一种没食子儿茶素棕榈酸酯和酒精复合消毒液及制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯和酒精的复合消毒液及制备方法，由有机溶液与无机溶液混合而成。有机溶液含有甘油，酒精，维生素E，脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯。无机溶液含有无离子水，凝胶聚合物，表面活性剂，芦荟提取物，酸碱调节物。步骤：1、配制有机溶液：加入脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯、酒精和辅料均匀混合后得到有机溶液。2、配制无机溶液：聚季铵盐?10、苯扎氯铵、十六烷基三甲基氯化铵、卡波姆Ultrez 20、芦荟提取物溶解无离子水。3、将有机溶液加入到无机溶液中，得到消毒液。配方合理，使用方便。长效，高效，无毒，抗氧化。不含有污染物和有毒物质，适用于人体皮肤表面和物体表面的消毒。
【专利说明】
一种没食子儿茶素棕榈酸酯和酒精复合消毒液及制备方法
技术领域
[0001] 本发明涉及医药技术领域，更具体涉及一种脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸 酯(￡口18&11〇〇3七6(311；[1183113七6-?31111；^3七6，￡6061)和酒精复合消毒液，同时还涉及一种 脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯和酒精复合消毒液的制备方法，作为表面消毒液可 用在家庭，医院，学校，公共场所，禽类养殖场，畜牧业，及其他可能遭细菌或病毒感染的场 所。不但及时杀灭已存在的细菌与病毒，同时在长时间内保持抑制病毒作用。
【背景技术】
[0002] 表没食子儿茶素没食子酸酯(Epigallocatechin gallate，EGCG)是茶多酚中最有 效的活性成分，属于儿茶素。EGCG具有抗菌、抗病毒、抗氧化、抗动脉硬化、抗血栓形成、抗血 管增生、抗炎以及抗肿瘤作用，由于其低毒性和存在于绿茶中的天然化合物，使它成为一种 具有极大吸引力的开发对象。表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)是从中国绿茶中提取的一 种成份，它是绿茶主要的活性和水溶性成份，是儿茶素中含量最高的组分，占绿茶毛重的 9%-13%，因为具有特殊的立体化学结构，EGCG具有非常强的抗氧化活性，抗氧化活性至少 是维生素C的100多倍，是维生素E的25倍，能够保护细胞和DNA受损害，这种损害相信与癌 症、心脏疾病和其他重大疾病有关，EGCG的这些功效归结于他们对氧自由基的清除（抗氧 化)能力。EGCG是作为安全消费品出现在FDA的清单上。
[0003] 然而，EGCG为水溶性分子且不稳定，极易被氧化，无法制成稳定性强的药物。徐德 博士早在2006年就提出对茶多酚/EGCG进行改性，进而增强其稳定性，脂溶性，特别是对病 毒杀灭的活性。这一新理念在国际新药开发领域得到了证实。改性EGCG对病毒的杀灭效果 比没有改性过的EGCG要强几十倍。
[0004] 此前人们已知道EGCG具有抑制病毒的作用，但直接饮用绿茶，EGCG会立刻在体内 分解，无法发挥作用。EGCG在水中不稳定，而且容易氧化导致损失。为此，我们用的是已经被 证明具有抗病毒活性的经过修饰的脂溶性的EGCG-p(结合了脂肪酸棕榈酸酯Palmitate)。 不但将水溶性的EGCG改性成为脂溶性，同时提高了化合物的稳定性。由于稳定性的提高，降 低了分解和氧化从而导致的损失，EGCG-p大大提高了杀灭病毒的活性。
[0005] 中国消毒剂市场目前并没有长效防止病毒感染的产品。在禽流感，单纯孢疹，手足 口症，肠道感染，乙肝等频发，导致患者死亡的环境中，我们研发的这种以EGCG-p为主要成 分之一的消毒液预防病毒感染的作用机制与目前任何市场上销售的消毒剂都不同，其特点 是长效，高效，无毒。长效指的是每次用于皮肤涂抹或表面喷洒之后，脂溶性没食子儿茶素 没食子酸棕榈酸酯残留在2小时内能防止多种病毒感染感染(酒精的作用时间为14秒）。高 效指的是其有效浓度非常低，即可对多种病毒进行灭活。无毒是因为新的化合物来自天然 分子的酯化改性，其毒性甚至低于绿茶。所有上述的内容都是通过前期大量的实验，包括人 体试验得来的，并有多篇徐德博士和其他研究团队发表在国际期刊上的研究报告作为根 据。
