，通过纳米制剂的颜色、形态、外观等参数确定PVA为最佳表面活性剂。
[0035] 考察表面活性剂浓度、油水比例、超声功率、投药量四因素，通过制得的纳米粒的 粒径及zeta电位确定制备纳米粒的最优处方，筛选过程如下：
[0036] 表1表面活性剂浓度对纳米制剂粒径及电位的影响
[0037]
[0041] 表3超声功率对纳米制剂粒径及电位的影响
[0042]
阳045] 实施例1
[0046] 精密称取Img紫杉醇，20m评LGA和0. 6mg的PLV2K，用1ml有机相二氯甲烧溶解， 将其加入5ml的1 %PVA水溶液中，冰浴超声乳化5min(超声功率400W)，形成纳米乳，在室 溫下磁力低速揽拌化，挥去有机溶剂，制得紫杉醇PLV2K-PLGA纳米粒溶液。
[0047] 将实施例1中制备的载药纳米粒通过动态光散射和透视电镜测定其粒径大小、电 位和形态，结果如图1、2所示。
[0048] 将实施例1中制备的载药纳米粒通过X射线来检测PTX在PLV2K-PLGA纳米粒中的 分散状态，结果如图3所示，表明PTX包裹在纳米粒的疏水性内核中并W无定型状态存在。 W例实施例2