罗布麻提取物及其纯化方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及一种罗布麻提取物及其纯化方法，尤其是一种罗布麻黄酬含量很高的 罗布麻提取物及其纯化方法。
【背景技术】
[0002] 罗布麻是夹竹桃科植物。作为一种传统中药材，罗布麻提取物可W用于治疗高血 压、屯、脑缺血等疾病。罗布麻叶中含有黄酬，有机酸及较质成分。由于黄酬和较质结构相近， 通常的提取方法无法将二者分离开。
[0003] 现代化的分离纯化技术，如二氧化碳超临界萃取技术、高速逆流色谱技术、工业制 备色谱技术、大孔吸附树脂技术W及微波、超声等辅助设备的开发，使得高纯度有效成分提 取物的制备成为可能。
[0004] 在目前开发的分离方法中，适于大规模工业化制备的生产工艺的分离方法并不是 很多。大孔树脂吸附分离法由于其低成本、无污染、操作简便、易于工业化等优势在天然植 物提取分离中占据重要地位。但是，大孔吸附树脂具有广谱吸附作用，使它对某一吸附质或 者对某一类吸附质的吸附选择性并不好，运导致提取物的纯度不高。例如，CN1385188A公开 了一种罗布麻有效部位的提取分离方法，包含罗布麻上柱液的制备步骤、由分离柱进行分 离的步骤、用洗脱剂对分离柱进行洗脱的步骤W及对洗脱液进行浓缩的步骤，其中分离柱 为大孔吸附树脂柱，在洗脱步骤首先采用20-39%的乙醇水溶液洗脱，再用40-70%的乙醇 水溶液洗脱。该专利文献声称可W获得总黄酬含量达到50wt% W上的浸膏。但是该方法并 没有给出总黄酬含量的测试方法。CN1634325A公开了一种罗布麻提取物及其提取方法，声 称其提取物中总黄酬含量35-90%。上述总黄酬含量是通过紫外光谱测定的，该方法对于罗 布麻总黄酬含量的测定专属性不强，误差非常大。本申请的发明人发现，液相色谱化PLC)适 合于总黄酬含量的测定，测定的数据较为准确。本申请的发明人也发现，上述两篇专利文献 的提取物中总黄酬含量在50wt% W下(液相色谱测定）。因此，目前尚未制备出来总黄酬含 量很高的罗布麻提取物。
[0005] 目前，关于中药成分常用的除较质方法主要有热处理冷置法、明胶沉淀法、酸性醇 沉法、碱性醇沉法和铅盐沉淀法等，但是，大多方法的选择性差(廖学品等，中草药提取物中 单宁(较质）的选择性脱除，天然产物研究与开发，第16卷第1期，第10-15页，2004年）。除较 质方法还包括聚酷胺法，但是运种方法存在不能用于酸性环境、流速慢和混入低分子杂质 等问题。因此，需要寻找一种简单且易于工业化生产的方法，其可W将黄酬纯化、并将较质 分离出来。
【发明内容】
[0006] 为克服现有技术的缺陷，本申请的发明人进行了深入研究。本发明的一个目的是 提供一种罗布麻提取物，其总黄酬含量高、但较质含量低。
[0007] 本发明的另一个目的在于提供一种纯化方法，该方法可W显著提高罗布麻提取物 中的总黄酬含量，且可W将罗布麻粗提物中的一部分较质分离出来。
[0008] 本发明提供一种罗布麻提取物，所述的罗布麻提取物的总黄酬含量在65wt% W 上，较质含量低于16wt% ;所述的总黄酬含量采用液相色谱测定。
[0009] 根据本发明所述的罗布麻提取物，优选地，所述的罗布麻提取物的总黄酬含量在 70~85wt%，较质含量为5~15wt% ;所述的总黄酬含量采用液相色谱测定。
[0010] 本发明还提供一种罗布麻提取物的纯化方法包括如下具体步骤：
[0011] (T)将罗布麻粗提物分散于第一乙醇水溶液中形成吸附液，所述吸附液中的罗布 麻粗提物浓度为5~lOmg/ml;其中，所述罗布麻粗提物的总黄酬含量低于20wt%，较质含量 在7wt% W上，所述的总黄酬含量采用液相色谱测定；