[0006] 采用新剂型的消毒液的特点为长效，无毒，无污染。针对手足口病和肠道感染的预 防，在儿童聚集的场合，例如幼儿园，小学等推广。对于流感的预防，将推广到学校，医院，单 位等场所。另一个重点预防的是通过性传染的病毒，如单纯孢疹，人类乳突瘤病毒，艾滋病 毒等。
[0007] 新型的长效无毒无污染消毒液主要用于皮肤和表面消毒，防止脊髓灰质炎病毒、 肠道病毒，手足口病毒，流感(包括禽流感)病毒，肝炎病毒，孢疹病毒，艾滋病毒等对人体的 感染。加上畜牧业消毒液产品市场的需求(2010年达每年217亿美元）。这种产品将是一种全 新的防范多种病毒感染的长效保护剂。其市场前景非常广阔。
【发明内容】
[0008] 本发明的目的是在于提供了一种脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯和酒精 复合消毒液，配方合理，使用方便。其特点是长效，高效，无毒。长效指的是每次用于皮肤涂 抹或表面喷洒之后，脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯残留在2小时内能防止多种病 毒感染感染(单独酒精的作用时间为14秒）。高效指的是其有效浓度非常低，即可对多种病 毒进行灭活。无毒是因为新的化合物来自天然分子的酯化改性，其毒性甚至低于绿茶。而且 对皮肤具有保护作用，不会污染环境。
[0009] 本发明的另一个目的是在于提供了一种脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯 和酒精复合消毒液的制备方法，方法可行，操作简便，不含有污染物和有毒物质，可制成消 毒液，含消毒液纸巾，喷洒剂，擦手液，皮肤涂抹剂，润滑剂等等。婴儿，儿童，和成人均可安 全使用。与其他产品不同的是长效，高效，无毒，而且起到保护皮肤，抗氧化的作用。
[001 0]为了实现上述的目的，本发明采用以下技术措施：
[0011] 其技术构思是:本发明为一种消毒液，一种以脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈 酸酯和酒精为主要作用成分的消毒液，由有机溶液与无机溶液混合而成。用于杀灭细菌和 病毒。有机溶液可以含有甘油，酒精，维生素E，脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯。无 机溶液可以含有无离子水，芦荟提取物等。
[0012] -种脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯和酒精复合消毒液，它由以下重量份 的原料制成：
[0013] 原料 重量份
[0014] 有机溶液占总体积的 65-90。
[0015]无机溶液占总体积的 10-35。
[0016] 所述的有机溶液为甘油、酒精、维生素E(抗氧化）、脂溶性没食子儿茶素没食子酸 棕榈酸酯其中的一种或二至四种的任意混合。
[0017] 所述的无机溶液为无离子水、芦荟提取物其中的一至两种的任意混合。
[0018] 无离子水占总体积的10-2 0，酒精（普通）占总体积的5 5 -7 5，甘油占总体积的 0.001-12,脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯占总体积的0.01-5。聚季铵盐-10占总体 积的0.01 -5.0，苯扎氯铵占总体积的0.01 -5.0，十六烷基三甲基氯化铵占总体积的0.01 - 3.0,卡波姆Ultrez 20 0.1-3.0,芦荟提取物（陕西中鑫生物技术有限公司生产）占总体积 的0.001-0.5，维生素E占总体积0.001-0.5。
[0019] -种脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯和酒精复合消毒液，它由以下重量份 的原料制成(优选范围）：
[0020] 原料 重量份
[0021]有机溶液占总体积的 68-88。
[0022]无机溶液占总体积的 12-32。
[0023] -种脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯和酒精复合消毒液，它由以下重量份 的原料制成(最好范围）：
[0024] 原料 重量份
[0025]有机溶液占总体积的 72-85。
[0026]无机溶液占总体积的 15-28。
[0027] -种脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯和酒精复合消毒液，它由以下重量份 的原料制成(最佳值）：
