海参脂溶性提取物、及含该提取物的唇膏及制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种海参脂溶性提取物、及含该提取物的唇膏及制备方法，该提取物的制备方法包括：(1)海参预处理，得到海参匀浆液；(2)酶解：将步骤(1)中的海参匀浆液依次经过胃蛋白酶和胰蛋白酶进行酶解，得到酶解液；(3)调节酶解液的pH至6.8～7.2，取上清液进行浓缩，然后加入设定比例的芝麻油，搅拌提取数次，提取后进行离心，合并上清液即得到海参脂溶性提取物。本发明含有该提取物的唇膏具有较好的修复作用，可以在短时间修复嘴唇干裂的现象。
【专利说明】
海参脂溶性提取物、及含该提取物的唇膏及制备方法
技术领域
[0001]本发明涉及一种海参脂溶性提取物及唇膏的制备方法与应用，具体涉及一种含海参脂溶性提取物的唇膏及其制备方法。
【背景技术】
[0002]海参(Seacucumbers ,holothurians)属于棘皮动物门(Echinodermata)海参纲(Holothur1idea)，是重要的海洋无脊椎动物。世界上关于海参药用最早记载于我国的《本草纲目拾遗》中，书中记载海参具有补肾经、益精髓、消痰涎、摄小便、生血壮阳、治疗溃疡生殖的药用价值。除此之外，大量的研究表明海参是一种高蛋白低脂肪低胆固醇的海产品。海参水解物中还含有甘氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、丙氨酸、精氨酸等多种氨基酸。除此之外海参中还含有维生素々、81、82、83、86、(:、04、1(7等多种维生素。而且海参必需脂肪酸种类齐全，如亚油酸、亚麻酸、EPA、DHA ο人体必需的常量和微量元素也是海参体内所富含的，其中微量元素中铁、锌含量明显高于其它元素。海参具有丰富的营养价值和保健功效，一直备受人们的推崇。
[0003]唇部肌肤与人体其他部位的皮肤不同，由于其角质层、颗粒层薄，颗粒黑色素比普通皮肤少，而且没有毛囊、皮脂腺等附属器官，因此很容易受到外界环境的改变而引起各种皮肤问题。秋冬时节气候寒冷干燥、风沙大，空气湿度低，加上人体维生素B2、维生素A摄入量不足，因此进入秋冬季节之后，好多人的嘴唇容易干裂、裂口、脱皮，甚至有人因此而引发唇炎和疼痛。目前市售的各种唇膏，主要以保湿滋润为主，预防口唇干裂比较好，但是对于已经发生干裂的嘴唇，需要较长时间才能修复，而且其修复主要皮肤的自我修复功能。目前市场上少有以唇部修复为主要成分的唇膏。
[0004]因此目前亟需研究一种安全有效的从海参中提取具有促进细胞增殖修复的脂溶性成分的方法以及含有该脂溶性成分的化妆品。
【发明内容】
[0005]本发明的第一个目的是提供一种海参脂溶性提取物的制备方法，该制备方法包括以下步骤:
[0006](I)海参预处理:取海参体壁，剪碎，加入海参质量的设定倍数的水进行匀楽，得到海参匀浆液；
[0007](2)酶解:将步骤(I)中的海参匀浆液依次经过胃蛋白酶和胰蛋白酶进行酶解，得到酶解液；
[0008](3)调节酶解液的pH至6.8?7.2，取上清液进行浓缩，然后加入设定比例的芝麻油，搅拌提取数次，提取后进行离心，合并上清液即得到海参脂溶性提取物。
[0009]步骤(I)中，本发明优选鲜海参，将鲜海参用清水冲洗，剖开腹部，去除内脏、生殖腺、泥沙等，取其体壁，并分别用自来水和双蒸水将体壁冲洗干净，剪碎，浸泡在双蒸水中0.4?lh，然后尽量去除水分，称重。
[0010]匀浆时，采用分散机进行匀浆，加入海参质量的6?10倍的水，优选8倍质量的双蒸水。
[0011 ]步骤(2)中，采用胃蛋白酶酶解时，胃蛋白酶的添加质量为海参的0.3?0.5% (优选0.4% );酶解温度为45?55°C (优选50°C )；酶解pH为2.0?2.5(优选2.3)，采用6mol/LHCl溶液进行调节;酶解时间为4?6h(优选5h)。
