用于增强透皮递送的肽的制作方法
【专利说明】用于增强透皮递送的化
[0001 ] 本申请已与其序列表(文件名为Sequence_Listing_74320US002.TXT，2014年8月 11日创建)相关联。此序列表文件包含4,556字节并且其全文W引用方式并入本文。
【背景技术】
[0002] 皮肤提供了许多药物(包括全身药物)理想的递送部位。经皮肤的药物递送可能是 无痛的且提供持续的释放，从而提高了患者的顺从性。经皮肤递送的全身药物不经历首过 代谢，并且皮肤递送可允许药物(诸如类似抗体和疫苗的蛋白质基药物）的全身治疗，运些 药物可另外易于在胃肠道中降解或吸收。
[0003] 此外，改善皮肤健康或增强皮肤外观的美容成分也必须横穿皮肤的最外层（角质 层)递送。然而，皮肤的有效环境屏障作用使药物和美容成分两者横穿角质层的递送变得复 杂。角质层阻止许多分子(诸如大分子、蛋白质药物和带电小分子)穿过其屏障。
[0004] 已经探究了输送药物和美容物质穿过角质层的多种方法，包括物理和化学破坏角 质层。尽管使用化学渗透增强剂已取得改观的成效，但它们通常不能输送大的亲水性化合 物、蛋白质药物或带电小分子横穿角质层进入到全身循环。反而，大的亲水性化合物、蛋白 质药物和带电小分子必须经常经由具有较低患者顺从性的途径(诸如注射)来递送。此外， 对于可使用化学渗透增强剂输送的分子而言，化学渗透增强剂可能会造成刺激。仍需要新 型渗透增强组合物，其可输送多种化合物横穿角质层到达皮肤的更深层或进入到全身循 环。
【发明内容】
[000引本公开整体设及包含肤的皮肤渗透增强剂，所述肤用于增强活性剂(诸如，药物活 性剂、疫苗、美容剂、营养补充剂等）的透皮递送。本文所述的皮肤渗透增强剂可用于改善多 种化合物(包括小的带电荷药物和大的蛋白质药物)穿过皮肤的渗透。
[0006] 本公开的一个方面提供了包含肤的皮肤渗透增强剂。所述肤可包含的氨基酸序列 包含:如SEQ ID NO: 1、2、3或6中所示的十个连续氨基酸残基；如SEQ ID N0:7或8中所示的 十一个连续氨基酸残基;如SEQ ID N0:4或5中所示的十二个连续氨基酸残基;或它们的类 似物。所述肤可包含30个或更少的总氨基酸残基或氨基酸类似物。所述肤可具有如SEQ ID ^:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16或17中所示的氨基酸序列。
[0007] 本公开的另一个方面提供了包含如本文所公开的皮肤渗透增强剂和活性剂的组 合物。所述活性剂可选自药物活性剂、疫苗、美容剂和营养补充剂;例如，抗体、降脂化合物、 治疗性蛋白质、毛发生长化合物、毛发去除化合物或维生素。
[0008] 本公开的另一个方面提供了透皮递送药物活性剂、疫苗、美容剂或营养补充剂的 方法，所述方法包括向对其有需要的受试者的皮肤施用组合物，所述组合物包含:载体，其 选自药学上可接受的载体、美容上可接受的载体或营养上可接受的载体;活性剂，其选自药 物活性剂、疫苗、美容剂或营养补充剂;和如本文所公开的皮肤渗透增强剂。
[0009] 结合【具体实施方式】，本公开的其他特征和方面将变得显而易见。
【具体实施方式】
[0010] 本公开整体设及包含肤的渗透增强剂和渗透增强组合物。本文所提供的肤、渗透 增强剂和组合物增强分子(诸如大分子、蛋白质药物和带电小分子)横穿角质层屏障的能 力，从而避免了不合意的递送途径(诸如注射)并提高了患者的顺从性。