[0028] 原料 重量份
[0029]有机溶液占总体积的 86。
[0030]无机溶液占总体积的 24。
[0031] -种脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯消毒剂，它由以下重量份的原料制 成： 原料 重量份 无离子水 10-35 甘油 0.01-12 脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯 0.01-5 酒精 55-75
[0032] 聚季铵盐-10 0. 01-4 0 苯扎氯铵 0. 01-2. 5 十六烷基三甲基氯化铵 0. 01-2. 5 卡波姆 Ultrez 2.0 0. 5-2. 5 芦荟提取物 0.1-Q. 5 维生素E 0. 1-0.
[0033] -种脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯消毒剂，它由以下重量份的原料制成 (优选范围）： 原料 重量份 无离子水 9. 7-3Q. 0
[0034] 甘油 0. 1-11 脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯 0 1-0 5 酒精 60-70 聚季铵盐-10 0.1-3.0 苯扎氯铵 0.1-2.0
[0035] 十六烷基三甲基氯化铵 0? 1-2.0 卡波姆 Ultrez 20 (X 1-2. 0 芦荟提取物 Q, 2-0. 4 维生素E 0. 2-0, 4C
[0036] -种脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯消毒剂，它由以下重量份的原料制成 (最好范围）： 原料 重量份 无离子水 10. 9-29. 3 甘油 1-10. .5 脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯 0.2-1 酒精 65-70
[0037] 聚季铵盐-10 1, 5-2, S 苯扎氯铵 1. (M. 5 十六烷基三甲基氯化铵 1. 0-1. 5 卡波姆 Ultrez 20 1.. 6-:L .5 芦荟提取物 0. 0025-0. 3 维生素E 0.:0:0雜-0.3。
[0038] -种脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯消毒剂，它由以下重量份的原料制成 (最佳值）： 原料 重量份 无离子水 21. :5 甘油 0.4
[0039] 脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯 0 ! 酒精 W 聚季铵盐-10 2.0 苯扎氯铰 1.0 十六烷基三甲基氯化铵 1.0 丨.:?波姆 Ultrez20 1.0
[0040] 芦荟提取物 0,001 维生素E 0, 〇Dlp
[0041 ] -种脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯消毒剂的制备方法，其步骤是：
[0042] 1、配制有机溶液:取55~75ml酒精，加入脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯 0.1~5g和辅料均匀混合后再与0.1~15ml甘油混合得到有机溶液。
[0043] 2、配制无机溶液:聚季铵盐-10、苯扎氯铵、十六烷基三甲基氯化铵、卡波姆Ultrez 20、芦荟提取物溶解在15ml-25ml去离子水中。用三乙醇胺调节酸碱度到pH-7.0至pH-8.0。 [0044] 3、将无机溶液慢慢加入到有机溶液中，边加边搅拌至均匀的溶液，得到100ml的一 种脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯和酒精消毒液。
[0045]所述的辅料为聚季铵盐-10、苯扎氯铵、十六烷基三甲基氯化铵、卡波姆Ultrez 20、维生素E、芦荟提取物中的一种至二种或六种的任意混合物；
[0046]本发明将脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯这种长效、无毒的消毒剂成分溶 解在无毒、无污染的酒精中，制成具有长效保护能力的无毒无刺激复合消毒液。本发明与现 有技术相比，具有以下优点和效果：