[0012]采用胰蛋白酶酶解时，胰蛋白酶的添加质量为海参的0.3 5?0.55 % (优选0.45%)；酶解温度为45?55 °C (优选50°C )；酶解pH为8.0?8.5(优选8.2)，采用0.5mol/LNaOH溶液调节;酶解时间为4?6h(优选5h)。
[0013]步骤(3)中，采用真空旋转蒸发仪进行浓缩，浓缩后使其含水量达到10?20%，加入芝麻油的质量比例为芝麻油:浓缩液= 1:(4?6)，优选比例为1:5。
[0014]所述提取温度为40?60°C，提取时间为I?3h。本发明优选采用两次提取，提取温度为50°C，一次提取时间为lh。
[0015]所述离心条件为2000?4000rpm离心10?20min，优选的，3000rpm离心15min。
[0016]本发明的第二个目的是提供一种采用上述方法制备得到的海参脂溶性提取物。
[0017]本发明的第三个目的是提供上述海参脂溶性提取物在促进成纤维细胞增殖中的应用，具体应用形式是，所述海参脂溶性提取物在制备祛皱修复化妆品中的应用，更具体的形式是，所述海参脂溶性提取物在制备唇膏、护肤水、精华液、乳液或者面霜中的应用，其中，所述唇膏为能够修复嘴唇干裂的唇膏。
[0018]本发明的第四个目的是提供一种含有海参脂溶性提取物的唇膏，该唇膏是由以下重量份的组分制成；
[0019]乳化剂2?4份，海参脂溶性提取物10?40份，金盏花油5?10份，葡萄籽油5?12份，黄蜂錯20?65份，水8?12份，甘油I?3份，阿甘油5?12份。
[0020]优选的，所述唇膏是由以下重量份的组分制成:
[0021]乳化剂3?4份，海参脂溶性提取物16?34份，金盏花油5?8份，葡萄籽油5?10份，黄蜂錯20?48份，水8?12份，甘油I?3份，阿甘油5?10份。
[0022]优选的，所述乳化剂为乳化剂LipomulseLuxe，该乳化剂包含鲸蜡硬脂醇、硬脂酸甘油酯、PEG-40硬脂酸酯、鲸蜡硬脂醇聚醚-20，可通过商业途径获得。
[0023]本发明的第四个目的是提供一种含有所述海参脂溶性提取物的唇膏唇膏的制备方法，包括以下步骤:
[0024](I)将乳化剂和部分海参脂溶性提取物混合均匀，得到A组混合液;将金盏花油、葡萄籽油和部分黄蜂蜡混合均匀，得到B组混合液;将水和甘油进行混合均匀，得到C组混合液;将A组混合液加入混合好的B组混合液，然后再加入C组混合液，得到油包水预乳化体系；
[0025](2)将阿甘油、剩余部分的海参提取物和黄蜂蜡混合，得到D组混合液;将步骤(I)中的油包水预乳化体系和D组混合液隔水加热，分别搅拌均匀至完全融化，然后将所述油包水预乳化体系加入D组混合液中，混合均匀；
[0026](3)将步骤(2)中得到的混合液注入模具，冷却后冷冻得到含有海参脂溶性提取物的唇膏。
[0027]步骤(I)中，在常温下进行各组的混合。
[0028]步骤(2)中，加热的温度为90?10cC。
[0029]步骤(3)中，注入模具的温度为70?90°C，冷却至室温后在_15?_5°C的冷冻条件下冷冻30?60分钟，优选的，所述冷冻条件为-10°C下冷冻40min。
[0030]所述步骤(I)中的部分海参脂溶性提取物与步骤(2)中的剩余部分的海参脂溶性提取物的质量比例为0.5?0.9:1。
[0031 ]所述步骤(I)中的部分黄蜂錯与步骤(2)中的剩余黄蜂錯的质量比例为0.5?0.9:
1
[0032]本发明的有益效果是:(I)本发明中海参脂溶性提取物的制备方法简单、易操作，温度低，制备过程中安全、环保，完整的保留了其中的活性成分;制备过程中采用试剂安全性高，因此不会产生溶剂残留问题，安全性较高；制备过程中首先经过胃蛋白酶和胰蛋白酶的酶解作用，然后根据海参的组成成分，特别采用了芝麻油作为脂溶性物质的提取溶剂，芝麻油中不含对人体有害的成分，而含有特别丰富的维生素E和比较丰富的亚油酸，这些成分具有较好的抗氧化作用，在提取过程中对海参脂溶性成分具有较好的保护作用，从而提高提取的海参脂溶性提取物的活性。另外用芝麻油提取，不经除去提取剂就可以直接作为制作唇膏的原料。
