一种能提高罗非鱼抗病能力的复方中草药制剂及其应用
【技术领域】
[0001]本发明属于中草药饲料添加剂技术领域，具体设及一种能提高罗非鱼抗病能力的 复方中草药制剂及其应用。
【背景技术】
[0002 ]近年来，由于高密度养殖，种群退化，环境、气候及养殖水质的恶化等原因，我国罗 非鱼养殖业爆发了链球菌为主的细菌性疾病且日趋严重，导致养殖罗非鱼大量死亡，给罗 非鱼养殖业造成巨大的经济损失并威胁着产业的健康发展。
[0003] 迄今为止，从养殖罗非鱼上分离到的链球菌主要有无乳链球菌和海豚链球菌，而 目前尤W无乳链球菌的危害为甚，该病具有发病率高、范围广、死亡率高的特点，给罗非鱼 养殖造成巨大的经济损失。
[0004] 大量抗生素的使用也使细菌极易产生坚强的耐药性，对疾病的防控造成困难，给 水产品安全和人类健康带来极大隐患。我国中药资源十分丰富，还具有少残留、副作用小， 符合无公害水产养殖要求等普遍认可的特点，已经成为研究防治鱼类疾病药物的主要原 料。利用中药及其复方制剂能够有效地提高罗非鱼的抗病能力。
【发明内容】
[0005] 本发明的第一个目的是提供一种能提高罗非鱼抗病能力的复方中草药制剂，该复 方中草药制剂对罗非鱼常见病原菌嗜水气单胞菌、溫和气单胞菌、维氏气单胞菌有良好的 抑菌活性，还能有效地控制罗非鱼链球菌病。
[0006] 本发明的第二个目的是提供上述能提高罗非鱼抗病能力的复方中草药制剂在制 备具有抑制嗜水气单胞菌、溫和气单胞菌、维氏气单胞菌和罗非鱼链球菌功效的药物中的 应用。
[0007] 本发明的第Ξ个目的是提供一种罗非鱼饲料，该罗非鱼饲料适口性好，安全无毒， 易于产业化。
[000引本发明的第一个目的是通过W下技术方案来实现的：一种能提高罗非鱼抗病能力 的复方中草药制剂，主要由W下质量份配比的原料制成：
[0009] 五倍子1~20、石恼皮1~20、苏木1~20、丹参1~20。
[0010] 作为本发明的一种优选的技术方案，各原料的质量份配比优选为五倍子5~20、石 恼皮5~20、苏木5~20、丹参5~20。
[0011] 作为本发明的一种最佳的技术方案，各原料的质量份配比为五倍子20、石恼皮5、 苏木20、丹参5。
[0012] 本发明提供的上述能提高罗非鱼抗病能力的复方中草药制剂的一种优选的制备 方法，包括W下步骤:按用量关系取各原料，加水煎煮多次后，合并煎煮液，过滤后合并滤 液，浓缩至生药含量为0.5~1.5g/mL。
[001引本发明中的复方中草药制剂包括但不限于水剂，还可W是其它剂型，如粉剂、超微 粉剂等。
[0014] 优选的，该能提高罗非鱼抗病能力的复方中草药制剂的制备方法中：加水煎煮3 次，合并3次滤液，浓缩至生药含量为1. Og/mL。
[0015] 本发明的第二个目的是通过W下技术方案来实现的：上述能提高罗非鱼抗病能力 的复方中草药制剂在制备具有抑制嗜水气单胞菌、溫和气单胞菌、维氏气单胞菌和罗非鱼 链球菌功效的药物中的应用。
[0016] 本发明的第Ξ个目的是通过W下技术方案来实现的：一种罗非鱼饲料，含有上述 的能提高罗非鱼抗病能力的复方中草药制剂和罗非鱼基础饲料。
[0017]优选的，所述复方中草药制剂的用量为罗非鱼基础饲料总质量的2~6%。
[0018] 上述罗非鱼饲料的一种优选的制备方法，包括W下步骤:按用量关系取复方中草 药制剂，喷洒至罗非鱼基础饲料上，风干即制得罗非鱼饲料。
[0019] 本发明具有如下优点：
[0020] (1)本发明的复方中草药制剂能有效防治罗非鱼链球菌病，其有效防治率在52~ 85%之间，对罗非鱼生长性能没有显著性影响，能显著提高血清中谷脫甘肤过氧化物酶 (G甜-Px)、溶菌酶活力，显著降低MDA含量;并能显著上调罗非鱼抗病因子MHC-2a、MHC-化的 表达，从而能有效提高罗非鱼的存活率；
[0021] (2)该复方中药还对罗非鱼常见病原菌嗜水气单胞菌、溫和气单胞菌、维氏气单胞 菌有良好的抑菌活性；
[0022] (3)含有本发明复方中草药制剂的饲料，制备工艺简单，可直接添加到商品饲料 中，且不会对饲料的适口性产生影响，安全无毒，所用的中药原料价格低廉，稳定好，易于产 业化生产。
【附图说明】
[0023] 图1为本发明实施例15中复方中药饲喂对罗非鱼肝脏、肾脏、脾脏MHC-2a，MHC-化 表达量影响结果。
【具体实施方式】
[0024] 实施例1
[0025] 本实施例提供的能提高罗非鱼抗病能力的复方中草药制剂，其配方通过W下方式 筛选获得：
[00%]按照五倍子、石恼皮、苏木、丹参分别设计0份、5份、10份、15份、20份五个剂量，按 照不同比例正交设计，进行体外抑菌试验，结果如下表1所示。
