普罗地芬在制备抗炎药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药技术领域，具体涉及普罗地芬及其药学上可接受的盐在制备预防 和治疗炎症相关疾病药物中的应用。
【背景技术】
[0002] 炎症是一种对入侵的病原体或无菌性组织损伤的一种有益的宿主反应。炎症反应 是一种由细胞和炎性介质在时间和空间上共同作用的结果，达到中和或者消除损伤刺激来 维持内环境稳态的结果。虽然炎症主要是一种生理和有益的过程，但是不能消退的炎症过 程将导致许多炎症疾病的发生，如类风湿性关节炎、炎症性肠病、哮喘、牛皮癣、系统性红斑 狼疮、多发性硬化、全身性脉管炎、动脉粥样硬化、鼻炎等。
[0003] 对于炎症的治疗，早期曾广泛使用糖皮质激素类抗炎药(地塞米松、强的松和可的 松等)，但长期使用会产生依赖性，易引起肾上腺皮质功能衰退等副作用。自20世纪50~60 年代出现阿司匹林、保泰松、 11引哚美辛、和布洛芬等药物后，非留体抗炎药（Nonsteroidal Antiinflammatory Drugs, NSAIDs)引起了人们的关注，并逐渐成为抗炎药研究和开发的 重点。传统的NSAIDs通过抑制C0X，抑制炎症部位前列腺素 PG的合成，产生抗炎作用，由 于胃肠道PG合成也受到了抑制，副作用较多。到20世纪90年代，发现COX存在两种亚 型：C0X-1和COX-2。C0X-1存在于大多数组织中，其功能是合成前列腺素来调节细胞的正 常生理功能，对胃肠道黏膜起保护作用。C0X-2是一个诱导酶，在正常生理状态下，其水平 很低，但在炎症细胞中，被有丝分裂原（如LPS)和炎症细胞因子(如TNF、IL-1、PAF)、内毒 素等刺激，可导致C0X-2的大量产生，表达水平升高数十倍，促进炎症反应和组织损伤。选 择性的抑制C0X-2的抑制剂成为研究热点，现在上市的有塞来昔布（Celecoxib)、罗非昔布 (Rofecoxib)、伐地昔布（Valdecoxib)和帕瑞昔布（Precoxib)等。但是由于选择性C0X-2 抑制剂抑制血管内皮的前列腺素生成，使血管内的前列腺素和血小板中的血栓素动态平衡 失调，导致血栓素升高，促进血栓形成。这也是C0X-2的抑制剂引起心血管风险发生的一个 主要原因。与此同时，随着人们对促炎症消退因子认识的深入，针对此策略的靶点研究越 来越多。迄今为止发现的促炎症消退介质有Cyclopentenone prostaglandins、Lipoxins/ resolvins 、 NF-κ B 、 Mediators of apoptosis (caspases, CD44, etc.) > Annexin-I, 针对上述靶点的药物研发如火如荼的进行中。寻求新的化合物来治疗无菌性炎症和免疫性 炎症疾病已成为研发热点和难点，开发自主知识产权的抗炎药物迫在眉睫。
[0004] 炎症反应的最重要功能是将炎症细胞输送到炎症局部，白细胞的渗出是炎症反应 最重要的特征。炎症的不同阶段，游出的白细胞也不同。在急性炎症的早期，中性粒细胞首 先游出，48小时后组织内则以单核细胞浸润为主。中性粒细胞和单核细胞渗出可吞噬和降 解细菌、免疫复合物和坏死组织碎片，构成炎症反应的主要防御环节。但白细胞也可通过释 放酶、化学介质和毒性自由基等，引起组织损伤并可能延长炎症过程。因此，促进炎症部位 中性粒细胞的消退是评价抗炎药效的一个指标。