[0033](2)通过本发明制备方法得到的海参脂溶性提取物，经试验测得其含有亚油酸、亚麻酸、EPA、DHA、单不饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸、维生素A、维生素B2、维生素D、维生素E、维生素K、脂溶性氨基酸等脂溶性成分、具有活性高、生物相容性好、安全无副作用等优点。
[0034](3)本发明提出海参脂溶性提取物在唇膏中的应用，该唇膏具有较好的修复作用，可以在短时间修复嘴唇干裂的现象，也可添加到护肤水、精华、乳液或者面霜中，制成修复化妆品。
[0035](4)本发明含有海参脂溶性提取物的唇膏，各种成分配伍科学合理，其中，金盏花油，对皮肤有很好的滋润、抗炎、细胞再生的作用;葡萄籽油含有丰富的不饱和脂肪酸、维生素E和原花色素等有效成分，具有刺激细胞分裂与组织再生，活化表层细胞，减少皱纹，延缓衰老等作用;黄蜂蜡含有大量的天然活性成分，比如长链脂肪醇及长链脂肪族等，具有抑菌和防腐的作用;阿甘油含有大量脂肪酸、留醇、维他命E和酚类化合物，具有软化角质层等作用;海参脂溶性提取物可以促进成纤维细胞增殖，成纤维细胞通过有丝分裂大量增殖，开始合成和分泌大量的胶原纤维和基质成分，与新生毛细血管等共同形成肉芽组织，填补伤口组织缺损，为表皮细胞的覆盖创造条件。基于此，本发明通过研究唇膏的各种成分之间的相互作用以及相互配合的效果，优选得到了具有较佳修复效果的唇膏，其安全无毒，可以长期使用。
【具体实施方式】
[0036]下面结合实施例对本发明进一步说明。
[0037]实施例1:海参脂溶性提取物的提取
[0038]将鲜海参Ikg用清水快速冲洗，剖开腹部，去除内脏、生殖腺、泥沙等，取其体壁，并分别用自来水和双蒸水将体壁冲洗干净，剪碎，浸泡在双蒸水中约0.5h，然后尽量去除水分，称重。向已剪碎的海参体壁中加入大约8倍量(质量比)的双蒸水，用分散机进行匀浆，得到海参匀浆液。将上述海参匀浆液置于50°C恒温水浴中，用6mol/L HCl溶液调pH至2.0?2.5，按照海参重量的0.4%加入一定量的胃蛋白酶，再调pH至2.3,500C恒温水浴酶解5h，持续搅拌，并且保持PH在2.0?2.5范围内。胃蛋白酶酶解结束后，将酶解液置于50 V恒温水浴中，用0.5mol/L NaOH溶液调pH至8.0?8.5，按照海参重量的0.45 %加入一定量的胰蛋白酶，再调pH至8.2，50 °C恒温水浴酶解5h，持续搅拌，并且保持pH在8.0?8.5范围内。
[0039]胰蛋白酶酶解结束后，调节酶解液pH至6.8?7.2，取上清用真空旋转蒸发仪浓缩，使其含水量达到10-20 %，然后按照质量比为1:5的比例加入芝麻油，50°C条件下搅拌提取两次，每次提取Ih，提取完后，3000rpm^心15min，将两次芝麻油提取液混合均勾，即得海参脂溶性提取物lkg。
[0040]实施例2:海参脂溶性提取物的提取
[0041 ]将鲜海参5kg用清水快速冲洗，剖开腹部，去除内脏、生殖腺、泥沙等，取其体壁，并分别用自来水和双蒸水将体壁冲洗干净，剪碎，浸泡在双蒸水中约0.5h，然后尽量去除水分，称重。向已剪碎的海参体壁中加入大约8倍量(质量比)的双蒸水，用分散机进行匀浆，得到海参匀浆液。将上述海参匀浆液置于50°C恒温水浴中，用6mol/L HCl溶液调pH至2.0?2.5，按照海参重量的0.4%加入一定量的胃蛋白酶，再调pH至2.3,500C恒温水浴酶解5h，持续搅拌，并且保持PH在2.0?2.5范围内。胃蛋白酶酶解结束后，将酶解液置于50 V恒温水浴中，用0.5mol/L NaOH溶液调pH至8.0?8.5，按照海参重量的0.45 %加入一定量的胰蛋白酶，再调pH至8.2，50 °C恒温水浴酶解5h，持续搅拌，并且保持pH在8.0?8.5范围内。