[0047] A、配方合理，使用方便。其特点是长效，高效，无毒。
[0048] B、长效指的是每次用于皮肤涂抹或表面喷洒之后，2小时内能防止多种病毒感染 感染(单独酒精的作用时间为14秒）。对多种病毒进行灭活。无毒是因为新的化合物来自天 然分子的酯化改性，其毒性甚至低于绿茶。而且对皮肤具有保护作用，不会污染环境。
[0049] C、方法可行，操作简便，不含有污染物和有毒物质，可制成消毒液，含消毒液纸巾， 喷洒剂，擦手液，皮肤涂抹剂，润滑剂等等。
[0050] D、对婴儿、儿童和成人均可安全使用。与其他产品不同的是长效，高效，无毒，而且 起到保护皮肤，抗氧化的作用。
[0051] 此配方与其他产品最大的不同点是除了酒精的常规杀菌作用外还将强力杀灭病 毒的成分-脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯-长期附着在皮肤细胞表面或其它物质 表面，使病毒失活，无法感染细胞。制成的消毒产品具有高效杀灭细菌和病毒的作用，脂溶 性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯在皮肤表面形成保护膜，灭病毒效果超过两小时，对皮 肤没有刺激。
【具体实施方式】 [0052] 实施例1:
[0053] -种脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯和酒精复合消毒液，它由以下重量份 的原料制成(最佳值）：
[0054] 原料 重量份
[0055]有机溶液占总体积的 88。
[0056]无机溶液占总体积的 22。
[0057]所述的有机溶液为甘油、酒精、维生素E(抗氧化）、脂溶性没食子儿茶素没食子酸 棕榈酸酯其中的一种或二至四种的任意混合。
[0058]所述的无机溶液为无离子水、聚季铵盐-10、苯扎氯铵、十六烷基三甲基氯化铵、卡 波姆Ultrez 20和芦荟提取物其中的一种至二种或六种的任意混合物。
[0059]所述的无离子水占总体积的10或12或14或16或18或20%，酒精(普通）占总体积的 55或60或65或70或75%，甘油占总体积的0.001或0.008或0.5或1.5或5或8或10或12%，月旨 溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯占总体积的〇 . 01或〇. 08或0.5或1.5或2.5或4.4或 5%。聚季铵盐-10占总体积的0.01或0.09或0.6或1.8或2.8或3.6或4.6或5.0%，苯扎氯铵 占总体积的0.01或0.1或1.2或2.2或3.3或4.5或5.0%，十六烷基三甲基氯化铵占总体积的 0.01或0.1或 1或 1.6或2.4或3.0%，卡波姆Ultrez 20 0.1或0.1或 1.4或2或2.6或3.0%，芦 荟提取物（陕西中鑫生物技术有限公司生产）占总体积的0.001或0.007或0.01或0.07或 0.12或0.3或0.4或0.5%，维生素E占总体0.001或0.007或0.01或0.07或0.12或0.3或0.4或 0.5%〇
[0060] -种脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯消毒液，它由以下重量份的原料制 成： 原料 重量份 无离子水 .15. _4
[0061] 甘油 9 脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯 02 酒精 70 聚季铵盐-10 2, 0 苯扎氯铵 1. Q
[0062] 十六烷基三甲基氯化铵 LQ 卡波姆 Ultrez20 1, 0 芦荟提取物 0. 3 维生素E 0. 1：〇
[0063] -种脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯和酒精复合消毒液的制备方法，其步 骤是：
[0064] 1、配制有机溶液:取30或40或50或60或70ml酒精，加入脂溶性没食子儿茶素没食 子酸棕榈酸酯0.1或0.5或1或2或3或4或5g和辅料均匀混合后再与10或12或13或15ml甘油 混合得到有机溶液。
[0065] 2、配制无机溶液:聚季铵盐-10、苯扎氯铵、十六烷基三甲基氯化铵、卡波姆Ultrez 20和芦荟提取物溶解在去10ml或11ml或12ml或13或14或15ml离子水中。用三乙醇胺调节酸 碱度到PH6.5或6.9或7.4.
