南五味子提取物在制备肝再生药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药技术领域。更具体地，设及南五味子提取物在制备肝再生药物中 的应用。
【背景技术】
[0002] 肝切除和活体肝移植是目前世界范围内最有效的治疗肝癌和终末期肝病的方法。 在临床应用中，肝切除和活体肝移植之所W可行的原因是肝细胞独特、强大的再生能力。然 而，患者接受手术后，如果剩余肝脏缺乏再生能力、延缓再生能力或者再生能力弱，会引起 多种不良的综合病症，如手术后急性肝衰竭、脈毒性感染，腹水，出血，肾衰竭或肝性脑病。 其中，手术后出现的急性肝衰竭仍然是导致术后死亡率的主要原因，并直接关系到患者预 后的好坏。
[0003] 肝再生机制极其复杂，近几十年来，国内外对有关肝再生过程机制研究进展较快， 但是在西医领域尚缺乏调控肝再生的有效手段。目前，仅局限于基础实验水平上的肝再生 促进剂，例如转化生长因子-〇、肝细胞生长因子、表皮生长因子等增殖因子，或者亮氨酸、谷 氨酸、鄉氨酸等氨基酸，干细胞、血小板、抗血管舒缓抗体、血栓形成素等。因此，如何选择性 使剩余静息肝细胞有效地激发残余肝细胞的再生潜能而又同时抑制肝癌细胞增殖是术后 病人得W存活的关键，也对肝脏疾病的治疗具有重要的理论意义和临床应用价值。
[0004] 南五味子Schisan化a S曲enanthera Rehd. et Wils.为人们常用中药，性溫、气 味酸，具有敛肺滋肾、生津止汗、宁屯、安神的功效，主要用于治疗久咳虚喘、久泻不止、津少 口干、盗汗、气短脉虚、健忘失眠等。随着药理学的深入发展，发现南五味子具有抗炎、提高 免疫功能、扩张血管、抗衰老、镇静、抗癌等药理作用，W及护肝作用。但是目前未见南五味 子提取物在肝切除术后促进肝再生方面的相关报道。
【发明内容】
[000引本发明要解决的技术问题是克服现有肝切除和活体肝移植后肝再生技术的不足， 目的是提供南五味子提取物在制备肝再生药物中的应用。本发明人研究显示，南五味子提 取物能够选择性对肝切除术后肝脏的再生能力具有显著的促进作用，为临床调控肝切除术 或肝移植后的肝再生提供了新的方法和手段。
[0006] 本发明上述目的通过W下技术方案实现： 南五味子提取物在制备肝再生药物中的应用，所述南五味子提取物为南五味子的干燥 果实的醇提取物浸膏。
[0007] 作为一种可实施的优选方案，上所述南五味子提取物的制备方法如下： 51. 称取南五味子的干燥果实，加6~10倍量的水煎煮0.5~化，过滤去除滤液，得药渣； 52. 药渣烘干后粉碎，用6~10倍量的70%乙醇回流提取2~3次，每次1~化，过滤，合并 滤液，浓缩，即得南五味子提取物浸膏。
[0008] 优选地，步骤S1所述水的量为南五味子干燥果实的8倍。
[0009] 优选地，步骤SI所述煎煮的时间为化。
[0010] 优选地，步骤S2所述70%乙醇的量为药渣的8倍。
[00·Μ ]优选地，步骤S2所述回流提取2次，每次1.5h。
[0012] 进一步优选地，所述南五味子提取物中五味子醋甲和五味子甲素的质量分数均不 低于 2.5〇/〇。
[0013] 另外，上述肝再生药物是指能够促进肝切除术或肝部分切除术后肝再生的药物。
[0014] 更进一步地，上述肝再生药物是指能够提高肝/体重比恢复能力的药物。
[0015] 具体优选地，所述肝再生药物是指能够提高肝切除术或肝部分切除术后肝/体重 比恢复能力的药物。
[0016] 更进一步地，所述肝再生药物是指能够提高肝细胞增殖能力的药物。
[0017] 具体优选地，所述肝再生药物是指能够提高肝切除术或肝部分切除术后肝细胞增 值能力的药物。
[0018] 更具体地，上述肝再生药物能够选择性使剩余静息肝细胞有效地激发残余肝细胞 的再生潜能而又同时抑制肝癌细胞增殖。
[0019] 本发明上述肝再生药物能够用于治疗已经接受肝切除/或部分肝移植的患者。
[0020] 上述肝再生药物的机制设及快速上调细胞周期素巧Clin D1和PCNA表达，从而 促进肝细胞增殖。
[0021 ] -种肝再生药物，包括上述南五味子提取物和药物载体。
[0022] 优选地，所述药物载体为填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、矫味剂、润滑剂或防腐 剂中的一种或多种。
[0023] 更优选地，所述的填充剂为淀粉、糊精、糖粉、乳糖、微晶纤维素、憐酸氨巧或糖醇 类。