[0005] 斑马鱼是一种脊椎动物，与人类基因同源性高达85%，其信号传导通路与人类基 本近似，生物结构和生理功能与哺乳动物高度相似，具有体积小(可用微孔板分析)、发育周 期短、体外受精、透明（可直接用肉眼和解剖显微镜观察)、单次产卵数较高等特点。斑马鱼 模型既具有体外实验快速、高效、低廉、用药量小等优势，又具有哺乳类动物实验预测性强、 可比度高、可观察多个器官等优点，近年已在化合物药效、毒性评价中得到广泛应用。研究 者建立了中性粒细胞特异发荧光的斑马鱼，利用硫酸铜特异的损伤斑马鱼侧线附近的神经 丘，引起中性粒细胞从血管中游出，向神经丘部位聚集，利用这一原理，研究者在此模型中 进行了抗炎化合物的高通量筛选，直接定量观察体内的炎症反应，这一模型促进了抗炎药 物的筛选过程。
[0006] 综上所述，本研究利用硫酸铜诱导斑马鱼炎症模型高通量筛选抗炎药物，寻求新 的化合物来有效抗炎，从而开发具有自主知识产权的抗炎药物，为人类健康带来福音。
[0007] 普罗地芬(英文名称：Proadifen ;分子式为C23H32ClNO2，分子量为389. 96。）作为细 胞色素 P450酶抑制剂，能够竞争代谢途径导致药物代谢酶被抑制。临床上作为一种助吸收 药物使用。
[0008] 至今尚未见有关普罗地芬抗炎活性及抗炎靶点活性的相关报道。
【发明内容】
[0009] 本发明的目的在于提供普罗地芬在制备防治炎症相关疾病药物中的新用途。
[0010] 本发明的目的是通过以下技术方案实现的：现有化合物普罗地芬，其结构式如 下：
[0011] 本发明中利用硫酸铜诱导斑马鱼炎症模型，硫酸铜特异的损伤侧线附近的神经 丘，可以观察到标记绿色荧光蛋白的中性粒细胞从血管中向损伤的神经丘游出或聚集。给 予普罗地芬治疗后，可以显著促进神经丘部位的中性粒细胞消退，具有明显的抗炎作用。
[0012] 本发明中普罗地芬在制备抗炎药物中的用途属于首次公开，可以用于炎症相关性 疾病包括无菌性炎症和免疫性炎症的防治。无菌性炎症包括：骨性关节炎、炎症性肠病、前 列腺炎、支气管炎、鼻炎、咽炎、慢性结肠炎、胰腺炎等。免疫性炎症包括：类风湿性关节炎、 哮喘、牛皮癣、系统性红斑狼疮、多发性硬化、全身性脉管炎等。 普罗地芬价格低廉、安全性高、原料来源广泛，辅以药学上可接受的辅料，采用常规制 剂技术即可制成各种口服、注射，外用制剂等剂型，具有良好的开发前景。
【附图说明】
[0013] 图1盐酸普罗地芬在硫酸铜诱导斑马鱼炎症模型的抗炎药效图。在空白组中，中 性粒细胞大多数分布在血液系统中；硫酸铜诱导后，侧线神经丘损伤，引起中性粒细胞的聚 集，模型组中性粒细胞个数可达13. 5个，与空白组相比，差异显著（p〈0. 01 )，表明模型建立 成功。阳性组吲哚美辛处理后，中性粒细胞个数为4个，与模型组相比，差异显著（p〈0. 01 )， 表明吲哚美辛有显著抗炎药效，治疗效率为70. 3% ;盐酸普罗地芬处理后，中性粒细胞为5 个，与模型组相比，差异显著（P〈〇. 01)，表明其有显著抗炎药效，治疗效率为63. 0%。红色箭 头所示为斑马鱼侧线附近中心粒细胞。
[0014] 图2盐酸普罗地芬在硫酸铜诱导斑马鱼炎症模型的抗炎药效柱状图。观察盐酸普 罗地芬在10、30 μ M浓度下，在硫酸铜诱导斑马鱼炎症模型中的抗炎药效，抗炎治疗效率分 别为27. 8% (ρ〈0· 05)、35· 2% (ρ〈0· 01)，未见异常毒性表现，表明盐酸普罗地芬在无毒性浓 度内有显著抗炎药效，且量效关系明确。
[0015] 图3盐酸普罗地芬在硫酸铜诱导斑马鱼炎症模型的抗炎药效图。
【具体实施方式】
[0016] 下面结合附图和实施例对本发明作进一步阐述，但本发明的保护范围并不限于 此。
[0017] 实