注射用二氢卟吩e6单酯冻干制剂及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明属于制药领域，具体涉及一种具光敏特性的注射用二氢卟吩e6单酯冻干制 剂及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 光动力疗法化11〇1:〇(17仙111；[01:116抑。7，1301')是20世纪80年代初发展起来的一种肿瘤 治疗新技术，即用特定波长的光辐照摄入光敏剂的病灶组织，由光敏剂诱发产生线态氧等 细胞毒活性氧物质而导致靶组织细胞坏死或凋亡。它是一无创或微创性，非产热性的、利用 光化学反应引起靶组织和靶细胞破坏的治疗方法。在光动力疗法中，氧气、光源和光敏药物 被融合在一起，是一种主要影响靶组织的选择性治疗形式。
[0003] 肿瘤光动力治疗药二氢卟吩e6单酯，具有环状四吡咯结构，是叶绿素降解产物经 半合成而成，具有结构明确、红光治疗区（λ>600ηηι)最大吸收波长红移至660~700nm且吸收 系数高一个数量级、光敏作用强、体内清除速度快、皮肤光毒性小，理化性质稳定等优点，通 过在恶性组织内对一定波长光的能量传递，使周围介质中的分子氧化成为单线态氧（102) 等活性氧物质，进一步与生物分子中的氧化敏感基团作用，导致其氧化失活，最终引起肿瘤 细胞死亡而显示治疗作用。
[0004] 小鼠药效学研究表明，二氢卟吩e6单酯对人肺癌A549、人宫颈癌Hela和人肝癌有 显著抑制作用，并呈现出剂量(药剂量和光剂量)效应关系。
[0005] 荷瘤小鼠单剂量静注给药3mg/kg二氢卟吩e6单酯后，药物浓度随血液循环广泛地 分布到血流丰富的组织脏器，0.5h或2h达到最高药物浓度，0.25h~4h范围内药物组织分布 处于高浓度区域，而注射给药24h后荷瘤小鼠各组织器官中的药物浓度均显著降低。其中二 氢卟吩e6单酯在肝、肺中分布浓度最高，心、肾次之，脾脏和肿瘤相对较低，肌肉、脂肪、皮 肤、脑极少。但相对而言，二氢卟吩e6单酯药物在肿瘤组织有较高的分布浓度，且随时间推 移药物浓度下降幅度缓慢，24h仍维持一定的组织药物水平。由于皮肤中分布极少，其皮肤 毒性很小，尤在太阳光下的皮肤光毒性更小，优于现有的市售光敏剂。且在一小时内达峰， 故治疗在一小时内完成。
[0006] 化学名称：二氢卟吩e6单酯。
[0007] 2，7，12，18-四甲基-3-乙烯基-8-乙基-13-羧基-15-单酸酯-17-丙酸-17，18-二氢 卟吩。
[0008] 化学结构式如下：
化学式：甲酯为(R=CH3)C35H38N4O 6，乙酯为(R=C2H5)C36H4QN 4O6。
[0009] 分子量：甲酯为612,乙酯为624。
[0010] 二氢Π 卜吩e6单酯的水溶液稳定性较差，由于其对光、热、氧、水都很敏感，可发生氧 化破坏性变化，出现含量下降，有关物质大量增加，因而不适合制成注射液，而适合于制成 冻干制剂。
[0011] 二氢Π 卜吩e6单酯为1.1类新药，未见制成冻干制剂的产品。
【发明内容】
[0012] 本发明所解决的第一个技术问题是提供一种临床应用的稳定的注射用二氢卟吩 e6单酯冻干制剂。
[0013] 为达到上述目的，本发明提供了一种注射用二氢卟吩e6单酯冻干制剂，其包括二 氢卟吩e6单酯、冻干支撑剂，氢氧化钠和pH值调节剂，以600ml总量计各组份的量为： 二氢卟吩e6单酯 IOg， 冻干支撑剂 0~30g， 氢氧化钠 1.5~2.0， pH值调节剂 适量， 注射用水加至 600ml， 其中，二氢卟吩e6单酯的烷基为乙基或甲基。