[0024] 优选地，所述的粘合剂为淀粉浆、明胶、聚维酬或纤维素衍生物。
[002引优选地，所述的湿润剂为水和乙醇。
[0026] 优选地，所述的崩解剂为干淀粉、簇甲淀粉钢、簇甲纤维素钢、碳酸氨钢或聚维酬。
[0027] 优选地，所述的矫味剂为甜菊巧、糖精钢、蛋白糖或甜蜜素。
[0028] 优选地，所述的润滑剂为硬脂酸儀、硬脂酸巧、微粉硅胶、滑石粉、聚乙二醇或十二 烷基硫酸儀。
[0029] 优选地，所述的防腐剂为苯甲酸、山梨酸或尼泊金。
[0030] 另外，优选地，所述的肝再生药物的剂型包括片剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂、溶液剂、 乳剂等。
[0031] 优选地，所述药物的剂型还可W是缓释剂或控释剂。
[0032] 在本发明研究结果之前的现有技术中，虽然有报道五味子提取物及其有效成分之 一五味子醇乙能显著预防和治疗扑热息痛或石胆酸所致的肝毒性的部分机制是促进肝细 胞增殖相关蛋白表达。但是，一方面扑热息痛或胆汁渺积引起的肝毒性症状与肝切除术引 起的急性肝损伤存在本质区别，有研究表明，扑热息痛肝毒性是由其N-乙酷-对-苯酿亚胺 启动的，其会使肝内源性谷脫甘肤耗竭，从而导致线粒体功能混乱和核内DNA损伤，最终引 起肝细胞损害和肝坏死;石胆酸肝毒性是由于过量毒性胆汁酸滞留引起的，其会导致毒性 物质蓄积如胆红素、胆固醇及胆汁酸从而伴随肝功能发生障碍、肝纤维化甚至肝硬化。而肝 切除术是将肝中的病灶部分切除，剩余正常的肝组织会立即启动静息肝细胞增殖，会很快 改善肝损伤情况，达到原有肝重则终止增殖行为。另一方面其报道的五味子提取物有效成 分与本发明的南五味子干燥果实醇提取物的有效成分不同。
[0033] 本发明所述的南五味子提取物(南五味子的干燥果实提取物，主要有效成分为五 味子醋甲和五味子甲素)能够显著促进肝/体重比快速恢复W及促进肝细胞快速增殖，而且 其在肝切除后促进肝再生的机制设及快速上调细胞周期素切Clin D1和PCNA表达，从而 促进肝细胞增殖。
[0034] 本发明具有W下有益效果： 本发明实验利用经典的2/^3肝切除模型，给予南五味子提取物后，能有效地加快肝重和 功能的恢复，具体表现为在肝切除术后2天、3天和5天，小鼠的肝体重比显著升高;在肝切除 术后1天、1.5天，小鼠处于增殖的肝细胞显著增多，随后逐渐减少；同时肝组织中的炎症浸 润和细胞水肿情况明显改善。
[0035] 另外，本发明还观察了南五味子对正常肝生长的影响，结果发现南五味子对正常 的肝脏生长没有影响。
[0036] 综上所述结果表明，南五味子提取物能够选择性对肝切除术后肝脏的再生能力具 有显著的促进作用，为临床调控肝切除术或肝移植后的肝再生提供了新的方法和手段。
【附图说明】
[0037] 图1为南五味子提取物对部分肝切除的小鼠和正常小鼠肝/体重比的影响结果图。
[0038] 图2为南五味子提取物对部分肝切除的小鼠肝细胞炎症浸润和水肿的影响结果图 (H&E染色肝脏病理切片）。
[0039] 图3为南五味子提取物对部分肝切除的小鼠肝细胞增殖的影响结果图(Ki67免疫 组化的肝脏病理切片）。
[0040] 图4为南五味子提取物对部分切除的小鼠肝脏切lin D1和PCNA的蛋白表达的影 响结果图。
[0041] 图1~4中，A为肝切除术组，B为肝切除术/南五味子提取物组，C为假手术组，D为假 手术/南五味子提取物组。
【具体实施方式】
[0042] W下结合说明书附图和具体实施例来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明 做任何形式的限定。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试 剂、方法和设备。
[0043] 除非特别说明，本发明所用试剂和材料均为市购。
[0044] 实施例1南五味子提取物的制备 取南五味子100 g，加8倍量的水煎煮Ih，过滤去除滤液，药渣烘干后粉碎，用8倍量的 70%乙醇回流提取2次，每次1.化，过滤，合并滤液，浓缩，即得南五味子提取物浸膏。
[004引实施例2南五味子提取物的制备 取南五味子100 g，加6倍量的水煎煮0.化，过滤去除滤液，药渣烘干后粉碎，用6倍量的 70%乙醇回流提取2次，每次化，过滤，合并滤液，浓缩，即得南五味子提取物浸膏。
[0046] 实施例3南五味子提取物的制备 取南五味子100 g