[0066] 3、将无机溶液慢慢加入到有机溶液中，边加边搅拌至均匀的溶液，得到100ml的一 种脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯和酒精复合消毒液。一种脂溶性没食子儿茶素没 食子酸棕榈酸酯和酒精复合消毒液，它由以下重量份的原料制成：
[0069] 其制备步骤与实施例1相同。
[0070] 该产品含有脂溶性茶多酚-暨脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯和酒精的两 种消毒成分。用于表面消毒剂。
[0071] 该产品含有脂溶性茶多酚-暨脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯和酒精的消 毒液用于预防微生物感染，特别是病毒对人类和动物的感染。
[0072] 该产品含有脂溶性茶多酚-暨脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯和酒精的消 毒液作为长效表面消毒剂用来防止微生物对人类和动物的感染。
[0073] 该产品含有脂溶性茶多酚-暨脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯和酒精的消 毒液用于预防性传播的病毒感染。
[0074] 该产品含有脂溶性茶多酚-暨脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯和酒精的消 毒剂用于已经被病毒感染的皮肤，粘膜。达到后期消毒作用。
[0075]该产品含有脂溶性茶多酚-暨脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯和酒精的消 毒剂的配方用于不同产品种。例如擦手液，消毒纸巾，表面消毒喷洒剂，皮肤表面涂抹剂，皮 肤润滑剂，医用消毒剂等等。
[0076]实施例9:消毒液储存在25°C的稳定性试验：
[0077]消毒剂48度保温箱中（湿度75%)贮藏6个月，常温贮藏2年，每半年检测一次脂溶 性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯的含量，结果见表1
[0078]表1本发明实施例消毒液储存在25°C的稳定性试验如下表所示：
[0081]实验结果显示本消毒剂性状稳定，有效消毒活性成分稳定。
[0082]实施例10:消毒液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的杀菌效果的检测按原卫生部颁 发的《消毒产品检验技术规范》中规定的方法进行，具体如下：
[0083] 一、实验目的:检测消毒液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的杀菌效果。
[0084]二、样品来源:被检样品EGCG棕榈酸酯和酒精复合消毒液为本发明实施例1、2、3、 4、5、6、7、8制备的产品。
[0085] 三、实验步骤 [0086] 1、试验器材
[0087] 1)菌种:金黄色葡萄球菌ATCC 6538、大肠杆菌8099、白色念珠菌ATCC10231
[0088] 2)磷酸盐缓冲液:见附录A。
[0089] 3)无菌蒸馏水。
[0090] 4)消毒剂稀释用硬水:见附录A。
[0091 ] 5)有机干扰物质:悬液试验用3 %BSA溶液。
[0092] 6) TSA培养基:胰蛋白胨大豆琼脂培养基(TSA)见附录A。
[0093] 7)含中和剂的胰蛋白胨大豆肉汤培养基（中和剂TSB)，中和剂经鉴定合格。
[0094] 8)刻度吸管（1 ? 0ml、5 ? 0ml、10 ? 0ml)，毛细吸管。
[0095] 9)恒温水浴箱。
[0096] 10)电动混合器。
[0097] 11)秒表。
[0098] 12)数字可调移液器（10yl，20yl，100yl，200yl，lOOOyl)及配套用一次性塑料吸 头。
[0099] 13)离心机。
[0100] 14)浊度计。
[0101] 2、细菌悬液制备：