[0014] 本实验证明二氢卟吩e6单酯在pH值8.5以下溶液中溶解不完善，本发明采用氢氧 化钠作为二氢卟吩e6单酯的溶解剂，且溶液的pH值达到13以上时，可保证二氢卟吩e6单酯 溶解完善;而后采用稀盐酸溶液将其PH值调回至8.5~9.5。
[0015] 本发明欲提高冻干前溶液的pH值，增加二氢卟吩e6单酯的溶解性，减少产品冻干 前的杂质产生，提高稳定性，实现上述目的的技术方案是二氢卟吩e6单酯溶解时药液的pH 值应为12~13.5。
[0016] 通过对比冻干前后的pH值及杂质含量可见，当冻干前药液pH值控制在8.5~9.5 时，杂质含量降低或稳定不变，制剂稳定性明显提高。
[0017] 控制由氢氧化钠1.5~2. Og溶于注射用水构成的溶液的pH值为12~13.5，加入二 氢卟吩e6单酯完全溶解后，由pH值调节剂盐酸1.1~1.5ml将pH值控制在8.5~9.5,再加冻 干支撑剂〇~30g制成的注射用二氢卟吩e6单酯冻干制剂，可进一步减少产品冻干前的杂质 广生，提尚稳定性。
[0018] 当注射用二氢卟吩e6单酯溶液的增溶剂采用氢氧化钠、pH值调节剂采用盐酸时， 以600ml总量计各组份的优选量为： 二氢卟吩e6单酯 10~30g， 冻干支撑剂 0~30g， 氢氧化钠 1.5~2.0g， 盐酸 1.1~1.5ml， 注射用水加至 600ml。
[0019] 经试验，本发明的冻干支撑剂（赋形剂）为甘露醇、葡萄糖、右旋糖酐、乳糖和蔗 糖，优选甘露醇。本品的主药规格较小，加入甘露醇能够保证产品外观美观，便于复溶。所 以更为优选的处方（600ml总量计各组份的量)为： 二氢卟吩e6单酯 IOg， 甘露醇 IOg， 氢氧化钠 1.5 g， 盐酸（浓盐酸） 1.1ml， 注射用水加至 600ml。
[0020] 本发明所解决的第二个技术问题是提供了一种制备注射用二氢卟吩e6单酯冻干 制剂的制备方法。
[0021 ] 按照600ml总量计分别称取二氢卟吩e6单酯10g，冻干支撑剂0~30g，氢氧化钠1.5 ~2. Og，pH值调节剂适量;然后按以下步骤制备： A. 在注射用水中加入氢氧化钠，搅拌使完全溶解，得氢氧化钠溶液;控制所述氢氧化钠 溶液的pH值为12~13.5; B. 在所述氢氧化钠溶液中加入二氢卟吩e6单酯，搅拌使完全溶解;用pH值调节剂调节 pH值为8.5~9.5; C. 加入冻干支撑剂，充分搅拌完善溶解； D. 加注射用水至全量600ml体积，加入药用活性炭，搅拌吸附后过滤除炭，药液pH值在 8.5~9.之间，测定中间品含量，合格后灌装，冷冻干燥后即得注射用二氢卟吩e6单酯冻干 制剂。
[0022]其中，步骤A宜将氢氧化钠加入到270~300ml的注射用水溶解，控制所述氢氧化 钠溶液的pH值为12~13.5，然后进行步骤B，加入二氢卟吩e6单酯，搅拌使之溶解；冻干支 撑剂宜于药液pH值为8.5~9.5范围内加入溶解，而后再在步骤D补水至全量即600ml。
[0023]步骤D药用活性炭的用量为以药液总质量计的0.05%(0.3g)为宜;并分别采用0.45 μπι、0.22μηι滤膜除炭和过滤除菌。
[0024] 其中冻干支撑剂可以选自甘露醇、葡萄糖、右旋糖酐、蔗糖和乳糖中的至少一种， 优选采用甘露醇。pH值调节剂用量以调节冻干前溶液pH值至8.5~9.5为准；优选采用1% 的盐酸溶液，用量约为（以浓盐酸计）1.1~1.5ml。