[0012] (2'）将罗布麻黄酬纯化树脂装入吸附柱;其中，所述的罗布麻黄酬纯化树脂为酷 胺化的聚丙締酸醋树脂，粒径为0.3~1.0mm、比表面积为70~150m2/g干树脂和平均孔径为 10~30nm;
[OOU] (3'）将1~2BV的所述吸附液加入步骤(2'）获得的吸附柱中，Wl~2BVA的吸附速 率将所述吸附液通过所述吸附柱，吸附完毕后，用1~2BV的水洗涂所述吸附柱，再用第二乙 醇水溶液对所述吸附柱进行洗脱，收集解吸液，干燥后得到罗布麻提取物;其中，所述的BV 表示柱体积单位。
[0014] 根据本发明所述的纯化方法，优选地，所述的第一乙醇水溶液含有5~20^%的乙 醇;所述吸附柱的长径比为5~20:1;所述的第二乙醇水溶液含有60~85vt%的乙醇。
[0015] 根据本发明所述的纯化方法，优选地，所述的第一乙醇水溶液含有12~15^%的 乙醇;所述吸附柱的长径比为10~20:1;所述的第二乙醇水溶液含有65~70vt%的乙醇。
[0016] 根据本发明所述的纯化方法，优选地，所述的罗布麻黄酬纯化树脂的粒径0.4~ 0.8mm、比表面积为80~13(WVg干树脂和平均孔径为15~化mm。
[0017] 根据本发明所述的纯化方法，优选地，所述的罗布麻黄酬纯化树脂W正庚烧为致 孔剂进行制备得到。
[0018] 根据本发明所述的纯化方法，优选地，所述的罗布麻黄酬纯化树脂通过如下方法 制备得到：
[0019] W丙締酸醋为单体，二乙締苯为交联剂，W偶氮二异下腊ABIN、偶氮二异庚腊ABVN 或过氧化苯甲酯BPO为引发剂，W正庚烧为致孔剂通过悬浮聚合步骤得到醋基树脂，然后经 过胺解和酷胺化步骤得到罗布麻黄酬纯化树脂；
[0020] 其中，所述的致孔剂用量为丙締酸醋和二乙締苯总量的lOlwt%~150wt%。
[0021] 根据本发明所述的纯化方法，优选地，所述的悬浮聚合步骤为:将丙締酸醋、二乙 締苯、引发剂和致孔剂混合均匀形成油相，然后将该油相加入到分散介质中，调节揽拌速度 W使得分散介质中形成的油珠尺寸控制在0.4~0.8mm之间；保持该揽拌速度，并WO. 1~ 0.6°C/min的第一速度升溫至65~80°C，保持3~6小时;继续Wo. 1~0.6°C/min的第二速度 升溫至85~90°C，并保持3~6小时W形成醋基树脂。
[0022] 根据本发明所述的纯化方法，优选地，所述罗布麻粗提物通过如下方法制备：
[0023] (1'）将粉碎的罗布麻叶用60~78八％的乙醇水溶液在60~80°C下加热回流，得到 粗提取液；
[0024] (2'）将所述的粗提取液旋蒸，在蒸出乙醇的同时补加水，旋蒸至粗提取液中乙醇 含量为5~20vt%，将所得溶液抽滤，即得吸附溶液；
[0025] (3'）将所述吸附溶液在苯乙締型树脂上进行吸附分离，吸附速率为1~2BVA，然 后用75~85vt %的乙醇水溶液洗脱得到解吸液；
[0026] (4'）将所述的解吸液在50~70°C下真空干燥得到罗布麻粗提物。
[0027] 采用传统方法并不能有效地提高罗布麻提取物中的总黄酬含量。本发明的纯化方 法通过使用酷胺化的聚丙締酸醋树脂、并控制吸附条件，可W有效提高罗布麻提取物中的 总黄酬含量、且有效去除较质。
【附图说明】
[0028] 图1为制备例1的醋基树脂和酷胺基树脂的红外光谱图。
[0029] 图2为搬皮素和山奈酪标准品的HPlX谱图。
[0030] 图3为实施例1的罗布麻粗提物水解后的HPlX谱图。
[0031 ]图4为实施例1的罗布麻提取物水解的HPlX谱图。
【具体实施方式】
[0032] 下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明，但本发明的保护范围并不限于 此。
[0033] 本发明中，"％