用于癌症治疗的植物提取物的新型配制剂的制作方法
【专利说明】用于癌症治疗的植物提取物的新型配制剂
[0001] 发明人：
[0002] 詹姆士 ?道、托马斯?道、杰夫?道以及大卫?沃克。
[0003] 相关申请的交叉引用
[0004] 本申请要求于2013年6月3日提交的，并且名为"用于癌症治疗的植物提取物的新 型配制剂"的美国临时专利申请序列号61/830,632的优先权，以引用的方式将其内容整体 并入本文。
[0005] 发明技术领域
[0006] 本发明涉及抗癌症药物的新的改良的组合物。本发明通常涉及用于改善疾病状态 的植物提取物的新型配制剂领域。具体而言，本发明提供了组合物和利用植物提取物预防 和治疗疾病(包括癌症）的方法。更具体而言，本发明涉及包含植物提取物的治疗有效的组 合的改良的配制剂。
[0007] 发明背景
[0008] 迄今为止已经开发了用于治疗哺乳动物中的多种类型的癌症的多种抗癌剂。已经 从植物提取物中获得了针对癌症、炎症病况和免疫学病况的新型多功能多靶标药剂。
[0009] Dao等的美国专利号8,173,177和美国专利申请公开号2005/0214394公开了包含 在抑制癌症中协同作用的灵芝（Ganoderma Iucidum)提取物的、丹参（Salvia miltiorrhiza)提取物和半枝莲(Scutellaria barbata)提取物中的两种或更多种的配制 剂。美国专利申请公开号20110117121(Dao等）公开了用于治疗疼痛和相关症状的包含相同 植物的提取物的组合物。所述植物组合物具有治疗性显著特征，并且作为所述成分以及与 其它植物提取物和/或化学治疗剂和其它药物和化学实体组合的组合物是有效的。这些多 功能多靶标(MFMT)药剂具有多种功能的治疗价值，并对多种生物靶标发挥作用。
[0010]已知包含灵芝提取物、丹参提取物和半枝莲提取物中的两种或更多种的配制剂具 有一些有益效果，如抗增殖、抗氧化、免疫增强、抗炎症、细胞周期调节、抗病毒和其它活性， 同时具有通常与之相关的低毒性和副作用。
[0011]因此，需要这样的配制剂:其允许递送增加量的这些提取物的更有效的配制剂。 [0012] 发明概述
[0013] 本发明涉及组合物和制备包含协同活性量的灵芝、丹参、黄岑和半枝莲提取物的、 植物提取物的生物利用度增强的口服配制剂的方法。在一些实施方案中，提取物为有机提 取物。在优选实施方案中，提取物为酯类(乙酸乙酯)提取物。
[0014] 本发明公开了抗增殖配制剂，其包含:灵芝提取物、丹参提取物、半枝莲提取物和 黄岑提取物中的两种或更多种以及至少一种乳化剂，其中以重量计，每种提取物构成约 1%-约90%。在一些实施方案中，所述乳化剂选自Cremophor EL、油酸和Labrasol。
[0015] 配制剂还可以包含抗氧化剂。在一些实施方案中，所述抗氧化剂选自抗坏血酸和α 生育酚。
[0016] 配制剂还可以包含稀释剂。在一些实施方案中，所述稀释剂为豆油。
[0017] 在一些实施方案中，在非醇有机溶剂中制备提取物。在一些实施方案中，所述非醇 有机溶剂为酯类。在优选实施方案中，所述酯类为乙酸乙酯。
[0018]与不含乳化剂的配制剂相比，公开的配制剂表现出增加的生物利用度，并且与不 含乳化剂的配制剂相比，公开的配制剂表现出增加的最大耐受剂量(MTD)。
[0019]公开了优选的配制剂，其包含:灵芝的乙酸乙酯提取物、丹参的乙酸乙酯提取物和 半枝莲的乙酸乙酯提取物，其中以重量计，每种提取物构成约1 %至约90 % ;选自Cremophor EL、油酸和Labrasol的至少一种乳化剂;选自抗坏血酸和α生育酚的抗氧化剂；以及选自豆 油的稀释剂。
[0020] 公开的配制剂还可以包含化学治疗剂。在一些实施方案中，所述化学治疗剂选自： 卡铂、诺维本? (长春瑞滨）、蒽环类抗生素 (Doxi 1)、拉帕替尼(GW57016)、赫赛汀、吉西他滨 (健择φ)、卡培他滨(希罗达?)、爱宁达、顺铂、5-氟尿啼啶、表柔比星、环磷酰胺、阿瓦斯汀、 万珂气紫杉醇以及多西紫杉醇。
[0021] 在一些实施方案中，化学治疗剂选自：抗代谢物、核苷类似物、基于铂的药剂、烷化 剂、酪氨酸激酶抑制剂、蒽环类抗生素、长春花碱、蛋白酶体抑制剂、大环内酯类以及拓扑异 构酶抑制剂。
[0022] 公开了治疗疑患癌症或相关疾病的个体的方法，所述方法包括:施用足以缓解癌 症或相关疾病的症状的量的权利要求1-15中任一项所述的配制剂。
[0023] 在一些实施方案中，所述方法包括施用包含0.1至IOOmg活性成分的配制剂，所述 活性成分由灵芝提取物、丹参提取物、半枝莲提取物和黄岑提取物中的两种或更多种组成。 [0024] 在方法的一些实施方案中，每天施用I、1.5、2、2.5、3、4或5g活性成分。
[0025] 在所述方法的一些实施方案中，以7、14或28天的周期施用所述配制剂1、2、3、4、5 或6个周期。
[0026] 在一些实施方案中，所述方法还包括施用相同配制剂中的化学治疗剂，或者作为 治疗方案的一部分分别施用化学治疗剂。