[0011] 本公开的皮肤渗透增强剂可逆地降低角质层的屏障抵抗并允许分子(诸如药物、 疫苗、营养补充剂或美容物质)更容易地渗透到活体组织，并且在一些情况下，全身循环。在 一些情况下，该皮肤渗透增强剂允许分子(诸如药物、疫苗、美容物质和营养补充剂)进入较 低的皮肤层次(诸如基底层和epinosa层）。在一些情况下，该皮肤渗透增强剂允许分子进入 循环系统或其他内部组织。术语"皮肤渗透增强剂"、"渗透增强剂"和"透过增强剂"可在本 文互换使用。
[0012] 本文所述的皮肤渗透增强剂允许分子(诸如药物、疫苗、美容物质和营养补充剂， 包括小的带电分子W及大分子诸如蛋白质）透皮递送。术语"透皮"或"透皮递送"通常用于 指横穿皮肤任何部分的活性成分的任何类型的递送。也就是说，透皮通常可包括全身递送 (即，活性成分横穿或基本穿过真皮输送，使得活性成分递送到血流中且全身地递送的情 况）W及皮内递送（即，活性成分部分地穿过真皮(例如，穿过皮肤的外层（角质层））输送的 情况，该处活性成分被递送到皮肤中，例如，用于治疗牛皮癖或用于局部麻醉药递送）。也就 是说，如本文所用，透皮递送包括横穿皮肤的至少一部分(并不一定是皮肤的所有层)而不 仅仅是局部施用到皮肤的外层来输送的活性剂的递送。
[0013] 不受理论的束缚，据信本文所述的渗透增强剂通过选择性地和可逆地调节皮肤对 多数分子保持封闭屏障的生物过程和信号通路来协助分子穿过角质层，从而允许所需分子 透皮递送。
[0014] 在术语"包含"出现在【具体实施方式】和权利要求书中时，该术语不具有限制意义。
[0015] 如本文所用，"一个/一种"、"该"、"所述"、"至少一个/至少一种"和"一个或多个/ 一种或多种"可互换使用。
[0016] 另外，在本文中，由端点表述的数值范围包括该范围内涵盖的所有数值(例如，5或 更小包括 0.5、1、1.25、2、2.8、3、4、5等）。
[0017] 如本文所用，"类似物"是指包含连续氨基酸序列的肤，该肤与其亲本肤(例如，SEQ ID NO: 1-17)有1-3个氨基酸残基不同，但具有与其亲本肤相同或相似的增强皮肤渗透的功 能。在一些情况下，差别在于保守氨基酸取代，在保守氨基酸取代中，一个氨基酸被另一个 具有相似侧链的氨基酸或一个具有相似特性的氨基酸类似物替换。例如，具有相似侧链的 氨基酸家族包括具有酸性或酷胺侧链的氨基酸，诸如天冬氨酸、谷氨酸、天冬酷胺或谷氨酷 胺;具有碱性侧链的氨基酸，诸如赖氨酸、精氨酸和组氨酸;具有不带电极性侧链的氨基酸， 诸如甘氨酸、天冬酷胺、谷氨酷胺、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸和半脫氨酸;具有非极性侧链的 氨基酸，诸如丙氨酸、鄉氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸和色氨酸;具 有e-支化侧链的氨基酸，诸如苏氨酸、鄉氨酸和异亮氨酸；W及具有芳族侧链的氨基酸，诸 如酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸和组氨酸。因此，示例性保守氨基酸取代包括:赖氨酸被组氨酸 或精氨酸取代;组氨酸被赖氨酸或精氨酸取代;精氨酸被赖氨酸或组氨酸取代;苯丙氨酸被 酪氨酸或色氨酸取代;酪氨酸被苯丙氨酸或色氨酸取代;色氨酸被苯丙氨酸或酪氨酸取代； 丝氨酸被苏氨酸取代;苏氨酸被丝氨酸取代;天冬氨酸被谷氨酸取代;天冬酷胺被谷氨酷胺 取代;谷氨酷胺被天冬酷胺取代;甘氨酸被丙氨酸、鄉氨酸、亮氨酸、异亮氨酸或甲硫氨酸取 代;丙氨酸被甘氨酸、鄉氨酸、亮氨酸、异亮氨酸或甲硫氨酸取代;鄉氨酸被甘氨酸、丙氨酸、 亮氨酸、异亮氨酸或甲硫氨酸取代;亮氨酸被甘氨酸、丙氨酸、鄉氨酸、异亮氨酸或甲硫氨酸 取代;异亮氨酸被甘氨酸、丙氨酸、鄉氨酸、亮氨酸或甲硫氨酸取代;天冬氨酸被天冬酷胺或 谷氨酷胺取代;天冬酷胺被天冬氨酸或谷氨酸取代；W及谷氨酷胺被天冬氨酸或谷氨酸取 代。