[0042]胰蛋白酶酶解结束后，调节酶解液pH至6.8?7.2，取上清用真空旋转蒸发仪浓缩，使其含水量达到10-20 %，然后按照质量比为1:5的比例加入芝麻油，50°C条件下搅拌提取两次，每次提取Ih，提取完后，3000rpm^心15min，将两次芝麻油提取液混合均勾，即得海参脂溶性提取物4kg。
[0043]实施例3
[0044]将鲜海参5kg用清水快速冲洗，剖开腹部，去除内脏、生殖腺、泥沙等，取其体壁，并分别用自来水和双蒸水将体壁冲洗干净，剪碎，浸泡在双蒸水中约0.5h，然后尽量去除水分，称重。向已剪碎的海参体壁中加入大约9倍量(质量比)的双蒸水，用分散机进行匀浆，得到海参匀浆液。将上述海参匀浆液置于50°C恒温水浴中，用6mol/L HCl溶液调pH至2.0?2.5，按照海参重量的0.35 %加入一定量的胃蛋白酶，再调pH至2.3，50 °C恒温水浴酶解
4.5h，持续搅拌，并且保持pH在2.0?2.5范围内。胃蛋白酶酶解结束后，将酶解液置于50 V恒温水浴中，用0.5mol/L NaOH溶液调pH至8.0?8.5，按照海参重量的0.50%加入一定量的胰蛋白酶，再调pH至8.2，50 °C恒温水浴酶解4.5h，持续搅拌，并且保持pH在8.0?8.5范围内。
[0045]胰蛋白酶酶解结束后，调节酶解液pH至6.8?7.2，取上清用真空旋转蒸发仪浓缩，使其含水量达到10-20%，然后按照质量比为1:4的比例加入芝麻油，50°C条件下搅拌提取两次，每次提取I.5h，提取完后，2500印111尚心1min，将两次芝麻油提取液混合均勾，即得海参脂溶性提取物4kg。
[0046]实施例4:含海参脂溶性提取物唇膏的制备
[0047]A乳化剂Lipomulse Luxe 4g，海参脂溶性提取物6g;
[0048]B金盏花油8g，葡萄籽油7g，黄蜂蜡17g;
[0049]C 水 10g，甘油 2g;
[0050]D阿甘油6g，海参脂溶性提取物1g，黄蜂蜡30g;[0051 ]唇膏的制备方法为:预乳化体系制备:常温下，A组混合，然后加入混合好的B组，再慢慢加入混合好的C组，做成油包水预乳化体系。
[0052]D组混合，与做好的预乳化体系分别同时隔水加热至95摄氏度，分别搅拌均匀至完全融化。95摄氏度下把搅拌均匀的预乳化体系缓慢倒入完全溶解的D组混合液中，缓慢搅拌，直至混合均匀。
[0053]70-90摄氏度下注入模具，冷却至室温后于-10度条件下冷冻40分钟。
[0054]实施例5:含海参脂溶性提取物唇膏的制备
[0055]A乳化剂Lipomulse Luxe 3g，海参脂溶性提取物14g;
[0056]B金盏花油5g，葡萄籽油1g，黄蜂蜡1g;
[0057]C 水 10g，甘油 2g;
[0058]D阿甘油10g，海参脂溶性提取物16g，黄蜂蜡20g;
[0059]唇膏的制备方法为:预乳化体系制备:常温下，A组混合，然后加入混合好的B组，再慢慢加入混合好的C组，做成油包水预乳化体系。
[0060]D组混合，与做好的预乳化体系分别同时隔水加热至90摄氏度，分别搅拌均匀至完全融化。90摄氏度下把搅拌均匀的预乳化体系缓慢倒入完全溶解的D组混合液中，缓慢搅拌，直至混合均匀。
[0061 ] 70-90摄氏度下注入模具，冷却至室温后于-10度条件下冷冻40分钟。
[0062]实施例6:含海参脂溶性提取物唇膏的制备
[0063]A乳化剂Lipomulse Luxe 3g，海参脂溶性提取物1g;
[0064]B金盏花油6g，葡萄籽油5g，黄蜂蜡18g;
[0065]C 水 10g，甘油 2g;
[0066]D阿甘油5g，海参脂溶性提取物20g，黄蜂蜡21g;
[0067]唇膏的制备方法为:预乳化体系制备:常温下，A组混合，然后加入混合好的B组，再慢慢加入混合好的C组，做成油包水预乳化体系。
[0068]D组混合，与做好的预乳化体系分别同时隔水加热至95摄氏度，分别搅拌均匀至完全融化。95摄氏度下把搅拌均匀的预乳化体系缓慢倒入完全溶解的D组混合液中，缓慢搅拌，直至混合均匀。