[0102] 1)取冻干菌种管，在无菌操作下打开，以毛细吸管加入适量营养肉汤，轻柔吹吸数 次，使菌种融化分散。取含5.0ml~10.0ml营养肉汤培养基试管，滴入少许菌种悬液，置37 °C 培养18h~24h。用接种环取第1代培养的菌悬液，划线接种于营养琼脂培养基平板上，于37 °C培养18h~24h。挑取上述第2代培养物中典型菌落，接种于营养琼脂斜面，于37°C培养18h ~24h，即为第3代培养物。
[0103] 2)取菌种第3代~14代的营养琼脂培养基斜面新鲜培养物（18h~24h)，用5.0ml吸 管吸取3.0ml~5.0ml稀释液加入斜面试管内，反复吹吸，洗下菌苔。随后，用5.0ml吸管将洗 液移至另一无菌试管中，用电动混合器混合(振荡）20s，或在手掌上振敲80次，以使细菌悬 浮均匀。
[0104] 3)初步制成的菌悬液，先用细菌浓度比浊测定法粗测其含菌浓度，然后以稀释液 稀释至所需使用的浓度。
[0105] 4)细菌繁殖体悬液应保存在4°C冰箱内备用。应当天使用不得过夜。
[0106] 3、试验分组
[0107] 试验中应分以下各组：
[0108] (1)试验组。选定试验菌和一个消毒剂浓度作用10min进行试验。
[0109] (2)阳性对照组。根据各种试验的规定，用稀释液代替消毒剂溶液，按上述同样的 步骤进行试验。所得结果代表菌液原有浓度，以其作为计算杀灭对数的初始浓度。
[0110] 4、悬液定量杀菌试验操作程序
[0111] 1)使用无菌硬水配制消毒液测试样品，配制的浓度为待测浓度的1.25倍，置20°C ±rc水浴备用。
[0112] 2)按照2配制实验用菌悬液，浓度为lX108cfu/ml~5X108cfu/ml。
[0113] 3)取消毒试验用无菌大试管，先加入0.5ml试验用菌悬液，再加入0.5ml有机干扰 物质，混匀，置20 °C ± 1°C水浴中5min后，用无菌吸管吸取上述浓度消毒液4.0ml注入其中， 迅速混匀并立即记时。
[0114] 4)待试验菌与消毒剂相互作用至各预定时间，分别吸取0.5ml试验菌与消毒剂混 合液加于4.5ml经灭菌的中和剂中，混勾。
[0115] 5)各管试验菌与消毒剂混合液经加中和剂作用lOmin后，分别吸取1.0ml样液，按 活菌培养计数方法测定存活菌数，每管样液接种2个平皿即可。如平板上生长的菌落数较多 时，可进行系列10倍稀释后，再进行活菌培养计数。
[0116] 6)同时用稀释液代替消毒液，进行平行试验，作为阳性对照。
[0117] 7)所有试验样本均在37 °C温箱中培养，对细菌繁殖体培养48h观察最终结果。
[0118] (8)试验重复3次，计算各组的活菌浓度(cfu/ml)，并换算为对数值(N)，然后按下 式计算杀灭对数值：
[0119] 杀灭对数值(KL) =对照组平均活菌浓度的对数值(No)-试验组活菌浓度对数值 (Nx)
[0120] 5、本发明实施例消毒液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的杀菌效果见表2 [0121 ]表2:实施例消毒液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的杀灭效果
[0122] 样品 作用时间 对大肠杆菌杀对金黄色葡萄球对白色念珠菌 (min) 灭对数值 菌杀灭对数值 杀灭对数值 实施例 1 10 6. 1 6. 7 6.2 实施例 2 10 6.2 6. 8 6.1 实施例 3 10 6.0 6,6 6.3 实施例 4 10 6.3 6,5 6. 2 实施例 5 10 6. 1 6, 7 6. 1 实施例 6 10 6.2 6, 8 6.2 实施例 7 10 6.1 6, 7 6, 4 实施例 8 10 6.3 6, ; 8 6.3
[0123] 6、结果评定：
[0124] 本试验通过纸片试验方法评定溶液EGCG棕榈酸脂消毒液对大肠杆菌、金黄色葡萄 球菌和白色念珠菌的杀菌效果，所选三种菌株都是最常见的致病菌，也是革兰氏阴性、革兰 氏阳性和真菌最普通的代表菌。从所做的实验观察的结果可以看出，被检测样品EGCG棕榈 酸脂消毒液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌有明确的抑菌效果，其抑菌作用对 革兰氏阳性(金黄色葡萄球菌）比革兰氏阴性(大肠杆菌)似更强。结论:EGCG棕榈酸脂和酒 精复合消毒液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌有明确的抑菌作用。