[0027]表1不同水平复方中药体外抑制无乳链球菌正交试验结果
[002引
[0029] 根据表1中的试验结果，确定本发明能提高罗非鱼抗病能力的复方中草药制剂，主 要由W下质量份配比的原料制成:五倍子1~20、石恼皮1~20、苏木1~20、丹参1~20。
[0030] 较佳组方主要由W下质量份配比的原料制成：五倍子5~20、石恼皮5~20、苏木5 ~20、丹参5~20。
[0031] 根据正交试验的原理，进行统计学分析，得到最佳配比，最佳由W下质量份配比的 原料制成:五倍子20、石恼皮5、苏木20、丹参5。最佳配比也进行了验证试验，抑菌圈在30mm W上。具体如下所示。
[0032] 按最佳质量份配比，配制复方中药，进行牛津杯抑菌试验，结果如下表2中所示，最 佳质量份配比中药效果最佳。
[0033] 表2最佳质量份配比中药对链球菌的验证试验结果
[0034]
[0035] 备注:GDXG-OUGD化-01、GDXJ-01和GDZX-01均为无乳链球菌分离株;分别分离自 仙桂村、二龙村、西镜村和中新村。
[0036] 实施例2
[0037] 本实施例提供的能提高罗非鱼抗病能力的复方中草药制剂，由W下质量份配比的 原料制成：
[003引五倍子1、石恼皮20、苏木1、丹参20。
[0039] 该能提高罗非鱼抗病能力的复方中草药制剂通过W下方法制备获得:按用量关系 取各原料，加水煎煮多次后，合并煎煮液，过滤后合并滤液，浓缩至生药含量为0.5g/mL。
[0040] 实施例3
[0041] 本实施例提供的能提高罗非鱼抗病能力的复方中草药制剂，由W下质量份配比的 原料制成：
[0042] 五倍子5、石恼皮15、苏木5、丹参15。
[0043] 该能提高罗非鱼抗病能力的复方中草药制剂通过W下方法制备获得:按用量关系 取各原料，加水煎煮多次后，合并煎煮液，过滤后合并滤液，浓缩至生药含量为1. Og/mL。
[0044] 实施例4
[0045] 本实施例提供的能提高罗非鱼抗病能力的复方中草药制剂，由W下质量份配比的 原料制成：
[0046] 五倍子10、石恼皮10、苏木10、丹参10。
[0047] 该能提高罗非鱼抗病能力的复方中草药制剂通过W下方法制备获得:按用量关系 取各原料，加水煎煮3次后，合并煎煮液，过滤后合并滤液，浓缩至生药含量为1.5g/mL。
[004引实施例5
[0049]本实施例提供的能提高罗非鱼抗病能力的复方中草药制剂，由W下质量份配比的 原料制成：
[(K)加]五倍子15、石恼皮5、苏木15、丹参5。
[0051]该能提高罗非鱼抗病能力的复方中草药制剂通过W下方法制备获得:按用量关系 取各原料，加水煎煮3次后，合并煎煮液，过滤后合并滤液，浓缩至生药含量为1. Og/mL。 [0化2] 实施例6
[0053]本实施例提供的能提高罗非鱼抗病能力的复方中草药制剂，由W下质量份配比的 原料制成：
[0化4] 五倍子20、石恼皮5、苏木20、丹参5。
[0055]该能提高罗非鱼抗病能力的复方中草药制剂通过W下方法制备获得:按用量关系 取各原料，加水煎煮3次后，合并煎煮液，过滤后合并滤液，浓缩至生药含量为1. Og/mL。 [0056] 实施例7
[0057]本实施例提供的能提高罗非鱼抗病能力的复方中草药制剂，由W下质量份配比的 原料制成：
[0化引五倍子20、石恼皮1、苏木20、丹参1。
[0059] 该能提高罗非鱼抗病能力的复方中草药制剂通过W下方法制备获得:按用量关系 取各原料，加水煎煮3次后，合并煎煮液，过滤后合并滤液，浓缩至生药含量为1. Og/mL。
[0060] 实施例8
[0061] 本实施例提供的能提高罗非鱼抗病能力的复方中草药制剂，由W下质量份配比的 原料制成：
[0062] 五倍子20、石恼皮5、苏木20、丹参5。
[0063] 该能提高罗非鱼抗病能力的复方中草药制剂通过W下方法制备获得:按用量关系 取各原料，加水煎煮3次后，合并煎煮液，过滤后合并滤液，浓缩至生药含量为1. Og/mL。
[0064] 实施例9
[0065] 本实施例提供的罗非鱼饲料，含有实施例2中能提高罗非鱼抗病能力的复方中草 药制剂和罗非鱼基础饲料。
[0066] 其中复方中草药制剂的用量为罗非鱼基础饲料总质量的2%。
[0067] 该罗非鱼饲料的制备方法，包括W下步骤:按用量关系取复方中草药制剂，喷洒至 罗非鱼基础饲料上，即制得罗非鱼饲料。
[006引实施例10
[0069] 本实施例提供的罗非鱼饲料，含有实施例2中能提高罗非鱼抗病能力的复方中草 药制剂和罗非鱼基础饲料。
[0070] 其中复方中草药制剂的用量为罗非鱼基础饲料总质量的3%。