药物芬戈莫德的新用图
【技术领域】
[0001 ]本发明设及一种药物芬戈莫德的新用途。
【背景技术】
[0002] 帕金森病(Parkinson's disease,PD)是中老年人常见的神经系统变性疾病，随着 人们生活水平提高和人口老龄化的加剧，WPD为代表的神经系统变性疾病发病率逐年上 升，己成为仅次于屯、血管疾病、恶性肿瘤之后的主要致死疾病，给患者和社会造成沉重的负 担。TO发病机制复杂，目前尚无有效治疗手段。临床常用药物如左旋多己只起改善症状的作 用，不能延缓疾病进程，且应用3-5年后其疗效逐渐下降并引起"开-关"现象等严重的毒副 作用，因此急需寻找能延缓疾病进程的有效治疗药物。
[0003] 芬戈莫德(Fingolimod，FTY720)是2010年美国FDA批准的用于复发形式的治疗多 发硬化的药物。分子式为:Cl讯33NO2.肥1，分子量为343.9，化学结构式如下：
[0005] 近年来文献研究发现，芬戈莫德在中枢神经系统具有广泛的药理作用，对亨廷顿 病、Rett综合征等都具有良好的作用。
[0006] 研究发现，帕金森患者的TNF-a含量高于正常，TNF-a在帕金森患者发病中起破坏 作用，但也有发现TNF-a在帕金森患者发病中不具有破坏性，而具有保护作用，徐秀芝等研 究得出TNF-a诱导核转录因子-kB参与帕金森的发病过程。文章 Novel FTY720-Based Compounds Stimulate Neurotrophin Expression and Phosphatase Activity in Dopaminergic Ce 11s(Medicinal Chemistry,Javier Vargas-Medrano,Sesha Krishnamachari,Ernesto ViI Ianueva，Wesley H.Godfrey，Haiyan Lou,Ramesh Qiinnasamy，Jeffrey B.A;rte;rbu;rn,and Ruth G.Perez),介绍了运用MN9D细胞株，夕t'加损 伤因素 TNF-a，通过台吩蓝及DAPI染色进行活细胞计数及用MTS法测定细胞活力简单评价了 芬戈莫德对TNF-a损伤MN9D细胞的作用。该文章中所用到的损伤因素 TNF-a是一种促炎细胞 因子，参与正常炎症反应和免疫反应，TNF-a在许多病理状态下产生增多，包括败血症、恶性 肿瘤、屯、脏衰竭和慢性炎性疾病，在重症类风湿关节炎患者的血液及关节中都可发现TNF-a 增多。结合现有技术，该文章仅仅能够得到芬戈莫德对经TNF-a处理的MN9D细胞有保护作 用，对于芬戈莫德是否对帕金森患者有作用，W及是否可延缓PD的病理进程目前尚无报道， 也无从得知。
【发明内容】
[0007] 本发明的目的就是为了提供一种药物芬戈莫德的新用途。
[000引芬戈莫德或其药学上可接受的盐、醋、溶剂合物在制备保护6-OHDA损伤的多己胺 能神经细胞MD9D药物中的应用。
[0009] 芬戈莫德或其药学上可接受的盐、醋、溶剂合物在制备预防和/或治疗神经系统变 性疾病中的应用。
[0010] 优选:所述神经系统变性疾病为帕金森病。
[0011] -种预防和/或治疗神经系统变性疾病的药物，其活性成分为芬戈莫德或其药学 上可接受的盐、醋、溶剂合物。
[0012] 优选:所述神经系统变性疾病为帕金森病。
[001引一种保护6-OHDA损伤的多己胺能神经细胞株細-SY5Y的药物，其活性成分为芬戈 莫德或其药学上可接受的盐、醋、溶剂合物。
[0014] 芬戈莫德在制备改善阿扑吗啡诱导的行为学药物中的应用。
[0015] 所述预防和/或治疗神经系统变性疾病（优选：帕金森病）的药物可通过注射、喷 射、滴鼻、滴眼、渗透、吸收、物理或化学介导的方法导入机体如肌肉、皮内、皮下、静脉、粘膜 组织;或是被其他物质混合或包裹后导入机体。
[0016] 需要的时候，在上述药物中还可W加入一种或多种药学上可接受的载体。所述载 体包括药学领域常规的稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面 活性剂、吸附载体、润滑剂等。