[0125] 消毒剂样品对脊髓灰质炎病毒灭活效果的检测按原卫生部颁发的《消毒产品检验 技术规范》中规定的方法进行，具体如下：
[0126] 实验原理：用细胞感染法测定消毒液作用实验组与对照组样本中脊髓灰质炎病毒 的量。以细胞病变作为判断指标，确定各组病毒的感染滴度，计算消毒液对脊髓灰质炎病毒 的灭活率。由于本实验中消毒液的样品没有相应的中和剂，所以这里用稀释的物理方法来 中和消毒剂效果，选用细胞维持液作为稀释溶剂。
[0127] 一、预备实验：
[0128] 1、细胞维持液+Vero细胞-培养
[0129] 加入细胞维持液，置37°C二氧化碳培养箱中培养72小时，每天观察细胞形态和生 长情况。
[0130] 2、消毒剂+细胞-培养
[0131] 将实验组细胞分别加入不同稀释度的消毒液（用细胞维持液稀释），作用2-3小时 后，吸去液体，另加入细胞维持液，置37°C二氧化碳培养箱中培养72小时，每天观察细胞形 态和生长情况。
[0132] 注:通过上述实验确认细胞生长对消毒剂的最大耐受浓度。
[0133] 五、杀灭试验
[0134] 1、将待检消毒液原液稀释成待测的浓度梯度(暂定为原浓度，10-1，10- 2)置20°C 土 rc水浴备用。
[0135] 2、将病毒悬液置20°C ± 1°C水浴5min，取出0.2mL病毒悬液分别与三种浓度的消毒 剂等体积混匀计时;作用至规定时间（先按l、2、5、10min，看看那个时间合适，以此时间为T， 再做时间梯度1/2T，T，3/2T)，立即取出0.11111，加入到0.91111中和剂中混匀作用1〇111111，适当 稀释接种于96孔细胞板，培养72h，每天观察并记录CPE。
[0136] 3、阳性对照以PBS代替消毒剂，按上述步骤进行操作，采用一个时间即可。阴性对 照就是平板上未加病毒的细胞孔。
[0137] 五数据整理
[0138] 根据公式（1)计算出各组病毒TCID50对数值：
[0139] 杀灭对数值= Log(阳性对照TCID50)-Log(T组病毒TCID50) (1)
[0140] 结果见表4:
[0141] 表4:实施例消毒液对PV-I杀灭效果以下与实际数据有差别，应该是6左右，作用时 间为30秒
[0144] 结果显示EGCG棕榈酸脂和酒精复合消毒液对脊髓灰质炎病毒-I有很好的杀灭作 用。
[0145] 以上所述的实施例，只是本发明较优选的【具体实施方式】的一种，本领域的技术人 员在本发明技术方案范围内进行的通常变化和替换都应包含在本发明的保护范围内。
【主权项】
1. 一种脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯和酒精复合消毒液，它由以下重量份的 原料制成： 原料 重量份 有机溶液 65-90 无机溶液 10-35; 所述的有机溶液为甘油、酒精、维生素 E、脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯其中 的一种或二至四种的任意混合； 所述的无机溶液为无离子水、芦荟提取物其中的一至两种的任意混合； 所述的无离子水占总体积的10-20，酒精占总体积的55-75，甘油占总体积的0.001-12， 脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯占总体积的〇. 01-5，聚季铵盐-10占总体积的0.01-5.0，苯扎氯铵占总体积的0.01-5.0，十六烷基三甲基氯化铵占总体积的0.01-3.0，卡波姆 Ultrez 20 0.1-3.0芦荟提取物占总体积的0.001-0.5，维生素 E占总体积0.001-0.5。2. 根据权利要求1所述的一种脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯和酒精复合消毒 液，其特征在于： 原料 重量份 有机溶液 68-88 无机溶液 12-32。3. 根据权利要求1所述的一种脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯和酒精复合消毒 液，其特征在于： 原料 重量份 有机溶液占总体积的 72-85 无机溶液占总体积的 15-28。