一种酚酰胺类化合物在防治脑损伤中的应用

文档序号:9897043
一种酚酰胺类化合物在防治脑损伤中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药技术领域,设及一种酪酷胺类化合物Lyciumamide A在制备诸如 治疗缺血性脑中风等药物中的应用。
【背景技术】
[0002] 脑中风(脑卒中)具有高发病率、高致残率和高死亡率的特点,严重威胁着人类的 健康。近几年流行病学调查结果显示,我国每年新发脑卒中病例约有200万,死亡率约为发 病率的50%。其中缺血性脑卒中约占脑卒中总数的80%左右,是对人类健康危害最大的脑 血管疾病。目前对于缺血性脑中风,除t-PA溶栓治疗外,临床尚无有效的治疗药物或措施, 但溶栓治疗又有严格的时间窗限制,只有极少数患者能够得到有效的溶栓治疗。因此迫切 需要研制新型安全高效的脑中风治疗药物。
[0003] 构杞化ycium barbarum L.)为茄科构杞属植物,主要分布于我国西北、西南、华 中、华南和华东各省。构杞子为构杞的果实,是一种补益类中药,W宁夏产的构杞子品质为 最佳。中医认为构杞子具有性平味甘,归肝肾经,滋补肝肾,益精明目之功效,能缓解虚劳精 亏、腰膝酸痛、眩晕耳鸣、内热消渴、血虚萎黄、目昏不明等症状。目前对其药理活性的研究 主要集中于抗氧化、免疫调节、抗肿瘤及神经保护等。
[0004] 近年来针对构杞子化学成分的研究较少,其主要含有多糖、黄酬等化合物。文献 (详见:Gao K,et al.Three New Dimers and Two Monomers of Phenolic Amides from the Fruits of Lycium barbarum and Their Antioxidant Activities.J Agric Food 化em,2015,63:1067-1075)从构杞子中分离得到新的酪酷胺类化合物Lyciumamide A,并对 其抗氧化能力进行了验证,但是并未研究该化合物在治疗缺血性脑损伤方面的应用。目前 也未见到其他关于Lyciumamide A具有防治缺血性脑损伤、脑中风的相关报道。