[0027] 在一些实施方案中，化学治疗剂选自：卡铂、诺维本?(长春瑞滨）、蒽环类抗生素 (Doxil)、拉帕替尼（GW57016)、赫赛汀?、吉西他滨（健择?)、卡培他滨 (希罗达，、爱宁达?、顺铂、5-氟尿嘧啶、表柔比星、环磷酰胺、阿瓦斯丁气万珂气紫 杉醇以及多西紫杉醇。
[0028] 在一些实施方案中，化学治疗剂选自：抗代谢物、核苷类似物、基于铂的药剂、烷化 剂、酪氨酸激酶抑制剂、蒽环类抗生素、长春花碱、蛋白酶体抑制剂、大环内酯类以及拓扑异 构酶抑制剂。
[0029] 在本发明的下述详细描述和附图以及实施方案中，本发明以及本发明的其它目 的、特征和优势将更加显而易见。
[0030] 附图简要描述
[0031] 下述附图组成了本说明书的一部分，并且包含于本说明书中以进一步显示本公开 内容的某些方面，通过参考这些附图的一个或多个，结合本文提出的具体实施方案的详细 描述，可以更好地理解本说明书的发明。本专利或申请文件包含至少一个彩图。含有彩图的 本专利或专利申请公开物的副本由专利局根据必要费用的请求和支付提供。
[0032]图1显示了灵芝(#9)、半枝莲(#15)和丹参(#14)的植物提取物的提取平台。
[0033]图2显示了用于制备植物提取物的提取和第一阶段浓缩的原理图。
[0034]图3显示了根据表3,以10倍稀释分散于水中的七种不同的配制剂的图片。
[0035]发明详细描述
[0036]本发明提供了用作人类疾病(优选慢性人类疾病）的多功能和多靶标预防药和治 疗的新方法和植物组合物。本发明的组合物具有下述特征中的一个或多个特征:抗炎性、抗 氧化、免疫调节、抗病毒、抗细菌、抗增殖、抗癌以及止痛。本发明涉及下述新发现：当向个体 施用时，基于植物提取物的组合物可以有效地抑制多种应答途径，且毒性大幅降低，并且具 有较少的副作用。
[0037] 定义
[0038] 本文使用的术语"植物"指适合于所述目的种子、叶、茎、花、根、浆果、树皮或任何 其它植物部分。对于某些用途，优选利用植物的地下部分，如根和根茎。叶、茎、种子、花、浆 果、树皮或其它植物部分也具有药用效果，并且可被用于制备茶和其它饮品、乳膏，以及用 于食品制造。
[0039]为了本说明书和权利要求的目的，本文使用的术语"治疗（treatment)"和"治疗 (treating)"包括预防、抑制、治愈或缓解。
[0040]通过术语"施用"，意为以可以实现期望目的的方式将组合物递送至宿主。如所提 到的，可以通过有效途径施用组合物，如口服给药、局部给药、直肠给药等。可将组合物施用 于需要治疗的任何宿主，例如脊椎动物，如哺乳动物，包括人类（男人、女人）、灵长类、宠物 (如猫和狗）、家畜(如牛、马）、鸟类、鸡等。
[0041 ] 可以通过联合指数（Cl)来测量"协同作用"。Chou和Ta la lay (Chou，T . -c. The median-effect principle and the combination index for quantitation of synergism and antagonism,p.61-102. In T.-C.Chou and D.C.Rideout(ed.),Synergism and antagonism in chemotherapy.Academic PressjSan DiegojCalif.(1991)；Chou,T.-C.,and P.Talalay. Quantitative analysis of dose-effect relationships:the combined effects of multiple drugs on enzyme inhibitors.Adv.Enzyme Regul.22: 27-55( 1984))描述了所述联合指数方法。Cl值为0.90或更低，则被认为是协同的，其中Cl值 为0.85为适度协同，CI值低于0.70为显著协同。CI值为0.90至1.10被认为是接近相加的，以 及CI值更高则被认为是拮抗的。
[0042]表1.作为CI值的函数的协同作用/拮抗作用
[0044] 应当注意，协同作用的确定可能会受到下述因素的影响：生物差异、剂量、实验条 件(温度、PH、氧张力等）、治疗方案以及组合比。
[0045] 可用于制备根据本发明的组合物的植物
[0046] 植物是发现和开发新的、天然来源的药剂以治疗人类疾病的宝贵资源。植物提取 物通常包含多种分子，并且具有可用于治疗和预防疾病的多种功能。因此，植物提取物能够 减轻用于治疗多种疾病靶标的许多治疗性药剂的有害的副作用。