[0017] 用芬戈莫德或其药学上可接受的盐、醋、溶剂合物为活性成分制备的预防和/或治 疗帕金森病药物可W制成注射液、片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊、口服液、膏剂、霜剂等多种形 式。上述各种剂型的药物均可W按照药学领域的常规方法制备。
[0018] 发明人在研究现有治疗帕金森的药物只起改善症状的作用，且严重的毒副作用等 问题时发现芬戈莫德对6-OHDA损伤的多己胺能神经元细胞株有保护作用，于是发明人运用 公认的6-OHDA损伤甜-SY5Y细胞和建立巧7BL/6小鼠 PD动物模型，通过系统详细的细胞学和 动物学实验层层验证了芬戈莫德作为PD治疗药物的治疗价值。通过运用MTT法测定细胞存 活率、LDH试剂盒测定细胞LDH漏出、流式细胞术及TU肥L染色测定细胞调亡等多个实验手 段，从多个角度层层证实了芬戈莫德的保护作用。体内实验中运用经典的6-OHDA纹状体立 体定位注射模型，通过观察阿扑吗啡诱导的行为学、黑质及纹状体TH免疫组化染色、TH western blot、高效液相测定多己胺及代谢产物含量等方法进一步评价了芬戈莫德对PD小 鼠模型的保护作用，为芬戈莫德作为PD治疗药物提供了详实而充分的数据和支持。
[0019] 本发明的有益效果：
[0020] 本发明经过系统的实验证实芬戈莫德是一种潜在的抗神经系统退行性疾病药物。 W芬戈莫德作为抗神经系统退行性疾病药物尤其是针对帕金森病具有W下两个优点：（1) 治疗帕金森病的临床常用药物如左旋多己只起改善症状的作用，不能延缓疾病进程，且应 用3-5年后其疗效逐渐下降并引起"开-关"现象等严重的毒副作用，芬戈莫德是2010年或美 国FDA批准的用于复发形式的治疗多发硬化的药物，多发硬化病与帕金森病之间并不是并 发症的关系，所W作为一种新药使用，芬戈莫德在抗帕金森病的方面不会出现出现耐药现 象(作为一种来源于天然产物的新型药物，作用机制也与临床现有抗帕金森病药物不同，主 要是侧重于对多己胺能神经元的保护作用，因此不会出现交叉耐药现象）；（2)能延缓帕金 森病的进程，效果显著。（3)由于芬戈莫德是临床上已上市药物，因此作为抗帕金森药物研 究中，可W大大降低临床前研究中的研究成本，节约资源、缩短研发周期。所有实验数据证 明芬戈莫德有良好的抗帕金森病效果，具有潜在的临床应用前景。（4)芬戈莫德在细胞及动 物实验中工作浓度均未见有毒性。
【附图说明】
[0021] 图1为芬戈莫德对6-OHDA损伤的多己胺能神经元细胞株細-SY5Y细胞的保护作用 示意图；
[0022] 图2为芬戈莫德对6-OHDA损伤甜-SY5Y细胞调亡保护作用的示意图；
[0023] 图3为芬戈莫德对6-OHDA损伤PD小鼠模型的保护作用示意图；
[0024] 图4为芬戈莫德对6-OHDA PD小鼠模型纹状体多己胺及代谢产物含量影响的示意 图；
[00巧]图5为芬戈莫德对6-OHDA PD小鼠模型脑内抓NF及AKT、ERK等憐酸化影响的示意 图。
【具体实施方式】
[0026] 下面结合附图与实施例对本发明作进一步说明。
[0027] 实验材料:人神经母细胞瘤细胞株細-SY5Y购自美国ATCC; C57化/6小鼠购自山东 大学实验动物中屯、，均为雄性，8-10周龄;芬戈莫德购自化yman chemical公司；6-0皿A购自 Sigma公司；p-AKT、AKT、p-E服、E服抗体购自Cell signaling technology公司，BDNF抗体购 自 Santa cruz公司，TH抗体购自 Qiemicon;LDH及TU肥L试剂盒购自 Roche ,Annexin-V-FITC 购自抓。
[002引实验方法：
[00巧]1.采用甜-SY5巧巾经母细胞瘤细胞培养细胞系。用DMEM-Fl 2培养基，10 %的牛胎血 清。培养箱条件:37 °C，5 % C〇2。每天换一次培养基。隔天传代一次。
[0030] 2.MTT法测定细胞存活率
[0031] 取指数生长期的甜-SY5Y细胞，用0.25 %膜酶消化分散成单个细胞。W 7000个/孔 接种于96孔板中，细胞贴壁后加入不同浓度的芬戈莫德(0