【发明内容】

[0005] 本发明的目的在于提供一种酪酷胺类化合物在防治脑损伤中的应用。
[0006] 为达到上述目的,本发明采用了 W下技术方案:
[0007] 酪酷胺类化合物Lyciumamide A在制备用于防治缺血性脑中风的药物中的应用。 [000引酪酷胺类化合物Lyciumamide A在制备用于保护脑缺血损伤的药物中的应用。
[0009] 酪酷胺类化合物Lyciumamide A在制备用于抑制神经细胞死亡的药物中的应用。
[0010] 酪酷胺类化合物Lyciumamide A在制备对脑缺血再灌注损伤具有保护作用的药物 中的应用。
[0011] 所述酪酷胺类化合物Lyciumamide A的结构如式I所示:
[0013] 所述药物的制剂包括单独使用酪酷胺类化合物Lyciumamide A或与其他药物的有 效成分配合制备而成的注射剂、散剂、丸剂、胶囊剂、片剂、微囊剂、软胶囊剂、膜剂、膏剂、町 剂、颗粒剂或气雾剂。
[0014] 本发明的有益效果体现在:
[0015] 本发明所述化合物Lyciumamide A为脂溶性酪酷胺类化合物,可通过血脑屏障,具 有良好的防治缺血性脑损伤效果,而且未见毒副作用,为研制新的保护脑缺血损伤的药物 提供先导化合物,可W进一步作为新的治疗脑中风药物进行研究开发,有效解决目前临床 上缺乏治疗缺血性脑中风的有效药物的难题。
[0016] 本发明所述化合物Lyciumamide A能够明显改善此化引起的甜-SY5Y细胞调亡,提 高细胞存活率;同时体内实验证实该化合物对线栓法致大脑中动脉栓塞(MCAO)模型造成的 缺血性损伤具有明显的保护作用,且未见毒副作用。
【具体实施方式】
[0017] 下面结合实施例对本发明做详细说明,但实施例仅是对本发明的解释,而不是对 本发明保护范围的限制。
[0018] (一)化合物的提取和分离
[0019] 采自宁夏中宁县的构杞子为原料,阴干,取20公斤,加入85%乙醇80升加热回流提 取,共提取3次,每次2小时。提取液过滤并合并,浓缩干燥得总提取物556克。提取物分散于2 升水中,用石油酸萃取3次,每次2升,萃取后的水相再用乙酸乙醋萃取3次,每次2升,合并乙 酸乙醋萃取液,回收溶剂,得到乙酸乙醋萃取部位125克。将乙酸乙醋萃取部位经硅胶柱层 析(薄层色谱用硅胶H,青岛海洋化工厂),W体积比为50:1:0.1~6:3:0.3的氯仿-甲醇-水 混合溶液为洗脱剂,梯度洗脱。按150毫升为一个流份收集,并用薄层层析检测,收集第21~ 32流份。减压蒸干溶剂后得6.8克粗品,经S邱hadexLH-20葡聚糖凝胶柱(GE-Healthcare公 司)色谱,体积比1:1的氯仿-甲醇洗脱,合并第12~15流份,减压蒸干溶剂后得到4.2克样 品,再经半制备高效液相色谱,W体积比65:35甲醇-水为流动相,流速为8mL/min进行制备, 保留时间tR = 18.4min的化合物(如式I)纯品化mg。
[0021] 上述化合物(结构如式I所示)命名为Lyciumamide A,是从构杞子中分离的酪酷胺 类化合物。
[0022] (二)化合物的结构鉴定
[0023] 化合物Lyciumamide A为黄色无定型粉末,ESI-MS给出准分子离子峰m/z647[M+ 化]+ (positive mode)和m/z 623[M-H]-(negative mode),结合Ih-醒R(500MHz,CD3〇D)和 i3C-NMR( 125MHz,CD30D )波谱数据(表1)确定其分子式为C3Q出6〇i3。
[0024] 从Ih-NMR中可W观察到存在两个信号区域。第一个区域在Sh 7.5至6.0,包括两组 邻位共辆的芳香质子,信号出现在SH6.85和6.73(each2H,d,J = 8.4Hz),SH7.07和6.61 (each 2H,d,J = 8.4Hz),来源于两个1,4-二取代芳环(A'和B'),属于AA' BB'-自旋系统;另 外还有2组芳香质子,信号出现在Sh 7.24((1,1 = 2.0化,护加),6.72((1,1 = 8.0化,护86)和 7.02((1(1,1 = 8.0曰11(12.0化,护加),^及在如7.30((1,1=1.2化,护5曰),6.73((1,1 = 8.0化, H-Sa)和7.05(dd,J = 8. Oand 1.2Hz,H-9a),来源于2个 1,3,4-S取代芳环(A和B),属于ABC-自旋系统;此区域除了芳香族质子,还包含了2个如6.53和7.49(6曰油(1,1=15.7化记-26 and H-3b)締质子,和一个Sh 7.26化-3a)締质子。第二个区域的信号集中在Sh 4.0和2.0之 间,显示存在2个A2拉自旋系统(Sh 3.48,4H,出-I'a和出-l'b;SH 2.77,2H,出-2'a和Sh 2.65, 2H,出-2'b),运与2个孤立去屏蔽的亚乙基相符;另外该区域还包括2个甲氧基(? 3.67,3H, s和?3.92,3H,s),HMBC谱显示运2个甲氧基分别与C-6a(Scl47.5)和C-化(Scl49.1)存在 远程相关,从而确定了它们在苯环A和B上的连接位置。此外,I 3C-醒財是示二聚体中含有2个 酪酷胺结构晰164.0,(:-1曰和如167.4,(:-化)。通过分别比较(:-1曰,(:-2曰(扣140.1,季碳原 子),C-3a和C-4a与C-化,C-2b(Sc 119.6,叔碳原子),C-3b和C-4b化学位移的变化,可推测 C-2a连接有1个活泼基团,结合分子式可判断此基团为径基。综上可W确定该化合物的结 构,命名为Lyciumamide A。
[0025] 表1化合物Lyciumamide A的1化核磁共振数据(测定溶剂:気代甲醇)
[0027] (S)化合物Lyciumamide A(式I)对出化诱导SH-SY5Y细胞死亡的保护作用。
[002引1、细胞培养
[00巧]SH-SY5Y细胞株用含10%胎牛血清、lOOU/mL青霉素、lOOU/mL链霉素的DMEM/F12培 养基在玻璃培养瓶中培养,0)2细胞培养箱的培养条件为37°C、5 %C〇2浓度、饱和湿度,待细 胞长至80%丰度后用0.25%的膜酶消化传代1次(约2-3d),倒置显微镜观察细胞生长状况, 实验时取对数生长期细胞进行实验。进行MTT实验前将细胞接种到96孔培养板用无血清培 养基培养。
[0030] 2、细胞给药处理及分组
[0031] 细胞共分为五组,无血清培养基接种2地后进行药物干预:①正常对照组:正常甜-SY5Y细胞;②模型组:SOOiiM此化;③化合物低剂量组:IOiiM化合物(式I )+600iiM出化;④化 合物中剂量组:化合物(式I) +600測此化;⑤化合物高剂量组:40iiM化合物(式I) +SOOiiM 出化。给药处理1化后加入出化,化后进行检测。
[0032] 3、MTT检测各组细胞活力
[0033] 取对数生长期的细胞,膜酶消化后Wl X IO5个/mL的细胞密度,每孔10化L接种于 96孔培养板中无血清培养2地,然后按照上述
再多了解一些
当前第1页1 2 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1