[0025] 本注射用二氢卟吩e6单酯冻干制剂采用棕色中性硼硅西林瓶灌装。
[0026] 本发明冻干制剂提高冻干前溶液的pH值，有利于产品冻干前的杂质控制。用1%稀 盐酸溶液回调药物溶液的pH值为8.5~9.5，可防止二氢卟吩e6单酯在回调pH值的过程中重 新析出。
【具体实施方式】
[0027] 本发明注射用二氢卟吩e6单酯冻干制剂，按600ml计，其组成包括： 二氢卟吩e6单酯 IOg， 冻干支撑剂 0~30g， 氢氧化钠 1.5~2.0g， pH值调节剂(盐酸） 适量， 注射用水加至 600ml。
[0028] 其中冻干支撑剂可以选自甘露醇、葡萄糖、氯化钠、右旋糖酐或乳糖中的至少一 种。
[0029] pH值调节剂用于调节冻干前溶液pH值至8.5~9.5 ;优选采用盐酸，其量为1.1~ 1.5ml〇
[0030]本发明制备方法中强调在冷冻干燥前将药液的pH值控制在8.5~9.5之间，二氢卟 吩e6单酯制剂在冷冻干燥后，能够更好保证产品的稳定性，冻干前后pH值对比及冻干前后 有关物质、含量及复溶时间的实验数据如表1。
以上实验数据表明，冻干前后样品溶液在pH值在8.5~9.5之间时，冻干前后pH值变化 不大，且杂质和含量也无明显变化。故冻干前溶液的pH值优选在8.5~9.5之间。
[0032] 在上述制备步骤中，发明人对注射用二氢卟吩e6单酯冻干制剂行了优化，即在加 入原料药之前先加入氢氧化钠溶于注射用水中，使溶液的pH值稳定在12~13.5，这样能够 更好保证二氢卟吩e6单酯在水中的完全溶解和稳定性。
[0033] 上述优化条件的筛选试验结果如下： 【处方量】 二氢卟吩e6单酯 IOg， 甘露醇 IOg， 氢氧化钠 1.5g， 盐酸 l.lg， 注射用水加至 600ml。
[0034] 分别按照工艺进行配制：取注射用水270ml (即全量约600ml的45%)，加入处方量 的氢氧化钠搅拌溶解，使溶液的pH值调为12~13.5后;再加入二氢卟吩e6单酯，搅拌使完全 溶解;再加入PH调节剂1%盐酸溶液调pH值至8.5~9.5;加入甘露醇溶解后补足水量，活性炭 吸附并除炭，中间品二氢卟吩e6单酯含量合格后再进行分装，冷冻干燥得冻干制剂。检测制 剂产品的有关物质和二氢卟吩e6单酯含量，同时在高温60°C和光照(4500Lx)条件下考察10 天和40°C下考察6个月，评价制剂的稳定性。结果详见表2。
[0035]表2制剂产品的有关物质和含量结果
表2数据表明，上述优化的处方和工艺制得的冻干制剂在加热60°C放置10天和40°C 放置6个月下，杂质和含量变化不明显，表明冻干制剂对热的稳定性良好，但光照（4500Lx) 10天下，含量下降3%到5.7%，杂质上升，表明本品对光是不稳定的，应避光保存，故本品采用 棕色西林瓶包装。
[0036]由于本品的pH值偏高，在包材上选择使用中性硼硅玻璃瓶，能够保证产品在高pH 值条件下的玻璃瓶不会出现脱片、掉肩等影响澄清度的情况，能够保证产品的澄清度，避免 或减少杂质的产生，且因对光不稳定性，采用棕色西林瓶。
[0037] 经试验，用本发明的制备工艺制备的注射用二氢卟吩e6单酯冻干制剂的各项指标 均符合要求。
[0038] 实施例1 处方： 二氢卟吩e6单酯 50.0g， 氢氧化钠 7.5g， 1%盐酸溶液 550ml (浓盐酸5.5ml)， 注射用水加至 3000ml，