4. 根据权利要求1所述的一种脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯和酒精复合消毒 液，其特征在于： 原料 重量份 有机溶液占总体积的 86 无机溶液占总体积的 24。5. 根据权利要求1所述的一种脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯消毒剂，其特征 在于： 原料 重量份 无离子水 10-35 甘油 0.01-12 脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯 0.01-5 酒精 55-75 聚季铵盐-10 0.01-4.0 苯扎氯铵 0.01-2.5 十六烷基三甲基氯化铵 0.01-2.5 卡波姆Ultrez 20 0.5-2.5 芦荟提取物 0.1-0.5 维生素E 0.1-0.5。6. 根据权利要求1所述的一种脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯消毒剂，其特征 在于： 原料 重量份 无离子水 9.7-30.0 甘油 0.1-11 脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯 0.1-0.5 酒精 60-70 聚季铵盐-10 0.1-3.0 苯扎氯铵 0.1-2.0 十六烷基三甲基氯化铵 0.1-2.0 卡波姆Ultrez 20 0.1-2.0 芦荟提取物 0.2-0.4 维生素E 0.2-0.4。7. 根据权利要求1所述的一种脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯消毒剂，其特征 在于： 原料 重量份 无离子水 10.9-29.3 甘油 1-10.5 脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯 0.2-1 酒精 65-70 聚季铵盐-10 1.5-2.5 苯扎氯铵 1.0-1.5 十六烷基三甲基氯化铵 1.0-1.5 卡波姆Ultrez 20 1.0-1.5 芦荟提取物 0.0025-0.3 维生素 E 0.0025-0.3。8. 根据权利要求1所述的一种脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯消毒剂，其特征 在于： 原料 重量份 无离子水 24.5 甘油 0.4 脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯 0.1 酒精 70 聚季铵盐-10 2.0 苯扎氯铵 1.0 十六烷基三甲基氯化铵 1.0 卡波姆Ultrez 20 1.0 芦荟提取物 0.001 维生素 E 0.001。9.权利要求1所述的一种脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯消毒剂的制备方法， 其步骤是： 1 )、配制有机溶液：取55~75ml酒精，加入脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯0.1 ~5g和辅料均匀混合后再与0.1~15ml甘油混合得到有机溶液； 2) 、配制无机溶液：聚季铵盐-10、苯扎氯铵、十六烷基三甲基氯化铵、卡波姆Ultrez 20、芦荟提取物溶解在15ml-25ml去离子水中，用三乙醇胺调节酸碱度到pH-7.0至pH-8.0； 3) 、将无机溶液加入到有机溶液中，边加边搅拌至均匀的溶液，得到100ml的一种脂溶 性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯和酒精消毒液； 所述的辅料为聚季铵盐-10、苯扎氯铵、十六烷基三甲基氯化铵、卡波姆U1 trez 20、维 生素 E、芦荟提取物中的一种至二种或六种的任意混合物。
【文档编号】A01N65/42GK105853676SQ201610216753
【公开日】2016年8月17日
【申请日】2016年4月8日
【发明人】吴建国, 徐德, 邬开朗, 张祺, 杨庆雨, 刘映乐, 谭秋萍, 刘芳
【申请人】武汉艾文斯生物科技有限公司