[0018] "类似物"也指与亲本氨基酸残基相比表现出很小差别的氨基酸残基结构衍生物。 "类似物"还指与其亲本肤或本领域已知的氨基酸残基相比具有很小修饰(包括但不限于改 变一个或多个氨基酸残基的侧链或用任何非氨基酸替换一个或多个氨基酸残基）的肤或氨 基酸残基。
[0019] 如本文所用，术语"皮肤'是指覆盖脊椎动物的外皮W及内部粘膜组织馈如口腔 粘膜、鼻粘膜、食管粘膜等)两者。
[0020] 本公开提供了包含肤的皮肤渗透增强剂。在一个实施例中，该肤所包含的氨基酸 序列包含十个连续氨基酸残基，包括ACLPGVLGSC(SEQ ID N0:1)，AC化PWDASC(沈Q ID NO: 2)，4〔01?化1'肥(569 10^:3)，4化0饥^1?4(：(沈9 10^:6)或它们的类似物。在一个实施例 中，该肤所包含的氨基酸序列包含^^一个连续氨基酸残基，包括ASSTTLNTLAQ(SEQ ID NO: 7)，ASSDIPLFTRY(SEQ ID N0:8)或它们的类似物。在一个实施例中，该肤所包含的氨基酸序 列包含十二个连续氨基酸残基，包括TWTQAWPWGWTW(SEQ ID N0:4)，AKSSWWGRAYWY(SEQ ID NO :5)或它们的类似物。
[0021 ]在一些实施例中，该肤序列通常包含7-40个氨基酸残基。在一些实施例中，该肤序 列通常包含10-30个氨基酸残基。在一些实施例中，该肤序列通常包含10-20个氨基酸残基。 在一些实施例中，该肤包含30个或更少的总氨基酸残基或氨基酸类似物。在一些实施例中， 该肤包含20个或更少的总氨基酸残基或氨基酸类似物。在一些实施例中，该肤包含19个或 更少的总氨基酸残基或氨基酸类似物。在一些实施例中，该肤包含至少7个总氨基酸残基或 氨基酸类似物。在一些实施例中，该肤包含至少10个总氨基酸残基或氨基酸类似物。在一些 实施例中，该肤的氨基酸序列的至少50%包含选自SEQ ID NO: 1、2、3、4、5、6、7或8或它们的 类似物的连续氨基酸序列。
[0022] 在一些实施例中，该皮肤渗透增强剂所包含的肤具有如SEQ ID N0:l、2、3、4、5、6、 7、8或它们的类似物中所示的氨基酸序列。在一些实施例中，该皮肤渗透增强剂所包含的肤 具有SHSACLPGVLGSCGGGS(SEQ ID N0:9)，SHSACSLPWDASCGGGS(SEQ ID N0:10)， SHSACDTPRLTHCGGGS(SEQ ID NO : 11),SHSTWTQAWPWGWTWGGGS(SEQ ID NO:12), SHSAKSSWWGRAYWYGGGS(SEQ ID N0:13)，SHSACLDNTFRACGGGS(SEQ ID N0:14)， SHSASSTTLNTLAQWPA(SEQ ID NO :15),SHSASSDIPLFTRYGGGS(SEQ ID NO:16), 甜SA化DNTFRACG(SEQ ID NO: 17)或它们的类似物的氨基酸序列。在一些实施例中，该肤的 N-末端包含甜S的连续氨基酸序列。在一些实施例中，该肤的C-末端包含选自GGGS、G和WPA 的连续氨基酸序列。本公开也提供了分离的肤，其具有如SEQ ID N0:l、2、3、4、5、6、7、8、9、 10、11、12、13、14、15、16、17或它们的类似物中所示的氨基酸序列。
[0023] 本公