[0047]已经证实植物是抗癌组合物的成功来源。实例包括绞股蓝（Gy η 〇 s t emma pentaphyllum)提取物、茶树（Camellia sinensis)(绿茶）和山楂（Crataegus pinnatifida)(山楂浆果），并且制备上述实例的方法是美国专利号5,910,308和6,168,795 的主题。对目前用于癌症疗法的来源于植物的一些药物进行设计，以干扰微管缩短(解聚） 或延长(聚合），所述药物如紫杉醇、多西紫杉醇、依托泊苷、长春新碱、长春花碱以及长春瑞 滨(Compton，D.A.，et al ·，（ 1999)Science 286:913-914)。它们共有与微管蛋白（组成微管 的分子)结合的共同作用机制（Compton,D.A.，et al ·，（1999)Science 286:913-914)。至少 六种植物来源的抗癌剂已经得到了 FDA的批准（例如紫杉酚、长春花碱、长春新碱、拓扑替 康、依托泊苷、替尼泊苷）。其它药剂正在临床试验中进行评估（例如喜树碱9AC和伊立替 康）。用于治疗癌症的植物提取物描述于美国专利申请公开20050214394 Al、20050208070 Al 和20050196409 Al 中。
[0048]本发明提供了包含植物提取物的新型组合物，以治疗在疾病病理中与多种生物学 通路相关的人类疾病。本发明的组合物由协同作用的两种或更多种植物提取物组成，以调 节多种生物学通路，所述生物学通路包括但不限于:炎症应答、免疫应答、氧化应答、病毒和 微生物感染以及细胞增殖应答。
[0049] (i)灵芝(Ganoderma Iucidum)(灵芝(Reishi)):灵芝由于早在公元456-536年在 神农本草经第一卷中所报道的其增强记忆和在老年中预防健忘的功效而被盛赞。利用口服 或局部施用灵芝对小鼠进行的研究表明灵芝具有抗炎活性。（Stavinoha，W.，et al.， (1995). Study of the anti-inflammatory efficacy of Ganoderma lucidum.In B.- K.Kim,&Y.S.Kim(Eds.),Recent Advances in Ganoderma lucidum research(pp·3-7) .Seoul Korea:The Pharmaceutical Society of Korea)。
[0050] 已经提出了灵芝属在下述中的应用：（1)在具有较高的发展为癌症的风险的个体 中的癌症的化学预防，（2)在预防癌症转移或复发中的辅助用途，（3)癌症相关恶病质和疼 痛的减轻，以及(4)与同步化疗的辅助用途以减少副作用、维持白细胞数量并允许更优的化 疗或放疗量（Chang,R.(1994)Effective Dose of Ganoderma in Humans；Proceedings of Contributed Symposium 59A，B 5th International Mycological Congress,Vancouver: pp. 117-121)。由于对人类剂量的研究是根据传统的和经验的，因此利用这些数据和药代动 力学原理来计算用于治疗的灵芝属的合适的剂量范围。所述计算建议：（1)对于健康维护而 言，灵芝属的干燥的子实体的剂量为每天0.5-lg，（2)如果存在慢性疲劳、压力、自身免疫或 其它慢性健康问题，则为每天2-5g，（3)对于严重疾病而言，每天5-10g。（Chang，R. (1993) Limitations and Potential applications of Ganoderma and related fungal polyglycans in clinical ontology；First International Conference on Mushroom Biology and Mushroom products:96)〇
[0051] 尽管优选灵芝，但是本领域技术人员会认识到，灵芝属的其它物种也可用于本发 明中。例如，在过敏小鼠模型中，已经显示松杉灵芝(G.tsugae)可以调节Thl/Th2和巨噬细 胞应答，并且在A549人肺腺癌细胞系中，来自松杉灵芝的重组表达的真菌免疫调节蛋白 FIP-gts抑制端粒酶活性（Lin，J.Y.et al ·，（2006)Food Chem.Toxicol · ;Liao，C.H.et al.，（2006)Mo.Carcinog. 45(4): 220-9)。灵芝属的其它物种的实例包括但不限于:树舌灵 芝（G.applanatum)、蒙古灵芝（G.mongolicum)、小孢子灵芝（G.microsporum)、近拟鹿角灵 芝（G . subambo inense)、弗氏灵芝（G.pfeifferi)、G.meredithae、俄勒闪灵芝 (G · oregonense) (G · oregonse)、无柄灵芝（G · resinaceum)、G · oerstedi i、马蹄状灵芝 (G.ungulatum)、奇异灵芝（G.mirabile)、松杉灵芝、树灵芝（G.sessile)、紫光灵芝 (G · vaIesiacum)、拱状灵芝（G · fornicaturn)、G · carnosum、南方灵芝以及狭长孢灵芝 (G.boninense)〇
[0052] (ii)半枝莲(Scutellaria barbata)(黄岑(skullcap)):半枝莲是用于肝脏、肺和 直肠肿瘤的传统的中药，已经显示其能抑制突变发生、黄曲霉毒素 BI (AFBl)以及细胞色素