[0069]70-90摄氏度下注入模具，冷却至室温后于-10度条件下冷冻40分钟。
[0070]对比例I
[0071 ]将实施例6中的海参脂溶性提取物替换为VE，其它不变。
[0072]实验例I:刺激性实验、过敏性实验
[0073]豚鼠18只，剪去背部毛，分别涂抹实施例4、5、6中制备的唇膏于剪去毛的部位，和没有涂抹唇膏的部位比较，30min后没有发红、发疹、起泡等刺激性和过敏反应，实验豚鼠也无其他不适反应。
[0074]实验例2:实施例6中含海参脂溶性提取物唇膏的修复效果评价
[0075]秋冬时节，选择90名20-25岁嘴唇有干裂现象的志愿者作为试用对象，随机分成三组，每组30名志愿者。阳性对照组涂抹市售唇膏，空白对照组涂抹不添加海参脂溶性提取物的唇膏(对比例I)，实验组涂抹含海参脂溶性提取物的唇膏，三组均为早晚各涂一次。使用4天后观察每组嘴唇干裂的愈合情况，实验结果:阳性对照组无嘴唇干裂现象18名，空白对照组无嘴唇干裂现象15名，实验组无嘴唇干裂现象25名，实验组跟空白对照组有显著性差异，表明含海参脂溶性提取物的唇膏具有较好的修复作用，可以在短时间修复嘴唇的干裂现象。
【主权项】
1.一种海参脂溶性提取物的制备方法，其特征是，包括以下步骤: (1)海参预处理:取海参体壁，剪碎，加入海参质量的设定倍数的水进行匀楽，得到海参匀浆液； (2)酶解:将步骤(I)中的海参匀浆液依次经过胃蛋白酶和胰蛋白酶进行酶解，得到酶解液； (3)调节酶解液的pH至6.8?7.2，取上清液进行浓缩，然后加入设定比例的芝麻油，搅拌提取数次，提取后进行离心，合并上清液即得到海参脂溶性提取物。2.如权利要求1所述的制备方法，其特征是:步骤(I)中，采用胃蛋白酶酶解时，胃蛋白酶的添加质量为海参的0.3?0.5% ;酶解温度为45?55°C ；酶解pH为2.0?2.5;酶解时间为4 ?6h03.如权利要求1所述的制备方法，其特征是:步骤(I)中，采用胰蛋白酶酶解时，胰蛋白酶的添加质量为海参的0.35?0.55% ;酶解温度为45?55°C ；酶解pH为8.0?8.5;酶解时间为4?6h。4.如权利要求1所述的制备方法，其特征是:步骤(3)中，浓缩后使其含水量达到10?20%，加入芝麻油的质量比例为芝麻油:浓缩液=1: (4?6)。5.如权利要求1所述的制备方法，其特征是:步骤(3)中，所述提取温度为40?60°C，提取时间为I?3h。6.权利要求1?5中任一项所述的方法制备得到的海参脂溶性提取物。7.权利要求6所述的海参脂溶性提取物在促进成纤维细胞增殖中的应用。8.权利要求6所述的海参脂溶性提取物在制备祛皱修复化妆品中的应用。9.一种含有权利要求6所述的海参脂溶性提取物的唇膏，其特征是，该唇膏是由以下重量份的组分制成； 乳化剂2?4份，海参脂溶性提取物10?40份，金盏花油5?10份，葡萄籽油5?12份，黄蜂蜡20?65份，水8?12份，甘油I?3份，阿甘油5?12份。10.权利要求9所述的含有海参脂溶性提取物的唇膏的制备方法，其特征是，包括以下步骤: (1)将乳化剂和部分海参脂溶性提取物混合均匀，得到A组混合液;将金盏花油、葡萄籽油和部分黄蜂蜡混合均匀，得到B组混合液;将水和甘油进行混合均匀，得到C组混合液;将A组混合液加入混合好的B组混合液，然后再加入C组混合液，得到油包水预乳化体系； (2)将阿甘油、剩余部分的海参提取物和黄蜂蜡混合，得到D组混合液;将步骤(I)中的油包水预乳化体系和D组混合液隔水加热，分别搅拌均匀至完全融化，然后将所述油包水预乳化体系加入D组混合液中，混合均匀； (3)将步骤(2)中得到的混合液注入模具，冷却后冷冻得到含有海参脂溶性提取物的唇膏。
【文档编号】A61K8/98GK105832646SQ201610428110
【公开日】2016年8月10日
【申请日】2016年6月13日
【发明人】宋淑亮, 张娥, 吉爱国
【申请人】山东大学（威海）